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【CN109655447A】用于微生物计数的检测系统和方法【专利】

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用于微生物细胞计数的仪器及方法[发明专利]

用于微生物细胞计数的仪器及方法[发明专利]

专利名称：用于微生物细胞计数的仪器及方法专利类型：发明专利
发明人：李恭新,刘飞,王志国,陈珺
申请号：CN201911309633.X
申请日：20191218
公开号：CN110846217A
公开日：
20200228
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种用于微生物细胞计数的仪器及方法。

本发明一种用于微生物细胞计数的仪器，包括：泵、DMD模块、透明通道芯片模块、分束器、上位机和光检测器件；所述透明通道芯片模块上设有液体通道，所述液体通道上设有若干圆孔，所述圆孔的直径大于所述液体通道的宽度，所述液体通道的宽度与所述细胞的直径相适配；所述DMD模块中的微镜与所述圆孔对应设置。

本发明的有益效果：本发明通过将传统的自动化的间歇计数过程转换成连续计数过程，将传统计数器中血细胞板内固定的细胞液变成该发明的微通道中流动的细胞液，拉长细胞检测时间和距离；微通道的尺寸略大于微生物细胞直径，保证在流通过程中逐个细胞流过通道的横截面。

申请人：江南大学
地址：214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
国籍：CN
代理机构：苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：李艾
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一种检验和计数活体微生物的方法[发明专利]

一种检验和计数活体微生物的方法[发明专利]

(10)申请公布号 CN 101935688 A(43)申请公布日 2011.01.05C N 101935688 A*CN101935688A*(21)申请号 200910054112.4(22)申请日 2009.06.30C12Q 1/68(2006.01)C12Q 1/06(2006.01)C12N 15/11(2006.01)(71)申请人光明乳业股份有限公司地址201103 上海市吴中路578号(72)发明人张红发 郭本恒 王荫榆 舒妹(74)专利代理机构上海智信专利代理有限公司31002代理人薛琦 朱水平(54)发明名称一种检验和计数活体微生物的方法(57)摘要本发明公开了一种检验和计数活体微生物的方法，包括以下步骤：1)对待检样品进行活菌培养计数，初步筛选出阳性可疑微生物；2)随机挑取步骤1)所述的阳性可疑微生物，提取基因组DNA ，用目标微生物的特异性引物进行PCR 检测并计数。

本发明将PCR 技术与传统微生物计数技术有机地结合起来，特异性强，灵敏度高，可靠性好，能够区分样品中活微生物和死微生物，结果误差小。

操作时间短，步骤简单，试剂无毒无害。

适合混合培养中的益生菌计数以及肠道中益生菌定植计数研究，特别是样品中干扰微生物与目标检测微生物相似时也能够准确计数，实际推广应用前景大。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 2 页权 利 要 求 书CN 101935688 A1/1页1.一种检验和计数活体微生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)对待检样品进行活菌培养计数，初步筛选出阳性可疑微生物；2)随机挑取步骤1)所述的阳性可疑微生物，提取基因组DNA，用目标微生物的特异性引物进行PCR检测并计数。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的进行活菌培养计数的方法是平板计数法或最大可能数法。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的待检样品是可溶性固体、液体样品，不溶性固体、半固体或粘稠性液体样品。

微生物检测系统和用于检测及杀灭体表微生物的建筑结构[发明专利]

微生物检测系统和用于检测及杀灭体表微生物的建筑结构[发明专利]

专利名称：微生物检测系统和用于检测及杀灭体表微生物的建筑结构
专利类型：发明专利
发明人：不公告发明人
申请号：CN202010184594.1
申请日：20200316
公开号：CN111220426A
公开日：
20200602
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及微生物检测领域，提供了一种微生物检测系统。

该微生物检测系统包括控制模块、传动模块、收集模块、检测模块、消毒模块和干燥模块。

收集模块还包括气体通道和气体收集装置，气体通道和气体收集装置通过移动至收集模块的过滤片连通，气体收集装置用于抽吸气体通道中的气体，气体通道包括充电部和电极部，电极部位于充电部和转盘之间；电极部与移动至收集模块的过滤片可以分别连接至极性相反的电极以形成电场，充电部可对进入到气体通道的微生物施加电荷，以使附带电荷的微生物可以被吸附到形成电场的过滤片上。

