冀中南地区16个平菇栽培菌株的 ISSR 分析

diblefungi2010（2）目前我国的食用菌栽培中，平菇的栽培范围最广，规模最大，品种也最多。

它们大多是在自然条件下采用开放式或生料栽培，病原菌极易发生。

在诸多病害中，细菌性病害最为严重，主要种类有褐斑病、黄萎病、姜烂病、干腐病、滴水病、僵化病等[1]。

细菌性褐斑病造成的平菇减产尤为严重，危害加重时，不仅会造成子实体死亡，还会影响下潮菇的正常生长，并能引起其它病害和虫害的交叉感染。

目前常用的一些物理和药物防治方法[2]，如控制温湿度，撒石灰和多菌灵药物等治标不治本，不仅耗费人力和物力，而且达不到预期目的。

不同平菇品种对细菌性病害的抵抗力也有很大的差异[3]，因此选育抗病品种是预防细菌性病害的根本对策。

试验是在对唐山地区平菇褐斑病菌进行分离鉴定的基础上，对生产上常见的平菇品种进行室内抗病性分析，为抗病育种和生产栽培提供依据。

1材料与方法1.1平菇品种16个平菇菌种均分离自生产上的栽培种。

分别为雪美、1500、抗病2号、冀农11、2026、姬菇3号、2002-4、5178、绣珍菇、高温88、台湾小平菇、996、2002、F803、高唐2号、海南2号。

在试验中分别简称P1～P16。

1.2唐山地区平菇细菌性褐斑病菌的分离、纯化和致病性鉴定采集唐山地区不同平菇品种具有典型细菌性褐斑病症状的子实体，选取病健交界处，利用LB 培养基分离并纯化细菌性褐斑病菌[4]。

致病性鉴定[5]采用纯培养物的菌悬液（OD 650=0.5～0.7）喷施到有微小针刺伤口的平菇子实体表面，保湿5d后观察发病症状，并从发病后的组织块上再次分离病原菌，利用上述方法检测与接种的病菌是否相同。

1.3平菇品种对褐斑病菌的抗性分析选取在PDA 培养基上菌落生长速度较快、中等和较慢的3个平菇品种进行褐斑病菌接菌量的确定试验。

每个三角瓶中放入75mL PD 液体培养基，接入两块直径为5mm 的菌盘，每种平菇共做3个处理，分别接入100μL 、200μL 和300μL 褐斑病菌悬液（OD 650=0.5～0.7）。

不同草菇栽培菌株的比较对中国不同地区的24个草菇栽培菌株的子实体颜色、菌膜厚度、菌柄形态及着生方式、菌托形态和生物转化率进行比较，结果表明：不同的草菇栽培菌株子实体形态存在差异，子实体的蛋型期颜色呈现深灰色、灰色和灰白色，以灰色居多；成熟期呈现灰色和灰白色，同样以灰色居多。

V365菌膜最厚，为 2.75 mm；单生草菇菌膜最薄，仅为0.95 mm。

菌柄有2种形态：上细下粗和基本等粗，菌托有3种形态：圆筒形、两瓣形和三瓣形；菌柄着生方式包括菌柄中生和菌柄偏生。

不同菌株的生物转化率也存在差异，其中V365生物转化率最高，达48.6%；A8最低，仅有3.1%。

草菇；子实体；形态特征；生物转化率草菇（V olvariella volvacea）品种极为丰富。

随着育种技术的不断发展，优良菌株不断涌现，对草菇新品种的保护也有了更高要求，需要一套能与国际接轨并符合中国国情的有效保护办法［1］。

因此草菇特异性(distinctness)、一致性(uniformity)和稳定性(stability)(简称DUS)测试指南的研制就成了当前最主要的研究课题。

DUS测试中所规定的测试原则及方法都是根据国际植物新品种保护联盟UPOV（International Union for the Protection of New Varieties of Plants，总部设在瑞士日内瓦）的要求而制定的，草菇DUS测试指南的使用范围为小苞脚菇属，本文按照DUS测试指南的要求［2］，分析24个草菇栽培菌株子实体的形态特征差异及生物转化率。

1 材料与方法1.1菌株供试的24个草菇栽培菌株分别来源于中国5省11个单位，V1、V23、V106、V844来源于华南农业大学食品学院，V110、V112、V11、V25来源于江苏省高邮市科学食用菌研究所，V365、V5、V029来源于山东省寿光市食用菌研究所，V26、V238来源于广东省微生物研究所菌种保藏中心，V901、V971来源于江苏省江都市天达食用菌研究所，V28来源于江苏省江南生物科技有限公司，V138来源于广州市白云区农业科学研究所，V34、单生草菇、丛生草菇来源于北京市吉蕈园科技有限公司，A8来源于广东省农业科学院蔬菜研究所，低温草菇来源于山东省单县高港食用菌有限公司，大草32、草菇01来源于河北省武安市何氏食用菌产业中心。

收稿日期:2007 10 22 作者简介:姜伟(1975 ),男,农艺师,硕士研究生,jw@;*通讯作者基金项目:广东省科技攻关项目(2005B26001083)不同来源棉花种质资源遗传多样性的ISSR 分析姜 伟,朱宏波*,何觉民(广东海洋大学农业生物技术研究所,湛江524088)摘要:采取ISSR 分子标记对48份棉花种质资源的遗传多样性进行分析,从60条ISSR 引物中筛选出11条引物,这11条引物共扩增出92个条带,平均每条引物扩增出8.36个条带;其中多态性带77个条带,多态率达83.70%。

U PGMA 聚类分析显示,48份材料的相似性系数(GS)变化范围在0.27~0.93之间。

聚类将48个种质资源划分为4个大类(GS=0.55),湛江野生棉、廉江野生棉与其它品种在遗传上有很大差别,属于较原始类型,归为一类;长绒棉与陆地棉品种存在明显的遗传差异也单独归为一类;其它不同省份的陆地棉品种在遗传上有较高的相似性,归为其它类型。

分析结果表明,ISSR 具有丰富遗传多样性和稳定性,是一种较好的遗传分子标记,适宜于棉花品种遗传多样性分析。

关键词:棉花;品种资源;ISSR 标记;遗传多样性中图分类号:S562.02 文献标识码:A 文章编号:1002 7807(2008)05 0348 06Genetic Diversity in Germplasm Resources of Cotton from Different Area Based on ISSR MarkersJIANG Wei,ZH U H ong bo *,H E Jue min(I ntitute of A gricultur al Biotechnology ,Guangdong Ocean Univer sity ,Zhanj iang,guangdong 524088,China)Abstract:T he g enetic diversity of 48cotton accessions w ere analyzed by using ISSR markers.11prim ers w ere screened out of 60primers.To tal of 92bands w ere detected,77of them w ere polym orphic.The percentage o f po lymo rphic bands w as 83.70%.UPGM A Cluster analy sis based on ISSR data show ed that the genetic similarity (GS )co efficient o f 48accessions ranged fr om 0.27to 0.93.48germplasm resources could be categ orized into four major groups,w ild cotton of Zhanjiang and Lian jiang,Guangdo ng pro vince,show ed g reat genetic differ ence from o ther materials,fell into one group,belong to primitive gr oup.G.bar badense cotton w ere o bvious g enetic diffrent from G.hir sutum ,also fell into one g roup,and hig h similarity amo ng the rest cultivars from different provinces for med other gro ups.The study indicated that ISSR mo lecular m ar ker is an efficient tool w ith high po lym orphism and stability for analysis the genetic diversity and r elationship of co tton germplasm resources.Key words:cotto n;germ plasm resour ces;ISSR m ar ker;genetic diversity 目前已有多种DNA 分子标记,如RFLP 、RAPD 、AFLP 、SSR 等分子标记已被用于各种物种的分子连锁图的构建、遗传多样性分析、品种鉴定、分子标记辅助育种等方面的研究[1,8 15]。

