微生物思考题

绪论1.什么是微生物？它包括那些类群？概念：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。

包括：原核类：细菌〔真细菌，古细菌〕，放线菌，蓝细菌，支原体，立克次氏体，衣原体等。

真核类：真菌〔酵母菌，霉菌，蕈菌〕，原生动物和显微藻类非细胞类：病毒，亚病毒〔类病毒，拟病毒，朊病毒〕2.人类迟至19世纪才真正认识微生物，其中主要客服了哪些重大障碍？显微镜的创造〔列文虎克〕灭菌技术的运用纯种别离培养技术的建立3.微生物有哪五大共性？其中最根本的是哪一个？为什么？五大共性：〔1〕体积小、面积大〔2〕吸收多、转化快〔3〕生长旺、繁殖快〔4〕适应强、易变异〔5〕分布广、种类多最根本的：〔1〕体积小、面积大原因：由于微生物是一个如此突出的小体积大面积系统，从而赋予它们具有不同于一切大生物的五大共性，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。

4.试述微生物的多样性（1）物种的多样性〔2〕生物代谢类型的多样性〔3〕代谢产物的多样性〔4〕遗传基因的多样性〔5〕生态类型的多样性5.微生物名人巴斯德（1）否认“自生说〞（2）预防接种（3）证明发酵是由微生物引起的（4）创造巴斯德消毒法第一章原核生物的形态、构造和功能1.细菌的根本形态分为几种？测量微生物大小常用单位是什么？细菌的形态极其简单，根本上只有球状、杆状和螺旋状三大类，仅少数为其他形状，如丝状，三角形，方形和圆盘形。

量度细菌大小的单位是um，而度量其亚细胞构造那么要用nm作单位。

2.试述G+和G-细菌细胞壁构G+：厚度大〔20～80nm〕，化学组成简单，一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸N-乙酰氨基葡萄糖〔G〕肽聚糖形成坚硬的多层三维网状结构N-乙酰胞壁酸〔N〕G+ 四肽链-肽桥交联甘油型磷壁酸核糖醇型G-：厚度较G+细菌薄，层次较多，成分较复杂，肽聚糖层很薄〔仅2～3cm〕故机械强度较G+细菌弱，主要包括外膜，肽聚糖层，壁膜间隙三个局部。

微生物思考题及答案1、何为硫磺样颗粒，有什么临床意义？答在患者病灶组织和瘘管中流出的脓汁中，可找到肉眼可见的黄色小颗粒，称硫磺颗粒，这种颗粒是放线菌在组织中形成的菌落。

用于放线菌的微生物学诊断。

（P184）2、简述白喉外毒素的产生、作用机制。

答当b棒状杆菌噬菌体侵袭无毒白喉棒状杆菌时，其编码外毒素的tox基因与宿主菌染色体整合，无毒白喉棒状杆菌则成为产毒的白喉棒状杆菌而产生白喉毒素。

作用机制：此毒素是一种毒性强、抗原性强的蛋白质，由A和B 肽链经二硫键连接而成。

A肽链是白喉毒素的毒性功能区，抑制易感细胞蛋白质的合成。

B链上有一个受体结合区和转位区，但能和心肌细胞、神经细胞等表面受体结合，协助A链进入这些易感细胞。

细胞内蛋白质的合成过程中，需要延伸因子1和延伸因子2.当白喉毒素A链进入细胞后可促进辅酶I上的腺苷二磷酸核糖与延伸因子2结合，结果延伸因子2失活，使蛋白质无法合成。

（P174）3、简述结核分枝杆菌形态染色，生长特点。

答形态染色：细长略带弯曲杆菌，齐-尼抗酸染色法阳性。

生长特点：生长缓慢，3-4周后可见颗粒、结节或菜花状，乳白色或米黄色菌落，不透明。

（P150）4、简述结核菌素试验的原理，结果判断及意义。

答原理：是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发性超敏反应（Ⅳ型变态反应）从而判定机体对结核有无免疫力的一种试验。

结果判断及意义：阴性反应：无硬结者或直径小于5mm,表示未感染过结核分枝杆菌，也未曾接种过卡介苗。

阳性反应：直径大于5mm,表示感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗，机体对结核分枝杆菌有一定的免疫力。

强阳性反应：直径大于15mm,表示体内可能有活动性结核感染。

（P153）5、简述结核分枝杆菌原发感染与原发后感染的特点。

答原发感染：多发生于儿童；原发综合征：原发灶、淋巴管炎、肺门淋巴结肿大；转归原发后感染：多发生于成人，多为内源性感染；病灶多局限，易形成结核结节，发生开发性肺结核的机率大（P152）6、支原体的定义。

●从细菌生长繁殖的条件入手，如何进行细菌的人工培养？充足的营养成分、适合的酸碱度、合适的酸碱度、适宜的温度、一定的气体环境、渗透压等、及时高压灭菌、适宜的培养基●什么是生长曲线？简述其分期及各期意义。

迟缓期：细菌被接种培养基的最初一段时间，主要是适应新环境，同时为分裂繁殖作物质准备，此时细菌体积比较大，含有丰富的酶和中间代谢产物。

对数期：细菌分裂繁殖最快的时期，菌数以几何级数增长，研究细菌的最佳时期。

稳定期：由于营养物质的消耗，代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。

活菌数保持稳定。

一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。

衰退期：繁殖变慢，死菌数超过活菌数。

细菌形态发生改变，生理活动趋于停滞。

●如何利用细菌分解代谢产物鉴别细菌？糖发酵试验：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖IMViC 试验常用于肠道杆菌的鉴定：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）实验。

