高效液相色谱-质谱法同时测定辛夷提取物中4种木脂素成分 20141214
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辛夷芳香性双四氢呋喃成分研究李竣;梅枝意;罗会畏;黄先菊;杨光忠【摘要】为阐明辛夷药材中芳香性双四氢呋喃化学成分,采用溶剂萃取、高速逆流分段、大孔树脂和半制备高效液相色谱分离和纯化,得到了4个高纯度芳香性双四氢呋喃木脂素单体化合物。
通过1 H NMR、13 C NMR、MS等现代波谱学方法分别鉴定为:松脂醇二甲醚(1),木兰脂素(2),里立脂素B二甲醚(3),epimagnolin B(4)。
辛夷芳香性成分的鉴定为其在医药、食品工业中的应用提供了更好的理论依据。
%In order to investigate the ditetrahydrofuran constituents of spicery from Magnolia denudata Desr., solvent extraction, high speed counter-current chromatography ( HSCCC ), macroporous resin and semi-preparative high performance liquid chromatography ( HPLC) were used and four highly purified aromatic lignans were obtained .They were identified as pinoresinol dimethy ether (1), magnolin (2), lirioresinol-B dimethyl ether (3) and epimagnolin B (4).The structures of these compounds were elucidated based on the 1 H NMR,13 C NMR,and MS characterization .The identification of these aromatic components of Magnolia denudate Desr.provided a theoretical basis for its application in medicine and food industry .【期刊名称】《中南民族大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】4页(P37-40)【关键词】辛夷;高速逆流色谱;化学成分;木脂素【作者】李竣;梅枝意;罗会畏;黄先菊;杨光忠【作者单位】中南民族大学药学院,武汉430074;中南民族大学药学院,武汉430074;中南民族大学药学院,武汉430074;中南民族大学药学院,武汉430074;中南民族大学药学院,武汉430074【正文语种】中文【中图分类】R284.1辛夷为木兰科植物望春花、玉兰或武当玉兰的干燥花蕾,花蕾紧凑,芳香浓郁,是一种名贵的香料和化工原料[1].作为传统中药,它能祛风寒、通鼻窍,可治疗风寒头痛、鼻塞、鼻渊、鼻流浊涕等[2],因其毒性低、香型优于其他植物,除作为药用外还可替代人工合成的香料,用于食品加工、日常生活用品和化妆品[3].天然产物的香料以萜类、倍半萜类及其含氧衍生物为主要组成的油状液体,以气味和挥发油含量的高低来评价其质量的优劣.辛夷香料常通过水蒸气蒸馏法、溶剂法和超临界流体萃取等方法制取挥发油,但水蒸气蒸馏法提取挥发油成本较低,常破坏挥发油中热敏性香气成分,获得的精油与原植物香气差异很大,各种萃取方法也常导致挥发油中含有其他脂溶性杂质.辛夷香料提取物中除萜类成分外,尚含有化学组成不清楚的小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物[4],挥发油成分检测主要通过GC、GC-MS等方法,不能在GC中气化的脂肪族和芳香族脂溶性杂质则难以被检测出来.目前对香料组成以外的脂溶性成分和生物活性尚缺乏全面了解,阻碍了辛夷挥发油在医药、食品和化妆品生产的使用推广.为更好地开发辛夷的香料成分,了解辛夷挥发油中脂溶性杂质的组成,本文选择脂溶性溶剂萃取辛夷挥发油部分,经过半制备高速逆流分段、半制备高效液相分离纯化,从辛夷香气部位中分离得到了4个木脂素成分,分别为松脂醇二甲醚(1)、木兰脂素(2)、里立脂素B二甲醚(3)、epimagnolin B(4).对辛夷挥发油中其他成分的鉴定也为其香料成分在食品、医药工业中的应用提供了更好的理论依据.1.1 仪器高速逆流色谱仪(TBE-300B型,上海同田生化技术有限公司),核磁共振仪(Bruker AM-400、Bruker DRX-500型, 美国Brucker公司),质谱仪(Micromass ZabSpec MS System, ESI源, 英国Micromass公司),色谱柱(YMC-Pack ODS-A, 250 mm×10 mm),色谱仪(Ultimate 3000型, VWD、DAD detector, 美国戴安),旋转蒸发仪(RE 52-98型,上海亚荣生化仪器厂),循环真空泵(SHZ-III型,上海亚荣生化仪器厂),电子天平(CP214型, 奥豪斯仪器有限公司),电热鼓风干燥箱(101-OAB型, 天津市泰斯特仪器有限公司),三用紫外分析仪(ZF-6型,上海嘉鹏科技有限公司).1.2 试剂D101大孔树脂(三星安徽树脂科技有限公司),薄层层析硅胶板(青岛海洋化工厂),HSCCC分离纯化、萃取和大孔树脂分离所用试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司),高效液相所用甲醇、乙腈均为色谱纯(Tedia Company, USA),蒸馏水. 1.3 材料实验所用辛夷药材全部购置于湖北金贵中药饮片有限公司,经中南民族大学药学院李竣副教授鉴定为木兰科木兰属玉兰(Magnolia denudate Desr.)的干燥花蕾.2.1 辛夷脂溶性部位的提取分离3.2 kg 辛夷粉末用95%乙醇回流提取3次,每次2 h,抽滤,合并滤液,旋蒸减压浓缩,得约470 g深棕色浸膏,将浸膏以水混悬,用氯仿萃取,蒸干得浸膏,得氯仿层提取物241 g.取氯仿层浸膏75 g以D101大孔树脂层析柱分离,50%乙醇上样,分别用60%、80%和100%乙醇洗脱得到35.83 g和24.24 g的60%和80%乙醇部位为.取500 mg大孔树脂60%乙醇洗脱组分浸膏,用5 mL φ(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水)=4∶6∶4∶6 的溶液的下相溶解,制得样品溶液,将φ(正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水)=4∶6∶4∶6这一溶剂体系的上相(固定相)和下相(流动相)按照1︰1的体积比比例泵入高速逆流色谱仪(HSCCC)的分离管路,待管路完全充满两相溶液后,调整转速至900 r/min(正向旋转),同时将作为流动相的下相溶剂以3 mL/min的流速泵入分离管路.大约60 min之后,当两相溶剂体系达到动态分配平衡时,通过进样阀注入样品溶液.整个分离过程的温度由恒温循环器控制在25℃.检测波长为254 nm. HSCCC色谱图数据从进样后开始采集,根据色谱图一次收集各个部分,将270~300 min收集的组分(组分I,见图1).2.2 HPLC制备色谱分离YMC-Pack ODS-A色谱柱(250 mm×10mm,5μm),柱温40℃,流动相:0~100% 甲醇-水为流动相;梯度洗脱,检测波长为254 nm,进样量100 μL,洗脱时间26 min,理论板数按峰计算不低于3000.通过制备HPLC分离(见图2),得到4个化合物松脂醇二甲醚1(45.2 mg),木兰脂素2 (66.7 mg),里立脂素B二甲醚3 (15.6 mg),epimagnolin B 4 (17.4 mg) (见图3).