总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求shouyi

总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：本产品与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用，用于体外定量测定人血清中总蛋白的浓度。

1.1包装规格液体单剂型（液体Ⅰ型）试剂（R）：60mL×4；试剂（R）：80mL×4。

1.2主要组成成分试剂（R）（液体）氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mmol/L碘化钾20mmol/L硫酸铜12mmol/L2.1 外观试剂（R）应为蓝色溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长546nm（540nm～560nm）（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤0.200。

2.4准确度测定尿素、尿酸和总蛋白复合冰冻人血清国家标准品（编号：360012），相对偏差应不超过±5%。

2.5分析灵敏度对应于浓度为60g/L的TP所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.100～0.500的范围内。

2.6重复性重复测试高、中、低浓度样本，变异系数（CV）应≤5%。

2.7批间差测定同一样本，批间差（R）应≤6%。

2.8线性范围在[2，100]g/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在(30，100]g/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%；在[2，30]g/L范围内，线性绝对偏差应不超过±3g/L。

2.9试剂稳定性2.9.1试剂效期稳定性：原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为36个月。

试剂有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

2.9.2开盖稳定性：开盖后，在2℃～8℃避光保存，稳定期为30天；稳定期满后1天内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

总蛋白液体测定(双缩脲法)Total Protein (TP)1检验目的本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆总蛋白。

2方法双缩脲比色终点法。

3原理在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。

显色强度和蛋白浓度成正比。

4 标本血清或血浆。

稳定性：20～25℃保存可稳定6天，4～8℃保存可稳定4周，-20℃保存至少可稳定1年。

不可使用已被污染的标本。

5 试剂5.1在测定时的各组分和浓度试剂1（R1）：氢氧化钠80 mmol/L酒石酸钾钠12.8 mmol/L试剂2(R2)：氢氧化钠100 mmol/L酒石酸钾钠16 mmol/L碘化钾15 mmol/L硫酸铜 6 mmol/L5.2试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻！标准品避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

6 仪器OLYMPUS AU400全自动生化分析仪7测定程序见参数表8 校准品和质控品8.1使用Roche公司提供的Roche多项目定标液对自动分析仪进行校准。

每批样品检测时，使用Roche 公司提供的Roche定标液和控制品进行内部质量控制。

8.2质控物的保存和稳定性：质控物存放于4-8℃可保存一个月，分装存放于-20℃至有效期。

8.3室内质控规则：X±2S为警告线, X±3S为失控线。

8.4 不准确度允许范围：X±10%8.5不精密度：RCV：4.0%9 性能特性9.1病人结果可报告范围本法对总蛋白的检测范围为0.5～150 g/L。

当样品测定值超过上限时，应将样品用9 g/L氯化钠溶液作1+ 1稀释，重新测定，结果乘以2。

9.2特异性/干扰当样品中抗坏血酸浓度≤ 1704 μmol/L，胆红素浓度≤ 684 μmol/L，血红蛋白浓度≤ 5.00 g/L，甘油三酯浓度≤ 11.3 mmol/L时没有观察到干扰。

9.3灵敏度/检测限本试剂的检测限为0.5 g/L。

双缩脲法蛋白质含量测定试剂盒使用说明货号:PC0040产品简介:样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。

此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。

该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。

自备仪器和用品:可见分光光度计、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

标准品：液体×1瓶，5mg/mL，4℃保存。

样品中可溶性蛋白质提取:1.液体样品：澄清无色液体样品可以直接测定。

2.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水））冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。

（动物样品常常需要稀释）3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

测定步骤:1.分光光度计预热30min以上，调节波长到540nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL蒸馏水，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A空白管。

3.标准管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL标准液，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A标准管。

4.测定管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL待测液，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A测定管。

