分别利用产甘油假丝酵母抗逆转录因子CgSTB5和CgSEF1对酿酒酵母菌株糠醛耐受
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第27卷第2期2008年3月 食品与生物技术学报Journal of Food Science and Biotechnology Vol.27 No.2Mar. 2008 文章编号:167321689(2008)022******* 收稿日期:2007203206. 基金项目:国家自然科学基金项目(30570142).作者简介:姚雁(19802),女,河北怀来人,发酵工程硕士研究生.3通讯作者:沈微(19682),男,江苏无锡人,工学博士,副教授,主要从事微生物学的研究.Email :microshen @gmail 1google 1com诸葛健(19392),男,浙江金华人,教授,博士生导师,主要从事发酵工程和工业微生物领域的研究.Email :jianzhuge @hotmail 1com产甘油假丝酵母烯醇化酶基因的克隆及序列分析姚雁, 沈微3, 饶志明, 王正祥, 诸葛健3(食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏无锡214122)摘 要:从产甘油假丝酵母(Can di da gl yceri nogenes )基因文库中分离了一个含烯醇化酶基因(CgENO1)的克隆子。
插入片段全长2456bp ,包含一段1314bp 的没有内含子的蛋白质编码区,编码一个含438个氨基酸残基的多肽链,其氨基酸序列与来源于酿酒酵母的烯醇化酶相似性为74.3%。
多重序列比对显示,产甘油假丝酵母烯醇化酶(CgENO1)含有酵母烯醇化酶全部保守区。
对编码区上下游序列分析显示,克隆片段含有典型的酵母基因上下游调控区,是一个完整的酵母新基因。
关键词:产甘油假丝酵母;烯醇化酶;序列分析中图分类号:Q 786文献标识码:ACloning and Sequence Analysis of the Ca ndida gl yceri nogenes E nolase G eneYAO Yan , SH EN Wei 3, RAO Zhi 2min , WAN G Zheng 2xiang , ZHU GE Jian 3(National Key Laboratory of Food Sceince and Technolgoy ,Jiangnan University ,Wuxi 214121,China )Abstract :A DNA clone containing t he p utative Candida glycerinogenes enolase gene (CgENO1)was isolated from genomic library.The 2456bp insert contained a int ronless open reading f rame (ORF )of 1314bp encoding a peptide of 438amino acid residues wit h 74.3%similarity to t he Saccharomyces cerevisiae enolase 1.Multi 2alignment compariso n revealed t he CgENO1contained all t he conserved regions of yeast enolase.Sequence analysis of 5’2and 3’2flanks of t he ORF revealed t he existence of several regulatory element s of t he yeast genes ,so t he gene cloned was a complete new gene.K ey w ords :Candi da gl yceri nogenes ;enolase ;sequence analysis 产甘油假丝酵母(Can di da gl yceri nogenes )是中国发酵甘油工业的生产菌种,除过量合成甘油外,该酵母还具有耐受高渗透压的优良性能[1]。
2019年北京高三二模生物汇编:选修一、三一.选择题(共11小题)1.(2019•东城区二模)图为农杆菌Ti质粒的T﹣DNA区段结构示意图。
农杆菌附着植物细胞后,T﹣DNA 首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制,然后进入植物细胞并整合到染色体上,继而诱发细胞异常生长和分裂,形成植物肿瘤。
以下有关叙述不正确的是()A.Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA之外B.植物肿瘤的形成与A、B两个基因的表达有关C.清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长D.利用T﹣DNA进行转基因时需保留LB、RB序列2.(2019•西城区二模)酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。
