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浅谈植物组织培养中的污染问题与防治措施李建忠（广西职业技术学院农业技术工程系02应生班）摘要：植物组织培养过程中的每一个环节，都应该谨慎操作，否则随时都有可能造成污染从而影响到实验的成功与否和大规模生产的顺利进行。
污染通常是由于培养容器，操作器械和培养基的不干净或消毒灭菌不彻底；接种环境和培养环境不清洁；操作人员操作不慎以及培养材料消毒不过关或携带内生菌等因素引起的。
本文将针对以上几方面介绍相关的防治措施，来减少污染问题的发生。
关键词：组织培养，污染，防治措施，消毒灭菌。
植物组织培养过程中，污染问题是一个普遍存在的现象。
能否很好地解决污染问题，关系到实验的成功与否和大规模生产的顺利进行。
所谓污染是指在培养过程中由于外界真菌，细菌或培养材料的内生菌所侵染，而使培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。
污染来源主要分为外界污染和内部污染两种。
具体原因可分为：①培养容器、操作器械和培养基的不干净和消毒灭菌不彻底；②接种环境和培养环境不清洁；③操作不谨慎；④外植体消毒不过关；⑤培养材料携带内生菌。
针对以上污染源，现将各相关防治措施分别介绍如下：1．培养容器、操作器械和培养基不干净与消毒灭菌不彻底1．1培养容器的清洗植物组织培养过程中，用于培养的容器有试管、三角瓶、培养瓶和培养箱等。
目前主要以培养瓶的使用为主。
对于培养瓶的洗法，根据桂林莱茵应用生物科技有限公司和加好生物工程有限公司的经验，先将瓶内的培养基去掉，然后置于淡洗衣粉水中浸泡一定时间，再在浓洗衣粉水中涮洗。
涮洗时要认真，瓶内瓶外都要涮洗到不能遗漏任何一处。
最后在流动的自来水下将残留的洗衣粉泡沫冲洗掉。
洗后的瓶子应明亮，内壁水膜均一，不挂水珠。
将洗干净的瓶子倒放在盘中或筐内，滤干水后，置于干净、明亮、干燥的地方备用。
需要注意的是，应将未污染的与污染的分开来洗。
先洗未污染的，再洗污染的。
并且分开放，以免造成交叉污染，而加重下一步的灭菌工作。
而对于瓶盖，也应严格的用洗衣粉水来认真涮洗，凉干后与瓶子一起存放备用。
植物组织培养中常见污染类型及防控技术探讨植物组织培养是一种重要的高效繁殖技术，在繁殖、育种、种质保存和遗传改良方面发挥着重要作用。
然而，在培养过程中，由于外界环境条件的影响，容易受到污染的影响，导致培养物成活率下降，造成大量损失。
为了保证培养物质量和数量，需要进行污染的防控。
本文将重点探讨植物组织培养中常见的五种污染类型及防控技术。
一、细菌污染细菌是造成植物组织培养污染的最主要原因之一，主要表现为苗期死亡及菌斑出现。
预防细菌污染应从以下几个方面进行：1、减少培养物的细菌污染源：例如，使用抗生素灭菌过滤器才能减少污染源。
2、消毒：保持培养室的洁净，经常使用消毒液喷洒培养室、培养器具及操作台面。
3、使用高品质的培养基和试管。
真菌是植物组织培养中最严重的污染问题之一，严重的可能会导致培养物死亡。
预防真菌污染应从以下几个方面进行：1、保持干燥：真菌喜欢潮湿和氧气环境，保持室内干燥可以减轻真菌污染。
2、培养物用高滤性试管和使用高品质的培养基。
3、使用杀真菌剂：如酚对甲酸、氯氧对二甲苯等。
三、病毒污染病毒污染常常是由外源引进，它们的传染性非常高，可以通过污染源、昆虫媒介传播等方式传播。
预防病毒污染可以通过以下几种途径进行：1、使用病毒检测细胞系。
2、消毒培养器、培养室和动植物的传送托架等工具。
3、使用抗病毒剂，如抗生素、抗病毒素和抗氧化剂等。
四、化学污染化学污染包括对培养物的有害物质污染，以及化学剂在培养基中的浓度超标。
