不同类型的缺氧对小鼠的影响实验课件
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缺氧对小白鼠体征的影响(潍坊医学院 2009级临床26班山东潍坊261053)[摘要]目的:观察缺氧对小白鼠体征的影响。
方法:取五只小白鼠,通过制作小白鼠的乏氧性缺氧、一氧化碳中毒性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧三种模型并与正常状态的小白鼠作对比,观察小白鼠的行为及皮肤、黏膜、肝脏的变化。
结果:小白鼠的乏氧性缺氧模型肝脏为青紫色,一氧化碳中毒性缺氧模型为樱桃红色,亚硝酸钠中毒性缺氧模型肝脏青石板颜色,正常小白鼠肝脏为红色。
结论:不同的缺氧因素对小白鼠肝脏颜色有不同影响。
[关键词]乏氧性缺氧,一氧化碳中毒性缺氧,亚硝酸钠中毒性缺氧,青石板颜色前言缺氧是由于机体供氧不足或组织利用氧障碍引起的机体代谢、功能和形态结构改变的病理过程[1]。
理论上由于不同机制的缺氧通过对血红蛋白的影响改变了血红蛋白的颜色从而我们可以复制相应模型以观察其血液的变化。
至于类似的实验,前人已经将其机制研究清楚了,做本次实验只是加以验证,观察是否与理论相符合,有时也许会有新的发现,但主要是为以后的临床学习打下基础。
材料与方法1 实验材料器材:小白鼠缺氧瓶、CO发生装置、1ml注射器、酒精灯、剪刀、镊子。
药品:钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%亚硝酸钠、1%美兰、生理盐水。
动物:小白鼠2 缺氧模型的制备2.1乏氧性缺氧模型的制备(1) 取钠石灰约5g及小白鼠一只放入缺氧瓶内。
观察动物的一般情况,呼吸频率(次/10s),深度,皮肤和口唇粘膜颜色,然后紧塞瓶塞,记录时间,以后每3min重复观察上述指标1次(如有其他变化则随时记录)直到动物死亡为止。
(2) 动物尸体留待2.2、2.3、2.4实验做完后,再依次打开其腹腔,比较血液或肝脏颜色。
2.2一氧化碳中毒性缺氧模型的制备(1) 装好CO发生装置。
(2) 将小白鼠放入广口瓶中,观察其正常表现,然后与CO发生装置连接。
(3) 取甲酸3ml放入试管中,加入浓硫酸2ml,塞紧。
(可用酒精灯加热,加速CO产生,但不可过热以至液体沸腾,因CO产生过多过快动物迅速死亡,血液颜色改变不明显。
急性重复缺氧与不同神经药物对小鼠缺氧耐受性的影响低张性缺氧(hypotonic hypoxia)指由 Pa O2 明显降低并导致组织供氧不足。
当 Pa O2 低于 8kPa (60mmHg)时,可直接导致CaO2和SaO2 明显降低,因此低张性缺氧也可以称为低张性低氧血症( hypotonic hypoxemia )。
2 血液性缺氧血液性缺氧(hemic hypoxia )指Hb 量或质的改变,使CaO2减少或同时伴有氧合Hb 结合的氧不易释出所引起的组织缺氧。
由于Hb 数量减少引起的血液性缺氧,因其Pa O2 正常而CaO2减低,又称等张性缺氧(isotonic hypoxemia)3 循环性缺氧循环性缺氧( circulatory hypoxia )指组织血流量减少使组织氧供应减少所引起的缺氧,又称为低动力性缺氧( hypokinetic hypoxia )。