化合物1:松脂醇二甲醚,无色油状物,ESI-MS m/z:386[M]+,分子式为C22H26O6. 1H NMR数据见表1,表中数据与文献[5]松脂醇二甲醚的数据相符,故鉴定为松脂醇二甲醚.化合物 2:木兰脂素,无色油状物,ESI-MS m/z: 416[M]+,分子式为C23H28O7.1H NMR和13C NMR数据见表1,表中数据与文献[6]木兰脂素的数据相符,故鉴定为木兰脂素.化合物3:里立脂素B二甲醚,无色油状物, ESI-MS m/z:446 [M]+,分子式为C24H30O8. 1H NMR数据见表1,以上数据与文献[7]里立脂素B二甲醚的数据相符,故鉴定为里立脂素B二甲醚.化合物4:epimagnolin B,无色油状物,ESI-MS m/z:416[M]+,分子式为C23H28O7. 1H NMR,13C NMR数据见表1,以上数据与文献[8]epimagnolin B的数据相符,故鉴定为epimagnolin B.随着人们生活质量的提高,绿色的有机的香料正在逐渐受到人们的青睐,从天然产物中提取、研究与开发高效、安全的天然香料,是当今食品添加剂研究领域的热点之一.同时,运用经典的提取分离方法,筛选出具有较好抗菌效果的中草药,并解析其化学组成成分,为今后食品添加剂的合理高效应用提供理论依据.食品的防腐保鲜始终是一个亟待解决的重要问题[9],辛夷挥发油能明显改善和修饰卷烟香气, 有降低烟气的粗糙度、改善吸味、减轻刺激性、去除杂气的作用[10] .本文从辛夷香料中分离得到4个木脂素类化合物,木脂素类化合物作为一种植物雌激素已引起营养学家、食物化学家和药物学家的普遍关注,具有调节激素平衡、抗氧化活性、抗肿瘤活性、等多种生物活性[11].辛夷香料成分中尚有化学组成不清楚的小分子脂肪族、芳香类化合物.挥发油常规的检测方法GC,GC-MS难以检测其不挥发的杂质,若不能预知未知杂质的生物活性,则其安全性难以保证.通过HSCCC-HPLC制备的方法能快速检验未知成分,具有操作简单、分离纯度高、制备量大等特点,对快速简单制备未知的天然产物成分具有实际使用价值.【相关文献】[1] 程朝晖,龚春晖,金波,等.辛夷超临界萃取物的气相色谱-质谱分析[J].中国食品添加剂, 2003,3(2):109-111.[2] 南京中医药大学.中药大辞典(上册)[M].上海:上海科学技术出版社, 2006: 1616-1619.[3] 赵铭钦. 卷烟调香学 [M]. 北京: 科学出版社,2008.[4] 汤天曙, 张鑫, 熊卫东,等. 辛夷挥发油的提取及其化学组分的研究[J]. 精细与专用化学品,1997,18:1-5.[5] Kakisawa H. Lignans in flower buds of Magnolia fargesii. [J].Phytochemistry, 1972, 11(7): 2289-2293.[6] Miyazawa M,Kasahara H,Kameoka H. Phenolic lignans from flower buds of Magnolia fargesii.[J].Phtochemistry,1992,31(10): 3666-3668.[7] Li J,Tanaka M,Kurasawa K,et al.Lignan and Neolignan Derivatives from Magnolia denudate[J].Chem Pharm Bull,2005,53(2): 235-237.[8] Kim J Y,Lim H J,Lee da Y. In vitro anti-inflammatory activity of lignans isolated from Magnolia fargesii [J]. Bioorg Med Chem Lett,2009,19(3):937-940.[9] 蒋志国. 抗果蔬致腐真菌中草药的筛选及有效成分的分析[J].中国食品添加剂,2006(1):151-154,92.[10] 李晓,纪晓楠,宋豪,等. 辛夷再造烟叶对卷烟烟气成分的影响[J].光谱实验室,2013,30 (1):238-241.[11] 李欣,袁建平,刘昕,等. 木脂素----一类重要的天然植物[J].中国中药杂志,2006,31 (24):2021-2025,2089.。
中药制剂有效成分含量测定中高效液相色谱法的应用分析中药类型包括中药成方制剂、中成药、单味制剂等,与西药相比,中药制剂不良反应小,用量少,且具有一定持久性和高效性。
但中药制剂所含成分较多,制备工艺复杂,在中药制剂质量控制上很难做到面面俱到,造成中药制剂质量良莠不齐。
为保证中药制剂质量,该研究采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对中药制剂有效成分含量测定中的应用与发展进行分析研究,并提出观点,以供参考。
标签:中药制剂;含量测定;高效液相;色谱法中药制剂质量检测中,一般将具有生理活性的化学成分作为控制标准与质量评价,以衡量产品是否稳定、质量是否达标等。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种具有分析速度快、检测灵敏度高、分离效率高、应用范围广、操作方便、重现性高等诸多特点的成分含量测定方法,可用于分析样品沸点、大分子量有效成分、热不稳定性等,已成为目前控制中药制剂有效成分的重要手段。
该研究对HPLC法在中药制剂中药苷类、萜类、黄酮类、生物碱类、醌类、木脂素类、香豆素类、有机酸类等8种有效成分含量测定应用进行介绍。
1 中药苷类成分含量测定苷类在是天然药物研究中不可忽视的一类成分,其广泛分布于中药界,生理活性多样,结构不一,国内外均有对采用HPLC法测定中药苷類成分含量的文献报道[1]。
高广慧等[2]采用HPLC法对中芍药苷含量进行测定,将提取与分离工艺优化,有效分离芍药苷成分,方法准确可靠,能够较好控制中成药、中药材中芍药苷质量。
苏晓楠等[3]通过HPLC法,快速、准确测定了芒果苷、新芒果苷及知母皂苷成分的含量,为中药材质量控制的全面性奠定了坚实基础。
陈华等[4]用HPLC法测定黄芩苷含量,通过精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验及样品含量测定,结果显示样品分离度及重现性好,峰型佳,无杂质峰干扰,保留时间稳定,精密度、稳定性、重复性均符合标准。
Vol. 35,No. 12Dec. 20202020年12月 第35卷第12期中国粮油学报Journal of the Chinese Cereals and Oils Association 高效液相色谱法同时测定蔷薇科 木本植物油中的苯甲醇和苯甲醛朱琳1张蕊1郝希成1王松山1王松雪1 郭宝元1薛雅琳1张东1刘鑫辉2郭咪咪1(国家粮食和物资储备局科学研究院1,北京100037)(吕梁学院2,吕梁033000)摘 要 建立了一种同时测定蔷薇科木本植物油中苯甲醇和苯甲醛的高效色谱法方法。
样晶经甲醇提取后,采用具有紫外检测器的液相色谱仪测定,色谱条件:Agilent SB - C18柱(250 mm X 4. 6 mm,5 »m )色谱柱,甲醇:0. 02%磷酸水=30: 70为流动相,柱温为30 °C ,流速为1 - 0 mL/min,苯甲醇检测波长为210 nm,苯甲 醛检测波长为250 nm 。
结果表明,苯甲醇加标平均回收率为91.8% ~93.7%,精密度为0.6% ~2.0% ;苯甲醛加标平均回率为96.5% ~97.7%,精密度为0.2% ~2.9% ;苯甲醇的检出限为0.41 mg/kg ,定量限为1.23 mg/kg ;苯甲醛的检出限为0. 33 mg/kg ,定量限为0. 98 mg/kg 。
本方法不仅回收率高,重复性好,而且灵敏度 高,可用于测定杏仁油、长柄扁桃油等蔷薇科木本植物油中的苯甲醇和苯甲醛含量,为科学评价蔷薇科木本油脂产晶的风味提供了技术支撑。