本发明的目的在于实现对微生物快速高效的收集和检测。

本发明还提供一种用于检测及杀灭体表微生物的建筑结构。

申请人：北京百瑞思安科技发展有限公司
地址：100085 北京市海淀区清河三街72号6号楼3层3152室
国籍：CN
代理机构：北京开阳星知识产权代理有限公司
代理人：杨中鹤
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一种微生物检验检测设备和检测方法[发明专利]

一种微生物检验检测设备和检测方法[发明专利]

专利名称：一种微生物检验检测设备和检测方法专利类型：发明专利
发明人：王青兰
申请号：CN202011305097.9
申请日：20201119
公开号：CN112501001A
公开日：
20210316
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及微生物检测技术领域，且公开了一种微生物检验检测设备和检测方法，包括底桶，所述底桶为中空圆柱形结构，底桶的顶部为敞口，所述底桶的内部底面中心处固定连接有主电机，通过将桶盖从支撑住上取下，把试管放入固定桶中，将支撑柱套接在限位孔上，把主弹簧弹出将卡接柱弹至限位孔的内侧壁上，进而使支撑柱与限位孔固定套接在一起，启动从电机，从电机转动带动转向盘转动，进而带动转轴转动，转轴做圆周运动使导轴杆做活塞运动，进而带动卡柱做活塞运动，卡柱做活塞运动带动滑块在滑杆上来回运动，最终使试管中的样液振荡均匀，从而使试管中的样液可以充分的振荡混合均匀，避免了不均匀振荡对检测造成的影响。

申请人：王青兰
地址：714000 陕西省渭南市临渭区乐天大街西段北侧乐天聚住宅小区4号楼
国籍：CN
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【CN109655447A】用于微生物计数的检测系统和方法【专利】

【CN109655447A】用于微生物计数的检测系统和方法【专利】

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CN 109655447 A
说 明 书
1/1ห้องสมุดไป่ตู้ 页
用于微生物计数的检测系统和方法
技术领域 [0001] 本发明涉及微生物领域，具体地涉及一种用于微生物计数的检测系统和方法。
背景技术 [0002] 食品因其丰富、多变的口感及营养物质，一直以来都是人们日常生活必需品，但是 丰富的营养物质也为微生物生长提供良好的条件。微生物含量也成为评估食品安全的一项 重要指标。目前 ，国际 公认的 卫生标准是以 细菌总数 、真菌总数作为安全评估指标。各国为 保障食品安全，都相应的制定标准化的检测流程和菌落总数的记数方法。标准化的检测流 程不仅有利于评估食品的 安全性 ，而且为食品监管部门 提供可靠的 科学依据。标准化检 测 流程还为食品生产企业严格控制产品 质量提供依据 ，可以 及时发现不合格产品 ，避免不合 产品流入市 场给人 们的 生活 及生命带来威胁。目 前 ，中国国 家标准中 测检微生物的 方法主 要采 用微生物培养法 ：通过采 用不同的 培养基以 定向或者非定向 培养方式检 测微生物 ；可 直观观察到所 测检微生物总数 ，一般所需时间为24-72h ，部分微生物甚至更久才能得到检 测结果 ，所需培养时间长、操作步聚繁琐、工作量大。甚至有些微生物因无法培养而逃过检 测。新技术和方法的引入对于微生物测检技术的发展至关重要，荧光标记技术、细胞膜电生 理技术以 及高分辨率显微镜使我 们对微生物生命活动的直接探索成为可能 ，但各种抗体、 染色技术不仅价格昂贵而且会对生理状态下的微生物细胞造成不同程度的影响或损伤。除 此以外，大部分技术还存在着试验操作复杂，耗时长等诸多弊端。 [0003] 显微拉曼光谱技术采用低功率激光器、高转换效率的全息技术以及共焦技术，具 有检测灵敏度高、时间短、所需样品量小、样品无需另外的试剂或复杂的手段进行制备等优 点，以上显著优势使得其越来越广泛的应用于微生物测检分析领域。然而，目前应用拉曼光 谱进行微生物菌落总数检测时首先需将检测样品制成小型样品片，样品片的厚度或合适的 样品量较难控制 ，若控制不当易对测试结果产生直接的 影响 ，然后制成的 样品片通过拉曼 光谱进行显微镜检测时 ，需要人为寻找微生物样品 ，对确定的 视野范围内的微生物才能进 行测定，因此限制拉曼光谱技术在样品中检测微生物的能力。 [0004] 因此，本领域仍然需要改进的检测方法和系统，以实现准确、快速、便捷地微生物 检测或计数。
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( 19 )中华人民 共和国国家知识产权局
( 12 )发明专利申请
(21)申请号 201910080620 .3
(22)申请日 2019 .01 .28
(71)申请人 广东海天创新技术有限公司 地址 528299 广东省佛山市南海区桂城街 道桂澜北路26号依云置地中心3座804 室 申请人 佛山市海天（高明）调味食品有限公 司 佛山市海天调味食品股份有限公司
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CN 109655447 A
权 利 要 求 书
2/2 页
所述检测装置(32)包括CCD。 8 .用于检测或计数样品中的微生物的方法，其包括以下步骤： (i) 使含有微生物的 待 测流体样品 在权 利要求1中所述的 流体管路中 按第一端部至 第
二端部方向、并以5-1200μL/min的流动速度移动，以使所述待测流体样品中的微生物逐个 通过所述流体管路的检测区；
CN 109655447 A
CN 109655447 A
权 利 要 求 书

