母液的配制ppt课件
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植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。
MS培养基的配制包括以下步骤。
培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。
现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg/LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5 5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。
植物组织培养母液配置一、实验目的学习配置培养基的母液,掌握配制方法,了解母液存储方法二、实验原理配置培养基时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配置,即按培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配置即可。
三、实验器材、试剂1器材电子天平烧杯(50ml 100ml 500ml 1000ml)量筒(1000ml 100ml 25ml)容量瓶(100 500 1000)2试剂NH4NO3,KNO3,KH2P O4,CaCl2·2H2O,MgSO4·7H2O,FeSO47H2ONa2-EDTA,MnSO4·4H2O,ZnSO4·7H2O,H3BO3,KI,Na2MoO4·2H2OCuSO4·5H2O,CoCl2·6H2O,肌醇,甘氨酸,盐酸硫胺素,盐酸吡哆醇,烟酸,蒸馏水四、实验步奏:一、母液的配置1、MS大量元素母液的配制一般将大量元素配制成10倍的母液,使用时再稀释10倍。
按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的:NH4NO3 、KNO3 ,KH2PO4 、MgSO4.7H2O 、CaCl2.2H2O的量,所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解,待全部溶解后,最后定容至1000ml,转入1000ml细口试剂瓶中,贴上标签,注明母液名称、放大倍数、配制日期,置于冰箱中保存备用。
2、MS微量元素母液的配制一般将微量元素配制成100倍的母液,使用时再稀释100倍。
按照配方表中用量分别依次称取:MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O 、H2BO3 、NaMoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O扩大100倍的量,用蒸馏水逐个溶解,待全部溶解后,用容量瓶定容至1000ml,转入1000ml细口试剂瓶中,贴上标签,注明母液名称、放大倍数、配制日期,置于冰箱中保存备用。
母液的配置流程一、母液配置前的准备。
1.1 了解母液的性质。
母液啊,那可就像做菜的底料一样重要。
咱得先清楚这母液是个啥性质,是酸性的呀,碱性的呀,还是有啥特殊的化学性质。
就好比你要做一道辣菜,得先知道辣椒的辣度是咋样的。
要是稀里糊涂的,那后面可就容易出乱子喽。
这是母液配置最基本的要求,就像盖房子打地基,地基不稳,房子能结实吗?肯定不行。
1.2 准备好所需的试剂和仪器。
试剂和仪器那就是咱配置母液的左膀右臂。
试剂得选对喽,纯度要符合要求,可不能以次充好。
这就像咱们买东西,不能图便宜买些假冒伪劣的。
仪器呢,要保证干净、完好无损。
比如说容量瓶,那得像新的一样透亮,刻度清晰准确。
要是有个磕磕碰碰的,量出来的东西就不准了,那母液配置出来也是个“半吊子”,根本没法用。
二、母液的配置过程。
2.1 精确称量。
称量可是个细致活儿,得像啄木鸟啄虫子一样精准。
多一点少一点都不行。
按照配方的要求,用天平精确地称取各种试剂。
这时候可不能粗心大意,“差之毫厘,谬以千里”啊。
要是称错了,那母液的成分就不对了,整个实验或者生产就可能毁于一旦。
就像你煮一锅汤,盐放多放少了,那味道可就全变了。
2.2 溶解操作。
把称好的试剂放到合适的容器里溶解。
这个过程要注意溶解的顺序,有时候就像排队一样,得按顺序来。
有的试剂可能需要加热才能更好地溶解,这时候就得小火慢炖,可不能心急火燎的,不然容易出岔子。
就像炖肉,火大了肉就糊了,这母液溶解也是这个理儿。
而且要搅拌均匀,让试剂充分溶解,不能留下小疙瘩,就像和面一样,得把面疙瘩都揉开。
2.3 定容操作。
定容可是母液配置的关键一步。
把溶解好的溶液转移到容量瓶里,然后用溶剂加到刻度线。
这时候眼睛得像老鹰一样锐利,盯着刻度线,一点都不能差。
要是加过了头,那母液就稀了;加少了呢,母液就浓了。
这就像穿衣服,大小得合适,不然就不合身,母液也是这样,浓度不合适就没法用。
三、母液配置后的检查与保存。
3.1 检查母液的质量。