关键词杏仁油长柄扁桃油苯甲醇苯甲醛高效液相色谱中图分类号:TS227文献标识码:A 文章编号:1003 -0174(2020)12 -0170 -07网络首发时间:2020 -11 -04 14:00:44网络首发地址:https ://kns . cnki. net/kcms/detail/11.2864 - TS. 20201103 - 1112- 016- html杏仁油和长柄扁桃油均是具有杏仁风味的蔷薇科木本植物油,其固有的杏仁风味是评价杏仁油和长柄扁桃油品质的重要指标之一,也是消费者选择尝试新油种的重要依据,根据文献报道,这种浓郁的杏仁味主要是由苯甲醇和苯甲醛等多种风味物质协 同作用的结果[一4]。
高效液相色谱蒸发光散射测定银杏叶软胶囊中4种萜类内酯
的含量
沙东旭;张满来
【期刊名称】《中国药品标准》
【年(卷),期】2004(5)3
【摘要】目的:用HPLC-ELSD测定银杏叶软胶囊中银杏内酯A、B、C及白果内酯的含量.方法:色谱柱填料为十八烷基键合硅胶,流动相为四氢呋喃-甲醇-水(11 : 19:70);漂移管温度为109℃,戴气流速为2.9L·min-1.结果:银杏内酯A、B、C及白果内酯分别在2.994μg~14.970μg、2.967μg~14.835μg、2.955μg~
14.775μg5.952μg~29.760μg线性关系良好;银杏内酯A、B、C及白果内酯的平均回收率分别为97.2%、97.5%、97.6%、98.3%.结论:该方法简便、准确、分离效果好;本方法可用于银杏叶软胶囊的质量评价.
【总页数】3页(P62-63,39)
【作者】沙东旭;张满来
【作者单位】辽宁省药品检验所,中药室,沈阳,110023;辽宁省药品检验所,中药室,沈阳,110023
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.HPLC-ELSD法测定银杏叶软胶囊中萜类内酯的含量 [J], 张亚中;周亚球;王娟;陶建生
2.银杏叶软胶囊中银杏黄酮醇苷和总萜类内酯含量测定 [J], 马敬仪;董金香
3.高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定银杏叶片中4种萜类内酯含量 [J], 肖飞;谭永霞;王永平;向阳;赵娟
4.高效液相色谱及蒸发光散射检测器法测定银杏叶片中萜类内酯的含量 [J], 杨艳芳;刘宇;刘焱文
5.高效液相色谱法测定贵州产银杏叶提取物中萜类内酯的含量 [J], 彭全材;杨占南;胡继伟;钟丽;蒋翠红
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高效液相色谱法测定贯叶连翘提取物中4种成分的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定贯叶连翘提取物中金丝桃素、金丝桃苷、芦丁和槲皮素含量的方法。
方法色谱柱为C18柱( 250 mm×4.6 mm,5 μm);测定金丝桃苷、芦丁和槲皮素时,流动相为甲醇-乙睛-0.3%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长360 nm;测定金丝桃素时,流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液,检测波长580 nm。
结果金丝桃苷,槲皮素,芦丁、金丝桃素线性范围分别为1.97~20.3 μg・ml-1 (r=0.999 2),2.47~24.7 μg・ml-1(r=0.999 1),2.25~22.5 μg・ml-1(r=0.999 1) , 0. 08~0.4 μg・ml-1(r=0.999 5),方法回收率均不低于98%。
结论该方法简便、准确、重复性好,可用作贯叶连翘提取物中此4种成分的含量测定。
【关键词】贯叶连翘提取物金丝桃素金丝桃苷高效液相色谱法Abstract:ObjectiveTo develop a rapid high-performance liquid chromatography method for determination of hypericin, hyperoside,rutin and quercetin in Hypericum perforatum L. extracts.MethodsHPLC method was employed on C18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm). The hyperoside, rutin and quercetin were detected at 360 nm, eluted with gradient three mobile phase (methanol-acetonitrile-0.3% phosophoric acid). The Hypericin was detected at 580 nm and the mobile phase consisted of methanol and 0.02 mol·L-1 KH2PO4.Results The HPLC method showed a good linear relationship in the range of 1.97~20.3 μg/ml(r=0.999 2) for hyperoside, 2.47~24.7 μg/ml (r=0.999 1) for quercetin, 2.25~22.5 μg・ml-1 (r=0.999 1) for rutin and 0.08~0.4μg/ml(r=0.999 5) for hyperin. Recoveries for the four components were all above 98%.CondusionThis HPLC method is simple, accurate and repeatable and can be used for determination of the four components in Hypericum perforatum L. exatracts.Key words:Hypericum perforatum L. extracts; Hyperin; Hyperoside; HPLC贯叶连翘Hypericum performatum L.为藤黄科金丝桃属多年生草本植物,其味苦、辛,性平,可清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎[1],国外在抗抑郁症方面也有广泛应用[2]。
The Simultaneous Determination ofFour Lignans in Schisandra Chinensis by HPLCTANG Qi 1,OUYANG yun 1,HE Xue 1,WANG Hui 2,ZHENG Jifang 1,XU Xiaona 1,3*(1.SGuilin Medical College 〔School of Public Health 〕,Guilin 541199,China ;2.South China University 〔School of Public Health 〕,Hengyang 421001,China ;3.The Guangxi Key Laboratory of Environmental Exposomics and Entire Lifecycle Health ,Guilin 541199,China )Abstract :Objective :To establish a high performance liquid chromatography (HPLC )method for simultaneous determination