1/2 页
1 .用于检测或计数微生物的系统，其包含： 具有流体入口与流体出口的流体泵(1) ； 流体控制装置(2) ，其包括具有第一端部和第二端部的流体管路(21)、混样池(22)以及 稀释液池(23) ；其中 ，所述混样池(22)分别与所述流体出口、第一端部以及稀释液池(23)流 体连通，所述流体管路(21)包含倒V型管单元(211) ，所述倒V型管单元(211)包含上升部分 (211a) 和下降部分 (211b) ，并且 ，靠近所述第二端部的位置设有检测区 ； 光谱检测系统(3) ，其包括光源(31)和检测装置(32) ，其中，所述光源(31)被设置为产 生从所述检测区穿过的激发光；所述检测装置(32)被设置为接收并检测从所述检测区产生 的光信号，以产生光谱。 2 .权利要求1所述的系统，其中，所述流体管路(21)包含多个流体连通的倒V型管单元 (211) ； 优选地，所述流体管路(21)包含3个、4个或5个流体连通的倒V型管单元(211)。 3 .权利要求1或2所述的系统，其中，所述流体管路(21)具有以下特征中的一项或多项： (i)所述上升部分(211a)与下降部分(211b)形成的夹角为锐角；优选地，所述锐角的范 围在45到75度之间； (ii) 所述上升部分 (211a) 与水平线的 夹 角为钝 角 ；优选地 ，所述钝 角的 范围 在100到 135度之间； (iii)所述上升部分(211a)与下降部分(211b)等长； (iv)所述流体管路的内径为20μm-50μm，例如20μm-30μm； (v) 所述流体管路由 激发光可穿透的材料 制成 ；优选地 ，所述激发光可穿透的材料选自 PMMA或PDMS； (vi)所述流体管路(21)的第一端部及其附近部分沿水平方向延伸。 4 .权利要求1-3任一项所述的系统，其中，所述系统还包括选自下列的一项或多项： (1)用于接收待测流体样品的流体源(4) ，其与所述流体泵(1)的流体入口流体连通；优 选地，所述待测流体样品是液体食品，例如饮品、液体调味品或饮用水； (2) 废液池(5) ，其与所述流体管路 (21)的第二端部流体连通 ； (3)阀门 (6) ，其用于控制流体从所述混样池(22)到所述流体管路 (21)的流动。 5 .权利要求1-4任一项所述的系统，其中，所述系统包含至少2个流体控制装置(2) ，所 述至少2个流体控制装置(2)中所包含的混样池(22)彼此流体连通； 优选地，所述系统包含至少3个流体控制装置(2) ，所述至少3个流体控制装置(2)中所 包含的混样池(22)彼此流体连通。 6 .权利要求1-5任一项所述的系统，其中，所述光谱检测系统(3)具备以下特征中的一 项或多项： (i) 所述光谱检测系统 (3) 进一步包含控制装置 ，其与所述光源 (31) 和检测装置 (32) 进 行数据通信； (ii)所述检测装置(32)包括光电转换器； (iii)所述光谱检测系统(3)选自拉曼光谱检测系统、红外光谱检测系统和紫外光谱检 测系统。 7 .权利要求1-6任一项所述的系统，其中，所述光谱检测系统(3)是拉曼光谱检测系统，
