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西安盛兴生物科技有限公司
UV0.3%贯叶连翘提取物真假区分方法
方法一：（西安盛兴生物）
取适量（50mg左右）的贯叶连翘提取物，用分析甲醇20ml溶解在50ML的容量瓶中，充分溶解后查看颜色，纯天然提取的贯叶连翘应为茶红色。
如图：左边颜色为茶红色则是纯天然提取，右图出现黑色或者呈黑绿色，则为添加色素的伪品。
方法二：（西安盛兴生物）贯叶连翘提取物中金丝桃素HPLC
一，高效液相色谱法条件：
专栏：inertsil消耗臭氧物质-3 4.6×150毫米5μm的
流速： 1.0毫升/分钟
检测：588nm的
流动相：甲醇：acetomitrile：nah2po3（0.1mol/l）（300:50：50，V/V）的
灵敏度：0.01aufs
柱温：25℃
进样量：10μ升
二.解决的制备
1.标准的准备工作：
精密称取约2mg金丝桃素的标准置25毫升容积瓶。
用甲醇：吡啶（9:1）溶解稀释至刻度。
2.样品制备：
精密称取约为200mg的贯叶连翘置25毫升容积瓶中，加流动相sonicate为1小时，冷却至室温。
用流动相稀释到刻度，0.45μm的微孔滤膜过滤器过滤。
注入液相色谱仪中，测定。
三.计算
保留时间约15分钟。
用外标法计算含量。
结论：如检测出金丝桃素成分在0.08%左右则为真货，反之则为添加物。
备注：本方法为相关文献资料及我公司技术人员常年经验总结而得，以备参考。
西安盛兴生物科技有限公司质量部。
HPLC法测定药材贯叶金丝桃中金丝桃苷和槲皮素的含量田红林;成杰;轩辕欢【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2015(30)6【摘要】目的：建立测定药材贯叶金丝桃中槲皮素和金丝桃苷含量的方法。
方法采用高效液相色谱法（HPLC）。
色谱柱：Hy‐persil CN（150 mm ×4．6 mm ，5μm）；流动相：甲醇‐4 mL · L －1磷酸（30／70），流速1．0 mL · min－1；检测波长（241，360 nm）；柱温30℃；进样量20μL。
结果槲皮素和金丝桃苷浓度分别在0．02～10和0．03～8μg · m L －1质量范围内与峰面积积分分值呈良好线性关系。
加样回收率分别为98．0％和98．1％。
结论该方法专属性强，灵敏度高，重复性好，可作为该药材测定槲皮素和金丝桃苷质量控制的方法。
%Objective To establish a method for the determination of hyperoside ,quercetin in Hypericum perforatum by HPLC . Methods The chromatographic conditions were as follows :Hypersil CN (150 mm × 4 .6 mm ,5 μm) column;a mobile phase of methanol‐4 mL · L -1 phosphate(30/70) ,a flow rate of 1 mL · L -1 ;the detection wavelength 241 ,360nm ;the column tempera‐ture 30 ℃ ;the sample size 20μL .Results Hyperin and quercetin ,with in the concentration of 0 .02‐10 and 0 .03‐8μg · mL -1re‐spectively showed a good linear relationship .Recoveries were 98 .0% and 98 .1% respectively .Conclusion The method has highspecificity ,sensitivity ,and good reproducibility ,and can be used as a method for quercetin and hyperoside determination .【总页数】3页(P688-690)【作者】田红林;成杰;轩辕欢【作者单位】新疆医科大学附属中医医院药学部，乌鲁木齐 830004;武警新疆总队医院药局，乌鲁木齐 830091;新疆医科大学附属中医医院药学部，乌鲁木齐830004【正文语种】中文【中图分类】R282【相关文献】1.HPLC测定贯叶金丝桃滴丸中金丝桃苷含量 [J], 曹广尚;杨培民;李芳2.HPLC测定贯叶连翘及提取物中伪金丝桃素和金丝桃苷的含量 [J], 张俊松;王晓利;罗谦;刘金钏;杨汝德3.HPLC法同时测定贯叶金丝桃中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量 [J], 传娟娟;张宝阳4.HPLC法测定野生及人工栽培贯叶连翘中金丝桃苷的含量 [J], 许乾丽;茅向军;熊慧林;殷玉恩;张著林5.贯叶连翘提取物中金丝桃苷含量的RP-HPLC法测定 [J], 韩霖;刘妍如;杨建云;肖炳坤;黄荣清因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量测定作者：王建舫崔德凤穆祥来源：《湖北畜牧兽医》2014年第05期摘要：本试验旨在建立一种高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）测定贯叶连翘提取物中金丝桃素含量的方法。
