哺乳动物卵母细胞的成熟,受精及早期胚胎发育26页PPT

生殖生理研究进展与发展趋势
研究方向
目前生殖生理的研究重点包括生殖内分泌调节机制、胚胎 移植技术的优化、繁殖生物技术的应用等。
研究成果
近年来，随着生殖生理研究的深入，母牛的繁殖效率得到 了显著提高，如通过人工授精和胚胎移植技术的改进，使 繁殖成活率得到了较大提升。
发展趋势
未来，随着生殖生理研究的深入和繁殖生物技术的发展， 将进一步提高母牛的繁殖效率，实现良种快速推广，为畜 牧业的发展做出贡献。
02 卵泡的发育与排卵
卵泡的发育
原始卵泡
在胎儿期形成，数量多但体积小，不 能发育成熟。
初级卵泡
在性成熟前开始发育，通过募集和选 择，部分卵泡发育为次级卵泡。
次级卵泡
在雌激素的作用下继续发育，形成卵 泡腔和卵母细胞，体积增大。
成熟卵泡
在LH分泌峰的刺激下，卵母细胞完 成第一次减数分裂，形成初级卵母细 胞，卵泡体积继续增大。
3
输卵管疾病
输卵管疾病会影响母牛的生殖能力，可以通过抗 生素治疗和加强饲养管理进行预防和治疗。
繁殖障碍与处理
受精失败
受精失败是母牛繁殖障碍的一种，可以通过人工授精和胚胎移植等 技术进行解决。
早期流产
早期流产是指母牛在怀孕早期失去胎儿，可以通过加强饲养管理和 兽医诊断进行预防和治疗。
胎儿畸形
胎儿畸形是母牛繁殖障碍的一种，可以通过遗传咨询和产前诊断进行 预防和治疗。
分娩过程
分娩前兆
在分娩前，母牛会出现一些明显的症状，如子宫收缩、阴道流出 粘液、腹部下沉等。
分娩过程
分娩时，母体会经历一系列的生理变化，包括子宫收缩、胎儿的 娩出、胎盘的排出等。
分娩后护理
在分娩后，需要对母体进行护理，包括对子宫和产道的清洗、对 伤口的处理等。

阿gh，
3 过氧化物酶：皮层颗粒分泌的过氧化物 酶通过交联相邻蛋白质的酪氨酸残基使受 精膜变硬。 受精膜最先在精子入卵的位 置形成，并向外扩张至整个卵细胞，从而 阻止多精入卵。
4 透明质素（hyalin）：在卵外形成透明 质层(hyalin layer)，它与卵裂中对分裂球 的支持作用有关。卵细胞质膜突起的微绒 毛深入到其基部。
赤道段 顶体后区
阿gh，
两次结合：
ZP3交联到精子细胞膜上的受体，又到 了顶体反应的发生。
通过顶体内膜上的特殊蛋白与透明带 中的ZP2糖蛋白结合的。
阿gh，
第二节 配子融合和卵子激活
一、配子融合 精子穿过卵黄膜的机制
由于顶体凸起向前不断伸长，产生一种机 械力，从而穿透卵黄膜。
顶体突起的顶部带有消化酶，可消化卵黄 膜，精子穿过卵黄膜之后，顶体突起与卵 质膜相遇，在接触点附近的卵子微绒毛伸 长并包绕精子，形成受精锥，顶体突起与 卵子为绒毛顶端发生融合，受精锥中的微 丝收缩将精子拖入卵内。
阿gh，
动画自精子入卵点（右上角）起，卵子表面受精膜膜膨起，并波及全卵。
阿gh，
（二）代谢活动的激活
早期应答
皮质反应出现的 数秒钟之内
晚期应答
受精的数分钟之后
阿gh，
早期应答，由钙离子作用引发的受精卵的一系 列变化过程（皮质颗粒的释放、精核的解凝聚、 细胞的分裂等活动）。
晚期应答，指伴随Ca2+浓度增加后，细胞内 pH很快提高而带来的一系列变化。在精子进 入卵细胞数分钟以后，卵细胞很快出现蛋白质 合成的高峰，它们对于胚胎的早期发育，包括 体轴形成和体制建立有着重要的作用。
阿gh，
阿gh，
海胆卵发育的启动机制
受精
Ca++