结果：大肠埃希菌：++-- 产气杆菌--++●简述细菌合成代谢产物在医药学上的意义。

1、热原质（致热源）：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。

产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。

2、毒素及侵袭性酶：①外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；②内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。

③侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。

3、色素：①水溶性；②脂溶性。

4、抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。

抗生素大多由放线菌和真菌产生。

5、细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。

细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。

6、维生素●简述微生物的分类及各类微生物的特点 P4●比较G+菌与G-菌细胞壁结构的异同，并简述细胞壁的功能细胞壁结构革兰阳性菌G+革兰阴性菌G-肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构肽聚糖厚度20～80nm 10～15nm肽聚糖层数可达50层仅1～2层肽聚糖含量占胞壁干重50～80% 仅占胞壁干重5～20%磷壁酸有无外膜无有细胞壁的功能：维持菌体固有的形态，并保护细菌抵抗低渗环境。

微⽣物学复习思考题《微⽣物学》复习思考题第1章绪论1.名词解释：微⽣物，微⽣物学2.⽤具体事例说明⼈类与微⽣物的关系。

3.微⽣物包括哪些类群？它有哪些特点?4.为什么说巴斯德和柯赫是微⽣物学的奠基⼈?5.试根据微⽣物的特点，谈谈为什么说微⽣物既是⼈类的敌⼈，更是⼈类的朋友？6.简述21世纪微⽣物学发展的主要趋势。

第2章原核微⽣物1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞2.根据⾰兰⽒阳性细菌与⾰兰⽒阴性细菌细胞壁通透性来说明⾰兰⽒染⾊的机制。

3.什么是芽孢？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分说明芽孢的抗逆性。

渗透调节⽪层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？4.⽴克次⽒体有哪些与专性活细胞内寄⽣有关的特性？它们有什么特殊的⽣活⽅式？⾐原体与⽴克次⽒体都为专性活细胞内寄⽣，两者有何差别？5.螺旋体和螺旋菌有何不同？6.什么是缺壁细菌？试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。

7.举例说明细菌的属名和种名。

8.试述古⽣菌和细菌的主要区别。

9.试根据细菌和古⽣菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在⾃然界中分布泛。

10.细菌（狭义）、放线菌、霉菌、酵母在繁殖⽅式上各有什么特点？第三章真核微⽣物1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。

2.举例说明霉菌与酵母菌与⼈类的关系。

3.试列表说明真核微⽣物与原核微⽣物的主要区别。

4.试图⽰真核⽣物“9+2型”鞭⽑的横切⾯构造，并简述其运动机理。

5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？6.试⽐较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原⽣质体的制备⽅法。

7.丝状真菌的营养菌丝和⽓⽣菌丝各有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？8.试述真菌的孢⼦类型和特点。

第4章病毒1. 名词解释：病毒粒⼦、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、裂解量、类病毒、朊病毒。

2. 病毒区别于其他⽣物的特点是什么? 根据你的理解，病毒应如何定义?3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。

微生物学课程思考题《微生物学》课程复习思考题绪论1.什么是微生物？它包括哪些类群？2.人类迟至19世纪才真正认识微生物其中主要克服了哪些重大障碍？3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？4.什么是微生物学？学习微生物学的任务是什么？5. 用一个具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物是人类的敌人，更是我们的朋友？（建议将一些具体事例延伸成为展板制作的题目）6. 为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”?7. 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人?（请不要简单罗列二个人的工作，而应该对他们的工作及意义进行评论）第一章1.试图示G+和G-细菌细胞壁的主要构造井简要说明其异同。

2.试图示肽聚糖的模式构造，并指出G+和G-细茵肽聚糖结构的差别。

3.试述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。

4.渗透调节皮层膨胀学说是如间解释芽袍耐热机制的？5.裂异形胞原体与始体．类支原体，浚酶体袍囊，磁小体。

第二章1.试解释菌物、真菌、酵母茵、霉菌和章菌。

2.试简介菌丝、茵丝体、菌丝球、真酵母、假酵母、芽痕、蒂痕、真菌丝、假菌丝等名词。

3.霉菌的营养菌丝恻气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化构造？4.试列表比较各种真菌胞子的特点。

5.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？第三章1.什么是真病毒？什么是亚病毒？2.病毒的一般太小如何？试图示病毒的典型构造。