样品中蛋白质浓度计算：C待测（mg/mL）=C标准管×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)=5×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)注意事项：1.样品蛋白浓度须在1~10mg/ml范围内，低于1mg/ml不能用此法，高于10mg/ml须做相应稀释。

q 总蛋白测定（双缩脲法）SOP1.原理：所有蛋白质分子都含有肽键。

在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色的化合物。

蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系，依次可以计算蛋白质的含量。

2.方法：双缩脲法3.试剂：总蛋白试剂其含量为氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mol/L碘化钾20mol/L硫酸铜12mol/L4.储存条件及有效期：（1）原包装试剂在2℃-8℃避光贮存，有效期36个月。

（2）试剂开盖后在2℃-8℃避光保存，稳定期30天。

5. 样本要求：（1）样本种类：新鲜无溶血血清。

（2）样本采集：取空腹静脉血 3.0ml，置于带分离胶试管中，标本采集后，3000r/min离心5min，分离血清，立即密封送检。

（3）样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。

（4）样本保存：密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。

6. 检验步骤：（1）开生化仪见生化仪的SOP。

（2）操作步骤：参数设置；试剂装载；校准；质控；样本装载；测定；结果审查；报告。

a.参数设置b.试剂装载每天在生化仪上进行试剂检查，检测的样本数，如发现量不多或不能满足当天需要，则需要加试剂，注意同一批号，不同批号的不能混用。

c.校准换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。

d.质控在做样本之前每天做质控，质控符合要求才可以做样本，不符合要求需要做校准，做完校准后，用校准品当样本来测，做质控。

e.样本装载样本符合要求，放在试管架上，编号，上机检测。

f.测定g.结果审查h.报告7. 参考值55-85g/L8 .临床意义：+(1) 血清总蛋白浓度增高a.血清中水分减少，而使总蛋白浓度相对增高。

凡体内水分的排出大于水分的摄入时，均可引起血浆浓缩，尤其是急性失水时（如呕吐，腹泻，高热等）变化更为显著，血清总蛋白浓度有时可达100-150 g/L。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告一、实验目的1、掌握双缩脲法测定血清总蛋白的基本原理和操作方法。

2、熟悉分光光度计的使用。

3、了解血清总蛋白测定的临床意义。

二、实验原理双缩脲试剂是由硫酸铜的碱性溶液与酒石酸钾钠的碱溶液混合而成。

当含有两个或两个以上肽键的化合物与双缩脲试剂反应时，会形成紫红色的络合物。

由于蛋白质分子中含有多个肽键，其在碱性溶液中能与双缩脲试剂产生紫红色的反应，颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。

通过比色法测定反应后溶液的吸光度，与标准曲线对照，即可计算出血清中总蛋白的含量。

三、实验器材与试剂1、器材分光光度计恒温水浴箱移液器试管刻度吸管2、试剂双缩脲试剂：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）15g 和酒石酸钾钠60g，分别用蒸馏水溶解后，混合并定容至 1000ml，在室温下放置可长期稳定。

蛋白标准液（60g/L）：准确称取干燥的牛血清白蛋白 60g，用生理盐水溶解并定容至 100ml。

待测血清样本四、实验步骤1、标准曲线的绘制取 6 支干净的试管，编号 1-6，按下表加入试剂：｜试管编号｜ 1 ｜ 2 ｜ 3 ｜ 4 ｜ 5 ｜ 6 ｜｜：：｜：：｜：：｜：：｜：：｜：：｜：：｜｜蛋白标准液（ml）｜ 0 ｜ 02 ｜ 04 ｜ 06 ｜ 08 ｜ 10 ｜｜生理盐水（ml）｜ 10 ｜ 08 ｜ 06 ｜ 04 ｜ 02 ｜ 0 ｜｜双缩脲试剂（ml）｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜摇匀后，置于 37℃水浴中保温 30 分钟。

以 1 号管为空白对照，在 540nm 波长处，用分光光度计测定各管的吸光度值（A）。

以蛋白质含量（g/L）为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。

2、测定血清总蛋白取 3 支干净的试管，编号 7、8、9，按下表加入试剂：｜试管编号｜ 7（空白管）｜ 8（标准管）｜ 9（测定管）｜｜：：｜：：｜：：｜：：｜｜生理盐水（ml）｜ 10 ｜ 0 ｜ 0 ｜｜蛋白标准液（ml）｜ 0 ｜ 10 ｜ 0 ｜｜待测血清（ml）｜ 0 ｜ 0 ｜ 10 ｜｜双缩脲试剂（ml）｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜摇匀后，置于 37℃水浴中保温 30 分钟。

