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项目五用高效液相色谱法检测物质任务一食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的测定（液相色谱法）单元一液相色谱分离原理和液相色谱仪的基本组成教学内容苯甲酸和山梨酸是我国目前最常用的食品防腐剂，广泛应用于各种果汁饮料中，以防止其变质。
但如果防腐剂的含量超过标准限度，或者长期饮用含有防腐剂的饮料，则会对人体健康造成不得影响，因此检测果汁中的苯甲酸和山梨酸含量是非常有必要的。
表GB2760-2007国家食品添加剂使用卫生标准抑制物质腐败的药剂。
即对以腐败物质为代谢底物的微生物的生长具有持续的抑制作用。
重要的是它能在不同情况下抑制最易发生的腐败作用，特别是在一般灭菌作用不充分时仍具有持续性的效果。
对纤维和木材的防腐用矿油、煤焦油、丹宁，对生物标本用甲醛、升汞、甲苯、对羟基苯甲酸丁酯、硝基糠腙衍生物或香脂类树脂。
在食品中使用防腐剂受到限制，因此多靠干燥、腌制等一些物理的方法。
特殊的防腐剂有乙酸等有机酸、以油酸脂为成分的植物油、芥子等特殊的精油成分。
对于生物体的局部（如人体表面或消化道），可以根据具体条件采用各种防腐剂（如碘仿、水杨酸苯酯、苯胺染料或吖啶类色素等）。
我国规定使用的防腐剂有苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、丙酸钙等25种。
防腐剂应具备的几个条件：1、性质较稳定：加入到食品中后在一定的时期内有效，在食品中有很好的稳定性2、低浓度下具有较强的抑菌作用3、本身不应具有刺激气味和异味4、不应阻碍消化酶的作用，不应影响肠道内有益菌的作用5、价格合理，使用较方便。
防腐剂的作用机理：1、能使微生物的蛋白质凝固或变性，从而干扰其生长和繁殖。
2、防腐剂对微生物细胞壁、细胞膜产生作用。
由于能破坏或损伤细胞壁，或能干扰细胞壁合成的机理，致使胞内物质外泄，或影响与膜有关的呼吸链电子传递系统，从而具有抗微生物的作用。
3、作用于遗传物质或遗传微粒结构，进而影响到遗传物质的复制、转录、蛋白质的翻译等。
4、作用于微生物体内的酶系，抑制酶的活性，干扰其正常代谢。
食品防腐剂之苯甲酸及其钠盐苯甲酸及其钠盐（CNS：17.001，17.002；INS：210，211）苯甲酸及其钠盐是使用较早的一类酸性防腐剂，其防腐原理为：使微生物细胞的呼吸系统发生障碍，阻碍细胞膜的正常生理作用，抑制微生物体内的酶活性，破坏微生物的正常代谢。
苯甲酸又称安息香酸，是苯环上的一个氢被羧基（—COOH）取代形成的化合物。
苯甲酸钠是苯甲酸的钠盐，有防止变质发酸、延长保质期的效果。
苯甲酸及其钠盐的性状苯甲酸为具有苯或甲醛的气味的鳞片状或针状结晶。
熔点122.13℃，沸点249.2℃，相对密度1.2659。
25%饱和水溶液的PH 值为2.8。
在100℃时迅速升华，它的蒸汽有很强的刺激性，吸入后易引起咳嗽。
微溶于水，易溶于乙醇、乙醚等有机溶剂。
苯甲酸是弱酸，比脂肪酸强。
他们的化学性质相似，都能形成盐、酯、酰卤、酰胺、酸酐等，都不易被氧化。
苯甲酸的苯环上可发生亲电取代反应，主要得到间位取代产物。
苯甲酸钠是无色或白色的结晶或颗粒粉末，无臭或带苯甲酸气味，易燃，低毒，味甜涩而有收敛性。
可溶于水，水溶液呈弱碱性，也溶于甘油、甲醇、乙醇。
水中溶解度为53.0g/100ml，溶液的PH值为8。
苯甲酸及其钠盐的防腐性能苯甲酸及其钠盐属于酸性防腐剂，一般用在酸性条件下，其防腐功能在PH值为2.5-4.0时最佳，在碱性介质中则无杀菌和抑菌作用，此类防腐剂对酵母菌、部分细菌防腐效果很好，对霉菌的效果差一些，但在允许使用的最大范围内，在PH值4.5以下，对各种菌都有效。