为了减少化学污染，可以从以下几个方面考虑：1、选择高纯度、良质的培养基及试管。
2、减少化学物品的使用量。
3、妥善处置化学物品，防止随意倾倒。
五、操作者本身的污染操作者本身是植物组织培养中最常见的污染源之一。
因此需要注意以下几个方面：1、操作者的穿戴应干净，操作前洗手消毒。
2、操作者在操作过程中应避免头发和衣服和培养物接触，并且应该佩戴口罩。
3、在操作过程中应经常更换手套。
总之，为了达到一定的培养效果，降低损失和增加获得率，对植物组织培养的污染进行有效的控制至关重要。
植物组培过程中污染产生的原因及防治措施1 污染的原因污染是指在培养过程中，培养基或培养材料上滋生真菌、细菌等微生物，使培养材料不能正常生长和发育的现象。
组织培养中污染是经常发生的，常见的污染病原是细菌和真菌两大类。
细菌污染常在接种1-2d后表现，培养基表面出现黏液状菌斑。
真菌污染一般在接种后3d以后才表现，主要症状时培养基上出现绒毛状菌丝，然后形成不同颜色的孢子层。
造成污染的原因也很多，主要有(1) 培养基及各种使用器具灭菌不彻底(2) 外植体消毒不彻底(3) 接种时不严格无菌操作(4) 接种和培养环境不清洁(5) 培养容器原因，包括盖子和封口膜等。
材料带菌或培养基灭菌不彻底会造成成批接种材料被细菌污染，操作人员不严格遵守无菌操作规程也是造成细菌污染的重要原因。
培养环境不清洁、超净工作台的过滤装置失效、培养容器的口径过大以及封口膜破损等主要引起真菌污染。
2 污染的预防措施2.1灭菌要彻底在组培生产中，各种培养基以及接种过程中使用的各种器具都要严格灭菌。
首先是培养基的灭菌，耐高温的培养基需要在121-123℃条件下灭菌20-30min。
若出现灭菌时间不足或温度不够，培养一段时间后就会在培养基表面产生细菌性的污染。
一些不耐高温的物质，可采取细菌过滤器除去其中的微生物。
其次，接种用的器具除了经过高温霉菌外，在接种的过程中，每使用1次后，都要蘸酒精在酒精灯火焰上灼烧灭菌，特别是在不慎接触到污染物时，极易由于器具引起污染。
第三，对于被污染的培养瓶和器皿要单独浸泡，单独清洗，有条件的灭菌后再清洗。
2.2选择适当的外植体要认真地选择外植体，减少外植体上的带菌量。
一般多年生的木本材料比一二年生的草本材料带菌多；老的材料比幼嫩的材料带菌多；田间生长的材料比温室生长的材料带菌多；带泥土的材料比不带泥土的材料带菌多。
用茎尖作外植体时，应在室内或无菌条件下对枝条进行预培养。
将枝条用水冲洗干净后插入无糖的营养液或自来水中，使其发枝。
植物组培过程中污染产生的原因及防治措施植物组培过程中污染产生的原因及防治措施1 污染的原因污染是指在培养过程中，培养基或培养材料上滋生真菌、细菌等微生物，使培养材料不能正常生长和发育的现象。
组织培养中污染是经常发生的，常见的污染病原是细菌和真菌两大类。
细菌污染常在接种1-2d 后表现，培养基表面出现黏液状菌斑。
真菌污染一般在接种后3d以后才表现，主要症状时培养基上出现绒毛状菌丝，然后形成不同颜色的孢子层。
造成污染的原因也很多，主要有(1) 培养基及各种使用器具灭菌不彻底(2) 外植体消毒不彻底(3) 接种时不严格无菌操作(4) 接种和培养环境不清洁(5) 培养容器原因，包括盖子和封口膜等。
材料带菌或培养基灭菌不彻底会造成成批接种材料被细菌污染，操作人员不严格遵守无菌操作规程也是造成细菌污染的重要原因。
培养环境不清洁、超净工作台的过滤装置失效、培养容器的口径过大以及封口膜破损等主要引起真菌污染。
2 污染的预防措施2.1灭菌要彻底在组培生产中，各种培养基以及接种过程中使用的各种器具都要严格灭菌。
首先是培养基的灭菌，耐高温的培养基需要在121-123℃条件下灭菌20-30min。