冀中南地区草菇优质高产栽培技术摘要介绍了草菇的生物学特性，针对草菇生长发育所需条件，提出了适宜冀中南地区草菇栽培技术，以期为草菇优质高产栽培提供技术支持。

关键词草菇；优质；高产；栽培技术；冀中南地区草菇又称苞脚菇、兰花菇、麻菇等，原系热带和亚热带高温多雨区的腐生真菌。

草菇肉质脆滑、味道鲜美，营养价值颇高，含有丰富的蛋白质、人体必需氨基酸、维生素C等。

并且栽培过后的培养料是优质的菌蛋白肥料。

草菇主要在南方栽培，近些年来北方也少有种植，因此有必要大力发展本地的草菇种植，这是一项很有发展前景的产业[1]。

1草菇的生活条件1.1营养一是碳源。

碳源是草菇新陈代谢过程中的主要能源，同时也是合成养分的主要原料，草菇是草腐菌，以禾本科作物的秸秆等为主要碳源。

冀中南地区主要有麦秸、玉米秸、棉秸秆、棉籽壳、废棉、花生枯等。

二是氮源。

有机氮如尿素和植物蛋白、无机氮铵盐和硝酸盐等；在栽培过程中加入的米糠、豆荚、花生壳、尿素等氮素都是草菇的氮源。

草菇适宜碳氮比营养生长阶段为20∶1，生殖生长阶段为40∶1。

三是矿物质营养。

除了需要碳氮营养外还需要一定量的矿质元素如磷、钾、钙、镁、硫等和微量元素及少量的维生素，它们都是草菇生命活动中不可缺少的营养成分。

1.2光照与温度菌丝的生长可以完全不需要光线，但散射光（能看清书报即可）是子实体形成的必要条件，光线过强会抑制子实体的生长。

菌丝生长适宜温度为30~39 ℃，低于10 ℃则停止生长，长期低于5 ℃或高于45 ℃则死亡。

子实体生长的适宜气温为27~31 ℃、培养基质温度为32~38 ℃。

1.3水分与空气草菇菌丝生长培养料适宜含水量60%~65%。

出菇时空气相对湿度85%~95%。

草菇是好气性真菌，新鲜的空气是生长发育良好的重要条件之一，微量的二氧化碳有利于草菇的生长，浓度超过0.5%会影响其生长。

1.4pH值草菇菌丝生长适宜的pH值是6.5~7.5，子实体生长最适pH值为5~7。

河南农业科学,2020,49(3):138-144Journal of Henan Agricultural Sciencesdoi :10.15933/ki.1004-3268.2020.03.018收稿日期:2019-07-10基金项目:河南省现代农业产业技术体系专项(S2013-09);河南省农业科学院自主创新项目(2019ZC30);河南省农业科学院优秀青年科技基金计划项目(2018YQ13)作者简介:崔㊀筱(1983-),女,河南南阳人,助理研究员,博士,主要从事食用菌育种及功能基因研究㊂E -mail:cuixiao21255@通信作者:孔维丽(1976-),女,河南开封人,副研究员,硕士,主要从事食用菌育种及平菇发酵料栽培机制研究㊂E -mail:kongweili2005@平菇种质资源的遗传多样性分析崔㊀筱,刘㊀芹,段亚魁,康源春,孔维威,张玉亭,袁瑞奇,孔维丽(河南省农业科学院植物营养与资源环境研究所,河南郑州450002)摘要:以43个平菇栽培菌株和11个野生菌株为材料,通过子实体颜色差异初步分类,采用拮抗法和ITS 序列分析相结合的方法,对供试菌株的遗传多样性进行分析㊂结果表明,颜色差异较大的菌株,拮抗试验差异显著;通过拮抗法将54个菌株分为32个差异菌株;通过ITS 序列分析并构建系统发育树将54个菌株聚为2个大类,2个大类遗传关系相对较远㊁独立进化,最终将54个菌株鉴定为36个差异菌株;拮抗试验结果与ITS 序列分析结果基本一致,但第Ⅵ Ⅸ组有较大差异㊂因此,拮抗试验结合ITS 序列分析法可作为菌种鉴定的一个手段㊂关键词:平菇;种质资源;拮抗试验;ITS 序列分析;遗传多样性中图分类号:S663.1㊀㊀文献标志码:A㊀㊀文章编号:1004-3268(2020)03-0138-07The Genetic Diversity Analysis of Pleurotus ostreatus Germplasm ResourcesCUI Xiao,LIU Qin,DUAN Yakui,KANG Yuanchun,KONG Weiwei,ZHANG Yuting,YUAN Ruiqi,KONG Weili(Agricultural Resources and Environmental Science,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,China)Abstract :43cultivated strains and 11wild strains of Pleurotus ostreatus were used as materials,by adop-ting copulative methods of antagonistic test and ITS sequence analysis,the genetic diversity of the tested strains were analyzed.The results showed that the antagonistic test results were significantly different among the strains with larger color differences,so the 54strains were divided into 32different strains by antagonis-tic method.According to the results of ITS sequence analysis and constructed phylogenetic tree,they weregrouped into two categories,and the two categories had relatively distant genetic relation and independent evolution,as a result,they were identified as 36strains.The antagonistic test results were basically consistent with ITS sequence analysis,except for the antagonistic group Ⅵ Ⅸ.Above all,the combination of antago-nistic test and ITS sequence analysis method can be used as a means of strain identification.Key words :Pleurotus ostreatus ;Germplasm resources;Antagonistic test;ITS sequence analysis;Genet-ic diversity㊀㊀平菇(Pleurotus ostreatus ),又名侧耳㊁糙皮侧耳㊁蚝菇㊁黑牡丹菇,台湾又称秀珍菇,在分类学上属真菌门(Eumycota;Mycobionta)㊁担子菌亚门(Basidio-mycotina)㊁伞菌目(Agaricales)㊁侧耳科(Pleurotace-ae)㊁侧耳属(Pleurotus )[1],是一种常见的灰色食用菇㊂据中国食用菌协会统计(2017年),国内平菇2016年总产量约600万t,在全国各地均有种植,河南省是全国平菇重点产区,年产量约100万t,栽培面积分布全省㊂由于不同区域引种混乱,随意命名,导致生产中平菇菌株同名异物和同物异名现象严㊀第3期崔㊀筱等:平菇种质资源的遗传多样性分析重㊂收集生产中常用菌株,对平菇菌株进行有效地分类和鉴定是平菇新品种选育的基础和前提㊂在自然界中微生物与微生物之间拮抗现象普遍存在,是一个复杂的反应过程,具有防止遗传上明显不同的个体间融合的作用,以保持个体遗传上的稳定性[2]㊂拮抗反应试验可用于菌株之间亲缘关系远近的预测,在真菌分类学上被广泛应用[3]㊂但拮抗试验只能将有拮抗反应的菌株分为不同菌株,却不能将没有拮抗反应的菌株视为相同菌株,甚至很难说没有拮抗反应的菌株亲缘关系近,有的不同种或不同属之间的菌株也可能没有拮抗反应,因此,拮抗测定仅仅是菌种鉴定的一种辅助手段,需要和其他鉴定手段相配合㊂核糖体第1转录间隔区(Internal transcribed spacer1,ITS1)是位于18S rRNA和5.8S