苯甲酸及其钠盐的安全性少量的苯甲酸钠对人体无毒害，它可以在体内与甘氨酸结合以马尿酸的形式排出体外，也有一部分与葡萄醛酸结合为1-苯甲酰葡糖醛酸而排出。
10-14h便可从体内全部排出，因此少量的苯甲酸钠不会有积蓄作用。
苯甲酸的微晶或粉末对皮肤、眼、鼻、咽喉等有刺激作用。
即使其钠盐，如果大量服用，也会对胃有损害。
操作人员应穿戴防护工具。
需贮存于干燥通风处，防潮、防热、远离火源。
附件11：化妆品中苯甲酸及其盐的检测方法高效液相色谱法1 范围本方法规定了采用高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂苯甲酸（CAS：65-85-0）及其钠盐（以苯甲酸计）含量的方法。
本方法适用于膏霜、乳、液、粉类化妆品中苯甲酸及其钠盐的测定。
暂无实验数据表明本方法适用于蜡质类化妆品中苯甲酸及其钠盐含量的测定。
2 方法提要试样经酸化后，用乙醇和水的混合溶液，经水浴、超声提取，采用高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。
本方法的检出限为0.000225μg，定量下限为0.00075μg。
若取1.0g样品，本方法对苯甲酸的检出浓度为0.0001%；最低定量浓度为0.0004%。
必要时，采用气相色谱-质谱（GC/MS）确证。
3 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯,水为超纯水。
3.1 无水乙醇。
3.2 磷酸二氢钠。
3.3 磷酸。
3.4 硫酸。
3.5 硫酸〔c(1/2H2SO4) =2 mol/L〕：取6mL硫酸（3.4）缓缓注入100mL水中，冷却摇匀。
3.6 乙醇-水混合液：取90mL无水乙醇和10mL水混合摇匀。
3.7 磷酸二氢钠缓冲溶液（0.02mol/L，pH=2.2）：称取3.12g磷酸二氢钠，加水溶解并稀释至1000mL，用磷酸调pH值至2.2。
3.8 甲醇,色谱纯。
3.9 苯甲酸，纯度≥99.5%。
3.10 苯甲酸标准储备液［ （苯甲酸）=1.0g/L］：精密称取苯甲酸0.1000g于100mL 容量瓶中，用乙醇-水混合液（3.6）溶解并稀释至刻度，即得浓度为1.0mg/mL的苯甲酸标准储备溶液。
该储备液应在0℃～4℃冰箱冷藏保存。
3.11 系列浓度苯甲酸标准溶液：分别精密量取一定体积的苯甲酸标准储备溶液（3.10）于10mL量瓶中，以乙醇-水混合液（3.6）稀释并定容至刻度，得系列浓度为0.05mg/mL 、0.10mg/mL、0.20mg/ mL、0.30g/mL、0.40mg/mL、0.50mg/mL的标准溶液。
食品添加剂苯甲酸钠含量的测定报告讨论
食品添加剂苯甲酸钠在中国是允许使用的一种食品添加剂，用于防止食品腐败和变质。
然而，根据中国的食品安全法律法规，食品添加剂的使用必须符合一定的标准和限制。
测定食品添加剂苯甲酸钠的含量是确保食品安全的重要步骤之一。
为此，针对食品中苯甲酸钠的含量，通常会进行化学分析方法的研究和应用。
有关苯甲酸钠含量的测定报告，一般会包括以下内容的讨论：
1. 分析方法的选择和开发：针对苯甲酸钠的特性和食品基质的复杂性，选择一种适合的分析方法来测定其含量。
常用的方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）等。
2. 样品处理和准备：样品的处理对于准确测定苯甲酸钠的含量至关重要。
