Anti-SAA1-Serum Amyloid A抗体说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）使用说明书•【药品名称】通用名称：抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）汉语拼音：Kang-A、Kang-B Xuexingdingxingshiji(Dankelongkangti) •【成份】本品主要成份为：分泌抗人A型和抗人B型血型抗原单抗的杂交瘤细胞培养上清液并补加一定量小鼠腹水抗体•【性状】抗A：浅蓝色澄明液体。

抗B：浅黄色澄明液体。

•【适应症】专用于鉴定人ABO血型。

•【规格】10ml/支•【用法用量】【用法与用量】（1）平板法（玻片法）：本品与受检者全血或10%红细胞生理氯化钠悬液按1：1使用，不必再稀释，按照有无凝集判定结果。

（2）试管法：本品与受检者5%红细胞生理氯化钠悬液按1：1使用，不必再稀释，摇匀，10000r/min离心1分钟或室温静置1小时，按照有无凝集判定结果。

血型抗A试剂抗B试剂A+-B-+O--AB++•【注意事项】（1）对含有较多自身冷凝集素的受检者，在鉴定血型时往往被误定为AB血型，遇到此种情况，需用37°C生理氯化钠溶液洗涤受检者红细胞2～3次，以去除吸附在红细胞上的冷凝集素，然后再鉴定血型。