3.病毒粒有哪几种对称形式？每种对称又有几类特殊外形？试各举一例。

4.什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。

5.什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？6.试解释溶源性、溶源菌、温和噬菌体。

第四章1.什么叫能源？试以能源为主、碳源为辅对微生物的营养类型进行分类。

2.什么叫生长因子？它包括哪几类化合物？微生物与生长因子的关系有哪几类？试举例加以说明。

3.什么叫水活度（a）？它对微生物的生命活动有间影响？对人类的生产实践w和日常生活有何意义？4.什么是选择性培养基？试举一例并分析其中的原理。

微生物学绪论一、选择题b1. 大部分微生物（）。

A 是原生动物B 帮助改善生活质量C生活在海洋的底层D发现于外层空间。

c2. 适合所有微生物的特殊特征是（）。

A 它们是多细胞的B 细胞有明显的核C 只有用显微镜才能观察到D 可进行光合作用c3.人类通过微生物产生的食品有（）。

A 牛奶B 火腿C 酸乳酪D 黄瓜a4. 第一位观察到微生物的科学家是（）。

A Robert HookeB Louis PasteurC Joseph ListerD James T. Watsona5. 自然发生说的理论认为（）。

A 微生物来自无生命的物质B 大动物中发现有系统发育C人类是从类人猿进化的 D病毒是从细菌退化的d6. 广泛进行微生物研究的17世纪70年代荷兰商人（）。

A van GophB van HoogenstyneC van DyckD van Leeuwenhoekd7. 路易.巴斯德对微生物的贡献在于他（）。

A 发现了病毒B 提出了自然发生说理论C抨击了进化论D 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性b8. 阐明微生物是传染病原因的概念称为（）。

A 进化论B 病原菌学说C 生物学细胞论D 报酬递减论a9. 巴斯德采用曲颈瓶试验来（）。

A 驳斥自然发生学说B 证明微生物致病C 认识到微生物的化学结构D 提出细菌和原生动物分类系统b10. 在微生物学中采用化学治疗剂治疗传染病是由于（）。

A Hooke的工作B发现了抗生素C 阐明了DNA的结构D 发展了遗传工程D11.病毒研究工作的迅猛发展取决于（）。

A 光学显微镜B 暗视野显微镜C 紫外线显微镜D 电子显微镜B12.下列的所有特征均与病毒相联系，除了（）之外。

A 它们很少或没有其它的化学物质B 用抗生素干扰病毒的活性C 病毒引起麻疹、腮腺炎和（病毒性）风疹D 它们不是细菌的类型C13. 所有微生物的遗传物质是（）。

A A TPB DNPC DNAD AMPC14. 由一团缠绕的核酸和蛋白质外壳所包围的粒子是对（）最好的描述。

微生物学思考题1.用一个具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物是人类的敌人，更是人类的朋友?答：因为微生物既可以促进人类社会的发展，也可以破坏生态环境，影响身体健康。

比如，很多菌种的次级代谢产物是对人类疾病非常有用的抗生素，如绿色丝状菌产生的青霉素，一些微生物被广泛应用于工业发酵，生产乙醇、食品及各种酶制剂等，一部分微生物能够降解塑料、处理废水废气等等，并且可再生资源的潜力极大，称为环保微生物。

由于微生物生长周期短，繁殖迅速等特点，被用于遗传育种上，具有重要意义。

但是，生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。

在人类疾病中有50％是由病毒引起，有些微生物是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化，微生物能够致病，能够造成食品、布匹、皮革等发霉腐烂。

在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。

一些疾病的致病机制并不清楚。

大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力，使许多菌株发生变异，导致耐药性的产生，人类健康受到新的威胁。

一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异，最典型的例子就是流行性感冒病毒。

所以，微生物是人类的敌人，更是人类的朋友。

2.为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”？答：因为微生物的个体较小，体内结构单一，易于筛选，可以轻松滴完成对它的功能和结构的改造，生命活动的规律，大都是在研究微生物的过程中首先被阐明的，微生物学为分子遗传学和分子生物学的创立、发展提供了基础和依据，而且是它们进一步发展的必要工具，微生物的多样性为人类了解生命起源和生物进化提供了依据，微生物学是基因工程乃至生物工程的主角。

所以，它必然成为生命科学研究的明星。

3.为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人？答：巴斯德：（1）彻底否定了“自生说”。

从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展。

（2）免疫学——预防接种。

为人类防病，治病做出了巨大贡献。

绪论1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。

事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。

整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。

许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。

根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。

根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。

微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。

没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。

植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。

土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。

微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。

奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。

泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。

可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。

微生物在能源生产方面也起着重要作用。

天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。

光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物——生物量。

废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废料等通过微生物转化微生物燃料——甲醇和乙醇。

利用微生物清理被人类活动污染的大气——生物整治。

利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。

通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。

利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。

在自然界中，它无限小，但作用无限大。

2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。

1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。

微⽣物思考题第⼀章1.设计⼀张表格，⽐较⼀下6个⼤类原核⽣物的主要特性。

2．试图⽰G+和G-细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同。

3．试述染⾊法的机制并说明此法的重要性。

⾰兰⽒染⾊的机制为：过结晶紫液初染和碘液媒染后，形成不溶于⽔的结晶紫与碘的复合物。

G+细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖⽹层次多和不含脂类，故经过⼄醇脱⾊后仍保持紫⾊；G-细菌则因其细胞壁薄、外膜层类脂含量⾼、肽聚糖层薄，遇到⼄醇脱⾊后细胞褪⾊；再经红⾊染料复染后，G-细菌呈红⾊，⽽G+细菌则仍保留最初的紫⾊。

重要性：此法证明了G+和G-主要由于起细胞壁化学成分的差异⽽引起了物理特性的不同⽽使染⾊反应不同，是⼀种积极重要的鉴别染⾊法，不仅可以⽤与鉴别真细菌，也可鉴别古⽣菌。