如何将样品转化为可测定的形式，并保证处理过程中不会造成样品中苯甲酸钠含量的变化，需要仔细考虑和控制。
3. 标准品和质控样品的使用：为了确保测定结果的准确性和可靠性，通常会使用标准品进行校准，并加入质控样品进行质量控制。
4. 方法的准确性和精密度评估：对于所选择的分析方法，需要进行准确性和精密度的评估，包括重复性、中间精密度、回收率等指标的测定。
5. 结果的讨论与比较：将所测定的苯甲酸钠含量与相关标准进行比较，并对结果的准确性和可靠性进行评估。
需要注意的是，在讨论报告时，不能直接透露涉及具体企业或产品的信息。
同时，任何关于食品添加剂苯甲酸钠使用的讨论都应该遵守中国相关法律法规的规定，保证内容不涉及违法违规行为。
希望以上信息对您有帮助。
附件11关于部分检验项目的说明一、苯甲酸及其钠盐苯甲酸及其盐是食品工业中常见的一种防腐保鲜剂，对霉菌、酵母和细菌有较好的抑制作用。
《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760-2014）中规定，苯甲酸及其钠盐（以苯甲酸计）在腌渍的蔬菜中最大使用量为1.0g/kg，其他蔬菜干制品中不得使用苯甲酸及其钠盐。
食品生产加工环节的防腐工艺阶段容易超范围、超限量使用。
苯甲酸及其钠盐的安全性较高，少量苯甲酸对人体无毒害，可随尿液排出体外，在人体内不会蓄积。
若过量食入苯甲酸超标的食物会引起腹泻、肚痛、心跳快等症状，长期使用可能引起肝肾脏的慢性损害。
二、安赛蜜安赛蜜是一种食品添加剂，是化学品，类似于糖精，易溶于水，增加食品甜味的，没有营养，口感好，无热量，具有在人体内不代谢、不吸收。
《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760-2014）中规定，可用于液体、固体饮料、冰淇淋、糕点、果酱类、酱菜类、蜜饯、餐桌用甜味料，最大使用量0.3g/kg。
在食品生产加工环节的调味阶段容易超范围、超量使用。
安赛蜜也是化工合成品，超范围、超量使用会对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒能力较弱的老人、孕妇、小孩危害更明显。
三、二氧化硫二氧化硫（以及焦亚硫酸钾、亚硫酸钠等添加剂）对食品有漂白和防腐作用，是食品加工中常用的漂白剂和防腐剂，使用后均可能二氧化硫的残留。
《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760-2014）中规定蔬菜制品中最大使用量为0.2g/kg，酱腌菜中的最大使用量为0.1g/kg。
可能在瓜子、腐竹、粉条粉丝、水产加工品、米面、年糕、酱腌菜、蜜饯等食品的加工过程中，超范围或超限量使用亚硫酸盐等漂白剂，以达到漂白和防腐的作用，从而导致产品中二氧化硫残留超标，不合规定使用二氧化硫也会对人体健康造成危害，经口摄入二氧化硫的主要毒性表现为胃肠道反应，如恶心、呕吐。
此外，也会影响钙吸收，造成机体钙丢失。
实验苯甲酸及其盐类的测定一、碱滴定法1、原理样品中的苯甲酸加入氯化钠饱和溶液后，在酸性条件下可用乙醚等有机试剂提取。
蒸去乙醚后溶于中性乙醇中，再用标准碱溶液滴定，求出样品中苯甲酸的含量。
2、试剂(1)纯乙醚：将乙醚于蒸馏瓶中置于水浴上蒸馏，截取35℃的馏分。
(2)1:1盐酸溶液。
(3)10％氢氧化钠溶液。
(4)氯化钠饱和溶液。
(5)氯化钠。
(6)95％中性乙醇：在乙醇(95％)中加入数滴酰酞指示剂，以氢氧化钠溶液中和至微红色。
(7)酰酞指示剂(1％乙醇溶液)。
(8)0.05M氢氧化钠标准溶液。