Schizandrol A and other three lignans in Schisandra Chinensis.Methods :HPLC separations were carried out on a Sepax C18column (250mm ×4.6mm ,5μm )by gradient elution using methanol ,acetonitrile and water as mobile phase.The flow rate was 1.0mL/min ,and the column temperature was 30℃.The injection volume was 20μL and the detection wavelength was 220nm.Results :The linear relationships of Schizandrol A ,Schisantherin A ,Schizandrin A and Schizandrin B were good within the ranges of 0.36~13.20,0.39~14.86,0.44~16.63,and 0.32~11.88mg/g ,relatively.The results of recovery ,precision ,stability and so on all met the requirements of methodological determination.The content of the four lignans tested in 12batches of Schisandra Chinensis samples from different producing areas was different ,with the RSD of 0.76%~3.28%.Conclusin :The established method can be applied to determine the four lignans in Schisandra Chinensis simultaneously.Key words :Schisandra Chinensis ;HPLC ;Schizandrol A ;Schisantherin A ;Schizandrin A ;Schizandrin B高效液相色谱法同时测定五味子中的4种木脂素成分唐琪1,欧阳云1,和薛1,王辉2,郑济芳1,徐小娜1,3*(1.桂林医学院〔公共卫生学院〕,广西桂林541199;2.南华大学〔公共卫生学院〕,湖南衡阳421001;3.广西环境暴露组学与全生命周期健康重点实验室,广西桂林541199)【摘要】目的:建立高效液相色谱法(HPLC )同时测定五味子中五味子醇甲等4种木脂素成分的含量。
高效液相色谱法测定北五味子中5种木脂素含量程振玉;杨英杰;刘治刚;徐春义【摘要】应用高效液相色谱法测定北五味子中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素等5种木脂素的含量。
北五味子样品(1.000 g)在70℃温度下用甲醇(20 mL)微波辅助提取5 min。
分取部分提取液,以Hypersil ODS C18色谱柱为固定相,用乙腈和水以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱,在检测波长225 nm 处进行测定。
5种木脂素在一定的质量浓度范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.0292~0.0507 mg·L-1之间。
以样品为基体,在3个浓度水平加入混合标准溶液进行回收试验,测得回收率在95.3%~101%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%~2.4%之间。
%HPLC was applied to the determination of 5 lignans,i.e.schisandrol A,schisantherin A, deoxyschisandrin,schisandrin B and schisandrin C in Schisandra chinensis (turcz.)baill.The sample (1.000 g) was extracted in microwave extraction device with methanol (20 mL)for 5 min at the temperature of 70 ℃,and an aliquot of the extract was separated on Hypersil ODS C18 chromatographic column,using mixtures of acetonitrile and water with different mixing ratios as mobile phase in the gradient elution.UV-detection at 225 nm was adopted in the determination.Linear relationships between values of peak area and mass concentration of the 5 lignans were kept in definite ranges,with detection limits (3S/N)in the range of 0.029 2-0.050 7 mg·L-1 .Tests for recovery were made by addition of mixed standard solution at 3 concentration levels to 6samples as matrixes,giving values of recove ry and RSD′s (n=6)in the ranges of 95.3%-101% and 1.1 %-2.4 % respectively.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】4页(P575-578)【关键词】高效液相色谱法;木脂素;北五味子【作者】程振玉;杨英杰;刘治刚;徐春义【作者单位】吉林化工学院,吉林 132022; 东北师范大学,长春 130024;吉林化工学院,吉林 132022;吉林化工学院,吉林 132022;吉林化工学院,吉林 132022【正文语种】中文【中图分类】O652.63北五味子是五味子科植物五味子的干燥成熟果实,主要产于吉林、辽宁、黑龙江、内蒙古等省[1]。
高效液相色谱法同时测定五味子中8种木脂素含量
李晓霞;刘忠英;孙严彤;刘晓;汪戎锦
【期刊名称】《人参研究》
【年(卷),期】2022(34)3
【摘要】目的建立并优化一种能够同时测定五味子药材中8种木脂素含量的高效
液相色谱方法,为五味子药材的质量控制方法研究提供依据。
方法采用高效液相色
谱方法,同时测定五味子中五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰基戈米辛H、五味子
酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素含量,通过专属性、线性、稳定性、精密度和回收率实验进行方法学验证,并利用该方法对20批不同产地的五味子药材进行木脂素含量的测定。
结果建立的高效液相色谱检测方法专属性强、准确度和精密度高,线性和稳定性好,能够应用于木脂素类化合物的含量测定。
结论
本研究所建立的木脂素类化合物含量测定方法为综合评价药材的质量、完善五味子质量标准提供科学依据。
【总页数】5页(P9-13)