采用YMC-Pack ODS-A色谱柱（5 μm，150 mm×4.6 mm），以乙腈-0.02M磷酸二氢钠（85∶15）为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长588 nm，柱温25 ℃。
结果表明，金丝桃素在6～36 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 6），平均加样回收率为98.86%（n=6），峰面积的相对标准偏差（RSD）为3.15%。
此方法专属性强、重复性好，可用于贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量测定。
关键词：贯叶连翘；金丝桃素；高效液相色谱；含量测定中图分类号：S853.7文献标志码：A文章编号：1007-273X（2014）05-0013-02贯叶连翘（Hypericum performatum L.）为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎[1]。
其主要活性成分金丝桃素具有光敏活性和光动力作用，有较好的抗病毒、抗肿瘤功效，同时也是贯叶连翘抗抑郁的主要活性成分之一[2]。
本试验采用高效液相色谱法对贯叶连翘提取物中金丝桃素进行了含量测定，建立了一种专一性强、重复性好的测定方法，为贯叶连翘提取物的质量控制提供依据。
1仪器与试药1.1仪器Waters Alliance e2695高效液相色谱仪；美国Millipore水纯化系统；针筒式微孔滤膜过滤器（上海兴亚净化材料厂产品，孔径0.22 μm）。
1.2药品与试剂金丝桃素（批号MUST-13121505，购自成都曼思特生物科技有限公司）；贯叶连翘提取物，购自北京经日今典科技有限公司；乙腈（色谱纯，天津市光复精细化工研究所）。
2方法与结果2.1色谱条件YMC-Pack ODS-A色谱柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相：乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钠（85∶15）；流速1.0 mL/min；检测波长588 nm；柱温25 ℃。
高效液相色谱法测定贯叶连翘提取物中4种成分的含量作者：许小红，廖丽云，陈龙江【摘要】目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定贯叶连翘提取物中金丝桃素、金丝桃苷、芦丁和槲皮素含量的方法。
方法色谱柱为C18柱 ( 250 mm×4.6 mm，5 μm)；测定金丝桃苷、芦丁和槲皮素时,流动相为甲醇-乙睛-0.3%磷酸溶液，梯度洗脱，检测波长360 nm；测定金丝桃素时，流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液，检测波长580 nm。
结果金丝桃苷，槲皮素，芦丁、金丝桃素线性范围分别为 1.97～20.3 μg·ml-1 (r=0.999 2)，2.47～24.7 μg·ml-1(r=0.999 1)，2.25～22.5 μg·ml-1(r=0.999 1) , 0. 08～0.4 μg·ml-1(r=0.999 5), 方法回收率均不低于98%。
结论该方法简便、准确、重复性好，可用作贯叶连翘提取物中此4种成分的含量测定。
【关键词】贯叶连翘提取物金丝桃素金丝桃苷高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo develop a rapid high-performance liquid chromatography method for determination of hypericin, hyperoside, rutin and quercetin in Hypericum perforatum L. extracts.MethodsHPLC method was employed on C18 column (250 mm ×4.6 mm, 5 μm). The hyperoside, rutin and quercetin were detected at 360 nm, eluted with gradient three mobile phase(methanol-acetonitrile-0.3% phosophoric acid). The Hypericin was detected at 580 nm and the mobile phase consisted of methanol and 0.02 mol·L-1 KH2PO4.Results The HPLC method showed a good linear relationship in the range of 1.97～20.3 μg/ml (r=0.999 2) for hyperoside, 2.47～24.7 μg/ml (r=0.999 1) for quercetin, 2.25～22.5 