2性能指标
2.1外观
试剂1（R1）应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物；
试剂2（R2）应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物；
试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；包装标签文字符号应完整、清晰。

2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37 ℃ 1 ℃，546 nm 波长条件下，吸光度应小于0.200。

2.4分析灵敏度
当样本浓度为70 g/L 时，吸光度变化应不小于0.150。

2.5线性范围
试剂盒在（2～120）g/L 范围内：
a)线性相关系数r 应不小于0.995；
b)当样本浓度不小于30 g/L 时，线性相对偏差应不超过±6.0%；当样本浓度小于30 g/L 时，线性绝对偏差应不超过±3.6g/L。

2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数：CV 应不大于 2.0％。

2.6.2批间差
相对极差：R 应不大于 4.5％。

2.7准确度
2.7.1国家标准品测试
测定国家标准品，测定结果与靶值的相对偏差应不超过±5.0% 。

2.7.2质控品测试
测定质控品，测定结果应在靶值范围内。

2.8分析特异性
血红蛋白浓度在250 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在1200 mg/dL 内、结合胆红素在21 mg/dL 内、非结合胆红素浓度均在21 mg/dL 内、葡聚糖（分子量：7w 或4w）浓度在3000 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10 .0%以内。

双缩脲法蛋白质含量测定试剂盒使用说明双缩脲法蛋白质含量测定试剂盒使用说明货号:PC0040产品简介:样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。

此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。

该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。

自备仪器和用品:可见分光光度计、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

标准品：液体×1瓶，5mg/mL，4℃保存。

样品中可溶性蛋白质提取:1.液体样品：澄清无色液体样品可以直接测定。

2.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水））冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。

（动物样品常常需要稀释）3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

测定步骤:1.分光光度计预热30min以上，调节波长到540nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL蒸馏水，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A空白管。

3.标准管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL标准液，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A标准管。

4.测定管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL待测液，1000μL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A测定管。

总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)简介：总蛋白(T otal Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成。

对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。

目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。

Leagene 总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。

可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm 。

双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响。

本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 取1ml 蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准(BSA)中，充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。

亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。

特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。

2、 样本处理：血清、血浆样本直接取50μl 检测。

对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水=1：9比例，加入9倍体积的生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，2500g 离心10min ，取50μl 上清待检。

3、 TP 测定操作，按下表依次加入试剂：编号 名称TC0547100T TC0547200T Storage试剂(A): 双缩脲试剂 250ml 500ml 4℃ 试剂(B): 蛋白标准(BSA) 20mg 20mg RT 试剂(C): 蛋白标准配制液 1.5ml 1.5ml RT 试剂(D): 双缩脲空白试剂 50ml 100ml 4℃ 试剂(E): ddH 2O 1ml2mlRT使用说明书1份空白管 标准管 待测管ddH 2O(ml)0.05 蛋白标准溶液(如1mg/ml)(ml) 0.05 待检样品(血清、血浆、组织)(ml)0.05双缩脲试剂(ml) 2.5 2.5 2.54、混匀, 37℃孵育。

双缩脲法蛋白质含量测定试剂盒使用说明微量法货号:BC3185规格:100T/96S产品简介:样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。

此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

强碱性溶液中，双缩脲与CuSO形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正4比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。

该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。

自备仪器和用品:可见分光光度计、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

标准品：液体×1瓶，5mg/mL，4℃保存。

样品中可溶性蛋白质提取:1.液体样品：澄清无色液体样品可以直接测定。

2.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水））冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。

（动物样品常常需要稀释）3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

测定步骤:1.分光光度计预热30min以上，调节波长到540nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取0.5mLEP管，加入40μL蒸馏水，200μL试剂一，混匀后室温静置15min，取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板，540nm比色，记为A空白管。