【作者】李晓霞;刘忠英;孙严彤;刘晓;汪戎锦
【作者单位】吉林大学药学院药物分析教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定北五味子中木脂素的含量
2.高效液相色谱法测定南、北五味子中4种木脂素含量
3.高效液相色谱法测定南、北五味子中木脂素含量
4.高效液相色谱法测定北五味子中5种木脂素含量
5.高效液相色谱法测定人参蜂王浆口服液中五味子木脂素成分的含量
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高效液相色谱法测定北五味子中木脂素的含量曾晓丹;杨英杰;王彤珊【摘要】[ Objective ] A method was developed for simultaneous determination of three lignans ( sehisandrin A, sehisantherin B, deoxyschizandrin, ) in Fructus schisandrae chinensis by high performance liquid chromatography. [ Method] Methanol and water was applied as mobile phase with isocratic ehltion. The samples were separated and qualitatived by standard through retention time. [ Results ] There were good linear relationships between the peak area and concentration for the three lignans, and the linear range for which were 0 - 156.0, 0 - 138.0, 0 - 120.4 mg/L respectively. The detection limits for the three lignans were 0. 202,0. 204,0. 338 μg/L respectively. This method is easy andsensitive.[ Conclusion] The efficiency of separation and the results of determination were satisfactory for the real samples.%[目的]建立同时测定北五味子中3种木脂素成分(五味子甲素、五味子乙素和五味子酯甲)的分析方法.[方法]以甲醇和水为流动相,采用等度洗脱对标样以及供试品进行分离,并且通过标准品以及保留时间进行定性.[结果]五味子甲素、五味子乙素以及五味子酯甲分别在0~156.0、0~138.0、0~120.4 mg/L范围内呈现良好的线性关系,检出限分别为0.202,0.204,0.338μg/L.[结论]该方法操作简单,分离效果好,灵敏度高.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)014【总页数】2页(P8355-8356)【关键词】高效液相色谱法;五味子甲素;五味子乙素;五味子酯甲;五味子;木脂素【作者】曾晓丹;杨英杰;王彤珊【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】S567北五味子(Fructus schisandrae chinensis)为木兰科植物五味子[Schisandra chinesis(Turez.)Baill]的干燥成熟果实,产于吉林、辽宁、黑龙江等地,能收敛固涩、益气生津、补肾宁心[1]。
DOI :10.11895/j.issn.0253⁃3820.140773高效液相色谱⁃质谱法同时测定辛夷提取物中4种木脂素成分赵鑫1 杨光2,3 郑国帅2,3 杭太俊*1 范国荣*2,31(中国药科大学药学院,南京210009) 2(第二军医大学药学院,上海200433)3(上海市药物(中药)代谢产物研究重点实验室,上海200433)摘 要 建立了高效液相色谱⁃质谱⁃电雾式检测器(HPLC⁃MS⁃CAD)联用技术同时测定辛夷中4种木脂素类成分的定量分析方法㊂采用YMC⁃Pack ODS⁃A(250mm ×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇⁃水梯度洗脱,柱温25℃,流速1mL /min,检测波长278nm,紫外检测器后3∶7分流,分别进入质谱和电雾式检测器进行检测㊂以木兰脂素为内参物,建立松脂素二甲醚㊁里立脂素B 二甲醚和表木兰脂素A 与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评㊂同时采用外标法测定辛夷提取物中4种木脂素成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证所建立方法的准确定㊂本方法对松脂素二甲醚㊁木兰脂素㊁里立脂素B 二甲醚和表木兰脂素A 4种木脂素类成分的检出限分别为0.34,0.55,0.50和0.58mg /L,线性范围分别为6.8~270mg /L,11~546mg /L,2.0~100mg /L 和2.3~116mg /L,相关系数为0.9995~0.9998,加样回收率(n =9)为98.2%~99.5%,采用校正因子计算的含量值与外标法计算的含量值之间无显著差异,所建立的方法准确㊁可行,可用于中药辛夷的质量评价㊂关键词 辛夷;高效液相色谱;质谱;电雾式检测器;木脂素 2014⁃09⁃01收稿;2014⁃10⁃11接受本文系国家自然科学基金资助项目(No.81173019)*E⁃mail:hangtj@,guorfan@1 引 言辛夷(Magnoliae Flos )为木兰科植物望春花(Magnolia biondii Pamp.)㊁玉兰(Magnolia denudataDesr.)或武当玉兰(Magnolia sprengeri Pamp.)的干燥花蕾,具有散风寒,通鼻窍之功效,临床上主要用于风寒头痛,鼻塞,鼻渊,鼻流浊涕[1]㊂辛夷中除了挥发油成分,木脂素类成分也是一类主要成分㊂研究表明,辛夷的木脂素类成分具有多种生理活性,包括抗炎免疫㊁抗菌㊁抗病毒㊁抗衰老和杀虫等作用,其中木兰脂素(Magnolin)㊁松脂素二甲醚(Pinoresinol dimethlether,PDE)㊁里立脂素B 二甲醚(Lirioresinol B dimethylether,LDE)等木脂素成分具有拮抗血小板活性因子(PAF)活性的药理作用,是辛夷抗炎作用的有效成分[2,3]㊂中国药典2010年版仅对辛夷药材中的挥发油含量和木兰脂素含量进行了含量测定,但传统的单一有效成分或指标性成分的定量分析模式已不能满足中药现代化对于质量控制的技术要求㊂对于木脂素类成分的多指标含量测定多采用高效液相色谱法(HPLC⁃UV),不同木脂素类成分的含量差异性及其响应的不一致性会对提取条件和色谱分析条件的选择造成很大限制,同时部分中药对照品的不易获得也对多成分含量测定造成一定的局限性[4,5]㊂为了解决中药质量控制多成分检测中标准对照品不易得到的困难,王智民等[6]基于HPLC⁃UV 分离检测技术提出了 一测多评”(Quantitative analysis of multicomponents by single marker,QAMS)新方法,即仅需用1种中药活性成分作为标准对照品(供应量大),通过其与其它主要成分间的相对校正因子(Relative correction fac tors,RCF)的计算,可以同步实现中药多成分的含量测定㊂新型电雾式检测器,又称荷电气溶胶检测器(Charged aerosol