rRNA基因之间的非编码间隔区,在种内由于基因的流动而经常表现出很高的同源性,在种间则保持着各种程度的变异,变异的多少能够反映生物进化上属内种间亲缘关系的远近,且具有快速㊁准确㊁微量㊁灵敏度高㊁程序简单等优点,现已作为一种分子标记广泛应用于真菌的分类鉴定㊁检测和病害诊断[4-5]㊂如刘华晶等[6]利用ITS标记对黑龙江省采集的33个野生黑木耳菌株和8个黑龙江省常见栽培菌株进行遗传多样性分析和系统发育研究㊂本研究对54个平菇菌种通过拮抗和ITS试验进行了分类和鉴定,旨在为以后的平菇选育工作提供依据㊂1㊀材料和方法1.1㊀供试菌株供试平菇菌株54株,其中野生菌株11株,栽培菌株43株(表1)㊂A16㊁A25㊁A43㊁A46引自中国农业科学院;A4㊁A10㊁A35㊁A54引自江苏天达食用菌有限公司;A7㊁A19㊁A34㊁A51引自新乡农业科学院; A48引自商丘农业科学院;A20㊁A24㊁A29㊁A31㊁A40为河南省农业科学院食用菌中心保藏菌株;A27㊁A49㊁A50㊁A52为自育品种㊂A2㊁A3㊁A6㊁A9㊁A12㊁A13㊁A14㊁A15㊁A18㊁A21㊁A22为野生型菌株,其余均从生产中采集分离㊂1.2㊀供试培养基母种PDA培养基购自北京奥博星生物技术有限责任公司;栽培培养基:棉籽壳98%㊁石灰2%㊂1.3㊀试验方法1.3.1㊀栽培评价试验㊀按照配方制作栽培菌袋,菌袋规格为14cmˑ28cmˑ0.05cm聚丙烯袋,一端套环,每袋培养料质量500g,高压灭菌后,在套环一端接种,25ħ培养,菌丝满袋后,去掉套环,开口出菇,保持棚内温度10~28ħ㊁相对湿度80%~95%㊁光照150~200lx㊁CO2质量浓度1178.57~1571.42mg/m3,子实体七成熟采收,观察记载子实体颜色㊂表1㊀供试平菇菌株Tab.1㊀The tested strains of Pleurotus ostreatus1.3.2㊀拮抗试验㊀以栽培评价分类的54个平菇菌株为材料,用直径3mm的打孔器打取各菌株种块于90mm培养皿内对峙培养,每皿放置8个种块,种块间距1.0cm,每个菌株重复3次,于25ħ培养7d,按照拮抗试验(国家标准)的方法观察菌株间拮抗反应的结果,记录并进行聚类分析㊂1.3.3㊀ITS序列分析1.3.3.1㊀DNA的提取与检测㊀将各参试菌株在相同条件下接种于PDA液体培养基中进行浅层培养,培养量以每个菌株可以做3个平行试验为准㊂基因组DNA提取方法参考闫燕等[7]的CTAB方法并有一定改动㊂将5mm平菇菌块接种到PDA培养基中,于25ħ㊁150r/min恒温振荡培养7d,7d后收集菌丝,放入烧过后的洁净研钵中,倒入适量液氮,迅速充分研磨菌丝体直至呈细粉末状,转入EP管㊂加入600μL预热到65ħ的CTAB提取液,充分振荡,放入65ħ水浴锅中1~2h㊂在此期间每隔10min上下颠倒混匀EP管一次,将上述加有菌体粉末的CTAB混合液冷却至室温,然后用V酚ʒV氯仿ʒV异戊醇=25ʒ24ʒ1和V氯仿ʒV异戊醇=24ʒ1的溶液各抽提1次,用DNA定量仪测定样品DNA的浓度和纯度, 1%琼脂糖凝胶电泳检测,-20ħ保存备用㊂1.3.3.2㊀PCR反应引物㊁体系及程序㊀ITS1序列PCR扩增正向引物为5ᶄ-GGAAGTAAAAGTCGTAA-931河南农业科学第49卷CAAGG-3ᶄ,反向引物为5ᶄ-GCTGCGTTCT-TCATCGATGC-3ᶄ,引物由武汉普奈斯生物科技有限公司合成㊂PCR反应条件:98ħ预变性2min;98ħ变性15s,50ħ退火30s,72ħ延伸30s,25~27个循环;72ħ延伸5min,使产物延伸完整,4ħ保存㊂PCR反应总体系为25μL,包括5ˑreaction buffer 5μL,5ˑGC buffer5μL,2.5mmol/L dNTP2μL, 10μmol/L上㊁下游引物各1μL,Q5DNA聚合酶0.25μL,模板DNA50~100ng,ddH2O9.75μL㊂1.3.3.3㊀DNA序列测定㊀扩增产物经2.0%的琼脂糖凝胶电泳,切取目的片段,用Axygen凝胶回收试剂盒回收目的片段㊂在MiSeq机器上利用MiSeq Reagent Kit V3进行2ˑ300bp的双端测序㊂1.3.3.4㊀ITS序列分析㊀对测序的54个DNA序列用Qiime软件进行OTU聚类,将OTU代表序列用Mafft对齐,然后用ClustalX2.1软件进行序列同源性比较㊂运用MAGA X软件基于邻接法(Neighbor-joining method,NJ法)构建分子系统发育树㊂2㊀结果与分析2.1㊀平菇栽培评价结果根据子实体颜色,将54个菌株分为两大类:深灰黑色和灰白色系列,结果见表2㊁图1 2㊂2.2㊀平菇拮抗试验结果以颜色分类为基础,分别对2个颜色系列54个菌株做拮抗检测(图3),共设计拮抗组合1431组,结果表明,拮抗现象不明显的有47组,占3.28%,初步将31个菌株聚成9个类群,其余23个菌株与其他菌株间拮抗现象比较明显,亲缘关系较远㊂Ⅰ㊁Ⅱ㊁Ⅲ㊁Ⅳ㊁Ⅴ㊁Ⅵ㊁Ⅶ㊁Ⅷ㊁Ⅸ组中,组内各个菌株间没有显著拮抗反应现象,表明这些菌株亲缘关系较近,可能起源于同一菌株,结果见表3㊂2.3㊀ITS序列分析结果2.3.1㊀PCR试验结果㊀54个平菇样品经PCR扩增都分别得到约280bp的目的条带(图4),将测序获得的序列于NCBI进行在线比对分析,证明其是5.8S rDNA区序列㊂表2㊀供试菌株子实体颜色Tab.2㊀Fruit body color of tested strains图1㊀深灰黑色平菇材料部分出菇试验结果Fig.1㊀Partial fruiting experiment of dark grey and black varieties 041㊀第3期崔㊀筱等:平菇种质资源的遗传多样性分析图2㊀灰白色平菇材料部分出菇试验结果Fig.2㊀Partial fruiting experiment of grey whitevarieties图3㊀平菇部分拮抗试验结果Fig.3㊀Partial antagonistic test results of Pleurotus ostreatus表3㊀平菇拮抗菌株分组结果Tab.3㊀Grouping results of Pleurotus ostreatus antagonistic strains141河南农业科学第49卷M.Marker 1000㊁700㊁500㊁400㊁300㊁200bp图4㊀54个平菇样品rDNA ITS1区序列PCR扩增检测结果Fig.4㊀PCR results of rDNA ITS1regions of54kinds of Pleurotus ostreatus2.3.2㊀ITS序列及组成分析㊀经对位排列,获得54株菌的ITS序列长度为280bp,与GenBank数据库中平菇菌种的ITS序列相似度为99%以上,在种的水平上证明供试菌株为平菇㊂经分析可知,54个平菇样品rDNA ITS1序列的碱基组成比较接近(表4),整个碱基组成中,除A5外,其余53个样品A+T 含量均高于C+G含量;单个碱基组成中,除A5外,其余53个样品T含量较高,为31%~33%,C含量较低,为20%~21%㊂表4㊀54个平菇样品rDNA ITS1序列的碱基组成Tab.4㊀Base composition of rDNA ITS1sequences of54kinds of Pleurotus ostreatus2.3.3㊀分子系统进化分析㊀为了明确54个平菇样品的分子进化关系,将测序得到的rDNA ITS1序列经ClustalX2.1软件进行多序列比对重排后,运用MAGA X软件基于NJ法构建平菇rDNA ITS1序列的分子进化系统树(图5)㊂从系统进化树的数值分析结果可以发现,54个平菇样品可以聚为2个大类,2个大类遗传关系相对较远㊁独立进化㊂其中,第一大类中,A33与A13聚为一小类,与A40㊁A22㊁A48存在一定的亲缘关系;A42与A20聚为一小类,与A35㊁A24㊁A14存在亲缘关系;A47与A29聚为一小类,A10与A11聚为一小类,且两小类之间存在一定的亲缘关系;A38与A5聚为一小类,A37与A4聚为一小类,且两小类之间存在一定的亲缘关系; A44与A12聚为一小类,A21与A9聚为一小类,且这两小类与A18㊁A6㊁A15㊁A3之间存在一定的亲缘关系㊂第二大类中,A43与A39聚为一小类;A23与241㊀第3期崔㊀筱等:平菇种质资源的遗传多样性分析A16聚为一小类,A54与A45聚为一小类,A31与A8聚为一小类且与A41存在一定的亲缘关系;A50与A49聚为一小类且与A52㊁A27㊁A25存在一定的亲缘关系;A28与A30聚为一小类,A19与A17聚为一小类,且与A32㊁A53存在一定的亲缘关系;A51与A7聚为一小类,A36与A26聚为一小类,A46与A1聚为一小类,且与A2存在一定的亲缘关系㊂根据ITS 序列进化分析,可将收集到的54株菌种定为36个菌株,彼此之间存在亲缘关系,与初步拮抗试验结果存在一定的差异㊂图5㊀54个平菇菌株的分子系统发育树Fig.5㊀The molecular phylogenetic tree of 54strains of Pleurotus