（2）在做配型试验时，如发现有不配合现象，则取受检者血清，用已知A或B血型红血胞进行反定型试验，以核实原鉴定的血型是否正确。

（3）用立即试管法不能测出亚型（如Ax），需延长作用时间。

（4）本品如出现浑浊或变色则不能使用，若开瓶使用时间较长后，最好用已知A、B、O血晕型红细胞检查结果是否与已知血型相符，以防制品污染、变质失效，而造成鉴定错误。

（5）在有效期内使用。

•【孕妇及哺乳期妇女用药】【孕妇及哺乳用药】•【贮藏】2～8°C避光保存【注意】药物说明书里面有三种标识，一般要注意一下：1.第一种就是禁用，就是绝对禁止使用。

2.第二种就是慎用，就是药物可以使用，但是要密切关注患者口服药以后的情况，一旦有不良反应发生，需要马上停止使用。

血清淀粉样蛋白A1(SAA1)在结直肠癌中的表达及其临床意义车忠广,马靖宇,白光(锦州医科大学附属第一医院,辽宁锦州121000) 摘要:目的　研究血清淀粉样蛋白A1(SAA1)在结直肠癌(CRC)中的表达情况及其临床意义㊂方法　选取2012年7月至2015年10月就诊于锦州医科大学附属第一医院的195例结直肠癌患者,采用免疫组织化学法分析其CRC组织中的SAA1蛋白表达水平㊂我们采用Pearson卡方检验分析SAA1的表达情况与临床病理参数之间的相关性㊂应用单变量和多变量Cox回归分析评估SAA1在CRC患者中的预后价值㊂使用Kaplan-Meier分析进一步调查了195名CRC患者中SAA1表达与总体生存(OS)之间的关联㊂结果　在195例结直肠癌患者中SAA1高表达有100例,Pearson卡方检验结果显示SAA1在CRC中的表达水平与淋巴结转移(P=0.034)㊁远处转移(P=0.041)及TNM分期(P=0.033)显著相关;多变量Cox 回归分析显示SAA1是CRC患者OS的独立预后危险因素(P=0.005);Kaplan-Meier分析结果显示,高表达组患者的平均生存时间显著低于低表达组(P<0.05)㊂结论　SAA1的过表达可能促进CRC的发生与发展而且是CRC患者预后不良的标记物㊂关键词:血清淀粉样蛋白A1;免疫组织化学;结直肠癌中图分类号:R735.3 文献标志码:A 文章编号:2096-305X(2019)01-0008-04Expression and Clinical Significance of Serum Amyloid A1(SAA1)in Colorectal CancerChe Zhongguang,Ma Jingyu,Bai Guang(The First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University,Jinzhou121000China)Abstract:Objective　To study the expression and clinical significance of serum amyloid A1(SAA1)in colorectal cancer (CRC).Methods　A total of195patients with colorectal cancer who were admitted to the First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University from July2012to October2015were enrolled.The expression level of SAA1protein in CRC tissues was analyzed by immu⁃nohistochemistry.We used Pearson chi-square test to analyze the correlation between SAA1expression and clinicopathological parame⁃ters.Univariate and multivariate Cox regression analyses were used to assess the prognostic value of SAA1in patients with CRC.Kap⁃lan-Meier analysis was used to further investigate the association between SAA1expression and overall survival(OS)in195CRC pa⁃tients.Results　There were100cases of high expression of SAA1in195colorectal cancer patients.Pearson chi-square test showed that the expression of SAA1in CRC was significantly correlated with lymph node metastasis(P=0.034),distant metastasis(P= 0.041)and TNM stage(P=0.033),multivariate Cox regression analysis showed that SAA1was an independent prognostic risk fac⁃tor for OS in CRC patients(P=0.005),Kaplan-Meier analysis showed that the average survival time was significantly shorter in the high-expression group than that in the low-expression group(P<0.05).Conclusion　Over-expression of SAA1may promote the oc⁃currence and development of CRC and is a marker of poor prognosis in CRC patients.Key words:serum amyloid A1;immunohistochemistry;colorectal cancer 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是结肠癌和直肠癌的总称,是常见的消化道恶性肿瘤之一[1]㊂CRC是在肺癌和乳腺癌之后世界上第三大常见肿瘤,全球致死率第四的肿瘤,尽管中国这种疾病的发病率远远低于西方发达国家,但在过去的40年中,随着经济的高速发展,人们生活习惯和饮食习惯的改变以及老龄化的加速,在中国CRC 的发病率和死亡率呈显著上升的趋势[2]㊂多项科学研究显示[3-11]血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)在胃癌㊁胶质母细胞瘤㊁肉瘤㊁宫颈癌㊁鼻咽癌㊁肺癌㊁肾细胞癌㊁头颈鳞状细胞癌等肿瘤的发生㊁发展及转移中起着重要作用,但与结8锦州医科大学学报J Jinzhou Medical University2019Feb.40(1)　作者简介:车忠广(1988),男,辽宁大连人,住院医师,硕士学位,主要研究方向为结直肠癌㊂　通讯作者:白光(1960),男,辽宁阜新人,主任医师,学士学位,主要研究方向为消化系统作用机制㊂肠癌的关系还不是很明确㊂本文通过免疫组化方法检测血清淀粉样蛋白A1(serum amyloid A1,SAA1)在结直肠癌中的表达水平,并通过统计学分析其与预后的相关关系,并评估其对患者的预后价值㊂1　资料与方法1.1　临床资料选取2012年7月至2015年10月在锦州医科大学附属第一医院普外科接受手术治疗后经病理证实为CRC的患者组织石蜡标本195例,其中女性91例(46.7%),男性104例(53.3%),60岁以下的有69例(35.4%),60岁及以上的有126例(64.6%)㊂临床病理参数包括年龄,性别㊁生存状态㊁病理类型㊁分化程度㊁瘤体大小㊁肿瘤位置㊁以及T,N,M分期和美国癌症联合委员会(AJCC)阶段,进行了记录㊂总生存率定义为从最初诊断到死亡或随访结束的时间㊂所有患者符合病理组织学的诊断标准,且临床资料及随访资料齐全,在接受治疗前均排除具有合并病(如:病理报炎性息肉,局部腺体腺瘤性增生),排除手术前接受化疗,放疗或新辅助治疗的患者㊂伦理批准由锦州医科大学附属第一医院医学伦理委员会批准㊂患者在治疗前提供书面知情同意书供参与研究和将其组织用于未来研究㊂1.2　研究方法1.2.1　结直肠癌的临床分期在本研究中CRC标本根据国际癌症控制联盟/美国癌症联合委员会(2017)规定的第8版TNM 分期进行分期分为I㊁II㊁III㊁IV4期,随分期升高,癌症的症状也加重㊂1.2.2　免疫组化染色方法应用标准的Envision二步法来定性和定量检测CRC样本中SAA1蛋白的表达㊂将组织蜡块切片,厚度约5μm,脱石蜡并再水合,然后放入微波炉中用pH=6.0柠檬酸盐缓冲液修复处理20min,流水自然冷却,室温下加入1滴3%H2O2孵育10 