若出现灭菌时间不足或温度不够，培养一段时间后就会在培养基表面产生细菌性的污染。
一些不耐高温的物质，可采取细菌过滤器除去其中的微生物。
其次，接种用的器具除了经过高温霉菌外，在接种的过程中，每使用1次后，都要蘸酒精在酒精灯火焰上灼烧灭菌，特别是在不慎接触到污染物时，极易由于器具引起污染。
第三，对于被污染的培养瓶和器皿要单独浸泡，单独清洗，有条件的灭菌后再清洗。
2.2选择适当的外植体要认真地选择外植体，减少外植体上的带菌量。
一般多年生的木本材料比一二年生的草本材料带菌多；老的材料比幼嫩的材料带菌多；田间生长的材料比温室生长的材料带菌多；带泥土的材料比不带泥土的材料带菌多。
用茎尖作外植体时，应在室内或无菌条件下对枝条进行预培养。
将枝条用水冲洗干净后插入无糖的营养液或自来水中，使其发枝。
植物组织培养中常见污染类型及防控技术探讨植物组织培养是一种重要的生物技术方法，广泛应用于植物组织生长、植物育种和植物繁殖等领域。
在植物组织培养过程中，常常会受到各种类型的污染影响，如细菌、真菌、病毒等微生物污染，以及化学物质污染等。
这些污染会影响植物组织培养的结果，甚至导致实验失败。
对植物组织培养中常见的污染类型及防控技术进行探讨，对于提高植物组织培养的成功率和质量具有重要的意义。
在植物组织培养中，常见的污染类型有细菌污染、真菌污染、病毒污染以及化学物质污染等。
这些污染会严重影响植物组织培养的结果。
1. 细菌污染细菌是植物组织培养中常见的污染微生物之一。
细菌污染通常表现为植物组织培养物表面或内部出现细菌菌落。
细菌污染会导致植物组织培养物变色、腐烂甚至死亡，严重影响植物组织培养的结果。
以上所述的污染类型，如不及时发现和控制，都会对植物组织培养产生严重影响，采取有效的防控技术显得尤为重要。
二、植物组织培养中的污染防控技术对于植物组织培养中常见的污染类型，有一些常见的防控技术可供选择，包括无菌技术、消毒技术、分离培养技术、基因工程抗性技术等。
1. 无菌技术无菌技术是植物组织培养中最基本和最重要的防控技术之一。
通过无菌操作和无菌环境建立，可以有效预防和控制细菌、真菌、病毒等微生物的污染。
无菌技术包括无菌操作技术、无菌工作台和培养室的建立，无菌试剂和器皿的使用等。
2. 消毒技术消毒技术是防控细菌、真菌等微生物污染的重要手段。
常用的消毒技术包括热消毒、化学消毒和辐射消毒等。
在植物组织培养中，要选择合适的消毒剂和消毒方法，确保除菌效果和对植物组织的安全。
3. 分离培养技术分离培养技术是防控污染的重要手段之一。
通过分离培养，可以将受污染的植物组织分离出来，保护无染的组织，减少污染的扩散。
分离培养技术需要耐心和技巧，但可以有效防控污染。
4. 基因工程抗性技术基因工程抗性技术是近年来发展起来的一种新的防控污染技术。
植物组织培养技术中常见的真菌污染问题解决探讨植物组织培养技术是一项重要的生物技术，广泛应用于植物繁殖、病毒清除、基因转化等领域。
然而，在实际应用中，常常会遇到真菌污染的问题，严重影响了组织培养的成功率和成果。
本文将从真菌的来源、污染的类型以及解决污染问题的方法等方面进行探讨。
真菌污染的来源多种多样，主要包括空气中的孢子、培养基原料中的微生物、操作人员等。
其中，空气中的孢子是最常见的污染源，它们在室内外环境中广泛存在，随风飘散并附着在培养器皿和植物表面，很容易对培养体产生污染。
因此，在组织培养过程中，保持无菌条件的重要性不言而喻。
真菌污染的类型包括外源性和内源性两种。
外源性污染主要指的是外来真菌侵入培养器皿和培养基，例如空气中的孢子、工作台面以及使用不洁净的操作工具等。
而内源性污染则指的是植物材料本身携带的真菌，例如种子、茎、叶片等。
针对真菌污染问题，可以采取多种方法加以解决。