(2)精子和卵子的发生时间是不同的。哺乳动物卵泡 的形成和在卵巢中的储备，是在出生前完成的，这是精子 和卵子在发生上的区别。
(3)不同动物排出的卵子成熟程度不同。有的动物排 出的可能是初级卵母细胞(如马、犬等)，有的可能是次级 卵母细胞(如猪、羊等)。
2．卵子受精的标志
卵子受精的标志是观察到 2 个极体而不是 3 个极体。 其原因是第一极体和次级卵母细胞的分裂是不同步的， 第一极体分裂迟。理论上，第一极体会分裂形成 2 个第二 极体，但实际上，多数哺乳动物的第一极体不进行减数 第二次分裂就退化了。
(3) 哺 乳 动 物 的 [C]__________ 过 程 和 [D]__________ 过程合称为__________。
(4)A、B 两过程的重要意义是___________________ _____________________________________________ ____________________________________________。
典例研析 【典例 1】 某高等生物生殖发育周期如下图所示， 请据图完成问题。
(1) 生 物 个 体 发 育 是 从 ______ 开 始 的 ， 主 要 进 行 ________分裂，发育成熟后，通过[ ]________产生配子。
(2)图中 B 过程是________，哺乳动物的该过程是在 ________中进行的。
解析：(1)受精卵是生物个体发育的起点，发育过程 中主要进行有丝分裂，成熟个体通过 A 过程，即减数分 裂产生配子。(2)B 指受精过程，哺乳动物的受精过程是在 雌性动物的输卵管中进行的。(3)C 过程表示胚胎发育形 成幼体，D 过程表示胚后发育，C、D 合称个体发育。(4) 受精作用保证了亲子代体细胞中遗传物质的相对稳定性， 对生物的遗传和变异具有重要意义。

3.发育所需营养物质主要来自母体输卵管和子宫
4.胚胎发育在透明带内进行
合子发育，以形态特征大体可分一下几个阶段：
1.桑椹胚 2.囊胚 3.原肠胚
第三节 妊娠识别与胚泡附植
一、妊娠的识别和建立
受精卵在输卵管中完成卵裂等部分早期胚胎发育阶段，便进 入子宫内并开始和子宫渐进性地建立联系。这种联系是以内分 泌活动为基础的。孕体（conceptus）是指胎儿、胎水、胎膜构 成的综合体。在妊娠初期，孕体产生的激素传给母体，母体对 此产生相应的反应，识别胎儿的存在，并在二者之间建立起密 切的联系，这一过程即为妊娠识别。 孕体和母体之间产生了信息传递和反应后，双方的联系和互 相作用已通过激素的媒介和其它生理因素而固定下来，从而胚胎 在子宫中生长发育，这叫做妊娠的建立（确立）。
2.卵子的运行
卵子本身并无运动能力，被伞部接纳的卵子，借助纤毛 颤动，沿着伞部的皱襞，通过漏斗口进入壶腹部。
3.卵子的运行速度
家畜卵子沿着输卵管运行的速度没有确切的材料。 卵子在输卵管内运行的时间包括： a.从伞部到达壶狭连接部的时间。 b.在壶狭连接部停留的时间。 c.通过壶狭连接部进入宫管连接部的时间。 卵子在输卵管运行的时间：牛90h，马98h，猪50h，羊72h。
（五）精子的运行速度
精子自射精部位到达受精部位的时间比精子自身运动 的时间要短。牛、羊在交配后15分钟左右，即可在壶腹 部发现精子。猪15～30分钟，马为24分钟左右。
（六）卵子的运行
1.卵子的接纳 母畜接近排卵时，输卵管伞充分开放、充血，并靠输卵 管系膜肌肉的活动使输卵管伞紧贴于卵巢表面，加之卵 巢固有韧带收缩而引起的围绕自身纵轴的旋转运动，使 伞的表面更接近卵巢的开口部。
2.精子在子宫中运行