3、操作步骤称取均匀试样75.0g(精确至0.1g)，置于300mL烧杯中，加入7.5g氯化钠，经搅拌使之溶解后，再加70mL氯化钠饱和溶液，用10％氢氧化钠溶液中和至呈碱性(以石蕊试纸试验)，将溶液移入250mL容量瓶中，以氯化钠饱和溶液洗涤烧杯一同移入容量瓶内。
并以氯化钠饱和溶液稀释至刻度，放置2h，并不时摇动之。
过滤，吸取滤液100mL，放入500mL分液漏斗中，加l:1盐酸至呈酸性(以石蕊试纸试验)，再加过量3mL，然后相继用50、40、40mL纯乙醚，小心地用旋转方法抽提，每次摇动不少于5min，待静置分层后，将有机层放出，将3次的乙醚抽提液汇集于另一分液漏斗中，用水洗涤之，每次10mL，直至最后的10mL洗液不呈酸性(以石蕊试纸试验)为止。
将乙醚抽提液放入锥形瓶中，于40℃的水浴上回收乙醚(或索氏萃取瓶回收)，至剩余少量乙醚，取下，打开瓶口，用风扇吹干。
加入50mL中性乙醇和12mL水，加酚酞指示剂3滴，以0.05M氢氧化钠标准溶液滴定至微红色为止。
4、计算 %1002501441.01⨯⨯⨯=V w CV x式中 x ——样品苯甲酸钠的含量，%；V ——滴定时所耗氢氧化钠标准溶液的量，mL ；C ——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，mol/L ；w ——样品质量，g ；V 1——参加反应的过滤后试样量，mL ；0.1441——1mmol 氢氧化钠标液相当于苯甲酸钠的量，g 。
1.苯甲酸及其钠盐（以苯甲酸计）苯甲酸及其钠盐是食品工业中一种常见的防腐保鲜剂，对霉菌、酵母和细菌有较好的抑制作用。
苯甲酸及其钠盐的安全性较高，少量苯甲酸对人体无毒害，可随尿液排出体外，在人体内不会蓄积。
若长期过量食用苯甲酸超标的食品可能会对肝脏功能产生一定影响。
《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760—2014）中规定的苯甲酸及其钠盐的使用范围不包括豆制品。
苯甲酸及其钠盐超范围添加的原因，可能是企业为延长产品保质期，或弥补产品生产过程卫生条件不佳等原因。
2.二氧化硫二氧化硫是国内外允许使用的一种食品添加剂，在水果、蔬菜干制品，蜜饯、食糖及鲜食用菌等在贮藏和加工过程中可以防止食品氧化褐变或微生物污染。
二氧化硫进入人体后最终转化为硫酸盐并随尿液排出体外，少量二氧化硫进入人体不会对身体带来健康危害，但若过量食用可能引起如恶心、呕吐等胃肠道反应。
《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760—2014）中规定，二氧化硫在蔬菜干制品中最大使用量为0.2g/kg。
本次百合的抽检结果为0.24 g/kg，超过国家标准，原因可能是生产企业在生产过程中控制不严或超限量使用。
3.菌落总数菌落总数是指示性微生物指标，主要用来评价食品清洁度，反映食品在生产过程中是否符合卫生要求。
糕点中微生物过多会造成人体肠胃不适，甚至食物中毒。
《食品安全国家标准糕点、面包》（GB 7099-2015）中规定，糕点一个样品的5次检测结果均不超过100000CFU/g 且至少3次检测结果不超过10000CFU/g。
糕点中菌落总数超标的原因：1.可能是个别企业未按要求严格控制生产加工过程的卫生条件。
2.包装容器清洗消毒不到位。
3.可能与产品包装密封不严，储运条件控制不当等有关。
4.甜蜜素甜蜜素属于非营养型合成甜味剂，其甜度为蔗糖的30倍。
食品生产中要加入糖，成本会比较高，生产企业往往出于降低成本的考虑，使用少量的甜蜜素，就能制造出“甜蜜”效果，达到刺激食欲的目的，如果摄入过多会给身体造成一定的负担。