首先，保持良好的无菌操作技术是防治真菌污染的基本手段。
操作人员应在洁净的环境中进行操作，定期对工作区域进行清洁和消毒。
其次，选择合适的杀菌剂和消毒剂对工作区域和操作用具进行消毒。
可使用紫外线灯对工作区域进行照射，也可以使用酒精、过氧化氢等消毒剂进行喷雾消毒。
此外，对于培养器皿和培养基的消毒也是关键。
培养器皿可以通过高温蒸气灭菌或紫外线照射进行处理，培养基则可以通过添加适量的抗生素、抗真菌剂等来抑制真菌的生长。
当发生真菌污染时，及时采取措施进行处理也是非常关键的。
一旦发现污染，首先应隔离受污染的培养器皿或植物材料，避免污染扩散。
其次，可以尝试使用抗真菌剂对受污染的培养器皿或植物材料进行处理。
常用的抗真菌剂有孢子杀菌剂、杀霉素等。
此外，也可以尝试将受污染的组织进行分离培养，移植到新的培养基中进行恢复。
不论采取何种处理方法，都需要持续监测和观察，确保处理的有效性。
总之，真菌污染是植物组织培养过程中的常见问题，但通过良好的无菌操作技术、适当的消毒措施以及及时的治理方法，可以有效地解决真菌污染问题，确保组织培养研究的顺利进行。
贵州农业科学2004,32(1):61~62Guizhou Agr icultur al Sciences新品种#新技术#新方法[文章编号]1001-3601(2004)01-0024-0061-02植物组织培养过程中的污染原因及控制措施赵佐敏,艾勇(贵州省安顺市农业科学研究所,安顺562109)Con tamin ation R eason an d its Control Measu re in Plan t Tissue CultureZHAO Zuo-min,AI Yong(Anshun Agricultural Institute,Anshun,Guizhou562109,China)[关键词]组织培养;控制污染[中图分类号]Q813.12[文献标识码]B根据笔者多年组培工作经验,将组培过程中可能出现的污染原因及控制措施总结如下。
1污染原因1.1培养材料带菌表现为接种后在外植体周围出现细菌、霉菌污染,可能原因是外植体消毒不彻底或外植体组织内部带有细菌、霉菌等杂菌。
1.2生产器具带菌生产器械、器皿带菌,包括镊子、剪刀、刀片、三角瓶、培养皿、封口膜等,超净台滤布不洁也会造成污染。
1.3培养基污染表现为接种前后培养基出现大量污染。
若菌落只存在于培养基表面且多为真菌时可能是由于瓶塞不严或扎[收稿日期]2003-09-23;2003-11-01修回[作者简介]赵佐敏(1967-),女,农艺师,从事园艺及生物技术研究。
贡献就越小。
结果表明,以双穗率最为重要,其对鲜食产量的影响最大,其次为行粒数,其余对产量贡献大小为:空秆率>出籽率>穗行数>株高>穗位高>千粒重。
株高、穗位高、千粒重3性状对产量的关联度虽然较小,但它们的作用发挥是通过其它性状表现的,对产量的影响也是不可忽视的。
2.2不同性状对产量的关联度不同,同一性状在不同品种中与产量的关联系数也不同从表2还可以看出:不同的性状对产量的关联度不同,同一性状在不同的品种中与产量的关联系数也不同。
植物组织培养中污染的分析及防控对策生物工程系生物技术及应用1041班邓雨琼学号：200410777指导老师赵军摘要：预防和控制污染是植物组织培养苗工厂化生产中重要的技术环节。
本文从通常污染的防控、内源性污染的防控、继代培养中污染防控、改善培养基的成分等方面，分析了怎样减少组织培养中出现的污染问题。
从而达到降低生产成本；减少对植株造成伤害；减少接种源及污染的机率等目的。