酿酒酵母产酒精能力强,但没有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精发酵能力弱。
科研人员通过两种途径改良酵母菌种,实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的。
下列叙述正确的是()A.途径Ⅰ需用纤维素酶处理酵母菌,再利用PEG诱导融合B.途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体C.途径Ⅰ和途径Ⅱ最终获得的目的酵母菌染色体数目相同D.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标3.(2019•海淀区二模)为提高大都对磷元素的吸收能力,研究人员利用杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中,如图为重组Ti质粒上T﹣DNA的序列结构示意图。
下列相关叙述不正确的是()A.以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因B.RNA聚合酶与启动子1识别并结合后,启动抗除草剂基因的转录C.可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因大豆愈伤组织D.用EcoRI、BamHI双酶切重组Ti质粒后,经电泳分离至少得到两条带4.(2019•朝阳区二模)餐厨废水含有丰富的糖类、蛋白质等有机物,研究者将三种细菌单独或混合接种于餐厨废水培养液中,通过测定菌悬液细胞密度(结果如表)研究三者的关系,以期为利用餐厨废水制备复合菌肥的研究提供依据。
下列说法错误的是()对照组单独培养组三种细菌混合培养组解磷巨大芽孢杆菌08.498.24圆褐固氮菌 5.09 3.35解钾胶质芽孢杆菌 2.81 1.41注:cfu•mL﹣1指每毫升样品中培养出的菌落数A.上述细菌作为分解者将餐厨废水中的有机物分解B.对照组的培养液为没有经过灭菌处理的餐厨废水C.可用稀释涂布平板法,计算不同条件下的活菌数D.由结果可知,解磷巨大芽孢杆菌的竞争能力较强5.(2019•朝阳区二模)以下高中生物学实验中,表述正确的是()A.实验1、2、3、4中的颜色都是经过染色出现的B.实验1不需要对照,图示结果表明细胞正在失水C.实验2中刚果红培养基可用于筛选尿素分解菌D.可从同种植物的不同部位取材进行实验1和36.(2019•丰台区二模)甲基对硫磷是常见的农药污染物。
产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因在酿酒酵母中的表达*中国生物工程杂志China Biotechnology, 2006, 26(1):38~41赵有玺1,2饶志明1**沈微1方慧英1诸葛健1**(1 江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院工业微生物研究中心无锡214036)(2 北京联合大学生物化学工程学院北京100023)摘要甘油是一种极其理想的耐高渗透压介质。
利用PCR方法,从产甘油假丝酵母WL2002 5中扩增出了2个产甘油的关键酶基因GPD和GPP,分别编码3 磷酸甘油脱氢酶(glycerol 3 phosphate dehydrogenase, GPD)和3 磷酸甘油磷酸酶(glycerol 3 phosphate phosphatase, GPP)。
利用T Vector在Escherichia coli JM109中克隆得到大量的GPD 和GPP基因,并成功构建了重组质粒pYX212 GPD和pYX212 GPP;通过LiAc转化法将重组质粒导入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303 1A。
初步实验结果表明:发酵过程中pYX212 GPD/S. cerevisiae W303 1A的生物量高于pYX212 GPP/S. cerevisiae W303 1A和野生型S. cerevisiae W303 1A;发酵72h后,pYX212 GPD/S. cerevisiae W303 1A发酵液中甘油含量大约为12mmol/L,明显高于野生型S. cerevisiae W303 1A 的甘油含量,而pYX212 GPP/S. cerevisiae W303 1A与野生型S. cerevisiae W303 1A在甘油含量上相差不大,均只有4mmol/L 左右。
关键词甘油3 磷酸甘油脱氢酶3 磷酸甘油磷酸酶酵母工程菌中图分类号Q786收稿日期:2005 03 09修回日期:2005 09 22*国家自然科学基金资助项目(30300027),江南大学工业生物技术教育部重点实验室开放基金资助项目(KLIB KF200507),江南大学预研基金资助项目(0004402)** 通讯作者,电子信箱:raozm@ 甘油是一种极其理想的耐高渗透压介质。