3.标准管：取0.5mLEP管，加入40μL标准液，200μL试剂一，混匀后室温静置15min，取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板，540nm比色，记为A空白管。

4.测定管：取0.5mLEP管，加入40μL待测液，200μL试剂一，混匀后室温静置15min，取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板，540nm比色，记为A空白管。

1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司总蛋白（TP）测定试剂盒（双缩脲法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆总蛋白（TP）的测定。

3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。

3.2 试剂储存：未开启的试剂盒在2℃～8℃保存有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定28天。

试剂不可冰冻3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理在碱性条件下，蛋白质与铜离子生成紫蓝色复合物。

显色强度和蛋白质浓度成正比4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本。

采集后及时测定，应避免溶血和污染4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。

4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。

当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。

4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。

4.3.3 测试基本参数4.4参考范围60～80 g/L（注：各实验室应有自己的参考范围。

）4.5 方法评价线性范围：2～120 g/L。

样本中含量超出可报告范围，请用生理盐水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。

反应曲线异常时应进行重复测定确认。

精密度:批内 CV ≤ 3%批间 CV ≤ 4.5%分析灵敏度：本试剂盒检测低限2 g/L。

5、临床意义TP 分为白蛋白和球蛋白两类，具有维持胶体渗透压，运输多种代谢物，调节被运输物质生理作用等功能，与机体免疫功能密切相关。

医疗器械产品技术要求编号：
总蛋白（TP）测定试剂（盒）（双缩脲法）
2.性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2装量
试剂装量的装量应按表1，液体装量的最大允许负偏差应为5%。

2.3试剂空白吸光度
试剂（盒）测试空白样本，在37 ℃±0. 1 ℃ 、546 nm 波长、1 cm 光径条件下，试剂空白吸光度≤0.200 Abs。

2.4分析灵敏度
试剂（盒）测试60.5 g/L 的被测物时，吸光度变化（ΔA）≥0.150 Abs。

2.5线性区间
试剂（盒）线性在(0.00，150.00] g/L区间内：
a)线性相关系数r≥0.990；
b) (0.00，20.00] g/L 区间内，线性绝对偏差应在±2.00 g/L 范围内；(20.00，150.00] g/L 区
间内，线性相对偏差应在±10% 范围内。

2.6精密度
2.6.1重复性
试剂（盒）测试浓度在（59±12 ）g/L 和（46±9 ）g/L 范围内的样本时，变异系数CV≤4.0%。

2.6.2批间差
试剂（盒）测试浓度在（59±12 ）g/L 和（46±9 ）g/L 范围内的样本时，相对极差R≤6.0%。

2.7准确度
测试国家标准品或可溯源至有证参考物质的校准品，相对偏差 B 在±10% 范围内。

1。

总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中总蛋白的含量。

1.1 产品型号/规格1×50 ml；2×50ml；4×50ml；8×50ml；5×50ml；2×100ml；6×100ml；4×70ml；9×70ml；6×50ml；2×125ml；4×125ml；1.2 划分说明硫酸铜 12mmol/L酒石酸钾钠 64mmol/L碘化钾 30mmol/L氢氧化钠 200mmol/L2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；中文包装标签应清晰、准确、牢固。

2.1.2 试剂应为蓝色澄清液体。

2.2 净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在光径1 cm、主波长546 nm下，以蒸馏水为检测样本时，吸光度应不大于0.250。

2.4 分析灵敏度TP含量为50 g/L时，测定吸光度差值（△A）应在0.107—0.199范围内。

2.5 线性范围TP试剂在线性范围（0～120] g/L内：（a）回归系数r应不小于0.990；（b）在（0～12] g/L范围内，线性绝对偏差应不大于±1.2 g/L；（c）在（12～120] μmol/L范围内，线性相对偏差应不大于±10%。