教学案例库——食品添加剂检测部分教学案例一苯甲酸及其钠盐的检测教学案例名称：饮料中苯甲酸及其钠盐的检测教学案例描述：该案例主要讲解饮料中苯甲酸及其钠盐的检测方法，适用于进行该项目检测的食品企业，以及进行苯甲酸及其钠盐检测项目教学的高职学校。
主要内容：一、防腐剂苯甲酸及其钠盐的检测意义二、饮料中苯甲酸及其钠盐的检测方法三、气相色谱法检测苯甲酸及其钠盐的定性、定量方法四、检测报告的出具教学目标：一、知识目标1. 明确防腐剂苯甲酸及其钠盐的检测意义2. 熟悉饮料中苯甲酸及其钠盐的检测方法3. 掌握色谱进行定性、定量的方法二、能力目标1. 能准确计算所用试剂量2. 能正确配置所需试剂及标准使用液3. 能操作气相色谱，对色谱条件会进行设置4. 会进行谱图分析5. 正确书写检测报告适用对象：高职学生知识准备：一、防腐剂简介食品防腐剂是指为防止食品在储存、流通过程中由微生物繁殖引起的腐败、变质，延长食品保存期和食用价值而在食品中使用的添加剂。
食品在物理、生物化学和有害生物等因素的作用下，可失去固有的色、香、味、形而腐烂变质，其中，有害微生物的作用是导致食品腐烂变质的主要因素。
有害微生物引起食品变质可分为：细菌繁殖造成的食品腐败，霉菌代谢导致的食品霉变，以及酵母分泌的氧化还原酶促使的食品发酵。
微生物繁殖需要有适合的客观条件，即适当的水分、温度、氧、渗透压、pH值和光等。
通常将蛋白质的变质称之为腐败，碳水化合物的变质称之为发酵，脂类的变质称之为酸败。
可以用物理或和化学的方法来防止有害微生物破坏。
所谓化学方法就是利用具有抑菌或杀菌（延缓或制止腐烂）的化学药剂来防止或延缓食品腐败，这些化学药剂称为防腐剂。
防腐剂的使用是为食品防腐提供了有效、渐变、经济的方法，在粮食、水果、蔬菜、肉、禽、蛋、水产品等视频的原料及加工品等贮藏中，起到了非常重要的作用。
防腐剂在食品中的应用广泛，使用量大，我国年产量为1万多吨。
用于视频的防腐剂，美国约有50种，日本有40多种，我国32种，主要有酸型防腐剂、酯型防腐剂、无机防腐剂和生物防腐剂四类。
目前，我国大量使用的食品防腐剂有：苯甲酸及其盐、山梨酸及其盐、对羟基苯甲酸酯类等化学合成防腐剂。
除了有益作用外，也有一定的危害，特别是有些品种中本身尚有一定毒性，使用不当便会给人体带来危害。
经长期的研究发现，一些合成防腐剂有诱惑性、致畸性和易引起食物中毒等问题。
如使用二氧化硫和亚硫酸盐后残存的SO2能引起严重的过敏反应（主要是呼吸道过敏），故FAO于1986年禁止在先蔬果中使用无机防腐剂。
使用苯甲酸、山梨酸钾和亚硝酸盐等防腐剂，也可能会在一定程度上抑制骨骼生长，危害肾脏、肝脏等器官的健康。
为了保证食品添加剂使用安全，在JECFA（FAO/WHO的食品添加剂联合专家委员会）、CCFAC（联合国食品法规委员会）和各国政府的努力下，随着科学技术的发展，特别是分析检测的进步，一方面已将那些对人体有害或对动物致癌、致畸的添加剂品种，如硼砂、甲醛、水杨酸和焦炭酸二乙酯等食品防腐剂禁止使用。
另一方面对那些有怀疑的品种继续进行更严格的毒理学检验，确定其是否可用、许可使用时的使用范围、最大使用量与残留量，以及其质量规格、分析检验方法等。
目前许可使用时的大多数食品添加剂和所有新的食品添加剂均已经过严格的毒理学实验和一定的安全性评价。
因此可以认为，现已将食品添加剂的危害降到了最低水平。
二、苯甲酸与苯甲酸钠的危害特性苯甲酸别名安息香酸，化学式为C7H6O2，相对分子质量122.12，白色，具有光泽的鳞片状或针状结晶，无臭或略带安息香或甲醛的气味。
性质稳定，有吸湿性，易溶于油脂中，在水中溶解度低，但加热可促使溶解，水溶液的pH为2.8。
苯甲酸钠为白色颗粒或晶体粉末，无臭或微带安息香气味，味微甜，有收敛性，在空气中稳定，易溶于水，53.30g/100ml（25℃）其水溶液的pH为8。