高糖胁迫下产甘油假丝酵母细胞质膜抗逆应答机制的初步研究产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)具有抗逆性强、糖代谢迅速、目标产物转化率高等特点,特别是在500 g·L<sup>-1</sup>的高葡萄糖浓度下仍可维持很好的发酵性能,是一株可应用于节能环保浓醪发酵的渗透压工业酵母。
酵母细胞质膜是其与外界环境进行物质能量交换和信号传递的重要场所,在胁迫压力下会发生一系列的动态应答,与此相关的理论机制可为指导实际生产提供重要的科学依据。
本研究在建立了一种适合C.glycerinogenes质膜提取方法的基础上,对其高糖胁迫下质膜的组成和相关基因的全局转录应答机制展开研究,主要结果如下:(1)采用先制备原生质体、再低渗裂解获得粗膜提取物、最后双水相分离纯化细胞质膜的策略,优化了原生质体的制备方法和粗膜的两相分离纯化体系,得到一种适合于C.glycerinogenes的高效质膜提取方法,优化后质膜纯度平均可达65%以上。
(2)研究发现,C.glycerinogenes在高浓度葡萄糖胁迫下,细胞质膜中的不饱和脂肪酸(特别是油酸)和麦角固醇的相对含量显著增加,而细胞质膜的流动性和通透性出现不同程度的降低。
因此,C.glycerinogenes细胞质膜在高糖胁迫下通过增加油酸的含量来稳固细胞质膜的流动性,通过增加麦角固醇的含量来维持质膜稳态。
(3)利用RNA-Seq测序技术考察高糖胁迫下C.glycerinogenes细胞质膜相关基因的全局转录应答情况,结果发现:获得了85个质膜相关差异显著表达基因,其中68个上调,17个下调;麦角固醇合成相关基因ERG6、ERG2、ERG3、ERG5、ERG4显著上调,这与麦角固醇含量增加的结果相符合;不饱和脂肪酸合成途径中大部分基因显著上调;1个葡萄糖转运蛋白基因的差异表达倍数最高(log2=9.55);糖脂合成、MAPK途径、mTOR途径的差异基因均显著上调。
肖敏敏,邢馨月,刘文光,等. 耐酒精高产L-乳酸菌株的筛选及发酵培养基优化[J]. 食品工业科技,2023,44(8):135−143. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022040147XIAO Minmin, XING Xinyue, LIU Wenguang, et al. Screening of an Alcohol Tolerant and High-yield L-lactic Acid Strain and Optimization of Culture Medium[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(8): 135−143. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022040147· 生物工程 ·耐酒精高产L-乳酸菌株的筛选及发酵培养基优化肖敏敏1,邢馨月1,刘文光2,孟祥慧1,魏姗姗1,张天笑1,王玉华1,李 侠1,*(1.吉林农业大学食品科学与工程学院,吉林长春 130118;2.华信检测技术有限公司,吉林长春 130000)摘 要:为提高L-乳酸产量,降低L-乳酸的生产成本,该研究经过筛选、驯化获得一株耐酒精且高产L-乳酸的菌株鼠李糖乳杆菌AK-0779。
使用玉米酒糟代替部分酵母粉作为菌株AK-0779发酵培养基的氮源。
在单因素实验基础上,对葡萄糖添加量、酵母粉添加量和玉米酒糟添加量进行三因素三水平响应面优化试验。
结果表明,最适发酵培养基为:葡萄糖添加量9.80%,玉米酒糟添加量0.98%,酵母粉添加量1.72%,L-乳酸产量为78.91 g/L ,糖酸转换率为80.52%。
与酵母粉完全充当氮源产L-乳酸82.36 g/L 相比,产量无显著差异,说明玉米酒糟能有效代替部分酵母粉作为发酵培养基的氮源,降低L-乳酸生产成本。
根癌农杆菌介导工业化产甘油假丝酵母的遗传转化饶志明;张君胜;沈微;方慧英;诸葛健【期刊名称】《应用与环境生物学报》【年(卷),期】2007(13)6【摘要】通过构建质粒pCAM3300-zeocin,将其电击转化到根癌农杆菌LBA4404中.将含有目的质粒pCAM3300-zeocin的根癌农杆菌和工业化产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)WL2002-5共培养,利用zeocin抗性基因为筛选标记,实现了pCAM3300-zeocin对产甘油假丝酵母的转化.并根据产甘油假丝酵母的生长特性,对转化条件进行了优化,在共培养时间为24h,产甘油假丝酵母和根癌农杆菌的细胞比例为1∶(500~1000)时最高转化率达到2个转化子/104个酵母细胞.初步建立了根癌农杆菌介导转化产甘油假丝酵母的转化方法.【总页数】4页(P868-871)【关键词】产甘油假丝酵母;转化;根癌农杆菌;zeocin基因【作者】饶志明;张君胜;沈微;方慧英;诸葛健【作者单位】江南大学工业生物技术教育部重点实验室和工业微生物中心【正文语种】中文【中图分类】Q75;TQ923【相关文献】1.根癌农杆菌介导酿酒酵母的遗传转化 [J], 张君胜;饶志明;吴蕾;沈微;唐雪明;方慧英;诸葛健2.根癌农杆菌介导的百脉根遗传转化体系的优化研究 [J], 孙艳香;杨红梅;耿云红;朱晔荣;王宁宁;王勇3.REMI介导电转化产甘油假丝酵母 [J], 张永光;沈微;饶志明;方慧英;诸葛健4.根癌农杆菌介导的甘蓝高效稳定的遗传转化系统的建立及对CpTI基因转化的研究 [J], 张七仙;敖光明5.根癌农杆菌介导的反义VeFAD2基因对少根根霉的遗传转化及其影响因子 [J], 刘明靖;李纪元;范正琪;田敏;范妙华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
