(3)酶与底物结合是通过一种称为诱导契 合模式进行的。
酶促反应动力学
概念:
• 研究酶促反应速率及其影响因素。 • 反应速率:单位时间内底物减少或产物
增加的速率,常用初速率来衡量。
初速率
产 酶促反应速率逐渐降低
物
0
时间
酶促反应的时间进展曲线
影响酶促反应速度的因素:
• 底物浓度[S] • 酶浓度[E] •T • pH 值 • 抑制剂 • 激活剂
• 加样量的准确性 • 温度与时间的准确性 • 分光光度计的校准和使用
➢ 开启电源,仪器预热20分钟。
➢ 波长调至测试用波长(510nm)。
➢ 将比色皿架处于空白管位置,打开试样室盖,选 择“T”档,调节“0”按钮,使数字显示为“0.00”。
盖上试样室盖,使光电管受光,调节透过率 “100%”按钮,使数字显示为“100.0”。
可逆性 非竞争性抑制
类型
反竞争性抑制 不可逆性
可逆性抑制作用的动力学比较
作用特点 无抑 竞争 非竞争 反竞争 制剂 性抑制 性抑制 性抑制
与I结合组分
E
E、ES ES
动力学参数
表观Km Km
Km
表观Vm Vm Vm
本次实验方案
底物:磷酸苯二钠 酶: 碱性磷酸酶AKP 抑制剂:磷酸氢二钠
v
v=Vm=K3[E]
V= Vmax [S]
Vm
Km + [S]
2
Km
[S]
底物浓度对酶促反应速度的影响
(二)米---曼氏方程 (Michaelis-Menten equation)
Vmax [S] V=
Km + [S]
1、米-曼氏方程解释: 当[S]Km时,v=(Vmax/Km) [S], 即v 正比于 [S] 当[S]Km时,v Vmax, 即[S]而v不变