在酸性溶液中水解成苯甲酸。
因苯甲酸对水溶解度低，固在食品生产中常使用苯甲酸钠做防腐剂。
苯甲酸钠的防腐剂作用机理与苯甲酸相同，都是因苯甲酸分子能抑制微生物呼吸酶系统的活性，特别对乙酰辅酶A缩和反应具有很强的抑制作用，但防腐效果低于苯甲酸。
苯甲酸钠在pH为3.5时，0.05%的溶液能完全防止酵母生长；在pH 为6.5时，溶液的浓度需提高至2.5%方能有此效果，这是因为苯甲酸钠只有在游离出苯甲酸的条件下才能发挥防腐作用。
在较强酸性食品中，苯甲酸钠的防腐剂效果好。
1.18g苯甲酸钠的防腐剂效能相当于1.0g苯甲酸。
苯甲酸有一定的毒性，主要认为苯甲酸进入机体9~15h内，大部分与甘氨酸作用生成马尿酸，或与葡萄糖醛酸结合成葡萄苷酸，随尿排除体外。
因上述解毒作用是在肝脏内进行的，故肝功能衰弱的人群不宜食用含苯甲酸的食品。
目前也有苯甲酸引起叠加中毒的报道，因此在使用上有争议，虽大部分国家仍允许使用，但应用范围较窄。
动物实验发现，给小鼠连续10周喂饲80mg/kg的苯甲酸，可导致32%的小鼠死亡，苯甲酸对大鼠经口的LD50为2530mg/kg体重。
苯甲酸无蓄积性、致畸、致癌、致突变和抗原作用。
苯甲酸钠的毒性较小，动物的最大无作用剂量（MNL）为500mg/kg体重，但在人体肠道的酸性环境下可转化为毒性较强的苯甲酸。
苯甲酸钠对大鼠经口的LD50为4070mg/kg体重。
依据人体体重，终身摄入一种食品添加剂而无显著健康危害的每日允许摄入量的估计值（ADI值）（0～5）mg/kg（苯甲酸及其盐的总量，以苯甲酸计）（FAO/WHO，1994）。
苯甲酸钠的毒性作用是通过改变细胞膜的通透性，抑制细胞膜对氨基酸的吸收，并透过细胞膜抑制脂肪酶等活性，使ATP合成受阻。
苯甲酸钠属于弱酸盐，食入酸性物质中毒后的表现是局部黏膜或皮肤出现因化学性腐蚀而造成灼伤，继发伤口感染。
如果短期内被人体大量吸收，可出现疲乏无力，怠倦，恶心呕吐，腹泻和上腹部疼痛等症状。
重者可以引起酸中毒样呼吸，意思障碍；可以有面部潮红，体温低，血压低，脱水甚至休克表现。
过多食用苯甲酸钠会对人体的肝脏和肾脏产生危害，甚至致癌。
日本对进口食品中限制使用苯甲酸和苯甲酸钠，但本品价格低廉，在我国仍作为主要防腐剂使用，主要用于碳酸饮料和果汁。
我国《食品添加剂使用卫生标准》规定：苯甲酸、苯甲酸钠对碳酸饮料最大使用量为0.2g/kg；低盐酱菜和酱类为0.5g/kg；葡萄酒、果酒、软糖为0.8g/kg；酱油、食醋、果酱（不包括罐头）、果汁（果味）型饮料为1.0g/kg；食用工业用塑料桶装浓缩果是、果蔬汁为2g/kg。
苯甲酸和苯甲酸钠同时使用时，以苯甲酸计不得超过最大使用量。
苯甲酸及苯甲酸钠常用于保藏高酸性水果、浆果、果汁、饮料糖浆及其他酸性食品，可与低温杀菌并用，起协调作用。
教学实施过程一、情境创设某饮料公司生产一批饮料，为了延长保质期，该公司在饮料中添加了一定量的苯甲酸及其钠盐，由于苯甲酸及其钠盐超标会对人身体造成危害。
因此，公司要求质检部门在产品出厂前对防腐剂是否超标进行检测。
请按照专业水平对送检样品进行制备、预处理、检测并提供有关苯甲酸及其钠盐的精密、准确、可信的数据报告。
最后独立完成检测报告的撰写。
保留部分样品进行复检。
【问题导入】食品中为什么添加苯甲酸及其钠盐？引出：1.什么是防腐剂？2.防腐剂的检测意义？【学生讨论】学生分组学习并讨论，得出问题答案。
