生脉软胶囊质量标准研究
【摘要】目的 介绍生脉软胶囊质量标准研究的考察内容，试验方案及试验结果。 方法 主要考察其外观性状、鉴别反应、装量差异、崩解时限、含量测定等。对鉴别反应采用薄层色谱法，含量测定采用高效液相色谱法，通过对样品的考察，最后确定其质量标准草案。 结果 证明本试验采用的方法符合规定要求。 结论 可以应用此标准对本品进行质量控制。
【Abstract】 Objective to introduce the Shengmai soft-capsules quality standards
on the contents of inspection, test plan and test results. Methods The main study of
its appearance, the differential response, volume difference, disintegration time,
content determination. On the differential reaction by thin layer chromatography,
content determination by high performance liquid chromatography, based on sample
survey, finally determine its quality standard draft. Results The test method used
to meet the requirements. Conclusion We can use this standard to the product
quality control.
【Key words】 Shengmai soft-capsules; TLC; Assaying; HPLC
山 东 化 工
收稿日期：２０１９－０６－０４作者简介：崔维刚（１９８６—），山东青州人，硕士学历，主管中药师，２０１２年１月至２０１９年５月主要从事中药及中成药的检验工作。接骨胶囊质量标准研究崔维刚１，蒋胜岳２，周利章２，耿燕楠３（１．临沂市行政审批服务局，山东临沂 ２７６００１；２．临沂市检验检测中心，山东临沂 ２７６００１；３．山东中医药大学附属医院，山东济南 ２５００００）摘要：建立接骨胶囊的质量分析方法。方法：采用薄层色谱法对接骨胶囊中红花和栀子进行定性鉴别，采用ＨＰＬＣ法测定制剂中柚皮苷的含量，使用ＡｇｉｌｅｎｔＣ１８柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）色谱柱，流动相为甲醇－１％冰醋酸（３３∶６７），检测波长２８３ｎｍ。结果：在薄层色谱中能检出红花和栀子；含量测定中柚皮苷在０．０９２８０～０．４６４０μｇ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９，平均回收率为９８．３４％。结论：建立的分析方法简便可行，专属性强，可用于接骨胶囊的质量控制。关键词：接骨胶囊；薄层色谱法；柚皮苷；液相色谱法中图分类号：Ｏ６５７．７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０１９）１７－０１１４－０３ＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌｏｆＪｉｅｇｕＣａｐｓｕｌｅｓＣｕｉＷｅｉｇａｎｇ１，ＪｉａｎｇＳｈｅｎｇｙｕｅ２，ＺｈｏｕＬｉｚｈａｎｇ２，ＧｅｎｇＹａｎｎａｎ３（１．ＬｉｎｙｉＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｖｅＥｘａｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄＡｐｐｒｏｖａｌＳｅｒｖｉｃｅＢｕｒｅａｕ，Ｌｉｎｙｉ ２７６００１，Ｃｈｉｎａ；２．ＬｉｎｙｉＩｎｓｐｅｃｔｉｎｇａｎｄＴｅｓｔｉｎｇＣｅｎｔｅｒ，Ｌｉｎｙｉ ２７６００１，Ｃｈｉｎａ；３．ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ ２５００００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＪｉｅｇｕＣａｐｓｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＳａｆｆｌｏｗｅｒａｎｄＦｒｕｃｔｕｓＧａｒｄｅｎｉａｉｎＪｉｅｇｕｃａｐｓｕｌｅｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙＴＬＣ．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｎａｒｉｎｇｉｎｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣ．Ｔｈｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅ：ＡｇｉｌｅｎｇｔＣ１８ｃｏｌｕｍｎ，ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｂｅｉｎｇｍｅｔｈａｎｏｌ－１％ｇｌａｃｉａｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄ（３３∶６７），ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈａｔ２８３ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｉｔｈＴＬＣｗａｓｓｐｅｃｉｆｉｃ．Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｏｆｎａｒｉｎｇｉｎｗｅｒｅ０．０９２８０～０．４６４０μｇ（ｒ＝０．９９９），ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９８．３４％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓＳｉｍｐｌｅ，ｓｔａｂｌｅａｎｄａｃｃｕｒａｔｅ．ＩｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＪｉｅｇｕＣａｐｓｕｌｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＪｉｅｇｕＣａｐｓｕｌｅｓ；ＴＬＣ；Ｎａｒｉｎｇｉｎ；ＨＰＬＣ 接骨胶囊为沂南攀峰骨科医院生产品种，１９９９年７月起试行，制剂原名称为“潘氏接骨灵胶囊（Ⅰ号）”。该品种由桃仁、红花、当归、土鳖虫、骨碎补等２１味中药组成，在临床上具有较好的疗效。其功效主要为活血化瘀，续筋接骨。用于各种骨折、跌打损伤等。目前，该制剂现行质量标准中，仅包含４个显微特征的鉴别以及血竭、当归和川芎的薄层鉴别［１］。接骨胶囊作为临沂市的医疗机构制剂，具有比较好的临床疗效及销量，但由于该处方涉及的中药药味数量较多，而中药材来源、质量差别较大，仅以现行标准难以确保该制剂的质量。因此，在当前国家药典标准大幅提高的前提下，我们对接骨胶囊进行了进一步的探索，按照国家药典药品质量标准分析方法验证指导原则，增加了红花和栀子的薄层鉴别，以及柚皮苷的含量测定，增强了接骨胶囊质量的稳定性，为保证人民用药安全提供进一步的保障。１ 薄层色谱法对接骨胶囊中３种中药成分进行鉴别１．１ 仪器和试药ＸＰ２０５电子天平（ＭＥＴＴＬＥＲＴＯＬＥＤＯ）；硅胶Ｇ薄层板（１０×２０ｃｍ，ＭｅｒｃｋＫｇａＡ，Ｇｅｒｍａｎｙ）；ＫＱ－３００ＤＥ型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；接骨胶囊（生产单位：沂南攀峰骨科医院，批号：２０１３１０２５，２０１３１０２９，２０１３１１０４）；栀子苷对照品（来源：中国食品药品检定研究院，批号：１１０７４９－２０１３１６）；栀子对照药材（来源：中国食品药品检定研究院，批号：１２０９８６－２０１３９９）；红花对照药材（来源：中国食品药品检定研究院，批号：１２０９０７－２０１１１１）；甲醇（德国默克生产）为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。１．２ 方法和结果１．２．１ 红花的薄层鉴别取本品内容物１．５ｇ，加丙酮∶水（８０∶２０）溶液５ｍＬ，振摇１５ｍｉｎ，静置，取上清液，作为供试品溶液。另取红花对照药材０．５ｇ，加丙酮：水（８０：２０）溶液５ｍＬ，振摇１５ｍｉｎ，静置，取上清液，作为对照药材溶液。照薄层色谱法进行试验，吸取上述两种溶液各５μＬ，分别点于同一硅胶Ｇ板上，以乙酸乙酯－甲酸－水－甲醇（７∶２∶３∶０．４）为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相对应的位置上，显相同颜色的斑点。展开系统的分离效果良好，结果见图１。１、１１．红花对照药材；２～４．样品２０１３１０２５；５～７．样品２０１３１０２９；８～１０．样品２０１３１１０４温度：１４℃，相对湿度：３７％；薄层板：ＭｅｒｃｋＫｇａＡ硅胶Ｇ板图１ 红花的薄层鉴别１．２．２ 栀子的薄层鉴别取本品内容物１ｇ，加甲醇∶水（５０∶５０）溶液１０ｍＬ，超声处理４０ｍｉｎ，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取栀子对照药材１ｇ，同法制成对照药材溶液。再取栀子苷对照品，加甲醇∶水（５０∶·４１１·ＳＨＡＮＤＯＮＧＣＨＥＭＩＣＡＬＩＮＤＵＳＴＲＹ ２０１９年第４８卷 第１７期５０）溶液制成每１ｍＬ含３ｍｇ的溶液，作为对照品溶液［２］。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各５μＬ，分别点于同一硅胶Ｇ板上，以乙酸乙酯－丙酮－甲酸－水（５∶５∶１∶１）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以１０％硫酸乙醇溶液，在１０５℃加热５ｍｉｎ。在日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。展开系统的分离效果良好，结果见图２。１．栀子苷对照品；２．栀子对照药材；３～５．样品２０１３１０２５；６～８．样品２０１３１０２９；９～１１．