min,将一抗(SAA1,稀释浓度1∶100)和1滴聚合物增强剂用于在室温下孵育,加入1滴酶标鼠聚合物室温下孵育,然后加1滴DAB液(二氨基联苯胺),显微镜下观察5min,苏木精核复染,用梯度酒精脱水并干燥后,二甲苯透明并用中性树胶密封固定㊂1.2.3　免疫组化结果判断标准在显微镜下观察标记细胞的信号,并由两位独立研究人员评估,他们对该研究的临床病理学因素不知情㊂根据染色强度(IS)以及阳性面积(AP)来判定结果:IS分为:0(负),1(弱),2(中等)和3(强)㊂AP取决于阳性细胞的百分比:0 (0),1(<1/3),2(1/3~2/3),3(≥2/3)㊂最终IS×AP=0判断为(-),IS×AP=1~2判断为(+),IS×AP=3~4判断为(++),IS×AP=6~9判断为(+++)㊂1.3　统计学分析所有统计分析均由SPSS22.0进行,运用Pearson卡方检验分析SAA1高低表达与临床病理指标之间的相关性,建立单因素和多因素Cox生存率比例风险回归模型,评估临床病理指标和SAA1表达的预后价值,再用Kaplan-Meier方法建立生存曲线,进一步比较高低表达两组之间平均生存时间的差异,研究SAA1表达与OS之间的关联,双尾P<0.05被认为差异具有统计学意义㊂2　结 果2.1　SAA1蛋白在195例CRC组织中的表达情况免疫组化结果显示:SAA1蛋白定位于细胞浆内,根据免疫组化染色结果判断,将SAA1在CRC 组织中的表达强度不同分为阴性(-)㊁弱阳性(+)㊁中等阳性(++)及强阳性(+++);图1㊂2.2　SAA1蛋白在CRC组织中的高低表达免疫组化结果显示SAA1蛋白定位于细胞质中,为棕黄棕色着色颗粒㊂SAA1的表达评分范围为0~9,中位数为3,中位数用于确定SAA1高或低表达水平的截断值,评分≥3被定义为高表达,评分<3被定义为低表达,即阴性和弱阳性被判定为低表达组,中等阳性和强阳性被判定为高表达组㊂在195例CRC组织中SAA1阳性率高达76.9%㊂阴性45例(23.1%),弱阳性51例(26.2%),中等阳性42例(21.5%),强阳性57例(29.2%)㊂则在195例CRC组织中50.7% (99/195)存在SAA1蛋白高表达,49.3%(96/ 195)存在SAA1蛋白低表达㊂2.3　SAA1与结直肠癌临床病理参数之间的关系见表1㊂9车忠广,等:血清淀粉样蛋白A1(SAA1)在结直肠癌中的表达及其临床意义表1　SAA1蛋白表达与结直肠癌患者临床病理指标相关性表2　单变量Cox回归分析鉴别影响CRC患者预后的因素临床指标βS⎺x P值RR值(95%CI)性别-0.2600.2510.3010.472-1.261年龄(岁)0.1430.2670.5910.684-1.946病理类型-0.2150.4380.6230.342-1.903分化程度0.3740.2330.1080.912-2.295瘤体大小(cm)-0.1350.2520.5940.533-1.433肿瘤位置-0.1150.2510.6470.545-1.459 T分期0.3410.1660.0611.015-1.947 N分期-0.5170.2560.0410.362-0.984 M分期1.9970.2670.0014.364-12.434 TNM分期1.2660.1860.0012.463-5.105 SAA1表达水平0.9360,2700.0011.502-4.332表3　多变量Cox回归分析鉴别CRC患者的独立预后因素临床指标βS⎺x P值95%CIN分期0.3040.4390.4890.574-3.201 M分期1.2210.4180.0041.494-7.692 TNM分期1.7230.6000.0041.727-18.163 SAA1表达水平0.7920.2800.0051.275-3.825 2.4　各临床病理参数对CRC患者术后生存时间的影响此研究对包括SAA1在内的10项可能影响CRC患者总生存时间的参数进行单因素分析,结果表明有无淋巴结转移(N)(P=0.041)㊁有无远处转移(M)(P=0.000)㊁AJCC分期(TNM)(P=0.000)㊁SAA1表达水平(P=0.000)均为影响患者术后生存时间的危险因素,见表2㊂2.5　SAA1蛋白的表达水平与CRC患者预后的关系通过Kaplan-Meier曲线(图2)确定的生存分析表明SAA1低表达组患者的平均生存时间为1 567.5d,显著高于高表达组患者的平均生存时间1 261.7d(P<0.05),即SAA1的高表达预示着CRC 患者的较差存活率和高死亡率㊂多因素Cox回归分析结果表明SAA1蛋白的表达(HR:2.208,95% CI:1.275-3.825;P=0.005),有无远处转移(M)(HR:3.390,95%CI:1.494~7.692,P= 0.004),AJCC分期(TNM)(HR:5.600,95% CI:1.727~18.163,P=0.004)是CRC患者的3个独立预后因素,见表3㊂3　讨 论结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,它是全球男性第三大最常见的癌症,也是全球女性第二大常见恶性肿瘤㊂在中国,结直肠癌的发病率和死亡率逐年上升,且发病年龄逐渐变小[12]㊂结直肠癌的早期诊断和早期治疗和早治疗对患者的预后有重要影响,现在的筛选方法仍缺乏特异性和敏感性,因01锦州医科大学学报　2019年2月,40(1)此对于早期诊断面临较大困难,近几年,中国医务人员已经做了大量的研究来逐年提高早期结直肠癌的检出率㊂肿瘤标志物作为一项重要的高危人群筛查指标及患病的诊断指标,得到越来越多的重视及研究㊂SAA1(血清淀粉样蛋白A1)蛋白是急性期载脂蛋白反应物,主要由肝细胞产生并在炎性细胞因子的调节下产生㊂SAA1似乎在免疫系统中起作用,可以促进受损组织的修复,可用作许多疾病的诊断,治疗或预后随访标记㊂对宿主的物理损伤包括感染,创伤,炎症反应和癌症可引发SAA血清水平升高㊂近年来其在肿瘤发展过程中的作用越来越受到关注㊂多个研究表明,SAA1作为SAA家族的亚型之一被认为在多种肿瘤的恶性发展及预后中具有重要作用㊂在本研究中发现,SAA1的表达与CRC患者有无淋巴结转移㊁有无远处转移及临床分期显著相关(P<0.05);而且随着SAA1蛋白在CRC组织中的表达升高,CRC患者的生存时间呈下降趋势,高表达组患者的平均生存时间1261.7d明显低于低表达组患者的平均生存时间为1567.5d㊂这些研究结果表明,在结直肠癌细胞中,SAA1可能参与了CRC的发生及发展,可能与肿瘤细胞的增殖及转移密切相关㊂通过多因素Cox回归分析,我们发现过表达的SAA1蛋白可能导致患者的预后不良,进一步说明SAA1是CRC患者预后不良的独立的有效的预测指标㊂近年来,SAA的相关研究发现在胃癌㊁肝细胞癌㊁肺癌㊁肾细胞癌等恶性肿瘤中,SAA与这些恶性肿瘤的发生发展均有密切关系,且过表达的SAA蛋白的肿瘤患者预后不佳[13-16],另外在胰腺导管腺癌㊁宫颈鳞状细胞癌及肾细胞癌的研究[10,17-18]859-866中进一步证实了SAA1与患者更差的生存相关㊂这些研究均与我们的观点一致㊂Chan DC等人[13]84-93发现,根治性胃切除术前后测定96例胃癌患者血清SAA水平,32名胃溃疡患者和52名健康受试者为对照组㊂随访结果发现, SAA的表达与肿瘤的发生和转移有关,且SAA水平>97mg/L的患者的死亡风险增加近4倍,这一数据也表明SAA可用于预测胃癌患者的生存期,而且还表明SAA对于术后随访具有重要价值㊂Sung HJ等人[15]1383-1395研究发现,肺癌患者血清和血浆中的SAA水平比健康对照高约14倍,体外实验显示通过与THP-1单核细胞相互作用从肺癌细胞诱导产生SAA,并且这反过来从THP-1诱导产生MMP-9㊂在体内动物模型中,过度表达的SAA 促进Lewis肺癌(LLC)细胞转移并在肺中定居㊂在肾细胞癌㊁肺癌㊁宫颈癌等疾病的进展过程中[9,15,18]859-866,1383-1395,3309-3317也发现SAA蛋白的过表达促进癌细胞侵袭及肿瘤的转移㊂本研究结果表明,SAA1蛋白的表达水平与CRC肿瘤的淋巴结和远处转移密切相关,但是,其作用机制尚不明确,需要进一步研究㊂本研究数据表明SAA1是预测结直肠癌患者发生转移㊁判断预后的重要指标,SAA1高表达者预后较差,且SAA1的高表达是结直肠癌患者预后不良的独立危险因素,提示SAA1对于制定个体化治疗方案及术后随访具有重要意义,对SAA1的靶向治疗可能为临床提高患者生存率提供新的方式㊂总之,SAA1蛋白参与结直肠癌的发生发展㊁转移等生物学行为,并报道了SAA1是CRC患者总生存率的独立预后因子㊂我们的研究结果表明SAA1是CRC的重要免疫检查点,需要进一步的研究来阐明SAA1过表达及其治疗价值的机制㊂(此文图1-2见附页4)参考文献:[1]　李莉.结直肠癌发生危险因素的流行病学研究进展[J].结直肠肛门外科,2010,16(6);397-401.[2]　陈辰.饮食因素影响结直肠癌发生的研究进展[J].中华医学杂志,2014,94(26);2069-2072.[3]　Wu DC,Wang KY,Wang SSW,et al.Exploring the expres⁃sion bar code of SAA variants for gastric cancer detection[J].Proteomics.2017Jun;17(11).doi:10.1002/pmic.201600356.