2、设计导言，激发兴趣（计划3分钟） 从“试管婴儿”这一比较有意思的话题为 切入点，激发学生的学习趣，引出胚胎工程 的概念，进而过渡到本节课的课题。
3、小组合作，探究重点（计划16分钟）
A１以示意图形式表示精细胞的发生 A 2 以示意图形式概括精细胞变形阶段的变化 A组 A３精细胞的变形保留了的结构有什么意义 A４哺乳动物一生中哪些时间产生初级精母细胞 B 1 以示意图形式表示卵子的发生 B 组 B 2 初级卵母细胞在何时形成 B３进入输卵管的是什么细胞 B４减数Ⅰ分裂和减数Ⅱ分裂在何时完成
专题3:胚胎工程
一、教材分析 二、设计思路 三、具体实施 四、预期效果
一、教材分析
1、胚胎工程是现代生物科技的重要组成部分 2、体内受精和早期胚胎发育是基础，计划3课时 3、第1课时内容包括胚胎工程的概念和百年发展 史，精子的发生、卵子的发生。与旧版教材 对比，这部分内容做了更详细的补充。
二、设计思路
4、巧用讨论，激活思维（计划5分钟） A、B两组互换，讨论教材62页 和63页的问题
5、再设讨论，升华课堂（计划6分钟） 学生讨论完成对比精子和卵子的 发生上的分钟）
四、预期目标
能实现学生自主学生，合作学习， 探究学习，能激发学生的学生兴趣，激 活学生的思维
1、运用多媒体辅助教学，化抽象为直观， 充分调动学生的主动性 2、引领学生进行思维上的探究 3、多处设计讨论题，让学生分组讨论， 实现小组合作，自主学习
三、具体实施
1、课前准备，做好铺垫
课前安排学生阅读《胚胎工程百年发展史》 和上网查阅资料了解胚胎工程的概念和取得的 成果。复习必修模块中减数分裂的内容，为学 习精子的发生和卵子的发生做好铺垫。

三新、生原 命肠的（作第用六1（周）分—化四图开肢始和中）脑的都开1始为初步_外分_化_胚了_，_层真_让，人激2动为__中__胚__层，
精子形成
内胚层：消化道、呼吸道上皮、肝、胰等腺体。
组织分化、器官形成（三胚层的分化）
“一孔3、为二腔内_、_三胚_胚_层层_” _，4为_囊__胚__腔_，5为__原_肠__腔_。
初级卵母细胞 新生命的第六周—四肢和脑都开始初步分化了，真让人激动
哺乳动物胚胎发育的基本过程
被卵泡细胞包围,形成卵泡
指由受精卵发育成为幼体的阶段。
三、原肠作用（分化开始） 指由受精卵发育成为幼体的阶段。
MⅠ
人类胚胎第8周时在子宫内的照片 ，胚初具人形
人类胚胎第8周时在子宫内的照片 ，胚初具人形
次级卵母细胞 第一极体 囊胚：细胞开始分化;内细胞团将来发育成各种组织,
顶体反应 头部进入
4、遗传物质的来源：
5、蛙受精卵的特点：
动物极 上端 卵黄少 密度小 颜色深 植物极 下端 卵黄多 密度大 颜色浅
二、卵裂
1、概念： 受精后，受精卵开始进行有序的有丝分裂，
这个过程叫做卵裂。
2、过程：
动物极
卵裂
卵裂
卵裂
植物极
3、特点
2细胞
4细胞
8细胞
囊胚腔
胚胎总体积不变、细胞越来越多、卵裂 球越来越小、细胞为全能干细胞
MⅡ 囊胚：细胞开始分化;内细胞团将来发育成各种组织, 滋养层将来发育成胎膜、胎盘;出现囊胚腔后，进一步扩大会导致孵化。
二腔: 缩小的囊胚腔和新形成的原肠腔。
内胚层：消化道、呼吸道上皮、肝、胰等腺体。
在受精过程完
卵子 第二极体 两个第二极体 囊胚：细胞开始分化;内细胞团将来发育成各种组织, 滋养层将来发育成胎膜、胎盘;出现囊胚腔后，进一步扩大会导致孵化。 成