循环性缺氧还可以分为缺血性缺氧( ischemic hypoxia )和淤血性缺氧( congestive hypoxia )。
缺血性缺氧是由于动脉供血不足所致;淤血性缺氧是由于静脉回流受阻所致。
4 组织性缺氧组织性缺氧(histogenous hypoxia )是指由于组织、细胞利用氧障碍所引起的缺氧。
缺氧时细胞的代谢和功能变化机体吸入氧,并通过血液运输到达组织,最终被细胞所感受和利用。
因此,缺氧的本质是细胞对低氧状态的一种反应和适应性改变。
当急性严重缺氧时细胞变化以线粒体能量代谢障碍为主(包括组织中毒性缺氧);慢性轻度缺氧细胞以氧感受器的代偿性调节为主。
缺氧时器官的功能和代谢变化缺氧对器官的影响,取决于缺氧发生的程度、速度持续时间和机体的功能代谢状态。
慢性轻度缺氧主要引起器官代偿性反应;急性严重的缺氧,器官常出现代偿不全和功能障碍,甚至引起重要器官产生不可逆损伤,导致机体的死亡。
实验目的:研究缺氧耐受性的形成及其适应机制对临床医学、航天医学、运动医学均具有重要的理论和实际意义,过去研究发现,在高原上长期慢性缺氧能使机体的缺氧耐受性增强,而本实验的目的在于探讨短期急性重复缺氧对小鼠耐受性的影响。
小鼠缺氧缺氧耐受性实验【实验目的】1.复制低张性缺氧,血液性缺氧的动物模型。
2.观察年龄及中枢神经机能状态对缺氧耐受性的影响。
3.观察不同类型缺氧时呼吸变化和皮肤,黏膜,血液及脏器颜色的变化。
【实验原理】1.通过腹腔注射中枢兴奋剂(可拉明)和抑制剂(乌拉坦)改变中枢神经活动状态,观察成年小鼠对缺氧耐受性的影响,通过新生小鼠与成年鼠的对比,观察年龄因素对缺氧耐受性的影响。
2.在高浓度CO环境下,促进动物体内形成大量HbCO,导致血液性缺氧.3.腹腔注射过量氧化剂亚硝酸钠,导致动物体内产生大量高铁血红蛋白,引起血液性缺氧。
【实验结果】表3-1 缺氧耐受性实验结果记录表表3-2 发生不同类型缺氧小鼠的变化【讨论】一、低张性缺氧:以动脉血氧分压降低、血氧含量减少为基本特征的缺氧称为低张性缺氧。
1. 10%乌拉坦组:乌拉坦为中枢抑制剂,注射乌拉坦后,中枢受到抑制,代谢率变低,小鼠刚开始呼吸变慢,随着瓶内氧气量的减少,20.22分钟后出现躁动,呼吸频率逐渐加快,直至43.80分发生缺氧死亡,皮肤颜色变成青紫色。
2. 10%可拉明组:可拉明对中枢神经系统具有兴奋作用,使小鼠耗氧量增加,注射可拉明后,呼吸明显加深加快,进而呼吸急促,最后变慢直至缺氧死亡,皮肤变成青紫色;实验结果可看出:0.34分钟,小鼠出现躁动,这应该是中枢兴奋的小鼠进入新环境后一种不安的表现,并不能反映是由于瓶内氧气不足而导致的躁动。
3. 生理盐水组:此实验组为对照组,注射生理盐水后的小鼠,随着瓶内氧气的减少,呼吸逐渐加快,10.07分开始出现躁动,最后19.02分时小鼠缺氧死亡,皮肤呈青紫色。
其出现躁动和死亡的时间均相比与乌拉坦组时间较快,相比与可拉明组较慢。
4. 新生小鼠组:新生小鼠由于其基础代谢率很低,对缺氧的耐受性很强,实验过程中小鼠比较正常,偶尔可见小鼠扭动脖子,但并不能说明其对缺氧而产生的躁动。
二、发生不同类型缺氧小鼠的变化1.低张性缺氧:低张性缺氧发生的关键是进入血液的氧减少或动脉血被静脉血稀释,外界氧气减少,进入小鼠血液的氧减少,氧分压降低,血液中与血红蛋白结合的氧量减少,动脉血氧含量降低,动脉血氧饱和度降低,引起组织、细胞缺氧。