[4]　Knebel FH,Uno M,Galatro TF,et al.Serum amyloid A1isupregulated in human glioblastoma[J].J Neurooncol,2017,132(3):383-391.[5]　Wan Ibrahim WI,Ashrafzadeh A,Singh VA,et al.Contras⁃ting increased levels of serum amyloid A in patients with threedifferent bone sarcomas:An indicator of tumor malignancy?[J].Electrophoresis,2016,37(17-18):2328-2337. [6]　Ren Y,Wang H,Lu D,et al.Expression of serum amyloid Ain uterine cervical cancer[J].Diagn Pathol,2014,9:16.[7]　Lung HL,Man OY,Yeung MC,et al.SAA1polymorphismsare associated with variation in antiangiogenic and tumor-sup⁃pressive activities in nasopharyngeal carcinoma[J].Oncogene,2015,34(7):878-889.[8]　Sung HJ,Ahn JM,Yoon YH,et al.Identification and valida⁃tion of SAA as a potential lung cancer biomarker and its involve⁃ment in metastatic pathogenesis of lung cancer[J].J ProteomeRes,2011,10(3):1383-1395.(下转第33页)11车忠广,等:血清淀粉样蛋白A1(SAA1)在结直肠癌中的表达及其临床意义者无明显相关性(r =0.29,P >0.05)㊂3　讨 论休克在临床上比较常见,引起休克的原因比较多,其中脓毒症是诱发休克的主要因素之一,尤其是严重脓毒症患者,发生休克的可能性通常在90%以上[4]㊂液体治疗是休克治疗的基础措施之一,而对于休克患者容量和容量反应的预测和评估,血流动力学监测是其核心内容[5]㊂脓毒性休克患者在早期给予快速的液体复苏治疗后,体内的血容量可能已经充足㊂在此情况下,若无法进行准确地判断,无法准确地把握液体治疗,一旦过度,将会造成严重的后果,如全身组织水肿㊁心力衰竭(心衰)㊁呼吸衰竭(呼衰)等,进而加重患者的病情,甚至增加病死率[6]㊂从现阶段临床对脓毒性休克患者容量反应的预测研究来看,PLRT 是一种预测容量反应性的方法,而模拟补液试验操作起来比较简单,具有较强的可操作性㊂PLRT 预测容量反应性,不受自主呼吸㊁心律失常㊁低潮气量通气或肺顺应性差等因素影响[7]㊂不同患者进行PLRT 时,回心血量会因人而异,因而存在一定的差异,但对同一患者而言,半卧位PLRT 回心血量应大于平卧位,因此半卧位进行PLRT 更加敏感,所以在本研究中,患者采用半卧位PLRT,试验结果可以看出PCCI 与SV 的变化相关,且涵盖了HR 对心排量的影响[8]㊂综上所述,PLRT 联合PiCCO 应用在老年脓毒性休克患者容量反应的预测中,具有较高的价值,值得临床推广应用㊂参考文献:[1]　武宇辉,刘晓红,李成荣,等.无创心排血量监测技术联合被动抬腿试验预测脓毒性休克患儿容量反应性的临床研究[J].中华危重病急救医学,2016,26(1):46-50.[2]　蒋道慧,张琳,彭松.每搏量变异度在预测老年脓毒症休克患者容量反应性中的价值[J].临床急诊杂志,2017,12(10):783-786.[3]　麦叶,何振扬,谢晓红.在行机械通气的脓毒性休克患者液体复苏治疗中每搏变异度对容量反应性的预测价值[J].中国临床研究,2016,29(3):301-304.[4]　孙波,胡雪忠,张天卿,等.调节呼气末正压预测脓毒性休克患者的容量反应性研究[J].中华急诊医学杂志,2016,25(10):1320-1323.[5]　展思东,庄志辉,蔡雪,等.被动抬腿试验联合PiCCO 预测老年脓毒性休克患者容量反应性的临床价值[J].中国医药导报,2016,13(1):66-70.[6]　王小智,邢柏.脑钠肽对脓毒性休克患者液体反应性的预测价值[J].海南医学,2016,27(19):3097-3101.[7]　郭翃江,纪红.中心静脉血氧饱和度对老年脓毒性休克患者容量反应性的预测价值[J].重庆医学,2017,46(6):786-788.[8]　武宇辉,何颜霞,杨卫国,等.超声心排出量检测仪预测脓毒性休克患儿容量反应性的价值[J].中华实用儿科临床杂志,2015,28(6):429-431.收稿日期:2018-09-10(上接第11页)[9]　Paret C,Schn Z,Szponar A,et al.Inflammatory protein ser⁃um amyloid A1marks a subset of conventional renal cell carcino⁃mas with fatal outcome [J].Eur Urol,2010,57(5):859-866.[10]　Shinriki S,Ueda M,Ota K,et al.Aberrant expression of se⁃rum amyloid A in head and neck squamous cell carcinoma [J].J Oral Pathol Med,2010,39(1):41-47.[11]　廖秋林,张卫云,张宏斌,等.鼻咽癌患者血清sICAM-1和SAA1及HSP70检测临床意义分析[J].中华肿瘤防治杂志,2013,(2):110-112.[12]　全国肿瘤防治研究办公室,全国肿瘤登记中心,卫生部疾病预防控制局.中国肿瘤死亡报告 全国第三次死因回顾抽样调查[M].北京:人民卫生出版社,2010:77-91.[13]　Chan DC,Chen CJ,Chu HC,et al.Evaluation of serum am⁃yloid A as a biomarker for gastric cancer [J].Ann Surg Oncol,2007,14(1):84-93.[14]　Ni XC,Yi Y,Fu YP,et al.Serum amyloid A is a novel prog⁃nostic biomarker in hepatocellular carcinoma [J].Asian Pac JCancer Prev,2014,15(24):10713-10718.[15]　Sung HJ,Ahn JM,Yoon YH,et al.Identification and valida⁃tion of SAA as a potential lung cancer biomarker and its involve⁃ment in metastatic pathogenesis of lung cancer [J].J ProteomeRes,2011,10(3):1383-1395.[16]　Ramankulov A,Lein M,Johannsen M,et al.Serum amyloidA as indicator of distant metastases but not as early tumor mark⁃er in patients with renal cell carcinoma [J ].Cancer Lett,2008,269(1):85-92.[17]　Djurec M,Graña O,Lee A,et al.Saa3is a key mediator ofthe protumorigenic properties of cancer-associated fibroblasts in pancreatic tumors.Proc Natl Acad Sci USA,2018,115(6):E1147-E1156.[18]　Peng G,Dan W,Jun W,et al.Transcriptome profiling of thecancer and adjacent nontumor tissues from cervical squamous cell carcinoma patients by RNA sequencing [J].Tumour Biol,2015,36(5):3309-3317.收稿日期:2018-10-1533庄志辉,等:不同监测方式对老年脓毒性休克患者容量反应性的价值分析 文见第8-11页A:阴性(-);B:弱阳性(+);C:中等阳性(++);D:强阳性(+++);染色方法:苏木精染色;放大倍数:200图1　SAA1蛋白在结直肠癌组织中的表达情况图2　Kaplan-Meier 生存分析显示SAA1蛋白表达在CRC 患者预后中的意义附页4锦州医科大学学报　2019年2月,40(1)。