(10)申请公布号 CN 109655447 A (43)申请公布日 2019.04.19 G01N 21/35(2014 .01) G01N 21/33(2006 .01) G01N 21/3577(2014 .01) G01N 21/01(2006 .01)
权利要求书2页 说明书10页 附图6页
系统 ，其包含 ：具有流体入口 与流体出口的 流体 泵、流体控制装置和光谱检测系统 ，其中 ，所述流 体控制装置包括混样池、具有第一端部和第二端 部的流体管路以及稀释液池；其中 ，所述混样池 分别与所述流体出口、第一端部以及稀释液池流 体连通，所述流体管路包含倒V型管单元，所述倒 V型管单元包含上升部分和下降部分，并且，靠近 所述第二端部的位置设有检测区 ；所述光谱检测 系统包括光源和检测装置，其中 ，所述光源被设 置为产生从所述检测区穿过的激发光；所述检测 装置被设置为接收并检测从所述检测区产生的 光 信号 ，以 产生光谱。本发明 还提供了一 种 用于 微生物计数的方法，其包括使用本发明的检测系 统。
(ii)通过权利要求1-7任一项所述的检测系统对通过所述检测区的待测流体样品进行 光谱法检测，以获得从所述检测区产生的光谱，所述光谱包含归因于所述待测流体样品中 的菌体的图谱；
(iii)对所述检测区产生的光谱进行分析，以获得归因于微生物的图谱； (iv)对所述归因于微生物的图谱进行统计分析，以获得所述微生物的数量， 优选地，在步骤(i)中，将所述待测流体样品应用于权利要求4中所述的流体源(4)。 9 .权利要求8所述的方法，在步骤(ii)中，通过权利要求6中所述的检测系统对通过所 述检测区的待测流体样品进行拉曼光谱法检测，以获得从所述检测区产生的拉曼光谱；并 且 ，在步骤 (iii) 中 ，对所述检测区 产生的拉曼光谱进行分析 ，以 获得归因于微生物的特征 峰； 优选地，所述拉曼光谱法选自共焦拉曼光谱、表面增强拉曼光谱、相干反斯托克斯拉曼 光谱及激光镊子拉曼光谱。 10 .权利要求9所述的方法，其中，在以下一项或多项条件下进行所述拉曼光谱法检测： (i)采集时间为8ms-15s； (ii)激发光的波长在紫外到近红外波长范围内； (iii)激光功率为2-20mW。 11 .权利要求8-10任一项所述的方法，在步骤(i)之前，所述方法还包括对所述待测流 体样品进行预处理； 优选地，所述预处理选自过滤、稀释，或其任何组合； 优选地，在步骤(i)之前，使用无菌水对所述待测流体样品进行稀释。 12 .权利要求8-11任一项所述的方法，其中，所述待测流体样品是液体食品，例如饮品、 液体调味品或饮用水； 优选地，所述待测流体样品选自酱油、牛奶、果汁及矿泉水。
(72)发明人 刘辉 童星 周斌 孙爱华
(74)专利代理机构 中国国际贸易促进委员会专 利商标事务所 11038
代理人 杨棽 李程达
(51)Int .Cl . G01N 21/65(2006 .01)
( 54 )发明 名称 用于微生物计数的检测系统和方法
( 57 )摘要 本发明提供了一种用于微生物计数的检测