样品２０１３１１０４温度：１７℃，相对湿度：３４％；薄层板：ＭｅｒｃｋＫｇａＡ硅胶Ｇ板图２ 栀子的薄层鉴别２ 接骨胶囊中柚皮苷含量测定接骨胶囊是由桃仁、红花、骨碎补、土鳖虫、牛膝等２１味中药组成，其中骨碎补具有疗伤止痛，补肾强骨功效［３］，在处方中对疗效有比较大的贡献，而柚皮苷为骨碎补和枳壳的共有成分，查阅文献得知柚皮苷在此两种药材中含量较高［４］，因此选用柚皮苷作为该制剂的含量测定指标。２．１ 仪器与试药安捷伦１２６０高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；ＤＺＫ－Ｄ－４型电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗仪器有限公司）；ＸＰ２０５电子天平（ＭＥＴＴＬＥＲＴＯＬＥＤＯ）；接骨胶囊（沂南攀峰骨科医院生产，批号：２０１３１０２５，２０１３１０２９，２０１３１１０４）；柚皮苷对照品（来源：中国食品药品检定研究院，批号：１１０７２２－２０１３１２，含量以９４．７％计）；甲醇（德国默克生产）均为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。２．２ 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：安捷伦ＳＢ－Ｃ１８液相色谱柱（５μｍ，４．６×２５０ｍｍ）；流动相：甲醇－１％冰醋酸（３３∶６７）；检测波长：２８３ｎｍ；柱温：３０℃。理论板数按柚皮苷峰计算，应不得低于３５００。２．３ 对照品溶液的制备精密称取柚皮苷对照品（来源：中国食品药品检定研究院，批号：１１０７２２－２０１３１２，含量以９４．７％计）１２．２５ｍｇ，置２５０ｍＬ容量瓶中，加甲醇使溶解，稀释至刻度，摇匀，即得（浓度为０．０４６４０ｍｇ／ｍＬ）。２．４ 供试品溶液的制备取本品内容物（批号：２０１３１０２５）适量，用研钵研细，称取约１ｇ，精密称定，置２５０ｍＬ具塞锥形瓶中，精密加入甲醇５０ｍＬ，称定其重量，水浴加热回流１ｈ，放冷至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。２．５ 线性关系的考察精密吸取２．３项下的柚皮苷对照品溶液（０．０４６４０ｍｇ／ｍＬ）２、４、６、８、１０μＬ，注入安捷伦１２６０高效液相色谱仪，分别测定峰面积。以峰面积积分值为纵坐标，对照品进样量为横坐标，计算线性回归方程：Ｙ＝１７９６．８５７Ｘ－２．７３２１，相关系数ｒ＝０．９９９７。结果表明，进样量在０．０９２８０～０．４６４０μｇ之间峰面积积分值和进样量呈良好的线性关系。２．６ 仪器精密度试验精密吸取２．３项下的柚皮苷对照品溶液（０．０４６４０ｍｇ／ｍＬ）５μＬ，注入安捷伦１２６０高效液相色谱仪，连续进样６次，分别测定其峰面积。结果对照品峰面积积分均值为３９５．３，ＲＳＤ值为０．２２％（ｎ＝６），表明仪器的精密度良好。２．７ 样品稳定性试验取本品内容物（批号：２０１３１０２５）适量，按照２．４项下供试品溶液的制备方法制成供试品溶液。每隔４ｈ进样一次，每次进样５μＬ，测定，共进样７次，分别计算供试品溶液中柚皮苷的峰面积积分值。统计分析供试品中柚皮苷峰面积，积分均值为３０４．２，ＲＳＤ值为０．９７％。结果表明供试品溶液在２４ｈ内稳定性良好，满足含量测定的需要。２．８ 方法重复性考察取本品内容物（批号：２０１３１０２５）适量，照２．４项下供试品溶液的制备方法制成供试品溶液，平行制备６份。分别精密吸取２．３项下的对照品溶液和上述供试品溶液各５μＬ，注入安捷伦１２６０高效液相色谱仪，测定［５］。统计分析供试品中柚皮苷含量，平均值为０．５３０ｍｇ／粒，ＲＳＤ值为０．３％。结果表明含量测定方法的重复性良好。２．９ 加样回收率试验取已知含量的样品（批号：２０１３１０２５）适量，柚皮苷的含量为０．５３ｍｇ／粒，精密称定，共取６份，每份中分别精密加入２．３项下的对照品溶液１０ｍＬ，按２．４项下的方法制成加标供试品溶液，按２．２项下的色谱条件进行测定，结果见表１。表１ 柚皮苷加样回收率考察结果样品号样品含量／ｍｇ加入量／ｍｇ测得量／ｍｇ回收率／％平均回收率／％ＲＳＤ／％１０．４４０４０．４６４００．８８９３９６．７５２０．４４２１０．４６４００．９０２３９９．１８３０．４４０９０．４６４００．８９７６９８．４３４０．４４３７０．４６４００．９０３９９９．１８５０．４４２８０．４６４００．８９９７９８．４７６０．４４５６０．４６４００．９００３９８．００９８．３４１．０ 试验结果表明，测定方法的回收率良好。２．１０ 专属性试验阴性对照溶液的制备：取处方中除去骨碎补、枳壳的其他１９味药，按处方比例制成阴性对照样品，照２．４项下供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液，即得。分别精密吸取２．３项下的对照品溶液、２．４项下的供试品溶液和上述阴性对照溶液各５μＬ，注入安捷伦１２６０高效液相色谱仪，测定。分析发现，供试品色谱中，在与对照品色谱峰保留时间相同的位置上，有相对应色谱峰，而阴性对照样品色谱中无相对应色谱峰。结果表明处方中其他药味对供试品中柚皮苷测定无干扰。结果见图３。·５１１·崔维刚，等：接骨胶囊质量标准研究
２０１ ３年７月第２Ｏ卷第７期 中国中医药信息杂志 ・５７・