血清淀粉样蛋白a名词解释
血清淀粉样蛋白A（Serum Amyloid A，SAA）是一种在急性炎
症和组织损伤时在血清中大量产生的蛋白质。

它是一种非特异性的
炎症标志物，可以通过检测血清中SAA的水平来评估炎症的程度和
疾病的活动性。

SAA的产生受到多种细胞因子的调控，包括白细胞
介素-1、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子等。

在炎症状态下，肝脏会
大量合成SAA，并释放到血液中。

SAA在炎症反应中发挥着调节免疫
反应、参与组织修复和调节脂质代谢等多种生物学功能。

除了急性
炎症外，SAA也与慢性炎症、动脉粥样硬化、类风湿关节炎、炎症
性肠病等疾病的发病和发展密切相关。

因此，血清淀粉样蛋白A在
临床诊断和疾病监测中具有重要意义。

通过监测SAA的水平，可以
帮助医生评估炎症程度、指导治疗方案的制定以及评估疾病的预后。

总之，血清淀粉样蛋白A在炎症和免疫调节中发挥着重要作用，对
临床诊断和治疗具有重要意义。

血清淀粉样蛋白A（SAA）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中血清淀粉样蛋白A的含量。

1.1 产品规格1.2 组成成份1.2.1 试剂组成试剂1：甘氨酸缓冲液 100mmol/L试剂2：包被胶乳颗粒的单克隆鼠抗人SAA抗体 0.2%1.2.2校准品的组成校准品为冻干品，校准品组成是在20g/L牛血清中加入含不同浓度的血清淀粉样蛋白A抗原，稳定剂<5%。