ostreatus3㊀结论与讨论根据栽培试验结果,按照颜色将54个菌株分为深色系列和浅色系列㊂按照颜色的聚类,在2个系列之间做拮抗分析,结果表明,根据拮抗现象的有无,初步将54个株菌株聚成32个类群㊂进一步通过ITS 序列分析发现,54个供试菌的ITS 序列长度为280bp,与GenBank 数据库中的ITS 序列比对发现,其是5.8S rDNA 区序列,与平菇菌种的相似度为99%以上㊂进化树分析表明,54个平菇样品可以聚为2个大类,2个大类遗传关系相对较远㊁独立进化,可将收集到的54株菌种定为36个差异菌株,但真菌ITS 区域变异较快,可提供比较丰富的变异位点和信息位点,因此可作为一种分子标记用于探讨真菌种内变异和属内种间分子系统关系,可作为拮抗法鉴定差异不明显菌株间的补充鉴定方法,拮抗341河南农业科学第49卷试验可以作为ITS序列菌种鉴定的前期辅助手段㊂平菇是重要的食用菌栽培种之一,由于其种类多㊁个体多态性明显,易受培养条件和其他因素的影响,仅根据形态学进行分类并不能建立稳定的分类系统,给其分类鉴定带来一定的难度[8],拮抗试验是菌株体细胞之间不亲和的表现,在辅助鉴定分析亲缘关系中得到普遍应用,如秀珍菇[9]㊁杏鲍菇[10]㊁真姬菇[11]㊁香菇[12]等菌种的鉴定及亲缘关系分析,但该方法也存在一定的局限性,因为亲和菌株可能完全相同就是一个菌株,也可能存在遗传差异㊂ITS1为核基因组序列,由于该序列属于非编码的间隔区,没有自然选择的压力,使得该序列成为较好的分子系统学分析片段㊂本研究通过拮抗试验对54个平菇菌株进行了初步鉴定,结果表明,共设计拮抗组合1431组,拮抗现象不明显的有47组,有1384个配对(96.72%)形成拮抗反应,其中Ⅰ Ⅸ组内的菌株之间拮抗不明显,可以认定为9个不同的菌株,其余23个菌株与之拮抗明显,最终将54个菌株初步鉴定为32个不同菌株㊂后经ITS序列进一步鉴定表明,ITS序列将54个菌株最终鉴定为36个菌株,除拮抗试验的Ⅵ Ⅸ组之外,其他组合与拮抗试验分析基本一致,这说明拮抗试验虽然是一种简易的鉴定方法,但受主观因素影响较大,特别是在统计过程中对拮抗强度的弱与无之间的界定不是很准确,另外,拮抗线的有无及程度的强弱还受培养基成分的影响[13],因此,拮抗反应只能作为鉴定菌种间亲缘关系的一个辅助手段,对于拮抗现象明显的菌株可认定是不同菌株,对于拮抗现象不明显的菌株,可通过ITS法对其进一步鉴定认证㊂参考文献:[1]㊀吴尚军,贺国强.设施香菇平菇实用栽培技术集锦[M].北京:中国农业出版社,2014:97-98.WU S J,HE G Q.A practical technique for cultivation ofLentinus edodes and Pleurotus ostreatus[M].Beijing:Chi-nese Agricultural Press,2014:97-98.[2]㊀刘盛荣.杏鲍菇的遗传特性与种间杂交研究[D].福州:福建农林大学,2008:6-8.LIU S R.Study on the genetic characteristics and inter-specific hybridization of Pleurotus eryngii[D].Fuzhou:Fujian Agriculture and Forestry University,2008:6-8.[3]㊀唐传红,苏春丽,张劲松,等.灵芝属分类学研究进展[J].食用菌学报,2007,14(3):86-90.TANG C H,SU C L,ZHANG J S,et al.Advances in taxo-nomics of Ganoderma[J].Journal of Edible Fungi,2007,14(3):86-90.[4]㊀陈剑山,郑服丛.ITS序列分析在真菌分类鉴定中的应用[J].安徽农业科学,2007,35(13):3785-3786.CHEN J S,ZHENG F C.Application of ITS sequenceanalysis in classification and identification of fungi[J].Journal of Anhui Agricultural Science,2007,35(13):3785-3786.[5]㊀刘春来,文景芝,杨明秀,等.rDNA-ITS在植物病原真菌分子检测中的应用[J].东北农业大学学报,2007,38(1):101-106.LIU C L,WEN J Z,YANG M X,et al.The application ofrDNA-ITS in the molecular detection of plant pathogenicfungi[J].Journal of Northeast Agricultural University,2007,38(1):101-106.[6]㊀刘华晶,许修宏,李春艳,等.ISSR和ITS分子标记在黑龙江省野生黑木耳遗传多样性上的应用[J].东北农业大学学报,2012,43(8):94-100.LIU H J,XU X H,LI C Y,et al.Application of ISSR andITS markers in genetic diversity of wild Auricularia auric-ula in Heilongjiang province[J].Journal of Northeast Ag-ricultural University,2012,43(8):94-100.[7]㊀闫燕,许文涛,苏春元,等.平菇基因组DNA提取方法的研究[J].食品工业科技,2011,32(9):190-193.YAN Y,XU W T,SU C Y,et al.Study on extraction meth-od of genome DNA from Pleurotus ostreatus[J].Food In-dustry Science and Technology,2011,32(9):190-193.[8]㊀RICHTER C,WITTSTEIN K,KIRK P M,et al.An assess-ment of the taxonomy and chemotaxonomy of Ganoderma[J].Fungal Diversity,2015,71(1):1-15.[9]㊀李维焕,蔡德华,郑芳,等.秀珍菇菌株的亲缘关系分析[J].食品科学,2010,31(17):267-271.LI W H,CAI D H,ZHENG F,et al.Analysis on the ge-netic relationship of Pleurotus geesteranus strains[J].Journal of Food Science,2010,31(17):267-271. [10]㊀刘盛荣,张维瑞,柯斌榕,等.基于拮抗试验的杏鲍菇菌株分类研究[J].食药用菌,2015,23(1):33-36.LIU S R,ZHANG W R,KE B R,et al.Study on the clas-sification of Pleurotus eryngii strain based on antagonistictest[J].Journal of Edible and Medicinal Fungi,2015,23(1):33-36.[11]㊀刘蕾,宁丽,郭立忠,等.12个真姬菇菌株拮抗试验及部分同工酶分析[J].食用菌,2008,26(1):12-14.LIU L,NING L,GUO L Z,et al.Antagonistic and partialisozyme analysis of12strains of Hypsizygus marmoreus[J].Journal of Edible Fungus,2008,26(1):12-14.[12]㊀贾定洪,王波,郑林用,等.应用拮抗及ISSR方法鉴定袋料香菇菌株[J].西南农业学报,2013,26(2):832-834.JIA D H,WANG B,ZHENG L Y,et al.Anti-antagonismand ISSR method were used to identify the strains ofLentinus edodes[J].Journal of Southwest Agriculture,2013,26(2):832-834.[13]㊀CRISTINA O,MYRON L.On the independence of bar-rage formation and heterokaryon incompatibility in Neu-rospora crassa[J].Fungal Genet Biol,2003(38):209-219.441。