玉米浆在产甘油假丝酵母甘油发酵中的作用机理谢涛方慧英诸葛健*(江南大学工业生物技术教育部重点实验室无锡214036)摘要:以复合培养基和合成培养基进行比较发酵,研究了玉米浆在产甘油假丝酵母甘油发酵过程中的作用机理。
结果表明:玉米浆中的磷、氮和微量元素是影响产甘油假丝酵母甘油发酵的3个关键因素。
当玉米浆磷浓度为121175m g/L(玉米浆浓度为14g/L),最大甘油转化率达到53144%。
玉米浆磷可以调节E M P途径与HM P途径之间碳架代谢流的分布,随着玉米浆浓度进一步增加,过量磷能抑制HM P途径而激活E M P途径,因而复合培养基各项发酵参数的变化非常显著。
玉米浆氮对磷的调节功能有协同作用,但并不是产甘油假丝酵母甘油发酵的理想氮源。
玉米浆中的微量元素能够显著提高葡萄糖的消耗速率、促进菌体的生长和增加甘油的产量。
关键词:玉米浆,产甘油假丝酵母,甘油发酵,作用机理中图分类号:TQ92文献标识码:A文章编号:0253-2654(2006)04-0080-05M echan is m of Corn Steep L i quor duri ng G l ycerol Fer m entati onby Candi da gl ycerinogenesX I E Tao FANG Hu-iY ing Z HUGE Ji an*(T heK ey Lab of Industri a lB iotec hnolo gy of M i n ist ry of Ed ucation,Sou t h e rn Yan g t z Universit y,W u x i214036)A bstract:U si ng ch e m icall y defi ned m ed i u m as t h e con tro,l m ech an i s m of corn steep li quor(CSL)i n co m p l exm ed i u m du ri ng glycero l p roducti on by Cand i da g l ycerino g enes w as stud i ed1Th e resu lts s h o w ed t h at there w eret h ree k ey fact ors i n CS L t h at had s ome great i nfl uences on g l ycerol fer m en t ati on of C1g l ycerinogenes,i ncl ud i ngphos phorus,n i trogen,and trace ele m ents1The maxi m u m g l ycerol y i el d o f53144%w as ac h i eved at an op ti m a lphos phorus concentrati on of121175m g/L,w here t h e CSL concen trati on w as14g/L1Phosp horus i n CSL cou l dcontro l the d i stri buti on of carbon m etabolis m fl ux bet w een EMP path w ay and HMP path w ay1W it h the i ncrease i nCS L con cen trati ons,s uperfl uou s phosphorus cou l d restrain HMP pat h w ay and acti vat e E M P pat h w ay,thus resu-lti ng i n re m ark ab l e changes i n vari ous fer m en tati on para m eters of co m plex m ed i u m1N itrogen i n C S L could p lay acooperati ve role i n the regu lati ve f uncti on of p hosp horu s1H o w ever,i t w as not a su it able n itrogen sou rce forC1g l yceri nog e nes1T race ele m ents i n CS L cou ld m ark edly i m p rove t h e g l ucose consu mp ti on rate,accel erate t h ecell gro w t h,and enhan ce the glycero l yield1K ey words:Corn steep liq uor(CSL),Cand i da g l ycerino g enes,Glycero l fer m entati on,M echan is m玉米浆(CSL)是玉米淀粉等产品加工过程中的浸泡水经浓缩至含固形物70%左右后得到的副产品[1],其构成成分较复杂,其中蛋白质含量高达40%以上(按干基计),氨基酸、生物素和维生素(如烟酸等)含量较丰富[2]。