【任务描述】职责要求科长：负责检验流程的监督及检测报告的审批；组长：人员分工，各组工作的监督（摄像、照相），检测报告初审；准备组：负责检验材料、试剂、设备等的准备工作；操作组：负责苯甲酸及其钠盐的检测操作数据组：负责样品信息的记录、检测结果的记录、结果计算、报告单出具二、工作流程【学生活动】发放学习资料单“GB 1902-2005 食品添加剂苯甲酸钠的测定第四法高效液相色谱法”，分组学习及讨论。
【结果展示】让学生绘制工作内容流程图，进行展示。
图1 苯甲酸及其钠盐测定流程图表1 准备工作单YWG-C18 4.6mm×150mm，10um不锈钢柱甲醇+乙酸铵溶液（0.02mol/L）（5+95）紫外检测器，波长230nm，灵敏度0.2AUFS表2 苯甲酸测定原始数据记录报告单表3检测报告单三、检测结果分析与展示1.展示各组填写的记录单及报告单，让学生进行对比及纠错；2.展示各组的检测结果，强调苯甲酸及其钠盐的测定方法及报告方法；3.结合检测过程中的问题进行分析，填写问题分析表。
山梨酸和苯甲酸含量的测定——高效液相色谱法（一）原理样品加温除去二氧化碳和乙醇，调pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。
（二）仪器和试剂1．仪器高效液相色谱仪（带紫外检测器）。
2．试剂（1）甲醇：经0.5µm滤膜过滤。
（2）稀氨水溶液（1＋1）：氨水加水等体积混合。
（3）乙酸铵溶液（0.02mol／L）：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45µm滤膜过滤。
（4）碳酸氢钠溶液（20g／L）：称取2g碳酸氢钠（优级纯），加水至100mL，振摇溶解。
（5）苯甲酸标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液（20g／L）5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容，此溶液每毫升含苯甲酸1mg，作为储备液。
（6）山梨酸标准储备溶液：准确称取0.1000g山梨酸，加碳酸氢钠溶液（20g／L）5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容，此溶液每毫升含山梨酸为1mg，作为储备液。
（7）苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液：吸取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.0mL ，放入100mL 容量瓶中，加水至刻度。
此溶液含苯甲酸、山梨酸各0.1mg ／mL 。
经0.45µm 滤膜过滤。
（三）分析步骤1．样品处理（1）汽水：称取5.00g ～10.0g 样品，放入烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1＋1）调pH 约7，加水定容至10mL ～20mL ，经滤膜（HA0.45µm）过滤。
（2）果汁类：称取5.00g ～10.0g 样品，用氨水（1＋1）调pH 约7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45µm）过滤。
（3）配制酒类：称取10.0g 样品，放入烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1＋1）调pH 值约等于7，加水定容至适当体积，经0.45µm 滤膜过滤。
2．高效液相色谱参考条件（1）色谱柱：YWG-C 18 4.6mm ×150mm ，10µm 不锈钢柱。
（2）流动相：甲醇＋乙酸铵溶液（0.02mol ／L ）（5＋95）。
（3）流速：1.0mL ／min 。
（4）进样量：10µL。