2.6 测量精密度2.6.1 重复性变异系数（CV）均应不大于10%。

2.6.2 批间差相对偏差（R）应不大于10%。

2.7 准确度采用GBW09815牛血清白蛋白含量标准物质对试剂盒进行测试，相对偏差应不超过±10%。

2.8 稳定性TP试剂盒贮存于2 ℃～8 ℃、避光环境中，有效期为12个月。

有效期满后应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告一、实验目的掌握双缩脲法测定血清总蛋白的原理和操作方法，熟悉分光光度计的使用，了解血清总蛋白测定的临床意义。

二、实验原理双缩脲试剂是由硫酸铜的碱性溶液与酒石酸钾钠的碱性溶液混合而成。

当含有两个或两个以上肽键的化合物（如蛋白质）与双缩脲试剂反应时，形成紫红色的络合物。

其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，在 540nm 波长处有最大吸收峰。

通过比色法，可以测定样品中蛋白质的含量。

三、实验材料与设备1、试剂双缩脲试剂：称取硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）15g 和酒石酸钾钠60g，用 500ml 蒸馏水溶解，在搅拌下加入 300ml 10%氢氧化钠溶液，用水稀释至 1000ml，贮存于塑料瓶中，可长期保存。

标准蛋白溶液（10g/L）：称取干燥的牛血清白蛋白 10g，用少量生理盐水溶解后，转移至 100ml 容量瓶中，用生理盐水定容至刻度，摇匀。

生理盐水。

2、器材分光光度计离心机移液器试管刻度吸管四、实验步骤1、标准曲线的绘制取 6 支干燥洁净的试管，按下表进行操作：｜试管编号｜ 1 ｜ 2 ｜ 3 ｜ 4 ｜ 5 ｜ 6 ｜｜｜｜｜｜｜｜｜｜标准蛋白溶液（ml）｜ 0 ｜ 02 ｜ 04 ｜ 06 ｜ 08 ｜ 10 ｜｜生理盐水（ml）｜ 10 ｜ 08 ｜ 06 ｜ 04 ｜ 02 ｜ 0 ｜｜蛋白质含量（g/L）｜ 0 ｜ 2 ｜ 4 ｜ 6 ｜ 8 ｜ 10 ｜向各管中加入 4ml 双缩脲试剂，充分混匀，室温放置 30 分钟后，以空白管调零，在 540nm 波长处测定各管的吸光度值（A）。

以蛋白质含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。

2、血清样品的测定取 3 支试管，分别标记为测定管、空白管和对照管。

测定管：准确吸取血清样品01ml，加入生理盐水09ml，充分混匀。

再加入 4ml 双缩脲试剂，室温放置 30 分钟后，在 540nm 波长处测定吸光度值（A₁）。

总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：用于体外定量测定人血清中的总蛋白含量。

1.1 包装规格
包装规格见表1。

表1 包装规格
1.2 主要组成成分
主要组成成分见表2。

表2 主要组成成分
2.1 外观
试剂为蓝色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。

2.2 净含量
试剂的净含量应不少于标称量。

2.3 试剂空白吸光度
试剂空白：A546nm（主）/A700nm（副）下测定空白吸光度应≤0.3000。

2.4 准确度
使用国际标准物质SRM927，对试剂盒进行测试，其测量结果的相对偏差应不超过±10%。

2.5 分析灵敏度
样本浓度为45g/L时，其吸光度变化在0.0300～0.1100之间。

2.6 线性区间
在[2.0，120.0]g/L区间内，线性相关系数r≥0.995，在[2.0，10.0]g/L区间内测定的绝对偏差应不超过±1.0g/L，在(10.0，120.0]g/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。

2.7 测量精密度
2.7.1 重复性
对高、低两个浓度的血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。

2.7.2 批间差
随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。

2.8 稳定性
试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为18个月。

在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。

总蛋白（TP）测定试剂盒
2、性能指标
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。

表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在波长546 nm，光径1.0 cm，温度37℃条件下，吸光度≤0.200。