定值范围：（150-400）mg/L。

1.2.3质控品的组成两水平冻干质控品，在20g/L牛血清中加入血清淀粉样蛋白A纯品，稳定剂<5%。

目标浓度：（10-30）mg/L、（30-60）mg/L之间。

2.1 外观试剂R1为无色至淡黄色澄清液体；试剂R2为乳白色悬浊液；校准品为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体；质控品为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 空白吸光度试剂空白吸光度应≤2.0。

2.4 分析灵敏度浓度为40mg/L时，吸光度差值的绝对值在≥0.010。

2.5 试剂测定线性在[5-300]mg/L范围内，线性相关系数r应≥0.990；测定浓度[5-80]mg/L，绝对偏差应不超过 8mg/L，在测定结果（80-300]mg/L时，相对偏差应不超过±10% 。

2.6 批内重复性试剂盒测试项目精密度 CV≤10%。

2.7 批间相对极差不同批号之间测定结果的相对极差应≤15%。

2.8 准确度回收实验：回收率在90%-110%。

2.9质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。

2.10 瓶间重复性（均一性）校准品、质控品瓶间重复性CV≤5%。

2.11 稳定性2.11.1试剂效期稳定性原包装试剂（含校准品和质控品），在（2-8）℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒检测其试剂空白、分析灵敏度、准确度、质控品赋值有效性、精密度和线性，试验结果满足2.3、2.4、2.5、2.6、2.8和2.9的要求。

Mouse Anti-beta-Amyloid(1-42)Cat.Number:DMm-0107MQuantity size:50ulConcentration:1mg/ml Buffer=0.01M TBS(pH7.4)with1%BSA,0.03%Proclin300and50% Glycerol.Background:The cerebral and vascular plaques associated with Alzheimer's disease are mainly composed of Amyloid beta peptides.beta Amyloid is derived from cleavage of the Amyloid precursor protein and varies in length from39to43amino acids.beta Amyloid[1-40],beta Amyloid[1-42],and beta Amyloid[1-43]peptides result from cleavage of Amyloid precursor protein after residues40,42,and43,respectively.The cleavage takes place by gamma-secretase during the last Amyloid precursor protein processing step.beta Amyloid[1-40],beta Amyloid [1-42],and beta Amyloid[1-43]peptides are major constituents of the plaques and tangles that occur in Alzheimer's disease.beta Amyloid antibodies and peptides have been developed as tools for elucidating the biology of Alzheimer's disease.Also known as:beta Amyloid(1-42);beta Amyloid1-42;beta-Amyloid1-42;Amyloid1-42;P3(42); A4;AAA;ABETA;ABPP;AD1;Alzheimers Disease Amyloid Protein;Amyloid B;Amyloid Beta A4 Protein Precursor;Amyloid Beta;Amyloid of Aging and Alzheimer Disease;APP;APPI;B Amyloid; Beta APP;Cerebral Vascular Amyloid Peptide;CTFgamma;CVAP;PN II;PN2;PreA4;Protease nexin II;A beta;A4_HUMAN;Beta-amyloid protein42.Specificity:●Mouse Monoclonal(Clone number:2E5)IgG2b,affinity purified by Protein A.●Reacts with:Human,Mouse,Rat,.●Immunogen:KLH conjugated synthetic peptide derived from human beta-Amyloid(1-42).●Predicted Molecular Weight:4.4kDa.Storage:Shipped at4℃,Store at-20℃(Avoid repeated freeze/thaw cycles). Application:WB=1:500-2000ELISA=1:500-1000IHC-P=1:400-800IHC-F=1:400-800 ICC=1:100-500IF=1:100-500Not yet tested in other applications.Optimal working dilutions must be determined by the end user.Important Note:This product as supplied is intended for research use only,not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.上海笃玛生物科技有限公司。

人血清淀粉样蛋白A(SAA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E08589h检测范围：156 ng/ml - 10000 ng/ml最低检测限：39 ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人SAA，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中SAA含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

概述血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA)是一种急性时限反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约12000。

在急性时限反应中，经IL-1、IL-6和TNF 刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，可升高到最初浓度的100-1000 倍，但半衰期极短，只有50分钟左右。

血清淀粉样蛋白A 与高密度脂蛋白(HDL)有关，它能在炎症期间调节高密度脂蛋白的代谢。

血清淀粉样蛋白A 一个特别重要的特性是其降解产物能以淀粉样蛋白A (AA) 原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾病中这是一种严重的并发症。

与C 反应蛋白(CRP) 类似，血清淀粉样蛋白A 的含量浓度是反映感染性疾病早期炎症的敏感指标，有助于诊断炎症、评估其活性、监控其活动及治疗。

但是，血清淀粉样蛋白A 检测在诊断发生病毒感染、肾移植排斥反应的患者（特别是进行免疫抑制治疗的患者）以及用肾上腺皮质激素治疗的囊性纤维化患者方面，比C 反应蛋白更确凿。