μg·ml-1 (r=0.999 1) for rutin and 0.08～0.4 μg/ml (r=0.999 5) for hyperin. Recoveries for the four components were all above 98%.CondusionThis HPLC method is simple, accurate and repeatable and can be used for determination of the four components in Hypericum perforatum L. exatracts.Key words：Hypericum perforatum L. extracts; Hyperin; Hyperoside; HPLC贯叶连翘Hypericum performatum L.为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎［1］，国外在抗抑郁症方面也有广泛应用［2］。
・生药学・不同产地贯叶连翘中贯叶金丝桃素含量分析比较郑清明,秦路平,郑汉臣,陈 磊,陈万生,余理红(第二军医大学药学院,上海 200433)摘要 目的:比较不同产地贯叶连翘中贯叶金丝桃素的含量。
方法:采用反相高效液相法(RP-HP LC)测定贯叶金丝桃素含量。
结果与结论:不同产地贯叶连翘中贯叶金丝桃素含量有差异,以陕西汉中产含量最高。
关键词 贯叶连翘;贯叶金丝桃素;反相高效液相色谱法中图分类号:R92712 文献标识码:A 文章编号:1006-0111(2002)01-0029-03Assay and comparion of the contents of hyperforin in Hypericum Perforatum from different regionsZHE NG Qing2ming,QI N Lu2ping,ZHE NG Han2chen,CHE N Lei,CHE N Wan2sheng,Y U Li2hong(School of Pharma2 cy,Second Military Medical University,Shanghai200433,China)ABSTRACT OBJECTIVE:T o com pare the contents of hyperforin in Hypericum per foratum from different regions. METH ODS:A chromatography method of RP-HP LC was used to determinate the contents of hyperforin.RESU LTS and CONC L USION:The contents of hyperforin in Hypericum per foratum from different regions were different,and that from Hanzhong was the highest.KE Y WOR DS Hypericum Per foratum L.;hyperforin;RP-HP LC 贯叶连翘Hypericum per foratum L.又称贯叶金丝桃,为藤黄科金丝桃属的多年生草本,全草入药,具收敛止血,调经通乳,清热解毒,利湿功效。
HPLC法分析贯叶连翘不同部位中金丝桃素的含量摘要用HPLC法测定贯叶连翘根、茎、叶、花、果中金丝桃素的含量；结果说明花中含量最高，茎中含量甚微。
关键词：贯叶连翘；金丝桃素；不同部位；HPLC贯叶连翘Hypericum perforatum L.为藤黄科金丝桃属植物，药理实验证明其要紧成份金丝桃素具有抗病毒、抗炎及抗肿瘤作用，对人体激活白细胞的免疫功能有抑制作用〔1〕。
目前以金丝桃素含量为贯叶连翘定量指标。
咱们成立了HPLC法，并测定了几个产区的贯叶连翘原植物根、茎、叶、花、果中金丝桃素的含量，以指导药材的采收和金丝桃素生产原料的质量操纵。
1 仪器与试药仪器HPLC仪(美国Perkin-Elmer公司)；LC-295型紫外可见检测器；Series 200泵；Plus-1022色谱工作站。
试药乙腈(色谱纯)；金丝桃素对照品(Sigma公司，批号)；贯叶连翘 Linn)全草(7月下旬至9月上旬搜集)。
2 方式与结果色谱条件色谱柱：Nova-Pak ODS(×200mm)；流动相：甲醇∶乙腈∶L磷酸二氢钠缓冲液(400∶100∶100)；流速：1ml/min；检测波长：588nm；Range：；进样量：10μl，金丝桃素保留时刻11min。
供试液的制备将原药材各部位样品别离粉碎，使全数过60目筛。
周密称取约1g，用甲醇-吡啶(90∶10)20ml超声提取1h，放冷至室温，最后定容于25ml量瓶中，用μm滤膜滤过，滤液即为供试液。
周密称取金丝桃素对照品，用吡啶-甲醇(1∶9)溶解并稀释为ml的溶液，作为对照品溶液。
提取溶媒的选择金丝桃素为多酚羟基双蒽酮类，在甲醇中加入必然吡啶使提取溶剂呈弱碱性，有利于金丝桃素的溶出。
提取时刻对同一药材样品别离加入吡啶-甲醇溶液20ml超声提取15，30，45，60，90min后测定，说明45min以后金丝桃素的含量测定结果趋于稳固(15%)，考虑超声时刻太长溶剂升温，故采取超声1h为宜。