酵母蔗糖酶的提取及其性质的研究丁洁,臧清,王然,马翌婷,马雪梅*(北京工业大学,生命科学与生物工程学院,生物化学技术实验室,北京100022)摘要:采用SDS 抽提法从酵母中提取蔗糖酶,在SDS 摩尔浓度0.5 mmol/L,温度40℃,提取时间10 h,pH值5.5的提取条件下,进行抽提得到粗酶,经质量分数50 %的乙醇分级沉淀、Mono Q阴离子交换柱层析纯化后,制得高纯度的酵母蔗糖酶。
利用考马斯亮蓝法测定不同浓度梯度的标准酵母蔗糖酶溶液的吸光度值,并绘制标准曲线,然后测定酵母蔗糖酶样液的吸光度值,从而得出该蔗糖酶样液的浓度,分别为:A样液279.53 μg /mL;B样液873.18 μg /mL。
最后利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定酵母蔗糖酶的相对分子质量是60kDa。
关键词: 酵母蔗糖酶;SDS法提取;考马斯亮蓝法;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳Study on Purification and Properties of Invertase from YeastDING Jie, ZANG Qing, W ANG Ran, MA Yi-ting, MA Xue-mei* (Beijing University of Technology, College of Life Science and Bio-engineering, Laboratory ofBiochemical technology, Beijing, China, 100022)Abstract:The experiment extracted invertase from brewer’s yeast using SDS extraction. Under the condition of the SDS concentration 0.5mmol/L, temperature for 40 ℃, time for 10h, pH value for 5.5to get coarse enzyme extraction. Then the purified invertase was obtained by precipitatation with 50%ethyl alcohol and Mono Q chromatography. The absorbance of yeast invertase solution can be determined by Coomassie Brilliant Blue, then draw the standard curve of yeast invertase solution so that we can know the concentration of yeast invertase solution:A samples of 279.53 μg /mL, B samples of 873.18μg /mL. The relative molecular mass of the yeast invertase was determined by SDS polyacrylamide gel electrophoresis.Key words : Yeast Invertase ; SDS Extraction; Coomassie Brilliant Blue; SDS Polyacrylamide gel electrophoresis作者简介:丁洁(1992一),女,北京人,学生。
产甘油假丝酵母稳定期酸胁迫耐受性研究谢涛;方慧英;诸葛斌;诸葛健【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2009(035)006【摘要】研究了产甘油假丝酵母稳定期的酸胁迫耐受性.结果表明,在一定的酸性pH值范围内,pH值降低而酸胁迫压力增加,可以促进产甘油假丝酵母胞内聚磷酸盐积累,从而保证细胞免受酸胁迫的过度影响,维持较高甘油生产水平所需的活细胞数;但过高的酸性环境会严重损伤细胞,降低细胞合成聚磷酸盐的能力,从而使细胞存活率和甘油产量下降.产甘油假丝酵母胞内积累聚磷酸盐,可以增强其对营养饥饿和强酸胁迫等的抵抗力,从而提高其在生长稳定期的存活率.【总页数】4页(P28-31)【作者】谢涛;方慧英;诸葛斌;诸葛健【作者单位】湖南工程学院化学化工系,湖南,湘潭,411104;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因的克隆、测序及植物表达载体的构建 [J], 赵有玺;林长生;饶志明;沈微;方慧英;诸葛健2.