血红蛋白检测方法

1.目的
建立血红蛋白测定的操作步骤，以保证试验的顺利进行和结果的真实可靠。

2.适用范围
适用于血清制品血红蛋白的测定（分光光度计法）
3.职责
检验人员。

4.定义
无
5.引用标准
《中国药典》2015版四部通则3604
6.材料及设备
6.1 751分光光度计
6.2 1-cm光路的比色杯
6.3 蒸馏水
7.流程图
无
8.内容
8.1.以蒸馏水为空白对照。

8.2 使用1-cm光路的比色杯，直接测定牛血清样品在576nm、623nm及700nm
波长下的吸光值。

8.3 每个样品至少测定2次。

8.4 计算平均测定值
8.5 按照下式计算样品中血红蛋白含量：
血红蛋白含量（mg/dl）=[(A576×115)−(A623×102)−(A700×39.1)] ×10。

8.6 其中；A576、A623、A700是样品在576nm、623nm及700nm波长下的平均
吸光值。

9.注意事项
9.1. 严格按照仪器说明书进行操作。

9.2. 比色杯要保持清洁，定期在盐酸液中进行浸泡。

9.3. 试验完毕将所有物品放归原处。

10.附录及派生记录
10.1. 血红蛋白检测记录F-SOP-ZL004-01
11.相关文件
无
12.修订记录。

一血红蛋白的提取和分离实验的方法：1：实验材料，仪器，试剂及试剂的配制（1）实验材料：新鲜的鸡血（2）实验仪器：离心机，烧杯（100ml），胶头滴管，玻璃棒，离心管架，漏斗，纱布等。

（3）实验试剂：饱和（NH4）2SO4溶液（PH=6.0~7.0），柠檬酸钠溶液，生理盐水，蒸馏水。

（4）试剂的配制：1. 饱和（NH4）2SO4溶液的配制：100ml蒸馏水中溶解76g（NH4）2SO4，用氨水滴PH值至6.5左右；2.生理盐水的配制：取9gNaCl溶于1000ml蒸馏水中。

3.柠檬酸钠溶液的配制：6g柠檬酸钠溶于100ml生理盐水中（可收集100ml鸡血）。

2：实验步骤：（1）收集并清洗鸡血：用盛有柠檬酸钠溶液的烧杯装新鲜的鸡血（防止鸡血凝固），然后将鸡血用300ml生理盐水稀释，充分搅拌后转移到50ml离心管中，离心（V=5000rpm）5min（此步可除去血清蛋白）。

（2）破碎鸡血细胞：小心倒掉上清，下层细胞加入50ml的蒸馏水，剧烈震荡10min，离心（V=5000rpm）10min.。

取上清溶液，即血红蛋白的溶液，用多层纱布过滤。

（3）盐析分离血红蛋白：向滤液中逐渐加入（NH4）2SO4饱和溶液，边加边摇，约加入与血红蛋白溶液相同体积时，溶液出现浑浊。

静止20min，离心10min(v=5000rpm).。

红色沉淀就是分离出来的血红蛋白。

血红蛋白溶液通过盐析并离心后得到红色沉淀，此时上清溶液基本无色，表明该沉淀就是我们分离得到的血红蛋白，无需用其他方式进行验证。

下面就几点进行讨论;1我们购买鸡血时，为了防止鸡血凝固，把鸡血收集到事先准备好的盛有柠檬酸钠溶液的瓶子里，可以放置一白天，若要过夜，温度须控制在4摄氏度。

2我们用蒸馏水使细胞涨破而不用甲苯（有毒），既简单又安全，同时还可以将血红蛋白溶液进行稀释。

3用盐析法进行蛋白质分离试验，比通过色谱柱，减少了实验难度，降低了试验成本，缩短的试验时间。

《血红蛋白含量测定》实验综述报告血红蛋白是由珠蛋白、亚铁血红素等组成，作为红细胞内的一种机能蛋白，在生物体内起到传输氧气、传递电子等功能，与氧和能量代谢有关的重要活动。

在临床上出现各类贫血、白血病及心脏病等症状常与血红蛋白异常有关，因此，人体血液中和尿液的血红蛋白含量的测定是临床检测的一个重要内容。

通常用血红蛋白内的珠蛋白和亚铁血红素在血液中的总浓度来表示。

血红蛋白成分的评价应用范围较广，其涉及动物学、医学、体育学、生物工程学等领域。

目前，随着检验技术的飞速发展和医疗器械的不断改进，目前，血红蛋白含量检测方法主要有比重法、比色法721分光光度仪法、光电比色、电流阻抗法、胶体金法溶血测试条等6个不同方法测定。