把原核⽣物分为G+和G-两⼤类，并揭⽰其在结构、功能、⽣理、遗传、⽣态等特性上的不同，故具有重要的理论和实践意义。

4．试讨论细菌的细胞形态与菌落形态间的相关性。

相关性：因不同形态、⽣理类型的细菌，在其菌落形态、构造等特征上也有许多明显的反映，故细菌的细胞形态与菌落形态间存在明显的相关性现象，如，⽆鞭⽑、不能运动的细菌尤其是球菌通常都形成较⼩、较厚、边缘圆整的半球状菌落；长有鞭⽑、运动能⼒强的细菌⼀般形成⽽平坦、边缘多缺刻、不规则的菌落；有糖被的细菌，会长出⼤型、透明、蛋清状的菌落；有芽孢的细菌往往长出外观粗糙、“⼲燥”、不透明且表⾯多褶的菌落等等。

名词解释菌落：菌落即单个（或聚集在⼀起的⼀团）微⽣物在适宜的固体培养基表⾯或内部⽣长、繁殖到⼀定程度可以形成⾁眼可见的、有⼀定形态结构的⼦细胞⽣长群体。

菌苔：如果把⼤量分散的纯种细菌密集的接种在固体培养基的较⼤⾯积上，结果长出的⼤量“菌落”已相互连成⼀⽚即称菌苔。

伴孢晶体：是少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成⼀颗菱形、⽅形或不规则形的碱溶性蛋⽩质晶体。

基内菌丝：是孢⼦落在固体基质表⾯并发芽后，不断伸长、分枝并以放射壮向基质表⾯和内层扩展，形成⼤量⾊浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的菌丝。

微生物实验思考题参考答案及知识要点------------------------------------------ 二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的？革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。

如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。

脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s ）。

2.固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。

固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。

3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？能。

在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（W）,被酒精脱色为革兰氏阴性菌。

最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。

4.涂片为什么要固定，固定适应注意什么问题？a杀死细菌并使菌体黏附与玻片上；b增加其对染料的亲和力。

固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。

三.霉菌、放线菌的形态观察1.镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到横隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。

2.显微镜下细菌放线菌酵母菌和霉菌的主要区别是什么？放线菌与细菌需要在油镜下才能观察清楚，而霉菌和酵母菌在低倍镜下即可看到。

细菌：为细而短的单细胞微生物（个体微小），主要形态有：球、杆、螺旋状等。

（部分杆菌还可形成芽抱）放线菌：存在分枝丝状体和菌丝体，革兰氏阳性菌，有抱子丝和抱子（球形、椭圆形、杆状、柱状）。

酵母菌：单细胞，菌体呈圆球、卵形或椭圆形，少数呈柠檬形、尖形等。

第一章一、选择题：1．属于细菌细胞基本结构的为A、荚膜B、细胞壁C、芽胞D、鞭毛2．生鞭毛最多的菌属于A、螺旋菌B、杆菌C、球菌D、假菌丝3．在放线菌发育过程中,吸收水分和营养的器官为A、基质菌丝B、气生菌丝C、孢子丝D、孢子4．放线菌属于A、病毒界B、原核原生生物界C、真菌界D、真核原生生物界5．菌苔是微生物培养特征。

A、固体平板B、固体斜面C、液体表面D、明胶穿刺6．放线菌的形态是A、单细胞B、多细胞C、单或多细胞D、非细胞7．用来测量细菌大小的单位是A、cmB、mmC、umD、nm8．细菌缺乏下列哪一种结构仍可存活A、细胞壁B、细胞膜C、细胞质D、核质9．下列结构中并非细菌生活的必须结构的为A、细胞壁B、细胞膜C、核D、核糖体10．下列微生物器官耐温顺序为A、营养体＞孢子＞芽孢B、芽孢＞孢子＞营养体C、孢子＞营养体＞芽孢D、芽孢＞营养体＞孢子11．放线菌适宜生长的pH范围为A、＜4.0B、4.0～6.0C、6.5～8.0D、7.5～8.512．革兰氏染色结果中，革兰氏阳性菌应为A、无色B、红色C、紫色D、黄色13．细菌主要繁殖方式为A、增殖B、芽殖C、裂殖D、孢子生殖14．大肠杆菌经革兰氏染色后,菌体应呈A、无色B、红色C、黑色D、紫色15．下列耐热能力最强的是A、营养细胞B、菌丝C、孢子D、芽孢16．细菌生长的最适PH为A、6.5～7.5B、7.0～8.0C、7.5～8.5D、3.8～6.017．属于细菌细胞的特殊结构部分为A、细胞壁B、芽孢C、细胞膜D、原生质18．革兰氏染色的关键步骤是A、结晶紫(初染)B、碘液(媒染)C、酒精(脱色)D、蕃红(复染) 19．细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。

自然界中最常见的是A、螺旋菌B、杆菌C、球菌D、弧菌20．自然界长期进化形成的缺壁细菌是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球21．革兰氏阳性菌细胞壁特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸22．革兰氏阴性菌细胞壁特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸23．原核细胞细胞壁上特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸24．放线菌具吸收营养和排泄代谢产物功能的菌丝是A、基内菌丝B、气生菌丝C、孢子丝D、孢子25．蓝细菌的光合作用部位是A、静息孢子B、类囊体C、异形胞D、链丝段26．产甲烷菌属于A、古细菌B、真细菌C、放线菌D、蓝细菌27．在革兰氏染色中一般使用的染料是A、美蓝和刚果红B、苯胺黑和碳酸品红C、结晶紫和番红D、刚果红和番红28．下列微生物中，哪种属于革兰氏阴性菌A、大肠杆菌B、金黄葡萄球菌C、巨大芽孢杆菌D、肺炎双球菌29．G＋菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球30．G－菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球31．实验室中自发突变形成的缺壁细菌称作A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球32．工业发酵生产抗主素时，放线菌主要借助哪种方式以产生新的菌丝体。