平菇主要农艺性状与产量的相关分析及通径分析盛春鸽;王延锋;史磊;潘春磊;刘姿彤;董雪梅;张鹏;王金贺【摘要】对20个平菇菌株进行栽培出菇试验，调查记录17个农艺性状，探究不同平菇菌株农艺性状之间的联系及主要性状与产量之间的关系，通过多元逐步回归和通径分析得到产量与生育期（x7）、菌盖厚度（x12）、单菇数（x15）、整齐度（x16）等性状的最优回归模型Y＝－33．32＋7．78x7＋100．64x12＋1．91x15＋26．18x16，为平菇的遗传育种及增产增收奠定基础，同时也为平菇各性状间的协调发展提供依据。

【期刊名称】《中国林副特产》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】3页(P4-6)【关键词】平菇;农艺性状;相关分析;通径分析【作者】盛春鸽;王延锋;史磊;潘春磊;刘姿彤;董雪梅;张鹏;王金贺【作者单位】黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江 157041;黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江157041;黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江 157041;黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江 157041;黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江 157041;黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江 157041;黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江 157041;黑龙江省农业科学院牡丹江分院，黑龙江牡丹江 157041【正文语种】中文【中图分类】S646.1+4平菇是侧耳属食用菌糙皮侧耳(Pleurotusostreatus)、白黄侧耳(P. cornucopiae)、佛罗里达侧耳(P. florida)和肺形侧耳(P. pulmonarius)等一类食用菌的统称[1]。