温度对产甘油假丝酵母产甘油发酵过程的影响 [J], 谢涛;方慧英;诸葛斌;诸葛健3.利用荧光蛋白研究产甘油假丝酵母胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD启动子[J], 丁春生;饶志明;诸葛斌;沈微;陈献忠;方慧英;诸葛健4.耐高渗压高压甘油的一个假丝酵母新种:产甘油假丝酵母 [J], 王正祥;诸葛健5.产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因在酿酒酵母中的表达 [J], 赵有玺;饶志明;沈微;方慧英;诸葛健因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
产甘油假丝酵母25S rRNA甲基转移酶BMT5对乙酸胁迫耐受的影响及应用周柳;陆信曜;宗红;诸葛斌【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2024(50)1【摘要】挖掘功能基因,提升菌株环境胁迫耐受性,对高效利用纤维素水解液产乙醇至关重要。
产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)是具有多重抗逆性的工业菌株,经基因组文库筛选,获得能够提高酵母乙酸耐受性的rRNA甲基转移酶基因CgBmt5。
在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中表达CgBmt5提高了乙酸耐受性,重组菌在胁迫下乙醇产量为60.5 g/L,提高17.7%。
在C.glycerinogenes中过表达CgBmt5后,乙酸胁迫下乙醇产量提高17.6%,2种过表达的单位菌体产量、底物转化率、生产强度均有提高。
进一步将C.glycerinogenes过表达菌应用于纤维素水解液发酵,乙醇产量提高71.7%,转化率提高65.0%,生产强度提高155.7%。
乙酸胁迫下,过表达菌中脂质过氧化水平降低,且过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性增加;转录分析发现,Pfk1和Arg3基因上调,Gpd1和Cox3下调,表明CgBmt5可能通过降低脂质过氧化水平、提高SOD和CAT活性及影响糖代谢和精氨酸合成促进菌株的乙酸耐受和胁迫下的发酵能力。
该研究为酵母的胁迫耐受机制和纤维素乙醇技术发展提供了新的生物材料。
【总页数】6页(P1-6)【作者】周柳;陆信曜;宗红;诸葛斌【作者单位】江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.产甘油假丝酵母稳定期酸胁迫耐受性研究2.产甘油假丝酵母细胞回用对甘油生产的影响3.温度对产甘油假丝酵母产甘油发酵过程的影响4.耐高渗压高压甘油的一个假丝酵母新种:产甘油假丝酵母5.产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因在酿酒酵母中的表达因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
2021年长沙市芙蓉路学校高三生物上学期期中试卷及答案解析一、选择题:本题共15小题,每小题2分,共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 某同学完成了探究·实践“培养液中酵母菌种群数量的变化”实验,图为利用血球计数板(1mm×1mm×0.1mm)通过显微镜观察时,实验第6天对酵母菌培养液稀释100倍后的统计结果。
图2为培养液中的酵母菌数量的变化情况。
下列相关叙述错误的是()A. 图1的中格内酵母菌的数量约计为20个B. 取样时为避免吸到培养液底部的死菌,滴管应轻轻吸取,避免溶液晃动C. 图2中de段发生的原因可能与营养物质的消耗、pH的改变等有关D. 制片时,先将盖玻片放在血球计数板的计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入2. 下列关于对生物体内水的描述,错误的是()A. 幼小的生物体内自由水与结合水的比值越大时,代谢越活跃B. 自由水是良好的溶剂,是各种代谢活动的介质C. 结合水是组成细胞结构的一部分,约占细胞内全部水分的4.5%D. 心肌坚韧、血液液态,但含水量相差无几,原因是心肌内全是结合水3. 在探索除草剂二甲戊灵诱导大蒜(2n=16)染色体数目加倍的实验中,研究者需要对大蒜细胞的增殖进行观察。