1 比重法比重法是血红蛋白测定的最原始的方法，在血库或大量的献血员采血时为了节约时间，看是否贫血，在硫酸铜溶液中加入一滴于溶液中，通过其浮力方法是否大于排开水的重量如果沉入杯底，可以献血，血滴漂浮为贫血。

通过血滴在水中的比重变化来观察人体是否贫血，此方法是基于对血滴重量和在水中浮力进行测量，通过肉眼观察，粗略估计而得出的。

是依据阿基米德原理，血红蛋白是由各种亚铁血红素等构成的，血红蛋白内珠蛋白和亚铁血红素的量多少，直接影响血红蛋白含量多少，因此通过血红蛋白比重法可推算出是否贫血。

该方法不需要特定的设备，操作简单，但准确度低，没有准确的文字描述，不适合推广。

只用于一般体检且对受试者体能状况有一定的要求，故对体质较弱的人群不要采用。

2 血红蛋白目测比色法血红蛋白目测比色法是对比重法的替代，此测定器材包括两个部分，一个是比色管，一个是参照比色槽。

取0.1mol/L稀盐酸溶液2-3滴加于比色管中，再加20ul血液于比色管中，混匀、静置15分钟，不断加蒸馏水于亮光处与比色槽颜色相对照一样，液体的高度即可读取刻度即血红蛋白含量。

由于指定颜色与刻度存在对应关系，进而可以推算出受试者的血红蛋白浓度。

比色法的优点是受试者可以准确知道血红蛋白含量。

测定血红蛋白的方法
测定血红蛋白的方法有多种，常用的包括：
1. 血红蛋白测定仪：利用光的吸收特性测定血红蛋白的浓度。

这种方法简单快捷，常用于临床血液检测。

2. 血红蛋白电泳：将血红蛋白在电场中分离，并根据不同类型的血红蛋白的迁移率判断其种类和含量。

这种方法常用于血红蛋白病变的诊断。

3. 血红蛋白比色法：通常使用氰化亚铁或盐酸血红蛋白比色法，将血红蛋白转化成可测量的化合物，并通过比色或比较色标定，测定血红蛋白浓度。

4. 血红蛋白溶血法：通过将红细胞破坏并释放出来的血红蛋白与特定试剂作用，从而测定血红蛋白的浓度。

这些方法各有优劣，具体选用的方法取决于实验目的和条件。

献血者血红蛋白检测（硫酸铜目测法）A.1 试验原理全血滴入标准硫酸铜溶液中，形成一层铜蛋白膜，包围在血滴外层。

观察全血在已知相对密度（比重）硫酸铜溶液中沉浮情况，可判定其相对密度（比重），从而确定其血红蛋白浓度。

A.2 试剂A.2.1 用于男性献血者（Hb≥120g/L）检测的硫酸铜溶液比重为1.0520。

A.2.2 用于女性献血者（Hb≥115g/L）检测的硫酸铜溶液比重为1.0510。

A.2.3 不同用途试剂瓶标识应便于区分A.2.4 采用商品化硫酸铜试剂的，按试剂说明书规定的条件储存，在有效期内使用。

A.2.5 硫酸铜溶液也可自行配制，配制方法见A.5，应保存配制记录。

A.2.6 硫酸铜溶液比重随温度变化而变化的，温度每上升2℃，比重下降0.0005。

在配制和使用时应注意这一特性。

A.2.7 每瓶（50 ml）硫酸铜溶液的可用于检测25人次。

A.3 标本要求A.3.1 新鲜采集的末梢血或静脉血，抗凝或不抗凝血液均可使用。

A.3.2 陈旧、溶血和严重乳糜的血液不可用来试验。

A.4 操作步骤和结果判断A.4.1 常规采集手指末梢血或静脉血。

A.4.2 在距硫酸铜液面上方1cm处垂直将1滴血液轻轻滴入，血滴应不含气泡。

A.4.3 在15秒内肉眼观察，判断结果：1）血滴很快下沉于瓶底，表明血液比重大于硫酸铜溶液比重，血红蛋白含量符合献血标准；2）血滴在硫酸铜溶液中部悬浮10 -15秒后下沉于瓶底，表明血液比重等于硫酸铜溶液比重，血红蛋白含量符合献血标准；3）血滴悬浮在硫酸铜溶液上部，15秒时不下沉，表明血液比重小于硫酸铜溶液比重，血红蛋白含量不符合献血标准。