关键词：植物组织培养；污染；预防控制；对策The analysis and control of Contaminations in Tissue Culture of PlantAbstract: The technical to avoid and control contaminations was important in tissue culture of plants. In this article, the factor was analysis to reduce rates and damages of the contaminations in plant tissue culture. Different measures (i.e. pretreatment of plant materials, surface sterilization and change the composition of culture medium) were used to control contaminations of endogenesis and exogenous origination. As a result, the costs and damages to the plants were significantly reduced.Key words：Contamination; Elimination and Control; Measures; Plant tissue culture 污染是在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象[1]。
植物组织培养中污染的分析及防控对策植物组织培养是一种重要的生物技术，在植物育种、繁殖、生产等方面都具有广泛的应用。
然而，在实际操作过程中，难免会出现各种污染问题，如细菌、真菌、病毒等。
这些污染会严重影响培养物的生长和发育，降低培养的成功率和品质。
因此，对植物组织培养中污染的分析及防控对策需要特别重视，以确保培养物的质量和数量。
一、污染的影响1. 生长受阻细菌、真菌和病毒会侵入植物细胞或其周围环境，抑制细胞分裂和生长，导致细胞不能正常地向培养基中分化和生长，进而影响到整个培养物的发育。
2. 变异增多植物细胞在体外培养过程中往往会出现变异，不过这种变异一般是基因层面的，而污染则会导致细胞形态上的变异，甚至是基因造成的异常表达。
3. 腐烂和死亡细菌和真菌会分解培养基中的有机物，而这些有机物也是培养生长的重要因素。
所以，一旦培养基受污染，其成分和含量都会发生变化，导致植物细胞死亡或腐烂。
二、污染的分类分析和识别污染源也是非常必要的一步，这有利于我们在后期的操作中加强管理和控制。
其主要分为三类：1. 真菌或霉菌污染真菌或霉菌污染是比较常见的一种污染，往往会导致真菌或霉菌孢子侵入培养物中，产生白色丝状物或橙色孢子团，不利于培养物的清晰观察。
2. 细菌污染细菌污染是植物组织培养中比较常见的类型，它会导致细胞生长受阻，表现为发黄或出现不规则黑斑，甚至在割裂的器官上出现腐烂。
3. 病毒污染病毒污染也是较为常见的，因为病毒经常侵入植物细胞中，与其DNA和RNA交互，导致生长受阻或死亡。
识别病毒污染的方法可以根据病毒所引起的症状进行分析。
三、防控策略针对植物组织培养中的污染问题，必须采取一系列的预防和控制措施，以使植物组织培养体系能够有效地保持健康和发育。
1. 无菌操作在进行植物组织培养时，必须确保无菌条件。
在操作前，必须对工作台、培养器、器具进行彻底消毒，清洁过程中要注意不污染设备表面，严格遵守无菌操作要求。
2. 选择良好的初始材料在进行组织培养前应选择健康、生长良好的植物组织作为起始物质，这样可避免由于起始材料本身带来的病原微生物的污染，减少进一步污染的风险。