◇ 进一步的细胞分裂最终产生雌雄同体的 959个体细胞。
（二）细胞谱系示意图（lineage diagram）表明 每个体细胞的生活史
◇ 雌雄同体的C.elegans的完整的细胞谱系
（三） 卵孔（vulva）形成的遗传分析
1、 C.elegans的生殖系统
2、卵孔的发育方式： 细胞通过信号分子来改变其它细胞基因组
1、母体效应基因（maternal-effect genes)
◇ 母性效应基因编码转录因子、受体和调 节翻译的蛋白，在卵子发生（oogenesis） 中转录，产物由滋养层细胞合成并输送入 卵母细胞中，由细胞骨架瞄定在细胞质的 不同区域，沿前-后轴呈梯度（gradient） 分布。
◇ 母性效应基因产物的梯度起始胚胎发育, 突变研究指出，调节果蝇发育的母性效应 基因约40个。如：bicoid, nanos.
complex（ANTP-C）和 双胸复合体 Bithorax complex（BX-C）。
胚胎体节的划分确定后，同源异形基因负责确定每个体节的特征 结构。若发生突变，会使一个体节上长出另一个体节的特征结构，如 Pb基因的突变使触须变成腿和UbX突变成四翅果蝇。
同源异形基因的结构特点：
❖具有同源异形框。 ❖有多个启动子和转录起始点。 ❖有多个内含子。 ❖同源异形基因之间的相互排斥。
（二）早期胚胎发育 P376
1、配子发育与受精 精卵形成、受精信号
2、卵裂与囊胚形成 除哺乳动物以外，多数动物合子基因组暂时不表
达，即转录处于抑制状态。卵裂所需的物质主要来源 于受精前储存在卵细胞质中的母源性分子，包括 mRNA和蛋白质等，及其受精后的翻译产物。这些母 源性物质能够支持受精卵发育到囊胚期（Blastocyst )。 3、胚轴建立与图式形成 背腹轴(D-V)、前后轴(A-P)、左右轴。

提示：形成的卵细胞较大，便于储存丰富的营养物质。 2．一个精原细胞和一个卵原细胞经减数分裂分别能产 生几种精子和卵细胞？
提示：2种精子，1种卵细胞。
[跟随名师·解疑难] 1．精子和卵细胞分裂图像的辨析
(1)减数第一次分裂后期：
(2)减数第二次分裂后期：
2．有丝分裂与减数分裂图像的辨析
有丝分裂 减数第一次分裂 减数第二次分裂
[跟随名师·解疑难] 减数分裂产生子细胞的种类和数目 分析配子产生时应特别注意是“一个个体”还是“一个性原 细胞”。 (1)若是一个个体则产生2n种配子，n代表同源染色体对数。 (2)若是一个性原细胞，则一个卵原细胞仅产生1个卵细胞， 而一个精原细胞可产生4个2种(两两相同)精细胞。
如染色体组成为YyRr的个体产生配子情况：
[解析] (1)小鼠形成精子的器官是睾丸，睾丸内的精原细胞 既可以进行有丝分裂也可以进行减数分裂。
(2)制片时应遵循解离固定→漂洗→染色→制片的步骤。选择 染色剂时应注意醋酸洋红液可将细胞内的染色体染成红色，便于 观察；而苏丹Ⅲ染液是鉴定脂肪的，健那绿染液是染线粒体的。
(3)在显微镜下可以观察到处于有丝分裂中期、减数第一次分 裂中期和减数第二次分裂中期的三种细胞，产生的子细胞分别是 精原细胞、次级精母细胞和精细胞。
C．受精卵中的染色体一半来自父方，一半来自母方；受精
卵中的DNA也同样是一半来自父方，一半来自母方
D．受精前的卵细胞代谢较慢，受精后的卵细胞十分活跃 解析：受精卵中的染色体一半来自父方，一半来自母方，
但受精卵中的DNA不是一半来自父方，一半来自母方，因
为细胞质中的DNA几乎全部来自于母方。答案：C
5．下列不属于减数分裂和受精作用的意义的是( ) A．有利于生物的生存和进化 B．维持生物前后代体细胞中染色体数目的恒定 C．能够基本保持亲本的一切遗传性状 D．对于生物的遗传和变异具有十分重要的意义 解析：由于减数分裂时，同源染色体分离同时非同源染色体 自由组合及四分体时期的非姐妹染色单体的交叉互换，产生 基因重组，大大提高了变异的频率，不能基本保持亲本的一 切遗传性状。 答案：C