其营养丰富、易于栽培，深受菇农和消费者的青睐。

栽培范围遍及全球，产量在世界菇类总产中位居前列[2]。

研究性状间的相互关系，明了产量构成相关因素，对平菇育种中目标性状的把握及各性状间的协调培养具有实践指导意义。

河北省常栽平菇种质资源评价李慧;王朝江;杨红敏;高春燕【摘要】In order to evaluate the germplasm of oyster mushroom cultivated in Hebei province and find high-quality strains to be used as breeding samples, eighty-three oyster mushroom strains were collected. Antagonistic test of the 83 strains were employed to identify the same strain with different names. Internal Transcribe Spacer ( ITS) of the tested strains were sequenced to identify the molecular species. Mycelial growth rate on two natural substrates and antibacterial action to Trichoderma of the vegetative incompatible strains was determined. The results showed that the 83 tested strains were divided into 31 vegetative com⁃patibility groups including 15 strains of Pleurotus ostreatus,9 strains ofP.floridanus,2 strains of P.cornu⁃copiae,one strain of P.pulmonarius and 4 strains of uncertain species. Two strains were screened that were most suitable for growing on cottonseed hull and two strains on cotton stalk. Seven strains were showed ex⁃cellent resistance to Trichoderma.These strains can be used as excellent samples for future breeding study.%为了解河北省栽培平菇种质资源情况，同时发掘优异种质资源，更好的为平菇育种工作提供基础材料，本研究收集了河北省常栽的平菇品种共83株，通过拮抗试验对其“同物异名”菌株进行初步鉴定；基于ITS序列分析进行分类鉴定．并进一步对体细胞营养非亲和菌株的天然基质生长速率、抗霉力等部分生物学特性进行了测定分析．结果表明：河北省平菇栽培品种“同物异名”现象较为严重，经拮抗试验将83个平菇菌株划分为31个不同营养亲和群；经ITS序列比对分析，31个体细胞营养非亲和菌株中包括15株糙皮侧耳（ Pleurotus ostreatus）、9株佛州侧耳（ P． floridanus）、2株白黄侧耳（ P． cornucopiae）、1株肺形侧耳（ P． pulmonarius）及4株未界定种；经生物学特性分析筛选出了2株棉籽壳基质生长最适宜菌株和2株棉柴屑基质生长最适宜菌株，以及7个抗霉能力较强菌株，为后续的定向育种工作提供了优良材料．【期刊名称】《湖北民族学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】5页(P425-429)【关键词】平菇;种质资源;ITS;棉柴;抗霉力【作者】李慧;王朝江;杨红敏;高春燕【作者单位】河北省农林科学院遗传生理研究所，河北石家庄050051;河北省农林科学院遗传生理研究所，河北石家庄050051;河北省农林科学院遗传生理研究所，河北石家庄050051;河北省农林科学院遗传生理研究所，河北石家庄050051【正文语种】中文【中图分类】S646.1+5平菇是我国栽培最为广泛的食用菌之一，也是河北省最主要的食用菌栽培品种［1］.实际生产中，糙皮侧耳、白黄侧耳、佛罗里达侧耳、肺形侧耳均统称为平菇［2］.近几年，随着食用菌产业的发展，传统品种出现菌种退化等现象［3］，栽培者对平菇新品种的需求越来越大，于是不同区域相互引种、老种新名导致了栽培品种菌种混杂、种源不清、同物异名严重、假冒伪劣菌种充斥市场，这严重制约了食用菌产业的发展.此外，随着传统栽培原料棉籽壳成本增加，新型栽培基质的研发显得尤有重要［4］.本研究，广泛收集河北省实际生产中栽培用的平菇品种，结合拮抗试验及ITS序列分析对平菇种质资源进行初步鉴别及物种分类，并考察了传统栽培基质（棉籽壳）和新型栽培基质（棉柴）上的菌丝生长速率及菌丝抗霉力两个重要育种材料筛选指标［5-6］，旨在解决河北省栽培平菇菌种名混乱现象，为实际生产的菌种流通提供数据参考，并为下一步的平菇育种工作提供基础数据支持.1.1 供试菌株本研究以河北省常栽平菇品种的83个菌株为材料，来源于科研单位或菌种公司，其中1～24号菌株来自于河北省农林科学院，25～36号菌株来自于河北工程大学，37～47来自于中国农业科学院，48～71来自于石家庄市食用菌创新研究所（菌种公司），72～83来自于唐山市农科院.供试菌株编号及菌种名见表1.1.2 拮抗试验1.2.1 拮抗方法首先将供试菌株接种于PDA培养基上活化，参考李何静［7］的方法，将活化菌种块接种于PDA培养基平板上，25℃倒置暗光培养，观察并记录两个接种块菌落交界处的拮抗反应.1.2.2 体细胞营养非亲和菌株的筛选根据Korolev N［8］及郑素月［3］研究表明，同一营养亲和群内的菌株为同一菌株或来源相同且遗传关系很近的菌株.基于本研究为筛选育种材料的目的，宜选择亲缘关系差异大的材料，故本研究对于同一营养亲和群内菌株，随机选择一个菌株用于后续研究.1.3 体细胞营养非亲和菌株ITS序列分析参考黄晨阳［9］的方法对体细胞营养非亲和性菌株进行ITS-PCR扩增，得到的PCR产物直接测序，对于未测序成功的，采用克隆后再测序.利用DNASTAR Lasergene 7.1中的SeqMan软件去除序列末端测序质量差或载体序列，并进一步拼接得到完整序列，利用NCBI中的Blast软件包对DNA序列进行比对分析，确认分子生物学物种.1.4 天然基质上的菌丝生长速率测定天然基质选取传统栽培基质—棉籽壳及近几年河北省逐渐推广使用的新型基质—棉柴屑［5］为材料，以体细胞营养非亲和性菌株为研究对象.用打孔器取活化菌株菌落边缘生长旺盛的同龄菌种块，接种到装有灭菌天然基料的大试管中，置于25℃下暗光培养.每个测试菌株设3个重复，观察并测量天然基质上的菌丝生长速率.并采用SPSS 17.0软件对数据进行显著性差异分析.1.5 抗霉力测定采用PDA平板对峙培养法.将活化的平菇菌丝打孔取相同大小的菌丝块接种到PDA平板的一边，25℃培养3 d后，再将同样大小的平菇木霉菌丝块接种到另一边共同培养，一段时间后，观察平菇菌丝与霉菌菌丝拮抗情况.如果平菇菌丝与木霉菌丝对峙生长，有明显拮抗线，则视为抗霉能力强.反之，如果平菇菌丝不能与木霉菌丝对峙生长，被木霉菌丝生长覆盖，则视为抗霉力弱.2.1 体细胞营养亲和性测定结果该试验测定了83个菌株两两之间的拮抗反应，部分菌株的拮抗反应见图1.根据菌丝交界处是否产生拮抗现象，将无拮抗反应的菌株划为同一营养亲和群，视为营养亲和菌株；有拮抗反应的菌株划为不同营养亲和群，视为营养非亲和菌株.83个供试菌株共划分为31个不同营养亲和群（表2）.其中有16个营养亲和群包含2个及以上菌株，推测这些菌株可能是“同物异名”.其中组6包含的菌株数最多为14个，次之为组10包含8株，组13包含7株.这三组中的双抗黑平、冀农11及原生2号均为河北省栽培最为广泛的平菇品种.从31个营养亲和群中随机选取一株组成营养非亲和性菌株群进行后续试验.2.2 体细胞营养非亲和性菌株ITS序列分析结果该试验的31个营养非亲和性菌株采用PCR产物直接测序未成功的有2个，经克隆后测序成功.利用NCBI中的Blast软件包对31个菌株的ITS拼接序列（含ITS1，5.8S rDNA和ITS2）与Genbank登陆的已知物种的ITS序列进行比对分析发现，各菌株的序列相似性指数从96%到100%不等.依据Hughes&Petersen［10］认为伞菌的ITS序列差异不超过2%～3%可定为同种的原则，31个菌株中有15株P.ostreatus（菌株编号为4、5、9、12、20、23、26、28、37、40、46、47、62、66、68）、9株P.floridanus（菌株编号为1、2、14、17、24、45、76、78、83）、2株P.cornucopiae（菌株编号为38和39）、1株P.pulmonarius （菌株编号68）.有4个菌株（菌株编号为7、13、34、66）的序列与Genbank 登陆的P.ostreatus或P.floridanus比对相似性指数在97%以下，不能准确界定物种.但这也可能跟ITS-PCR扩增时出现碱基错配有关.2.3 天然基质上的菌丝生长速率测定分别测定了31个营养非亲和性菌株在棉籽壳和棉柴屑上的菌丝生长速率，结果显示（表4和5），不同菌株分别在棉籽壳和棉柴屑两种不同天然基质上的菌丝生长速度差异较大，总体来讲菌丝在棉柴屑上的生长速率要远远快于棉籽壳，但同一菌株在两种基质上的生长速率差别较大，棉籽壳上生长最快的菌株为豫平5号和558，而棉柴屑上生长最快的菌株为中蔬10号及特早新丰.这可能与不同菌株分解不同基质相关酶系的活性不同有关.2.4 抗霉力测定结果采用平板对峙培养法评价了31个供试菌株的抗霉能力，如图2所示，A菌株表现为平菇菌丝与木霉菌丝对峙生长，两者形成比较明显的拮抗线，而B菌株表现为木霉菌丝可以覆盖平菇菌丝生长，不能形成拮抗线，认为A菌株的抗霉能力比B菌株强.结果显示，有7个平菇菌株抗霉能力较强，分别为双抗黑平、秦风黑平、2028、中蔬10号、灰美2号、CCEF99及CCEF89.有5个菌株抗霉能力较差，分别为高平88、小白平、2016、基因2005及夏抗50.平菇是河北省栽培最为广泛的食用菌品种之一，随着食用菌产业的迅速发展，传统品种老化退化，劳动力成本以及栽培原料价格不断上涨等因素都制约了平菇产业的发展，种菇者亟需高产、优质、抗病抗杂能力强、栽培基质适应范围广的优良新品种.但是，通过本研究发现，当下的平菇菌种市场“同物异名”现象仍较为严重，1个双抗黑平菌株竟有14个名字，实际生产中错种、假种的现象也时有发生，本研究以现有河北省广泛栽培的平菇菌种为材料，初步解决了平菇品种混乱的现象，可以为平菇生产提供种源清楚的菌株.自从Gardes et al将ITS应用到真菌鉴定以来，以ITS序列分析为基础的真菌鉴定被广泛应用［11-12］.但黄晨阳等［9］研究认为ITS序列存在近缘种种内差异比种间大的问题，以及数据库序列信息的不准确性等因素造成了该方法的不准确.另外，金健康等［13］研究证明P.ostreatus、P.cornucopiae和P.floridanus为同一可交配群体，所以从生物学种的概念出发，P.ostreatus、P.cornucopiae和P.floridanus可以认为是同一个糙皮侧耳生物种群［14-15］.故本研究的31个河北省常栽平菇菌株除菌株基因2005为P.pulmonarius，其他菌株可认为是同一糙皮侧耳生物种群.棉籽壳是食用菌代料栽培的主要原料，近几年，棉籽壳的价格逐渐上涨，然而由于棉籽脱绒技术的提高，棉籽壳营养含量却在下降，从而导致了食用菌生产成本升高、生物转化率降低的现象.科研人员因此研究了多种农业副产品作为食用菌新型栽培基质并取得了成功［16-17］.棉柴同样作为棉花副产品，其产量远远大于棉籽壳，近几年已成功被用于部分食用菌的生产中［5，18-20］.本研究初步评价了河北省常栽平菇菌株对棉柴基质的利用能力，为棉柴栽培平菇适宜菌株的筛选提供了数据支持.同时，认为对于食用菌新型基质的研发，除了对高产配方的研究外，还需要考虑对基质适应性强的菌株的选育.【相关文献】［1］冀晓阳.河北省食用菌产业发展SWOT分析［J］.合作经济与科技，2015（2）：20-22. ［2］郑素月，张金霞，王贺祥，等.我国栽培平菇近缘种的多相分类［J］.中国食用菌，2003，22（3）：3-5.［3］郑素月，张庆桥.生化标记在河北省栽培平菇种质资源鉴别中的应用研究［J］.北方园艺，2011（14）：162-164.［4］陈学强，罗霞，余梦瑶，等.新型栽培基质生产食用菌的研究进展［J］.中国食用菌，2009，28（3）：7-9.［5］解文强，周廷斌，彭学文，等.棉柴代替棉籽皮栽培平菇和白灵菇的初步研究［J］.河北农业科学，2013，17（2）：35-37.［6］陈艳露，周莉，黄麟淇，等.抗木霉平菇菌株的筛选及其生产性能评价［J］.北方园艺，2013（17）：145-148.［7］李何静.我国野生白灵侧耳交配型因子数目的估测［D］.长春：吉林农业大学，2012.［8］KOROLEV N，KATAN J，KATAN T.Vegetative compatibility groups of Verticillium dahliae in Israel：Their distribution and association with pathogenicity［J］.Phytopathology，2000，90（5）：529-536.［9］黄晨阳，陈强，高山，等.侧耳属主要种类ITS序列分析［J］.菌物学报，2010，29（3）：65-372.［10］HUGHES K W，PETERSEN R.What percent sequence divergence for the ribosomal ITS gene can be considered conspecific for agaric fungi from a restricted geographical region？［C］//Johanne Stogran Botanical Society of America，Botany and Mycology，Snowbird，Utah：The Botanical Society of America，2009：43.［11］郑和斌，马志刚，吕作舟，等.基于ITS序列分析对我国主要栽培的侧耳品种的鉴定及评价［J］.菌物学报，2006，25（3）：398-407.［12］申进文，赵旭，李燕，等.河南省栽培平菇品种的种质资源评价［J］.河南农业大学学报，2010，45（3）：297-301.［13］金健康，宋金娣，姚萍，等.平菇单孢杂交与高产杂交种选育［J］.江苏农业科学，1993（2）：51-57.［14］吴秋欣.亲和性试验与高等担子菌的系统学［J］.真菌学报，1992，11（4）：249-257. ［15］PETERSON R H.Auriscalpium vulgare：mating system and biological species ［J］.Mycosystema，1991，93：25-32.［16］覃宝山，覃勇荣.新型培养料栽培食用菌研究的现状及展望［J］.中国农学通报，2010，26（16）：223-228.［17］苗人云，黄忠乾，李小林，等.花生壳作为姬菇栽培主要原料的可行性研究［J］.中国食用菌，2015，34（5）：9-13，16.［18］刘宇，王兰青，王守现，等.棉柴栽培杏鲍菇试验［J］.中国食用菌，2012，31（3）：32-34，37.［19］高春燕，郝素芳，王朝江.棉秆屑栽培小平菇技术要点［J］.食用菌，2012（5）：39-40. ［20］李保华，高春燕，王朝江.棉柴屑栽培姬菇鸡腿菇试验［J］.食用菌，2010（6）：32-33.。