下列细胞增殖过程中有关物质数目变化规律的叙述,错误的是()A.计数染色体时,每条染色体上有两条染色单体,染色体数目加倍时,染色单体数目也加倍B.二甲戊灵有可能通过“干扰纺锤体的形成,但不干扰着丝点分裂”诱导大蒜染色体数目加倍C.对大蒜染色体进行计数时,应对大蒜细胞分裂装片进行观察,先找到处于中期的清晰图像D.染色体复制时,细胞核DNA分子的数目增加一倍,着丝点分裂时,核DNA分子数目不变4. 机体维持稳态的主要调节机制是A.神经调节B.神经一体液调节C.体液调节D.神经一体液一免疫调节5. 下列关于细胞膜的流动镶嵌模型的叙述正确的是()A. 细胞膜两侧的分子性质和结构相同B. 磷脂分子的疏水端朝向两侧,亲水端朝向内侧C. 白细胞吞噬细菌、K+进入细胞体现了细胞膜的流动性D. 构成细胞膜的磷脂分子和大多数蛋白质分子可以运动6. 使用洋葱进行的生物实验,取材部位与实验匹配最佳的是()A.取紫色鳞片叶,提取叶绿体中的色素B.取根尖分生区细胞,观察细胞的质壁分离C.取鳞片叶外表皮,观察细胞的线粒体D.取鳞片叶内表皮,观察DNA和RNA在细胞中的分布7. 在高等动物体内,激素调节的共同特点不包括A. 通过体液运输B. 微量和高效C. 作用于靶细胞D. 产生神经冲动8. 每年二月的最后一天为“国际罕见病日”。
几种真菌发酵液对致病疫霉的抑制作用蒋继志;赵丽坤;史娟;董金皋【期刊名称】《微生物学通报》【年(卷),期】2001(028)002【摘要】Effect of 8 fungal fermented filtrates on mycelial growth, encystment and germination of zoospores, appressorium formation, and penetration hyphae formation of Phytophthora infestans was investigated. Of which, the fermented filtrates from Rhizoctonia solani and Colletotrichum gloeosporioides showed the strongest inhibition against P. infestans. The results indicated that they are potential for controlling the diseases caused by P. infestans.%测定了8种真菌发酵液在5种不同浓度下对致病疫霉菌丝生长、游动孢子静止、静止胞萌发、附着胞形成和侵入丝形成等不同阶段的影响。
结果表明,供试真菌不同浓度的发酵液,对致病疫霉上述各个阶段均有一定程度的抑制作用,并均随发酵液浓度增加,抑制作用逐渐增强,浓度为100%时,抑制作用均达到最高。
其中,立枯丝核菌发酵液的抑制作用最强,浓度为100%时,对致病疫霉菌丝生长的抑制率达到90.4%,而静止胞萌发率仅为2.4%,附着胞及侵入丝均未见形成。
【总页数】5页(P55-59)【作者】蒋继志;赵丽坤;史娟;董金皋【作者单位】河北大学生物学系;河北大学生物学系;宁夏农学院林学系;河北农业大学植物病理系【正文语种】中文【中图分类】Q939.92【相关文献】1.链霉菌F-1013虾壳粉发酵液对3种植物病原真菌的抑制作用 [J], 林梅;张绍升2.沼气发酵液对青霉,曲霉等真菌的抑制作用之研究 [J], 张无敌3.两种真菌发酵液对致病疫霉的抑制机理 [J], 郭会婧;李文香;蒋继志;田再民;郭江;鲁建斌4.粘帚霉不同菌株发酵液对3种病原真菌的抑制作用(英文) [J], 马桂珍;吴学仁;杨文兰;吕国忠5.40株虫生真菌发酵液对白色念珠菌的抑制作用 [J], 邵颖;丁婷;葛飞;樊美珍;胡丰林因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
分别利用产甘油假丝酵母抗逆转录因子CgSTB5和CgSEF1对酿酒酵母菌株糠醛耐受
产甘油假丝酵母抗逆转录因子CgSTB5和CgSEF1是两个与逆境应答相关的基因。
它们在酿酒酵母菌株中的糠醛耐受性方面可能发挥一定的作用。
下面是分别利用这两个基因进行的研究方法:
1. 利用CgSTB5增强酵母的糠醛耐受性:
- 克隆CgSTB5基因:首先,将CgSTB5基因从产甘油假丝酵母中克隆出来。
- 构建表达载体:将CgSTB5基因插入一个适合酿酒酵母的表达载体中,以便在酿酒酵母中进行表达。
- 转形酿酒酵母:将表达载体导入酿酒酵母细胞中,使其表达CgSTB5。
- 鉴定表达水平:通过RT-PCR、Western blot或其他适当的方法确认CgSTB5在酿酒酵母中的表达水平。
- 酸性糠醛处理:将转形后表达CgSTB5的酿酒酵母细胞暴露在含有酸性糠醛的培养基中。
- 分析耐受性变化:通过细胞生长曲线、存活率、基因表达等指标来评估酿酒酵母在糠醛胁迫下的耐受性。
2. 利用CgSEF1增强酵母的糠醛耐受性:
- 克隆CgSEF1基因:将CgSEF1基因从产甘油假丝酵母中克隆出来。
- 构建表达载体:将CgSEF1基因插入一个适合酿酒酵母的表达载体中,使其在酿酒酵母中进行表达。
- 转形酿酒酵母:将表达载体导入酿酒酵母细胞中,使其表达CgSEF1。
- 鉴定表达水平:通过RT-PCR、Western blot或其他适当的方法确认CgSEF1在酿酒酵母中的表达水平。
- 糠醛耐受性测试:将转形后表达CgSEF1的酿酒酵母细胞暴露在含有糠醛的培养基中。
- 评估耐受性变化:通过细胞生长曲线、存活率、基因表达等指标来评估酿酒酵母在糠醛胁迫下的耐受性。
这些方法可以帮助研究人员了解CgSTB5和CgSEF1对酿酒酵母菌株糠醛耐受性的影响,从而为改良高糠醛耐受性的酿酒酵母菌株提供理论基础。
请注意,在具体实验中应根据实际情况优化实验条件和测量方法。