A.4.4 记录检测结果。

A.5 硫酸铜溶液配制方法A.5.1 贮存液（比重为1.1000）配制称取硫酸铜结晶(CuSO4•5H2O，分析纯)170.0g置于大试剂瓶中，在1000ml容量瓶中加入蒸镏水至刻度，测量此蒸镏水的温度，根据表A-1查出与温度相应的蒸镏水毫升数，不足的容量用滴定管补加入容量瓶中。

血红蛋白测定实验报告血红蛋白是人体内一种重要的血液蛋白，它能够携带氧气到达身体各个器官和组织。

血红蛋白测定是临床常用的一种检验方法，能够提供有关患者体内氧合情况的重要信息。

本次实验旨在通过测定参与实验的人员的血液样本中的血红蛋白含量，来了解其体内氧合情况及贫血情况。

实验步骤：1. 收集血液样本：准备工作台和所需器材，包括带有一次性安全针头的注射器、耗材等。

选择一个适当的部位，通常是患者的指尖。

在清洁皮肤后，用注射器抽取一定量的血液样本。

2. 采用血红蛋白计测定仪测定血红蛋白含量：将血液样本倒入已经预装了染剂的检测管中，混合均匀。

将检测管放入血红蛋白计测定仪中。

根据血红蛋白计测定仪的说明书，操作仪器进行测定。

实验结果：本次实验中测得参与者A的血红蛋白含量为X克/升，参与者B的血红蛋白含量为Y克/升，参与者C的血红蛋白含量为Z克/升。

讨论与分析：通过本次实验，我们发现不同参与者的血红蛋白含量存在一定的差异。

血红蛋白含量的正常范围可能因个人的年龄、性别、健康状况和生活习惯等因素而有所不同。

血红蛋白在人体中起着至关重要的作用，它能够与氧气结合形成氧合血红蛋白，并将氧输送到身体各个组织和器官中。

因此，血红蛋白含量的变化往往与身体的氧合情况有关。

根据世界卫生组织的建议，成年男性的正常血红蛋白范围为130-170克/升，成年女性的正常血红蛋白范围为120-150克/升。

如果血红蛋白低于这个范围，就可能存在贫血的情况。

贫血是一种常见的疾病，其主要特征是机体内的红细胞数量或质量的减少，导致无法满足身体对氧气的需求。

贫血可以由多种原因引起，例如缺铁、缺维生素B12或叶酸、慢性疾病等。

血红蛋白测定不仅在临床中广泛应用，而且在科研领域也扮演着重要角色。

通过测定血红蛋白的含量，可以了解机体的氧合情况，为临床诊断和治疗提供重要依据。

总结：通过本次血红蛋白测定实验，我们了解到血红蛋白是人体中不可或缺的重要物质。

血红蛋白含量的测定可以为医生提供诊断和治疗贫血等疾病的依据，也为科研人员提供了重要的实验数据。

血红蛋白测定参考方法血红蛋白测定是常见的一种体检项目，通过测定血液中的血红蛋白含量，可以判断人体的贫血程度。

下面就来介绍一下血红蛋白测定的参考方法。

一、血红蛋白测定的原理血红蛋白测定是基于血红蛋白的吸收光谱原理进行的。

血红蛋白是一种含有铁元素的蛋白质，可以与光谱吸收的波长产生特定的反应。

在测定过程中，将血样与某种试剂混合后，产生的反应物质与血红蛋白结合，使血红蛋白发生变化。

根据血红蛋白的吸收光谱变化，可以测定出血红蛋白的含量。

二、血红蛋白测定的参考方法1.静脉血法静脉血法是一种比较准确的血红蛋白测定方法，适用于对血红蛋白含量有精确要求的实验室检测。

在采集静脉血时，需要注意消毒、穿刺和采血的技术操作规范。

2.指尖采血法指尖采血法是一种简单的血红蛋白测定方法，适用于现场采集和快速测定。

采血时需先用清水和消毒液清洗手指，再用采血针穿刺手指取血。

3.自动化测定方法现代医疗技术已经发展出一些自动化的血红蛋白测定仪器，可以快速、准确地测定血红蛋白含量。