研究发现，在患炎性关节炎的案例中，血清淀粉样蛋白A 与疾病活动性的关系最密切。

同时检测C 反应蛋白和血清淀粉样蛋白A 能提高对感染的诊断灵敏度。

根据病人的病情选择：1.确定什么原因引起的血小板减少，至少要找到疾病的诱因。

免疫系统？骨髓造血系统？内分泌（激素）？2.若不能找到诱因，一定要使用该两种药品，先用6周，看看效果，查血小板计数，是否继续使用，再做评估。

罗米司亭【商品名】Nplate【药品名称】罗米司亭/ romiplostim【适应症】治疗脾切除和脾未切除慢性免疫性血小板减少性紫癜（ITP）成人患者的血小板生成药。

【用法用量】（1）初始剂量1μg/kg每周1次皮下注射。

（2）因为需要减低出血的风险，通过增量1μg/kg调整每周剂量以达到和维持血小板计数50 × 109/L.（3）最大剂量不要超过每周10μg/kg。

如血小板计数达>400×109/L不要给药。

（4）如在最大剂量4周后血小板计数不增加中断Nplate。

（5）在配制期间不要震荡；避光保护配制好的Nplate； 24小时内给配制好的Nplate。

（6）注射容积可能非常小。

使用刻度0.01 mL的注射器。

（7）遗弃单次使用小瓶中未使用部份。

【注意事项】（1）Nplate增加骨髓内网硬蛋白(reticulin)沉积的风险；临床研究未除外网硬蛋白和其它纤维沉积导致有血细胞减少的骨髓纤维化的可能性。

监查外周血骨髓纤维化征象。

（2）中止Nplate可能导致血小板减少比Nplate治疗前更坏。

Nplate中止后监查全血细胞计数(CBCs)，包括血小板计数至少2周。

（3）过量Nplate可能增加血小板计数至产生血栓形成/栓塞并发症的水平。

（4）如随Nplate初期反应后血小板计数严重减低评估患者中和抗体的形成。

（5）Nplate可能增加血液学恶性病的风险，尤其是有骨髓增生异常综合征患者。

（6）每周监查CBCs，包括血小板计数和外周血涂片，直至达到稳定的Nplate 剂量。

其后，至少每月监查CBCs，包括血小板计数和外周血涂片。

（7）只能通过受限制的分配计划，称为Nplate NEXUS(了解和支持Nplate专家和患者网络)计划，才能获得Nplate。

1 性能指标
2.1外观
外观应符合如下要求：
a)磁珠包被物R1 摇匀后应为棕褐色悬浊液；静止久后，棕褐色磁珠沉降于底部，上清液应为无色液体；酶标记物R2 应为无色液体，无沉淀或絮状物；校准品应为外观均匀，成形完整，呈乳白色的冻干品，复溶后较清亮，无浑浊及沉淀；
b)试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；
c)中文包装标签清晰，无磨损。

2.2准确度
用参考物质作为样本进行检测，测定结果的相对偏差在±10% 范围内。

注：参考物质为WHO International Standard SERUM AMYLOID A (SAA) 1st International Standard (NIBSC code: 92/680)。

2.3空白限
空白限不大于 3 μg/mL；
2.4线性
试剂盒在 3 μg/mL～200 μg/mL 区间内，其相关系数（r）的绝对值不低于0.9900。

2.5重复性
变异系数CV≤8.0%。

2.6批间差
变异系数CV≤10.0%。

2.7校准品
2.7.1校准品准确度
测定校准品，测定结果的相对偏差在±10% 范围内。

2.7.2校准品瓶内均一性
校准品瓶内均一性≤8.0%。

2.7.3校准品瓶间均一性
校准品瓶间均一性≤5.0%。

血清淀粉样蛋白A（SAA）在感染性疾病中临床应用专家共识摘抄于《中华检验医学杂志》2019年3月第42卷第三期感染性疾病是临床常见的疾病类型。

感染性疾病的病原体种类繁多、感染途径多样、症状和体征存在个体差异，如果不能及时明确诊断、有效治疗可引发严重后果。

因此，如何对感染性疾病进行早期诊断和(或)鉴别诊断是临床亟待解决的实际问题。

目前对于感染性疾病的实验室检查手段有病原学检测(如微生物培养、病原体核酸、病原体抗原/抗体检测)以及血清学炎症标志物的检测。

病原学检测是感染性疾病诊断的“金标准”，但常规微生物培养至少需要18-48 h，其阴性结果并不能排除感染的发生；微生物质谱分析技术基于数据库中已有病原体信息，虽然可以鉴定细菌、真菌等，但是也要经过培养后才能鉴定，不能实现早期诊断。

病原体核酸检测和抗原/抗体检测，虽然已经广泛运用于临床对病原体的鉴别，但仅限于部分常见病原体。

近年来，血清学炎症标志物在感染性疾病诊疗过程中的价值逐步得到临床广泛认可。

一些血清学炎症标志物既能在感染早期被检测出，又与疾病的严重程度和动态变化密切相关,有望成为感染性疾病临床诊疗过程中的理想标志物。

目前临床最常用的血清学炎症标志物有C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)和降钙素原(procalcitonin，PCT)，可较好辅助细菌感染的诊断，但对细菌之外的病毒、真菌、支原体、衣原体等病原体感染的诊断价值尚有待商榷。