复习思考题1.什么是微生物？包括哪些主要类群？.微生物（microorganism）：是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。

（<0.1mm）微米级：光学显微镜下可见（细胞）小（个体微小）纳米级：电子显微镜下可见（细胞器，病毒）单细胞简（构造简单）简单多细胞微生物非细胞（即“分子生物”）原核类：细菌（真细菌，古生菌），放线菌，蓝细菌，原体，立克次氏体，衣原体等低（进化地位低）真核类：真菌（酵母菌，霉菌，蕈菌），原生动物，显微藻类非细胞类：病毒，亚病毒（类病毒，拟病毒，朊病毒）2.微生物有哪五大特性？体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多。

3.微生物的发展经历了几个阶段？各阶段的代表人物为谁？史前期：各国劳动人民，未见微生物，先利用，如酿酒，发面，沤肥初创期：列文虎克，自制显微镜，观察到细菌等微生物个体奠基期：巴斯德，用实践——理论——实践的方法开展研究，建立微生物学及许多分支学科发展期：e.buchner，发现微生物的代谢统一性，进入寻找人类动物病原菌的黄金时期成熟期：j.watson和 f.crick揭示微生物的活动规律，微生物基因组的一眼就促进了生物信息时代的到来。

4.研究微生物学的基本方法有哪些？答：显微镜技术，无菌技术，纯种分离纯化技术，纯种培养技术，微生物保藏技术5.什么是无菌操作技术？答：在微生物转接过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转接，以免烫伤微生物。

如果是转接液体培养物，则用预先已灭菌的玻璃吸管或吸嘴6.细菌的基本形状有几种？细菌大小测量的方法及单位是什么？3种单位：µm7.细菌细胞结构中一般结构和特殊结构分别包括哪些？一般结构：细胞壁、细胞膜、细胞质和核区特殊结构：鞭毛、菌毛、8.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的主要成份分别是什么？肽聚糖单体是由哪三部分组成的？青霉素的作用位点是哪个部位？G+细菌的细胞壁：肽聚糖、磷壁酸G-细菌的细胞壁：外膜3部分：双糖单位四肽尾肽桥青霉素的作用位点是PBP29.何为原生质体、球状体、L-型细菌？生质体—指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞，它们只能用等渗或高渗培养液保存或维持生长。

微生物实验思考题1、用油镜观察时应该注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防上次实验的污染。

操作时,先低倍再高倍。

用完要擦掉油。

加滴香柏油。

作用:增加折光率，也就是增加了显微镜的分辨率.2、根据实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察.答：细菌用油镜，真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度.放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大 40 倍的物镜就可以看了,细菌小，要用放大 1000 倍的物镜看，感觉还很小。

病毒那就要用电子显微镜看了。

3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么？答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节;其中最关键的环节是脱色环节。

4、进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？答：着色不均，染色效果不好。

阴性阳性不明显分不太清楚，问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。

5、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色？答:不可以.因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁,对实验结果造成影响。

脱色后复染前，革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色.6、不经过复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？答：不行。

在复染之前,革兰氏阴性菌是无色透明的,在显微镜下很难观察到；或者脱色过度，也会造成阳性菌脱色，不经过复染，无法进一步区别。

7、你认为制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节?答：1制备适宜的培养基2在超净工作台上进行,保持无菌环境3对培养基，接种环等物品的高温高压灭菌。

4倒置培养基,防止冷凝水内流8. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?答:1、若未完全干燥，载玻片上的液体会污染油镜镜头。

镜头非常精密,被污染后不利于下次观察；2、若未完全干燥，水滴会影响油与玻璃之间折光率，造成视野不够清晰。

1、为什么说Koch等建立的微生物纯培养技术是微生物学建立与发展的基石？一般可用哪些方法获得微生物的纯培养？不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。

大多数细菌、酵母菌，以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落，采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。

所谓平板，即培养平板(culture plate)的简称，它是指熔化的固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛有固体培养基的平皿。

这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。

固体培养基是用琼脂或其他凝胶物质固化的培养基，每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落，形成的菌落便于移植。

最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。

这种由Koch建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行，100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。

常用固体培养基分离纯培养：1、稀释倒平板法(pour plate method)2、涂布平板法(spread platemethod)3、平板划线分离法(streak plate method)4、稀释摇管法(dilutlon shake culture method)此外还有液体培养基分离纯培养。