这些仪器通常包含一个血样处理模块和一个光学检测模块，能够自动完成血样处理和血红蛋白含量的测定。

三、血红蛋白测定的注意事项1.在进行血红蛋白测定之前，务必清洗手部、消毒针头和瓶塞，避免细菌感染和交叉污染。

2.采集血样时，注意不要把气泡吸入采血器中，否则会影响测定的准确性。

3.参考值仅供参考，具体结果仍需要根据个体情况综合判断。

总之，血红蛋白测定是一项重要的身体健康指标，需要进行科学、规范的操作。

只有掌握了正确的测定方法，才能得到准确的结果，并为健康管理提供科学依据。

人血红蛋白检测金标准试剂条法
人血红蛋白检测金标准试剂条法是一种常用的血红蛋白检测方法。

该方法通过用试剂条测量红细胞中的血红蛋白含量，从而评估血红蛋白的浓度。

该方法的步骤如下：
1. 准备血液样本，并将其放置在试剂条上。

2. 在试剂条中的特定位置，血液样本与试剂发生反应，产生一种特定的颜色变化。

3. 通过颜色的深浅，使用试剂条上的相应标尺，来测量血红蛋白的浓度。

这种金标准试剂条法在临床血液学中应用广泛，是一种快速、简便和准确的血红蛋白检测方法。

它可以用于早期发现贫血、血红蛋白异常以及血液病的诊断和监测。

同时，金标准试剂条法还可以被用于疾病筛查、血液捐献者的评估以及孕妇血红蛋白的监测等领域。

血红蛋白的测定原理
血红蛋白是存在于红细胞内的一种蛋白质，起着运输氧气的重要作用。

测定血红蛋白的方法有多种，其中最常用的方法是通过光学吸收测定。

测定血红蛋白的原理基于血红蛋白与特定波长的光的吸收关系。

血红蛋白分子能够吸收特定波长的光线，而不吸收其他波长的光。

在常见的实验条件下，尤其是在546 nm波长处，血红蛋
白会吸收尽可能多的光。

为了测定血红蛋白的浓度，通常会将血样溶解或稀释成一定体积的溶液。

然后，使用一台分光光度计或类似仪器，将光线传递到溶液中。

光经过溶液时，部分光被吸收，其余的透过溶液而达到光电检测器。

检测器通过测量透过溶液的光的强度来计算血红蛋白的浓度。

为了准确测定血红蛋白的浓度，通常会对样品进行空白校正。

这意味着使用一个不含血红蛋白的溶液进行测量，并将其吸光度值从样品的吸光度值中减去。

这样可以消除与血红蛋白无关的干扰物质对测定结果的影响。

总的来说，血红蛋白的测定原理是利用血红蛋白对特定波长光的吸收能力来测定其浓度。

通过光学吸收测定的方法，可以快速、准确地测定血红蛋白的浓度，为临床医学和疾病诊断提供重要的参考信息。

用生化酶标仪测试血红蛋白的微量检测方法
使用生化酶标仪测试血红蛋白的微量检测方法
血红蛋白是人体不可缺少的物质，它能吸收和分解氧，支持心脏、肌肉和其他
器官而不断寻求氧气，从而维持身体的生命活动。

因此，对血红蛋白水平的检测是评估健康状况的重要指标之一。

生化酶标仪是一种实验室常用的分析仪器，能够快速准确地测定微量生化指标，包括血红蛋白。

它采用酶分光光度法，以及一种专门针对血红蛋白的反应物，能够有效检测血红蛋白含量。

生化酶标仪测试血红蛋白的具体操作步骤是：首先将样本放置于微量分析仪中，并加入专门针对其工作的混合液，之后在经过特定的温度和时间，它会将原来的血液样本物质发生变化，最后在生化酶标仪的读数上反映，显示出符合血红蛋白含量的数据，进而对血红蛋白的水平有一个初步的检测。

因此，使用生化酶标仪测试血红蛋白的微量检测方法是很有效的，既快速又准确。

它不仅改善了实验室环境，减少了大量的实验时间，而且使分析数据可以通过读取器快速准确地显示出来，从而及时发现血红蛋白水平异常，并进行有效的后续处理，为保障人们的健康状态做出了重要贡献。