基于高通量测序分析河北省中南部地区耕地土壤细菌多样性张翔;宋水山;黄亚丽;贾振华;黄媛媛;宋聪【摘要】为了研究大棚土壤与大田土壤中细菌多样性的差异,利用Miseq高通量测序技术,对河北省南部地区大棚与大田土壤的14个样品进行测序,并得到了2组样品中的物种组成信息与相对丰度信息.结果表明,在大棚(M1)与大田(N1)土壤样品中,优势菌群的组成基本一致,在门水平有变形菌门、放线菌门、酸杆菌门、拟杆菌门、绿弯菌门、厚壁菌门和芽单胞菌门这7个细菌门类,其中,放线菌门在大田中的相对丰度多,厚壁菌门在大棚中的相对丰度较多.在纲水平有α-变形菌纲、酸杆菌纲、γ-变形菌纲、放线菌纲、Δ-变形菌纲、β-变形菌纲、芽单胞菌纲、纤维粘网菌纲等15种优势菌群,其中,大棚中相对丰度明显增高的是纤维黏网菌纲、杆菌纲和黄杆菌纲等,而相对丰度明显降低的是酸杆菌纲和β-变形菌纲等.在属水平有节细菌属、鞘氨醇单胞菌属、德沃斯氏菌属、芽孢杆菌属、黄单胞菌属和溶杆菌属6个优势菌群,其中,节细菌属在大田中较多,而芽孢杆菌属、黄单胞菌属和溶杆菌属在大棚中较多.另外,一些具有固氮和降解修复能力的菌群在大田中的相对丰度要高一些.这应该是由大田与大棚不同的种植环境导致的.研究结果对改善耕地土壤,提高产量与抗病能力有一定的价值.【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2018(033)004【总页数】8页(P196-203)【关键词】高通量测序;大棚土壤;大田土壤;细菌多样性【作者】张翔;宋水山;黄亚丽;贾振华;黄媛媛;宋聪【作者单位】河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081;河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄 050000;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄 050081;河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄 050081;河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄 050081;河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄 050081;河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄 050081;河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄 050081【正文语种】中文【中图分类】S432.4河北省地处华北平原，土地总面积188 544.71 km2，其中，耕地面积有6537.74 km2[1]。

平菇栽培报告平菇双核菌丝具有大而明显的锁状联合。

担孢子萌发的初生菌丝(单核菌丝)较纤细，无锁状联合；次生菌丝(双核菌丝)在PDA培养基上呈绒毛状，洁白、粗壮、浓密、整齐，气生菌丝发达，在试管、培养皿和菌袋中爬壁能力特别强。

一般不产生色素，培养时间过长或温度过高或老化会出现黄色斑块。

子实体常丛生或叠生，由菌盖和菌柄两部分组成。

菌盖侧生于菌柄上，较大，扇形，有白、灰、黑等多种颜色。

菌肉厚，吸水能力强。

菌褶刀片状，延生，质脆易断。

菌柄侧生，内实。

菌柄着生处下凹。

担子无隔，棍棒状，顶端有4个孢子梗。

每个梗上着生1个担孢子。

担孢子无色，光滑，长圆柱形或长椭圆形。

孢子印多白色。

平菇肉质肥厚，味道鲜美，营养丰富。

据测定，每100g干平菇中含粗蛋白质 25.6 g、粗脂肪 3.7 g。

平菇含有18种氨基酸，其中人体必需的8种氨基酸都有，且占总氨基酸总量的40%-50%。

平菇还含有丰富的钙、磷、铁、钾等矿质元素以及维生素B、维生素C、维生素K 等。

平菇所含的酸性多糖、微量牛磺酸和多消化、降低血压和胆固醇，并对癌细胞有显著的抑制作用，还可有效地防治胃炎、肝炎、十二指肠溃疡、胆结石、糖尿病和心脑血管疾病等。

20世纪初意大利首先进行平菇木屑栽培研究，70年代后中国、德国、日本、韩国等国采用稻草、废棉、棉籽壳等栽培取得良好效果，使平菇成为世界上栽培最广泛的食用菌之一。

平菇栽培原料广泛，适应性强，生物学效率较高，栽培方式多样。

1原料及配方1.1菌种平菇菌种：黑平王，引自高邮市科学食用菌研究所。

1.2培养料配方可参照发酵料床栽配方，单为了取得较高单产，根据主料不同可适当增加一些富含氮素的养料[1]。

本次栽培配方如下：破籽棉30%，甘蔗渣22%，莲子壳20%，麸皮和玉米粉15%，石灰3%。

要求培养料含水量60%～65%，pH：8～9。

一般主料先加水或浸水预湿，充分吸水后，再将多余的水沥干，然后加入辅料，充分拌匀，调节水分至适合发酵的程度，堆制发酵后装袋灭菌。

十个平菇菌株比较试验
姜新良;赵占春;李蓁;杨兴国;蒋逵良
【期刊名称】《食用菌》
【年(卷),期】2006(28)6
【摘要】平菇是我市常规主栽品种之一。

近年栽培平菇规模不断扩大，为进一步提高平菇产量，在苏州市科技局支持下，开展优质平菇新品种的选育，对引进10个平菇菌株进行比较试验，筛选出3个菌株作为下一步杂交育种出发菌株。