detector,CAD),其检测信号不依赖于被检测物质的化学结构,对不同结构的化合物有统一的响应,被誉为新型通用型检测器,已成功应用于中药活性成分含量测定与指纹图谱研究[7,8]㊂为了探讨基于HPLC⁃CAD 分离检测技术进行中药多组分质量控制的 一测多评”方法的可行性与优越性,本研究以辛夷药材提取物中木脂素类成分为研究对第42卷2014年12月分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry第12期1804~1810象,采用HPLC⁃MS⁃CAD 的色谱联用技术,在辛夷药材提取物中木脂素类成分MS n 鉴定的基础上,对辛夷木脂素4个指标性成分进行CAD 定量分析,成功建立了基于CAD 检测特点的辛夷药材提取物质量控制的QAMS 新方法㊂2 实验部分2.1 仪器与试剂Ultimate 3000DGLC 高效液相色谱仪系统,包括SRD⁃3600脱气机㊁DGP⁃3600SD 双三元梯度泵㊁WPS⁃3000SL ANALYTICAL 自动进样器㊁TCC⁃3000RS 柱温箱㊁DAD⁃3000二极管阵列紫外检测器㊁PD715⁃102十通切换阀;LCQ⁃Fleet 质谱仪;Corona Ultra 电喷雾检测器(CAD);采用Xcalibur 2.6.0数据工作站控制LCQ⁃Fleet 质谱仪,采用Chromeleon7数据工作站处理CAD 数据;ASE350加速溶剂萃取仪(赛默飞世尔科技有限公司)㊂甲醇(色谱纯,美国天地有限公司);实验用水为Hi⁃Tech 水纯化系统制备的超纯水㊂木兰脂素对照品(含量≥98%,批号20130322,上海源叶生物科技有限公司);松脂素二甲醚㊁里立脂素B 二甲醚和表木兰脂素A 对照品由实验室高速逆流自制,纯度均大于≥98%(LCQ⁃Fleet 质谱仪定性检验,高效液相色谱面积归一化法进行纯度检测);5批辛夷药材饮片(编号1~5)购于上海市某药房㊂2.2 分析条件2.2.1 色谱分析条件色谱柱 YMC⁃Pack ODS⁃A(250mm ×4.6mm,5μm);流动相(双三元梯度泵,左泵):A 为甲醇,保持100%甲醇等度运行,流速0.7mL /min;流动相(双三元梯度泵,右泵):A 为甲醇,B 为水;梯度洗脱:0~30min,35%A;30~45min,35%~40%A;45~65min,40%A;流速:1mL /min,进入紫外检测器后3∶7分流,0.3mL /min 流速进入质谱检测器,0.7mL /min 流速进入CAD 检测器;检测波长278nm;柱温25℃;进样量20μL㊂2.2.2 质谱分析条件 采用ESI 离子源,正离子模式检测,喷针电压4500V,毛细管电压35V,干燥气(N 2)流速10.5L /min,扫描质量范围m /z 200~500,雾化温度350℃㊂采用一级全扫质谱方式获得总离子流图,同时进行DDS 数据依赖性扫描获得多级质谱碎片信息㊂2.2.3 电喷雾检测器(CAD )分析条件 电喷雾检测器参数设置:雾化温度35℃,氮气压力0.24MPa,量程100pA,过滤模式High,采集频率5Hz㊂2.3 实验方法2.3.1 辛夷药材提取物的制备 精密称取辛夷药材粉末(过50目筛)约1g,置10mL 不锈钢萃取池(下端加装纤维滤膜)中,将萃取池放在固定装置上,设置提取参数(萃取温度120℃;静态萃取时间10min;循环2次;冲洗体积70%;氮气吹扫时间60s;70%乙醇为萃取剂),然后进行萃取,萃取液用70%乙醇定容至50mL;再准确移取该溶液1mL,用70%乙醇定容至5mL,最后过0.22μm 微孔滤膜,取续滤液1mL 作为辛夷药材提取物的供试品溶液㊂2.3.2 对照品溶液的制备 称取木兰脂素10.91mg,用甲醇溶解并定容至5mL;称取松脂素二甲醚13.54mg㊁里立脂素B 二甲醚5.03mg 和表木兰脂素A 5.82mg,分别用甲醇溶解并定容至10mL,摇匀,配成4个对照品储备液㊂2.3.3 实验操作 按照色谱分析条件对辛夷药材提取液中的木脂素类成分进行分析,双三元梯度泵右泵为分析梯度泵,用于色谱分析,双三元梯度泵左泵为CAD 检测器的柱后补偿泵,用于增加有机相比例,提高雾化效率,增加响应值㊂进样后,通过切换阀将前25min 极性较大的物质切换到废液,25min 时切换回样品分析流路,进入紫外检测器分析,并在紫外检测器后3∶7分流,0.3mL /min 流速进入质谱检测器进行成分鉴定,0.7mL /min 流速进入CAD 检测器进行含量测定㊂3 结果与讨论3.1 辛夷药材提取物中木脂素类成分定性鉴定在上述分析条件下,辛夷药材提取物中木脂素类成分的UV 图和MS 总离子流图如图1㊂5081第12期赵鑫等:高效液相色谱⁃质谱法同时测定辛夷提取物中4种木脂素成分 图1 辛夷药材提取物中木脂素类成分的MS 总离子流图(A)和UV 图(278nm)(B)Fig.1 HPLC⁃mass spectrometry(MS)⁃total ion current (TIC)(A)and high performance liquid chromatogrpahy⁃ultraviolet (HPLC⁃UV)(278nm)(B)chromatogroms of Magnoliae Flos extract从图1可见,辛夷药材提取物中共分离出7个化学成分,各化学成分色谱峰正离子全扫描(m /z 200~500)一级质谱及相应的二级(MS 2)㊁三级(MS 3)质谱图见图2㊂保留时间约为49.04,52.70和58.70min 的3个化学成分的色谱峰由于含量较低,未获得三级质谱(MS 3)㊂根据文献[9,10]报道,最终鉴定辛夷药材提取物中4种化学成分分别为松脂素二甲醚㊁木兰脂素㊁里立脂素B 二甲醚和表木兰脂素A,ESI⁃MS n 检识的4个化合成分的相关信息见表1㊂ 图2 辛夷药材提取物中4个化学成分的质谱图Fig.2 Mass spectra of Magnoliae Flos extractA.松脂素二甲醚(PDE);B.木兰脂素;C.里立脂素B 二甲醚;D.表木兰脂素A㊂A:Pinoresinol dimethylether (PDE);B.Magnoli;C .Lirioresinol B dimethylethe(LDE);D:Epi⁃magnoli A.3.2 辛夷药材提取物中木脂素类成分含量测定结果按照2.2节电喷雾检测器的分析条件对辛夷药材提取物中4种木脂素类成分进行含量测定,CAD色谱图见图3㊂6081 分析化学第42卷表1 辛夷药材提取物ESI⁃MS n 检识4个化学成分相关信息Table 1 ESI⁃MS n information of four Lignans in Magnoliae Flos extract峰号Peak No.保留时间Retention time(min)ESI⁃MS n 特征离子ESI⁃MS n ions鉴定结果Identification result 130.16369.25[M+H-H 2O]+;MS 2:351.18;MS 3:320.23;松脂素二甲醚Pinoresinol dimethylether,PDE 234.20399.20[M+H-H 2O]+;MS 2:381.17;MS 3:350.20;木兰脂素Magnoli338.43429.20[M+H-H 2O]+;MS 2:411.22;MS 3:380.19;里立脂素B 二甲醚Lirioresionol B dimethyletther,LDE 442.86399.19[M+H-H 2O]+;MS 2:381.23;MS 3:350.21;表木兰脂素A epi⁃MagnoliA图3 辛夷药材提取物中4种木脂素类成分的混合对照品(A)与样品(B)的CAD 色谱图Fig.3 Charged aerosol detection (CAD)chromatogrphy of mixed reference substance (A)and four Lignans inMagnoliae Flos extract (B)3.3 方法学考察3.3.1 标准曲线的制备 