乳癖康胶囊质量标准研究
王俊香
山东中医药大学，山东济南２５００１４
摘要：目的建立乳癖康胶囊的质量标准。方法用薄层色谱法对乳癖康胶囊中地龙进行定性鉴别。用高效液相
色谱法测定制剂中丹参酮ＩＩＡ的含量，色谱柱为日立Ｌ－２０００ Ｃ 柱（２５０ ｍｉｌｌ×４．６ ｍｉｌｌ，５ ｍ），流动相为甲醇一水（７５：２５），
流速为１．０ ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长为２７０ ｎｍ。结果在薄层色谱中能检出地龙，阴性对照无干扰。丹参酮ＩＩ Ａ在０．１６～
０．４ Ｐｇ范围内具有良好的线性关系，回归系数，＝０．９９９ ９，平均回收率为９９．１％，ＲＳＤ＝２．２０％。结论本方法简便可
行，专属性强，重复性好，可用于乳癖康胶囊的质量控制。
关键词：乳癖康胶囊；薄层色谱法；丹参酮ＩＩ Ａ；高效液相色谱法
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉ Ｓ ｓｎ．１００５—５ ３０４．２Ｏ１ ３．０７．０２Ｉ
中图分类号：Ｒ２８４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００５—５３０４（２０１３）０７—００５７．０２
Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｆｏｒ Ｒｕｐｉｋａｎｇ Ｃａｐｓｕｌｅｓ ＷＡＮＧ Ｊｕｎ—ｘｉａｎｇ（Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊｉｎａｎ ２５Ｏ０ｌ４，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｆｉｓｈ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄ ｆｏｒ Ｒｕｐｉｋａｎｇ Ｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｌｕｍｂｎｃｕｓ ｗｅｒｅ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ＴＬＣ．Ｔａｎｓｈｉｎｏｎｅ ＩＩＡ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ．ＨＰＬＣ ａｎａｌｙｓｉｓ ｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｏｎ Ｈｉｔａｃｈｉ
Ｌ－２０００ Ｃｌｓ ｃｏｌｕｍｎ（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｌａｍ）ａｎｄ ｔｈｅ ｎｌｉｘｔｕｒｅ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ（７５：２５）ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ
生发酊的质量标准研究
目的 对生发酊质量控制指标进行研究。方法 首先对生发酊中的补骨脂、何首乌、红花、黄芪、丹参进行薄层色谱鉴别，同时以补骨脂素，异补骨脂素为指标成分，应用高效液相色谱法对其进行定量测定。结果 定性鉴别简便易行；含量测定方法中同分异构体补骨脂素、异补骨脂素分离较好，补骨脂素、异补骨脂素柱效比较理想，其理论塔板数>5000。此法分离效果好，重现性好、精密度高、加样回收率令人满意。结论 定性定量方法简便、准确，专属性强，重现性好，能有效地控制该制剂的质量。
标签：生发酊，薄层色谱，高效液相色谱
生发酊为江苏省中医院自制制剂，主要由补骨脂、何首乌、红花、黄芪、丹参等中药组成，具有刺激毛发生长，治疗斑秃的功效。经我院皮肤科多年使用，疗效确切。为了更好地控制其质量，我们在原有气相色谱法测定乙醇含量的基础上，进一步采用薄层色谱鉴别等手段对其进行定性控制；同时以补骨脂素、异补骨脂素为指标成分，应用高效液相色谱法对其进行定量测定。
1实验材料
1.1仪器 Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪，G1314A VWD检测器，G1311A泵，G1316A柱温箱；美国Agilent公司。Discovery C18柱（美国）。Satarius
BP1100十万分之一电子分析天平（德国）。929薄层制板器（重庆市南岸贝尔德仪器技术厂）。
1.2样品与试药
1.2.1样品 生发酊样品：由江苏省中医院制剂部提供（批号061201，070402，070403）。
1.2.2试药 对照药材：补骨脂（121056-200503）、何首乌（120934-200507）、红花（120907-200609）、黄芪（120974-200609）、丹参（120923-200610）均购于中国药品生物制品检定所。对照品：补骨脂素（0739-9907），异补骨脂素（11073-200309）均购于中国药品生物制品检定所（供含量测定用）。薄层层析用硅胶G（批号：060518）、薄层层析硅胶 GF254批号：（批号：040811）均由中国青岛海洋化工集团公司出品（国家药典委员会监制）。甲醇为色谱纯（德国Merck公司），其他试剂均为分析纯。