现将品比试验结果总结如下：
【总页数】2页(P18-19)
【作者】姜新良;赵占春;李蓁;杨兴国;蒋逵良
【作者单位】江苏省张家港市蔬菜办公室,张家港,215600;江苏省张家港市蔬菜办公室,张家港,215600;江苏省张家港市科教站,215600;江苏省张家港市蔬菜办公室,张家港,215600;江苏省张家港市蔬菜办公室,张家港,215600
【正文语种】中文
【中图分类】S6
【相关文献】
1.十个平菇菌株的品比试验 [J], 韩根锁;王周录;史联联;王志岳;王敏
2.秦巴山区2个平菇菌株比较试验 [J], 张耀玲;刘勇;陈荣信;吴建海
3.铜仁地区10个平菇菌株比较试验 [J], 杨慧;邓超;秦盛江;张志昌;顾昌华
4.铜仁地区10个平菇菌株比较试验 [J], 杨慧;邓超;秦盛江;张志昌;顾昌华
5.聊城地区10个平菇菌株农艺性状和产量比较试验 [J], 李岩杰;邱牧;李娜;何小春;赵新宇;李慧;武恩斯;曹修才
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冀中南地区羊肚菌种植中的常见问题和管理措施浅析
贾静丽
【期刊名称】《农业开发与装备》
【年(卷),期】2024()4
【摘要】近几年,冀中南地区的羊肚菌产业发展迅速,取得了一定的规模和影响力,但是,在发展中存在的一些技术问题制约着该地区羊肚菌产业发展。

针对常见的种植问题,结合种植实践,介绍了冀中南地区羊肚菌种植中播种前、播种后及其他常见问题和管理措施,以期为菇农朋友提供有益的帮助,更好促进羊肚菌产业发展。

【总页数】3页(P190-192)
【作者】贾静丽
【作者单位】柏乡县农业农村局
【正文语种】中文
【中图分类】F42
【相关文献】
1.羊肚菌外援营养袋技术常见问题及改进措施
2.山西中南部地区羊肚菌资源及生境调查
3.陕南地区羊肚菌—甜瓜—四季豆高效种植模式简介
4.皖北地区“葡萄+羊肚菌”绿色提质增效种植模式要点
5.陕西汉中地区羊肚菌温室大棚种植技术
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冀中南地区设施蔬菜栽培茬口汇总对比
李燕;师建华;康欣娜;张铁石
【期刊名称】《现代农村科技》
【年(卷),期】2015(0)5
【摘要】随着市场消费结构的不断变化和人民生活水平的不断提高,人们对营养丰富的时令蔬菜需求量日益增加。

因此,应充分利用设施优势,科学安排茬口布局,合理调整种植品种结构,才能提高种植收益。

2014年9月,对石家庄市109个设施蔬菜基地做了调研,整理出主要的栽培茬口模式,并进行了效益分析,现总结如下,建议种植者根据当地实际情况灵活掌握利用。

本地区设施蔬菜栽培茬口主要有两种模式：一种是温室栽培模式,一种是大棚栽培模式。

1温室栽培主要茬口1.1番茄（黄瓜）一大茬。

【总页数】1页(P18-18)
【作者】李燕;师建华;康欣娜;张铁石
【作者单位】050000 石家庄市农林科学研究院;050000 石家庄市农林科学研究院;050000 石家庄市农林科学研究院;050000 石家庄市农林科学研究院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.设施蔬菜栽培茬口安排
2.设施蔬菜栽培茬口对生态型无土栽培基质性状变化的影响
3.蔬菜设施栽培专题讲座第十讲南方地区设施蔬菜周年茬口安排
4.蔬菜栽培的茬口管理技术要点
5.南京地区超甜玉米"晶甜9号"设施栽培周年生产高效茬口模式
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不同连作年限烤烟根际红壤微生物多样性比较曹超逸;潘义宏;冀新威;黄坤;李柘锦;张加研【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2022(50)19【摘要】为探究不同种植年限现蕾期烤烟根际土壤微生物多样性的规律及差异,以云南红河不同种植年限根际红壤为研究对象,采用16S rRNA和ITS序列进行高通量测序,对比分析不同种植年限烤烟根系细菌和真菌多样性、群落分布规律及与种植年限的相关性。

结果表明,根际土壤细菌和真菌群落的α多样性(ACE和Chao1)随种植0年—种植1年—连续种植2年、3年—连续种植4年—连续种植5年呈升高—降低—升高—降低的变化趋势,且轮作处理细菌群落ACE和Chao1多样性最高,撂荒处理真菌群落ACE和Chao1多样性最高;6个处理间根际土壤细菌和真菌群落β多样性均存在极显著差异(R^(2)=0.732,P<0.01;R^(2)=0.520,P<0.01),短期连续种植年限(SCC2和SCC3)能使土壤具有明显的细菌群落结构,撂荒处理(SCK)能使土壤具有明显的真菌群落结构;优势细菌中的酸杆菌门和绿弯菌门与种植年限呈显著负相关(P<0.05);疣微菌门与种植年限呈显著正相关(P<0.05)。

细菌属水平中的苔藓杆菌属、RB41菌属与种植年限呈显著负相关(P<0.05)。

真菌门和属水平类群与种植年限均无显著相关性(P>0.05)。

其中,6个处理优势真菌均为子囊菌门,属水平的镰刀菌属在连续种植5年处理丰度最高,达到10.01%,可能会引起真菌病害,导致连作障碍的发生。

说明不同耕作方式对土壤微生物群落结构均有影响,连续种植对烤烟根际土壤微生物多样性有负向影响,研究中筛选的关键菌群,可为连作烤烟红壤微环境健康的判断提供科学依据。

【总页数】9页(P211-219)【作者】曹超逸;潘义宏;冀新威;黄坤;李柘锦;张加研【作者单位】西南林业大学化学工程学院;云南省烟草公司红河州公司【正文语种】中文【中图分类】S572.06;S182【相关文献】1.不同养地方式对连作烤烟根际土壤微生物功能多样性的影响2.不同连作年限怀牛膝根际土壤理化性质及微生物多样性3.抗病性不同大豆品种根面及根际微生物区系的变化Ⅱ.连作大豆(重茬)根面及根际微生物区系的变化4.不同连作年限烤烟根际土壤真菌群落\r18S rDNA-PCR-DGGE分析5.不同连作年限高粱生长及根际土壤微生物群落功能多样性差异因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

采用同工酶分析技术鉴定11个平菇菌株亲缘关系
李红;苏君伟;张敏;刘娜
【期刊名称】《辽宁农业科学》
【年(卷),期】2008(000)003
【摘要】平菇（Pleurotus ostreatus）在分类学上隶属于担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、侧耳属。

平菇适应性强，出菇温度范围广，栽培相对简易，产量高，肉质肥嫩，营养丰富，市场容量大，是我国近20年来发展最快的食用菌之一。

【总页数】3页(P27-29)
【作者】李红;苏君伟;张敏;刘娜
【作者单位】辽宁省农业科学院食用菌研究所,辽宁,沈阳,110161;辽宁省农业科学
院食用菌研究所,辽宁,沈阳,110161;辽宁省农业科学院食用菌研究所,辽宁,沈
阳,110161;辽宁省农业科学院食用菌研究所,辽宁,沈阳,110161
【正文语种】中文
【中图分类】S646.1+40.1
【相关文献】
1.14个平菇栽培菌株的亲缘关系及培养特性研究 [J], 武模戈
2.11个平菇菌株聚类及酯酶同工酶分析 [J], 熊焕衢;谭金莲
3.冀南地区22个平菇栽培菌株的酯酶同工酶分析 [J], 郑素月;曹鹤;尹超;丁深根
4.山东省35个黑灰色平菇菌株的酯酶同工酶分析 [J], 李瑾;官志远;任鹏飞;任海霞;曲玲;于淑芳
5.白平菇不同菌株的酯酶同工酶分析及优良菌株筛选 [J], 杨立红;黄清荣;梁建光;路俊仙;蔡德华
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