通常采用的液体培养基分离纯化法是稀释法。

接种物在液体培养基中进行顺序稀释，以得到高度稀释的效果，使一支试管中分配不到一个微生物。

如果经稀释后的大多数试管中没有微生物生长，那么有微生物生长的试管得到的培养物可能就是纯培养物。

如果经稀释后的试管中有微生物生长的比例提高了，得到纯培养物的概率就会急剧下降。

因此，采用稀释法进行液体分离，必须在同一个稀释度的许多平行试管中，大多数(一般应超过95%)表现为不生长。

单细胞（孢子）分离：采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。

单细胞分离法的难度与细胞或个体的大小成反比。

微生物思考题及参考答案1.用油镜观察时应注意哪些问题在载玻片和镜头之间加滴什么油起什么作用答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比有公式,同时与波长成正比.2.什么是物镜的同焦现象它在显微镜观察中有什么意义答：在一般情况下,当物像在一种物镜中已清晰聚焦后,转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时,物像将保持基本准焦的状态,这种现象称为物镜的同焦;利用这种同焦现象,可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦,从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片;3.影响显微镜分辨率的因素有哪些答：物镜的NA值物镜的数值孔径与照明光源的波长.4.美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答：会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的是透明无色,衰老的是淡蓝色,死亡的是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果;5.镜检时如何区分放线菌基内菌丝,气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体;6.在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片;2、如果是涂布液体,可以用毛细管或接种环滴一小滴,然后轻轻抹开,一圈足够;3、如果是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去,接种环的尖蘸一点点即可; 4、为了节省时间,可以将干燥和热固定合并成一步;但是应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形; 5、染色时间视染色液种类而定;如结晶紫只需几十秒,亚甲基蓝则需一到两分钟; 6、冲洗时,水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上; 7、冲洗后干燥,可以用酒精灯加热以节省时间,同样的,应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形;7.进行细菌制片时为什么要进行加热固定在加热固定时应注意什么固定的目的有三个：1杀死微生物,固定细胞结构;2保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉;3改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色;固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次手指触摸玻片反面,不烫手为宜,固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩;8.为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察1.因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察.2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰;9.哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性其中最关键的环节是什么答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节;10.进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题答：菌龄太老,细胞壁通透性改变;着色不均,染色效果不好;阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌;11.革兰氏染色中那一步是关键为什么你是如何操作的革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色是脱色时间;如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌;脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s;12.革兰氏染色中,哪个步骤可以省略在什么情况下采用媒染目的是在所有的细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物; 脱色后使革兰氏阴性菌变为无色; 复染使革兰氏阴性菌染成红色; 所以鉴别细菌的革兰氏阴阳性只须媒染,复染的目的是为了看清革兰氏阴性菌;13.你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌曲霉:具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串的球形分生孢子;分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连;根霉:菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根;在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶端膨大成球形孢子囊;囊的基部有囊托,中间有球形或半球形囊轴;毛霉:菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝;菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗;各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托;青霉:菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙;基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生孢子梗经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体;孢子颜色：黑曲霉是黑色,青霉是青色,根霉是白菌丝黑孢子,毛霉则是淡黄色;以上为实验室观察1菌丝特征：青菌与曲霉菌丝与膈；毛霉与根霉则无；2菌丝的特化结构：曲霉有足细胞,其它霉菌无；根霉有假根与匍匐枝,其它霉菌无；3孢子头特征：青霉的孢子头为扫帚状；根霉与毛霉的孢子头为囊状；曲霉为菊花状孢子头;14.为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正目镜测微尺中每小格代表的实际长度是不固定的,它是随所使用目镜和物镜的放大率的不同而改变的,故在测量前必须先用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正,以得出在显微镜的特定放大倍率下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度;15.在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,其测定结果是否相同为什么答:相同;目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分的刻度,有把毫米刻成为50 等分或把10 毫米长度刻成100 等分;测量时,将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象;由于在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,物象的放大倍数与每小格目镜测微尺所代表的长度在变化比例上是同步的,故而测定结果相同;16.哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差,应如何避免操作时没有先盖盖玻片再滴加悬液,导致体积不准确;避免：先盖盖玻片再滴加悬液;细胞密度太高;避免：稀释溶液;溶液不均匀;避免：滴加溶液前混匀悬液;1、仪器误差：所用器材均应清洁干净,并且计数板计数区不应该有擦痕;2、计数室内可能有气泡;因为酵母细胞并没有染色,看起来是透明的,有气泡很容易被计入,使数值偏高；并且,气泡会影响菌悬液的随机分布;改进：若产生气泡,则用吸水纸吸出;3、菌体在计数板上分布不均,当用选取5格计数时,会造成很大误差;改进：应使菌液自然流入并混匀,进行观察时尽可能多数几个格子;4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低,导致稀释液浓度和原液不成正确比例,计算时产生误差;应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释;5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差;应多人观察,取记录平均数;6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了,使数值偏高; 改进：谨遵一个规则,计上不计下,计左不计右,不可以重复计数;7、可能出现有出芽的酵母菌,将出芽的酵母菌按两个计数了,使数值偏高; 改进：计数时,只有当芽体于母细胞一样大的时候,才能计为两个;17.培养基配好后,为什么必须立即灭菌如何检查灭菌后的培养基是否无菌为什么要倒置培养答：由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌,如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长系列而消耗养分和改变培养基的酸碱度所带来的不利影响;将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h,无菌生长即可证明灭菌后的培养基无菌;倒置培养的主要目的：1由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长；2防止空气中微生物的污染培养基及培养物：倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌;3倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境;如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况;而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失是很重要的;19.