血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)是一种非特异性急性时相反应蛋白，其作为炎症标志物的临床价值近年来得到广泛关注。

SAA水平变化对于感染性疾病的早期诊断、危险评估、疗效观察及预后评价都具有重要临床价值。

除了在细菌感染中升高外，SAA在病毒感染中亦显著升高，根据其升高的程度或与其他指标联合运用，可以提示细菌性或病毒性感染，从而弥补了目前常用炎症标志物不能提示病毒感染的不足。

尽管SAA的检测目前已在部分医疗机构开展，但临床及实验室对SAA的临床应用价值尚缺乏一致的认识，因此中国中西医结合学会检验医学专业委员会组织专家在综合文献调研并结合临床多学科深人研讨的基础上形成本共识，旨在为临床更有效地运用SAA辅助感染性疾病的临床诊疗提供参考。

人血清淀粉样蛋白A（SAA）酶联免疫分析要点人血清淀粉样蛋白A(SAA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E08589h检测范围：156 ng/ml - 10000 ng/ml最低检测限：39 ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人SAA，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中SAA含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

概述血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA)是一种急性时限反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约12000。

在急性时限反应中，经IL-1、IL-6和TNF 刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，可升高到最初浓度的100-1000 倍，但半衰期极短，只有50分钟左右。

血清淀粉样蛋白A 与高密度脂蛋白(HDL)有关，它能在炎症期间调节高密度脂蛋白的代谢。

血清淀粉样蛋白A 一个特别重要的特性是其降解产物能以淀粉样蛋白A (AA) 原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾病中这是一种严重的并发症。

与C 反应蛋白(CRP) 类似，血清淀粉样蛋白A 的含量浓度是反映感染性疾病早期炎症的敏感指标，有助于诊断炎症、评估其活性、监控其活动及治疗。

但是，血清淀粉样蛋白A 检测在诊断发生病毒感染、肾移植排斥反应的患者（特别是进行免疫抑制治疗的患者）以及用肾上腺皮质激素治疗的囊性纤维化患者方面，比C 反应蛋白更确凿。

研究发现，在患炎性关节炎的案例中，血清淀粉样蛋白A 与疾病活动性的关系最密切。

α-淀粉酶(AMY )测定试剂盒（EPS底物法）说明书【产品名称】α-淀粉酶(AMY)测定试剂盒（EPS 底物法）【包装规格】a)试剂1：2×45mL 试剂2：2×15mL b)试剂1：4×45mL 试剂2：4×15mL c)试剂1：2×60mL 试剂2：2×20mL 【预期用途】用于体外定量测定人体血清中淀粉酶的活性。

临床上常用于急性胰腺炎的诊断，血淀粉酶的增高常见于急性胰腺炎、唾液腺疾病、胆管疾病、糖尿病酮酸中毒及破裂异位妊娠等[1]。

【检验原理】PNPG7−−→−淀粉酶PNPG3+麦芽三糖PNPG3−−−→−葡糖苷酶PNPG1+葡萄糖PNPG1−−−→−葡糖淀粉酶对-硝基酚+葡萄糖生成的对-硝基酚为黄色物质，通过在405nm 测定对-硝基酚吸光度值的的上升速率，即可计算出样本中淀粉酶的活性。

【主要组成成分】试剂1主要组分Tris 缓冲液50mmol/L 葡糖苷酶25KU/L 氯化钠50mmol/L 牛血清白蛋白适量试剂2主要组分Tris 缓冲液50mmol/L P-硝基苯D-麦芽庚烷（PNPG7）0.9mmol/L 氯化钙5mmol/L 牛血清白蛋白适量注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。

【储存条件及有效期】贮存于2～8℃，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。

【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI 7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT 008AS 型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR /TBA-2000FR ；罗氏cobas 8000c 702/cobas 8000c 701/cobas 8000c 502；西门子SIEMENS ADVIA 1800/ADVIA 2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C ；科华KHB 卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/BS-800/BS-2000M ；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray 420；英诺华D280；特康TC6010L ；锦瑞GS400；普康6066。

鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)EUSA检测试剂盒说明书产品名称：鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELIS A检测试剂盒规格:96T/48T保存;38℃。

检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本•例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。

试剂盒组成及试剂配制：1 .酶联板(ASSayplate上一块(96孔)。

2 .标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3 .样品稀释液(SamPleDilUent):1X2Oml/瓶4 .生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibodyDiluent):l×IOml/瓶。

5 .辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidinDiluent):IXIOml/瓶。

6 .生物素标记抗体(Biotin-antibody):!.X12。

μ1/瓶(1:100)7 .辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)3X120U1/瓶(1:100)8 .底物溶液(TMBSubstrateJilXIoml/瓶。

9 .浓洗涤液(WaShBUffer)AX20ml/瓶,使用时每瓶用蒸憎水稀释25倍。

10 .终止液(StoPSolUtion):：LXlOml/瓶(2NH2SO4),,样品收集、处理及保存方法：1)血清---操作过程中避免任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后,1000Xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2)血浆--EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。

IooOXg离心30分钟去除颗粒。

3)细胞上清液…100OXg离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4)组织匀浆--将组织加入适量生理盐水捣碎。

100OXg离心10分钟,取上清液5)保存一一如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70C保存,避免反复冷冻。