分别准确取2.3.2节制备的各对照品储备液适量,用70%甲醇稀释成5个不同浓度的混合对照品溶液,进样测定,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归,各回归方程呈良好的线性关系,线性方程和检出限结果见表2㊂表2 线性回归方程和检出限Table 2 Calibration curves and limit of detection(LODs)分析物Analytes 回归方程Regression equation 相关系数Correlation coefficient(r )线性范围Linearity range (mg /L)检出限Detection limit (mg /L)松脂素二甲醚PDE y =0.1068x -0.018580.9996 6.8~2700.34木兰脂素Magnoli y =0.1054x +0.020720.999811~5460.55里立脂素B 二甲醚LDE y =0.1102x -0.018760.9997 2.0~1000.50表木兰脂素A Epi⁃Magnoli Ay =0.1071x -0.021720.99952.3~1160.583.3.2 精密度实验 取线性中间点混合对照品溶液,连续进样6次,记录松脂素二甲醚㊁木兰脂素㊁里立脂素B 二甲醚和表木兰脂素A 的峰面积,RSD 分别为0.58%,0.41%,0.76%和0.84%,表明仪器精密度良好㊂3.3.3 稳定性实验 精密称取编号为1的辛夷药材饮片粉末,按照2.3.1节制备供试品溶液,分别于制备后的0,2,4,8,12和24h 进样测定,记录松脂素二甲醚㊁木兰脂素㊁里立脂素B 二甲醚和表木兰脂素A 的峰面积,RSD 分别为1.3%,0.88%,1.6%和1.2%,表明供试品溶液在24h 内稳定㊂3.3.4 重复性实验 准确称取编号为1的辛夷药材饮片粉末6份,按照2.3.1节制备供试品溶液,进样分析,计算得松脂素二甲醚㊁木兰脂素㊁里立脂素B 二甲醚和表木兰脂素A 的平均质量百分比分别为2.08%,5.41%,0.92%和1.16%,RSD 分别为2.4%,2.0%,2.7%和2.2%㊂3.3.5 加样回收率实验 称取已知含量的编号为1的辛夷药材饮片粉末9份,每份约0.5g,置10mL 不锈钢萃取池中,分别加入4种木脂素类对照品,加入量分别为线性中间点的80%,100%和120%(每7081第12期赵鑫等:高效液相色谱⁃质谱法同时测定辛夷提取物中4种木脂素成分 个水平各配3份,n=9),并按照药材取样量进行折算㊂其中松脂素二甲醚对照品的加入量分别为6.52~6.86mg,8.27~8.58mg和10.03~10.11mg,木兰脂素对照品的加入量分别为16.30~ 16.36mg,20.18~20.34mg和24.29~24.41mg,里立脂素B二甲醚对照品的加入量分别为2.13~ 2.20mg,2.51~2.57mg和3.02~3.09mg,表木兰脂素A对照品的加入量分别为2.19~2.36mg, 2.86~2.97mg和3.31~3.44mg㊂按照2.3.1节制备供试品溶液,进样分析,计算松脂素二甲醚㊁木兰脂素㊁里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A的平均回收率分别为98.2%,98.8%,99.5%和99.1%,RSD 值分别为3.07%,2.93%,3.16%和3.10%㊂3.3.6 相对校正因子的计算及响应一致性比较 以木兰脂素为内参物,根据标准曲线测定结果,按照公式(1)计算木兰脂素对松脂素二甲醚㊁里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A的相对校正因子(Relative correction factors,RCF)[11],结果见表3㊂f si=f s fi =A s/C sA i/C i(1)式中A s为内参物对照品的峰面积,C s为内参物对照品的浓度,A i为某待测成分对照品的峰面积,C i为某待测成分对照品的浓度㊂表3 4种木脂素成分的相对校正因子Table3 Relative correction factors of four Lignans编号No.f木兰脂素/松脂素二甲醚f magnolin/pinoresinol dimethletherf木兰脂素/里立脂素B二甲醚f magnolin/lirioresinol B dimethyletherf木兰脂素/表木兰脂素Af magnolin/epi⁃magnolin A10.97140.97780.99272 1.02300.9826 1.035930.9808 1.00550.99554 1.02550.9561 1.028650.98330.94540.9810Mean0.99680.9735 1.0068RSD(%) 2.6 2.4 2.4 经计算,松脂素二甲醚㊁里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A的相对校正因子均接近1,进一步说明选择CAD检测器进行定量时,检测信号不依赖于被检测物质的化学结构,对不同结构的化合物有统一的响应㊂对4种木脂素成分的UV和CAD的单位浓度响应一致性进行比较,根据松脂素二甲醚㊁木兰脂素㊁里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A标准曲线的峰面积和浓度数据,计算各成分单位浓度的响应因子值(A i Ci,A为峰面积,C为组分浓度,i=1,2 ),各成分单位浓度的响应因子均值结果见表4㊂CAD对4种木脂素类成分单位浓度的响应因子RSD为2.0%,而UV对4种木脂素类成分单位浓度的响应因子RSD为56.1%,CAD单位浓度的响应因子比UV更具有一致性㊂表4 CAD与UV的响应一致性比较Table4 Response factor consistency of four Lignans响应因子Response factors松脂素二甲醚Pinoresinol dimethlether木兰脂素Magnolin里立脂素B二甲醚Lirioresinol B dimethylether表木兰脂素Aepi⁃Magnolin A RSD(%) CAD0.10400.10630.10710.1092 2.0UV0.24790.14980.051680.127156.1 3.4 5批辛夷药材饮片中4种木脂素类成分的含量测定分别精密称取5批辛夷药材饮片粉末,按照2.3.1节的方法制备供试品溶液,进样分析,采用外标法测定4种木脂素类成分的含量,再用建立的QAMS法进行含量计算,通过计算相对误差(RE)对两种方法所得结果进行比较,结果见表5㊂结果表明,两种方法含量测定结果的相对误差均小于3%,可以采用QAMS方法对辛夷药材饮片中4种木脂素类成分进行含量测定㊂通过与UV的比较也说明,CAD检测器对不同结构具有响应一致性8081 分析化学第42卷的特点在某种程度上更适用于在缺少对照品的情况下采用 一测多评”的方法同步实现中药多成分的含量测定㊂表5 QAMS 法与外标法测定4种木脂素类成分的含量结果(%)Table 5 Contents of four Lignans by external standard (ES)method and quantitative analysis of fmulticomponent by single marker (QAMS)(%)编号NO 木兰脂素Magnolin ES松脂素二甲醚Pinoresinol dimethletherESQAMSRE (%)里立脂素B 二甲醚Lirioresinol B dimethyletherESQAMSRE (%)表木兰脂素A epi⁃Magnolin AESQAMSRE(%)1 5.46 2.028 2.050 1.080.9330.924-0.96 1.122 1.1330.982 2.800.7540.7610.930.6410.636-0.780.5940.603 1.523 3.39 1.261.244-1.350.8270.823-0.480.8350.8410.724 3.180.9470.9550.840.7750.768-0.900.7120.721 1.2651.880.6520.6570.770.4810.474-1.460.5070.5110.79RE:相对误差(Relative error)㊂Reference1 Chinese Pharmacopoeia.The First Volume.2010:169-170中国药典.