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题为什么答：一般而言,培养基的配置要注意如下几点原则：1营养成分的配比：碳源和氮源的比例C/N要适当；2适宜的酸碱度pH值：配制培养基时pH的调节；3渗透压：营养物质要有适合的浓度；4培养基不能反复高温灭菌;5 称不溶性固形物时,应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装；6一般情况下培养基用自来水配制;操作细节上则要注意：1称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖2调pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度3分装时注意不要污染棉塞、试管口,以免染菌;4及时灭菌,以免培养基及容器里的微生物生长繁殖消耗养分、改变酸碱度;1、当然是注意浓度配比不要搞错2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀4、不要忘了调节pH值一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质20.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物;答：1在使用高压蒸汽灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度;2压力未降至“0”便开盖取物的可能后果：压力锅内压力骤然降低,引起容器中的溶液喷出容器口导致污染或导致人员的烫伤;21.干热灭菌操作过程中应注意哪些问题为什么1、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通2、灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火3、灭菌时人不能离开4、灭菌结束后不能忘记关掉电源5、待温度降到70度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故22.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长在湿热条件下,有水蒸汽的作用：a高温水蒸汽导热比干空气要快；b高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；c高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞；d高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热;湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低；湿热的穿透力比干热大；湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2．26kJ千焦的热量;这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力;23.设计实验方案,比较干热灭菌和湿热灭菌的效果; 以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件和等量原则;一实验材料试管镊子酒精灯嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC 7053 菌片纸片与菌片同大小同材料溴甲酚紫蛋白冻水培养基已灭菌等实验材料材料有余;二对照组取9支洁净试管,分为A1 B1 C1 三组每3支一组,将A1 组中放入菌片,B1 组中放入纸片,C1组中什么也不加；不经灭菌,直接加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基等量;三恒为培养将上述所有试管按分组在56℃恒温条件下培养48小时;24.如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养请写出实验的主要步骤纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到;25.配制牛肉膏蛋白胨培养基,有哪些操作步骤那几步易出错,如何防止称取药品—加热溶化—分装—加棉塞—包扎—灭菌—搁置斜面易出错的步骤有：a 称取药品称取时钥匙专用,瓶盖不要错盖,易吸水的药品要快速称取；b 加热溶化加入药品后要用玻璃棒不停搅拌,以免糊底在琼脂熔化过程中,应控制火力,以免培养基因沸腾而溢出容器,同时,需不断搅拌,以防琼脂糊底烧焦;；c 分装分装时培养基不能粘在三角瓶或试管口,以免接种时染菌；d 搁置斜面斜面长度约试管长度一半为宜;26.平板菌落计数法的原理是什么它适用于那些微生物的计数平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数;但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞;因此平板菌落计数的结果往往偏低;现在常使用菌落形成单位;平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个微生物繁殖而形成的现象进行的,也就是一个菌落可代表一种微生物并不绝对;通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量;8、微量移液器的最小量程太大,在加样时,容易加多,使盖玻片鼓起,血球计数板所技术的体积变大,最终结果偏大; 改进：用量程的小的微量移液器并少加一些;27.如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产生高温蛋白酶的菌株,你将如何完成写出实验方案产蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈;以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件一材料准备 1 土壤有机质特别是蛋白质含量丰富的土壤2 灭菌生理盐水0.85%NaCl3 灭菌移液管4 添加酪素的B—4牛肉膏蛋白胨完全培养基经灭菌5 B—4斜面经灭菌6 其他材料：接种环酒精灯等二操作方法1在盛有10ml灭菌生理盐水的烧杯中添加1g土壤,配成悬浮液；2 稍静止后,用灭菌移液管移取部分上清液,将其制成10^4—10^6倍的稀释液；3 用灭菌移液管吸取各稀释液用稀释倒平板法或涂布平板法将其接入添加酪素的B—4平板上；4 在55—65℃下培养1—2天；5 挑取形成降解酪素透明圈的菌落透明圈直径D与菌落直径d之比较大者,转接入B—4斜面上培养；若无特定菌落形成,则需另取土样从开始重复试验6 将B—4斜面上的菌落再用平板纯培养,依次重复2—3次后即可得到纯培养镜检；7 纯培养细菌中蛋白酶的提取及活性鉴定摇瓶培养若提取蛋白酶及其活性正常,则纯培养成功,否则,重取土样重复以上实验;28.为什么熔化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板低于这个温度琼脂会凝固,温度过高,如果是做倾倒琼脂做菌落计数,会杀死一部分细菌,如果只是只是制备琼脂平板,那么温度太高就进行倾倒会导致琼脂凝固后偏软,水汽过多;29.要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键为什么1 无菌操作2 稀释良好,不会太浓或太稀;3 菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数;30.当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时,你认为问题出在哪里1.太浓 2.没涂匀31.用倾注法和涂布法计数,其平板上长出的菌落有何不同为什么要培养较长时间48h 后观察结果倾注法是在培养皿中接种好样品之后,倾注琼脂并培养；而涂布法则是在琼脂表面接种并使用L型棒涂布;因此,倾注法的菌落将出现在琼脂的各个部位,包括底层和中层,但涂布法培养后形成的菌落只出现在琼脂表面;32.你如何解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶答：①淀粉是大分子物质,进入细胞十分困难,甚至需要高耗能的胞吞作用;因而通过胞外酶的作用,将淀粉水解为葡萄糖后运入细胞,较方便高效;②试验中出现透明圈,说明培养基内淀粉被水解,可推测是细菌产生的胞外的淀粉酶起的作用;33.不利用碘液,你能否证明淀粉水解的存在答：由于淀粉水解生成葡萄糖,即多羟基醛,因此可利用醛的性质进行检验,如银镜试验,斐林试验等;呈阳性者,说明产生了葡萄糖,淀粉被水解；阴性者说明淀粉未被水解;34.假如某些微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果答微生物有氧代谢葡萄糖产气不产酸,因此发酵结果是小管中生气泡但是溶液不变黄;35.解释在细菌培养中吲哚检测的化学原理,为什么在这个试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸答：化学原理：有些细菌产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚和丙酮酸;吲哚与对二甲基氨基甲醛结合,形成红色的玫瑰吲哚;但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,因此吲哚试验可以作为一个生物化学检测的指标;因为丙酮酸是生物体呼吸作用的产物,无论是有氧还是无氧,都会产生丙酮酸,因而无法作为色氨酸酶活性的指示剂进行区分;同时吲哚能通过有明显颜色变化的化学反应观测到,而丙酮酸不能,所以试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸;36.为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性,而产气杆菌为阴性答：当细菌代谢糖产生酸时,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色PH6.3转变为红色PH4.2,即甲基红反应;而大肠杆菌和产气肠杆菌在培养的早期均产生有机酸,但大肠杆菌在培养的后期仍能维持酸性PH4,而产气肠杆菌则转化有机酸为非酸性末端产物,如乙醇、丙酮酸等,使PH升至大约6;因此,大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性;37.用紫外线进行诱变时,为什么要打开皿盖为什么要在红光灯下操作紫外线不容易穿透玻璃,所以打开盖,自然光下容易光复活,红光下不会所以在红光下操作。