2.3分析灵敏度
试剂盒测试70 g/L被测物时，吸光度变化值≥0.150。

2.4线性范围
2.4.1 试剂盒在30.0～120.0 g/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.995。

2.4.2 在30.0～120.0 g/L 区间（范围）内，线性相对偏差应不超过±6.0%。

2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤2.0%。

2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤5.0%。

2.6准确度
相对偏差（Bias%）应在±5.0%范围内。

2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。

总蛋白（TP）测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中总蛋白的含量。

1.1 试剂盒包装规格试剂：1×20ml；2×60ml；3×40ml；4×60ml；4×400ml；2×30ml。

校准品：1×1ml；1×3ml。

1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂：亮蓝色澄清液体。

校准品：无色至浅黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.2。

2.4 分析灵敏度测定浓度为50g/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.2。

2.5 线性范围在（10，100）g/L线性范围内，线性相关系数r应不小于0.990。

在[30，100）g/L范围内的线性相对偏差应不大于±10%；在（10，30）g/L范围内的线性绝对偏差应不大于±3.0g/L。

2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于3%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于5%。

2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。

2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至NIST生产的有证参考物质（SRM927）。

2.10 稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。

总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）
适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中总蛋白的含量。

1.1 规格
试剂盒是由试剂组成的液体单试剂。

规格及装量见表1。

表1 规格及装
量
1.2主要组成成分
试剂主要组分：
2.1 净含量
应不低于试剂瓶标示装量。

2.2 外观
试剂为淡蓝色或深蓝色液体。

外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.3 试剂空白
在546nm处测定试剂空白吸光度，应≤1.5。

2.4 分析灵敏度
测试70g/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.05。

2.5 准确度
用国家标准品（360012）对试剂（盒）进行测试，相对偏差不超过±10%。

2.6 重复性
批内变异系数（CV）应不超过5％。

2.7 线性
2.7.1在[2，120]g/L区间内，线性相关系数r应不低于0.990；
2.7.2 [2，9.6）g/L区间内绝对偏差不超过±0.77g/L；[9.6，120]g/L区间内相对偏差不超过±8%。

2.8 批间差
对同一份样品进行重复测定，相对极差不大于8％。

2.9 稳定性
取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：用于体外定量测定人血清和血浆样本中总蛋白（TP）的浓度。

1. 产品型号/规格及其划分说明1.1产品型号/规格DR-103B：800测试/盒；DR-103C：96×4测试/盒。

1.2划分说明字母DR为企业名称端瑞的拼音字头；数字103为产品序号，字母B、C分别表示试剂盒中微孔板（96孔）的数量， B：没有板；C：4块板。

1.3 产品型号/规格及装量见表1表1 试剂组成成份及含量注：蛋白校准液朔源至GBW(E)090351人血清中总蛋白浓度标准物质 2. 性能指标 2.1 外观2.1.1 试剂应为蓝色透明液体，无异物。

2.1.2 蛋白校准液应为无色或浅黄色透明液体，无异物。

2.1.3 包装完好、标志完整、清晰。

2.2 净含量净含量应不少于标示值。

2.3 校准液溯源性本校准液溯源至北京市医疗器械检验所人血清总中总蛋白浓度标准物质（GBW （E ）090351）。

2.4试剂空白用纯水加入试剂作为样品测试时，试剂空白吸光度A 540nm （或A 546nm ）≤0.3。

2.5分析灵敏度试剂盒测试蛋白浓度35g/L 被测物时，吸光度差值ΔA 540nm （或ΔA 546nm ）≥ 0.40。

2.6线性范围a)线性相关系数：[35,100] g/L ，相关系数r ≥ 0.990； b)线性偏差：相对偏差，不超过±10%。

2.7重复性：变异系数（CV ）≤ 6%2.8批间差：相对极差(R) ≤10%2.9准确度用人血清总蛋白有证参考物质（CRM）对试剂盒进行测试，测试结果相对偏差不超过±10%。

2.10稳定性2℃～8℃贮存，至18个月的有效期后2～3个月，分析结果应符合2.4～2.7、2.9的要求。