类胡萝卜素的检验方法(中国螺旋藻联盟)

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类胡萝卜素(以β-胡萝卜素计)的测定

A.1.1 原理

根据在碱性条件下,样品中其它色素及酯类可被皂化,可用水除去。不被皂化的总类胡萝卜素,可溶于乙醚中,通过测定其特征吸光度计算含量。

A.1.2 试剂

所用试剂均为分析纯试剂。

a)混合溶剂:正己烷、丙酮、乙醇、甲苯体积比为10:7:6:7。

b)乙醚

c) 40%KOH甲醇溶液:20克KOH溶于少量水中,用甲醇定容于50ml。

d)无水硫酸钠

A.1.3 仪器

分光光度计、恒温水浴锅。

A.1.4 操作方法

A.1.4.1 样品处理

称取0.03g至0.05g(精确至0.0001g)样品于50ml的比色管中,加35ml混合溶剂(a)和1ml40%KOH溶液(c),35℃恒温水浴并避光超声2小时,将浸泡提取液倒入250ml的分液漏斗中;在浸泡过的样品中加入25ml蒸馏水,轻轻摇荡、静置,合并以上提取液,加入乙醚(b)50ml萃取,并于萃取液中加入100ml蒸馏水,轻轻摇荡、静置,弃去下层溶液,重复洗涤至少两次,萃取液经过10g的无水硫酸钠(d),收集于100ml容量瓶中,用乙醚(b)定容至刻度线。

A.1.4.2 测定

以乙醚(b)作空白,用带塞的1cm玻璃比色皿在453.0nm处测定吸光度。

A.1.5 计算

类胡萝卜素含量(g/kg)=A453.0×V×10

G×E

式中:A:波长为453.0nm处的吸光度;

V:定容萃取溶液的体积,ml;

G:样品重量(g);

E:总类胡萝卜素的吸光系数(2500)。

A.1.6 检验结果报告

保留两位有效数字。

本方法来源于《中国螺旋藻战略联盟食用螺旋藻行业标准》。