绪论复习题1、什么是微生物？包括哪些类群？2、人类迟至19世纪中叶才真正认识微生物世界，其中的障碍有哪些？它们是如何被克服的？3、试举五例说明人类历史上致病微生物导致的传染病大流行。

4、微生物学史可分哪五期？各期的时间、实质、创始人和特点。

我国在微生物学发展史上有什么值得反思？5、说明微生物在推动生命科学基础研究中的贡献。

6、什么是微生物的五大共性？其中最关键的是什么？7、你对微生物学的发展前景有何观点？原核微生物思考题1、细菌的一般构造和特殊构造有哪些？2、比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁的结构。

3、比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌肽聚糖单体。

4、细菌革兰氏染色过程的基本步骤及基本原理。

5、比较4类缺壁细菌。

6、液态镶嵌模型。

7、比较真细菌与古生菌细胞膜。

8、说明细菌芽孢的结构和各部分成分。

9、研究芽孢的意义。

10、渗透调节皮层膨胀学说。

11、什么叫“拴菌”试验？分析该试验在思维方式和试验方法上的创新。

12、比较细菌鞭毛、菌毛和性毛。

13、放线菌形态、繁殖方式、菌落形态。

14、为什么蓝细菌会成为“先锋生物”？其细胞有几种特化形式？功能怎样？15、比较衣原体、立克次氏体和支原体。

真核微生物思考题1、在形态、构造和生理功能上比较真细菌、古生菌和真核微生物。

2、比较线粒体和叶绿体在形态、构造、成分和功能等方面的差别。

3、比较细菌鞭毛与真核微生物鞭毛在结构及运动方式上的差别。

4、总结酵母菌的五个特点，并列出各个特点的例外。

5、简要说明酵母菌生活史类型，并说明各阶段的特点。

6、真核生物细胞的细胞之内细胞骨架结构怎样？功能如何？7、以粗糙脉孢菌为例简述霉菌菌丝延伸过程中细胞壁成分的变化。

8、比较细菌、酵母菌和霉菌的细胞壁和细胞膜成分的差异。

9、比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落。

10、比较细菌、放线菌和霉菌的个体及菌落的形态特征。

11、介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝的特化构造并说明它们的功能。

12、比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分，说明各自原生质体的制备方法。

绪论1、名词解释：微生物，微生物学，种，菌株、品系、克隆，菌落，菌苔。

2、简述微生物学发展史上5个时期的特点和代表人物。

3、微生物共有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？4、微生物分类学有哪3项具体任务？试加以简述。

5、种以上的分类单元分几级？6、何谓三域学说？7、何谓（G+C）mol% 值？它在微生物分类鉴定中有何应用？第一章原核微生物的形态、构造和功能1、名词解释：原核生物，细菌，缼壁细菌，原生质体，芽孢，伴孢晶体，放线菌，2、细菌的基本有哪些？3、图示细菌细胞构造。

4、试比较G+和G-细菌细胞壁的异同。

5、简述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。

6、渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢的耐热机制的？7、简述链霉菌形态构造特点。

第二章真核微生物的形态、构造和功能1、名词解释：真核微生物，酵母菌，生活史，霉菌，无性孢子，有性孢子，子实体，2、简述真菌的特点。

3、简述酵母菌的特点。

4、图示酵母菌细胞构造，并指出其细胞壁的结构特点。

5、简述酵母菌的繁殖方式，图示酿酒酵母的生活史并说明各阶段的特点。

6、霉菌的有性和无性孢子主要有哪些？7、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？8、试比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们原生质体制备方法。

13、什么叫锁状联合？其生理意义如何？14、霉菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化结构？第三章病毒和亚病毒1、名词解释：病毒，真病毒，亚病毒，噬菌斑，烈性噬菌体，温和噬菌体，溶原菌，溶原性。

2、病毒粒有哪几种对称体制？每种对称又有几类特殊外形？3、什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。

4、什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？第四章微生物的营养和培养基1、名词解释：自养微生物，异养微生物，营养，营养物，C/N，氨基酸自养型生物，氨基酸异养型生物，生长因子，大量元素，微量元素，培养基。

2、指出四大类微生物的最适生长pH范围及常用的培养基名称。