一部.2010:169-1702 YU Pei⁃Ming,TIAN Zhi⁃Yong,XU Qi⁃Tai,DONG Cheng⁃Min,LI Heng.Lishizhen Medicine and Materia Medica Research ,2005,16(7):652-653于培明,田智勇,许启泰,董诚明,李恒.时珍国医国药,2005,16(7):652-6533 ZHANG Yong⁃Zhong,LI Xiao⁃Li,GUO Qun.Hubei Journal of Traditional Chinese Medicine ,2001,23(10):7张永忠,李小莉,郭群.湖北中医杂志,2001,23(10):74 CAO Wei⁃Guo,TAO Yan⁃Duo,YAN Xue⁃Wei,ZHANG Dan,WANG Gang.Lishizhen Medicine and Materia MedicaResearch ,2014,25(7):1598-1599曹玮国,陶燕铎,颜学伟,张丹,王刚.时珍国医国药,2014,25(7):1598-15995 WANG Yan⁃Han,GAO Jian⁃Ping,CHEN Dao⁃Feng.China Journal of Chinese Materia Medic ,2003,28(12):1154-1158王彦涵,高建平,陈道峰.中国中药杂志,2003,28(12):1154-11586 WANG Zhi⁃Min,GAO Hui⁃Min,FU Xue⁃Tao,WANG Wei⁃Hao.China Journal of Chinese Materia Medic ,2006,31(23):1925-1929王智民,高慧敏,付雪涛,王维皓.中国中药杂志,2006,31(23):1925-19297 WANG Yi⁃Bo,WANG Chun⁃Yu,QU Fan⁃Na,ZHANG Li⁃Ying,LIANG Li⁃Na,YU Yan⁃Hai,PAN Yuan⁃Yuan.ChineseJ.Anal.Chem.,2014,42(1):109-112王一博,王春雨,曲范娜,张丽英,梁丽娜,余彦海,潘媛媛.分析化学,2014,42(1):109-1128 BAI Chang⁃Cai,CHAI Xing⁃Yun,WANG Hai⁃Long,CUI Xiu⁃Ming,LI Ping,TU Peng⁃Fei.Journal of China 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Research,Shanghai200433,China) Abstract A high performance liquid chromatography⁃electrospray ionization mass spectrometry⁃charged aerosol detection(HPLC⁃MS⁃CAD)method was established for the simultaneous quantitative analysis of four Lignans in Magnoliae Flos extract.The components were separated on a YMC⁃Pack ODS⁃A column (250mm×4.6mm,5μm)by gradient elution with methanol and water as the mobile phase at aflow rate of 1.0mL/min.Then the elution solution was routed into MS equipment at a flow rate of0.3mL/min and CAD detector at a flow rate of0.7mL/min by a split ratio of3∶7for the further detection.The column temperature was25℃and the detection wavelength was278nm.A method was developed for the quantitative analysis of muti⁃components by single maker(QAMS)to determine pinoresinol dimethylether,magnoli,1irioresinol B dimethylethe and epi⁃magnoli A.Magnoli was selected as internal standard and the relative correction factors (RCF)of the four Lignans were calculated.The contents of the four Lignans in Magnoliae Flos extract were determined by both external standard method and QAMS.The QAMS method was evaluated by comparison of its assay result and that of external standard method.Under the selected chromatographic condition,the limits of detection of pinoresinol dimethylether,magnoli,lirioresinol B dimethylethe and epi⁃magnoli A were0.34, 0.55,0.50and0.58mg/L,respectively,while the linear range were within6.8-270mg/L,11-546mg/L,2.0-101mg/L and2.3-116mg/L.The recoveries(n=9)were98.2%-99.5%,and the correlation coefficient were0.9995-0.9998.No significant differences were found between the quantitative results of external standard method and QAMS method.The developed method is accurate,feasible,and can be used for quality evaluation of Magnoliae Flos.Keywords Magnoliae Flos;High performance liquid chromatography;Mass spectrometry;Charged aerosol detector;Lignans(Received1September2014;accepted11October2014) This work was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81173019)。