繁殖控制技术
人工授精技术
通过采集优质精液，经过处理后 进行人工授精，提高受精率和后
代品质。
胚胎移植技术
通过移植优质胚胎，实现动物快速 繁殖和品种改良，适用于珍稀、濒 危动物的保护和繁殖。
激素调控技术
利用生殖激素调节动物的繁殖周期 ，控制发情期和排卵时间，提高配 种效率和受孕率。
繁殖控制的优缺点
优点
分娩障碍
分娩障碍总结
分娩障碍原因
分娩障碍是指在动物分娩过程中出现的问 题，导致胎儿无法顺利出生。
分娩障碍的原因可能包括产道狭窄、胎儿 过大、子宫收缩无力等。
分娩障碍预防
分娩障碍治疗
为了预防分娩障碍，可以采取一系列措施 ，如加强孕期管理、定期产检、优化繁殖 环境等。
对于分娩障碍的治疗，需要根据具体情况 采取不同的方法，如产道扩张、催产素注 射等。
03
受精过程中产生的基因突变和重组，有助于产生适应环境变化
的新的遗传特征，提高生物的适应能力。
PART 02
妊娠
早期妊娠识别
早期妊娠识别是指通过观察和检测手段，确定雌性动物是否 已经怀孕。在动物繁殖学中，早期妊娠识别对于后续的管理 和护理至关重要。
常见的早期妊娠识别方法包括观察行为变化、检测激素水平 、超声波扫描等。这些方法可以帮助养殖户和兽医在早期发 现怀孕，以便采取适当的措施来保护胎儿和母体的健康。
受精障碍原因
受精障碍的原因可能包括精子 数量不足、精子质量差、卵子 成熟障碍、子宫颈粘液异常等 。
受精障碍预防
为了预防受精障碍，可以采取 一系列措施，如改善动物营养 、提高动物健康状况、优化繁 殖环境等。
受精障碍治疗
对于受精障碍的治疗，需要根 据具体情况采取不同的方法，

胚胎发育的信号转导
生长因子
生长因子在胚胎发育过程中传递信号，调节细胞 生长、分化和迁移。
激素
激素在胚胎发育过程中发挥重要作用，影响细胞 功能和器官形成。
细胞因子
细胞因子在胚胎发育过程中调节免疫反应和细胞 间的相互作用。
胚胎发育的表观遗传学调控
DNA甲基化
DNA甲基化影响基因表达和染色质结构，调控胚胎发育和细胞命 运。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
卵子的发生与成熟
卵子的发生
卵子在卵巢中形成，经过初级卵母细 胞、次级卵母细胞和成熟卵子的阶段 。
卵子的成熟
卵子在排出前达到成熟状态，此时卵 子被释放到输卵管中，等待受精。
受精过程
受精前的准备
精子需要在女性生殖道中经过一段时间的获 能处理，才能具备受精能力。同时，卵子也 需要达到成熟状态才能受精。
通过胚胎干细胞研究，科学家可以深入探究胚胎发育过程中细胞的分化、增殖和凋亡等过程，揭示生 命形成的奥秘。此外，胚胎干细胞还具有治疗某些疾病的潜力，例如糖尿病、帕金森病和烧伤等。通 过将胚胎干细胞诱导分化为所需的细胞类型，可以用于细胞替代治疗和组织工程等领域。
感谢您的观看
THANKS
组蛋白修饰
组蛋白修饰影响染色质结构和基因表达，参与胚胎发育和细胞分化 的调控。
非编码RNA
非编码RNA在胚胎发育过程中发挥重要功能，调节基因表达和细 胞命运。
04
哺乳动物胚胎发育的应用
胚胎移植技术
胚胎移植技术是指将早期胚胎从一个母体移植到另一个母体的子宫内，以达到繁殖或生产的目的。这种技术广 泛应用于畜牧业和人类辅助生殖领域。
在畜牧业中，克隆技术可以快速繁殖具有优良性状的动物个体，提高生产效率和经济效益。在珍稀动物保护方面，克隆技术 可以用于拯救濒临灭绝的物种，保护生物多样性。此外，通过克隆技术还可以深入探究胚胎发育的奥秘，推动生命科学领域 的发展。

桑椹胚
桑椹
2、早期胚胎发育得几个阶段
囊胚(内含囊胚腔)
内细胞团:发育成胎儿 各组织
滋养层细胞:发育成胎 膜和胎盘
囊胚得形成
内细胞团
滋养层
囊胚期 滋养层:发育成胚胎得附属结构或胚外结构,胚 胎可通过这些组织从母体中获得正常发育所需 得氧气和营养物质
内细胞团细胞:即胚胎干细胞,就是一种未分化得 细胞,具有全能性,能发育成完整得胚胎
大家学习辛苦了，还是要坚持
继续保持安静
二、卵子得发生
1、场所: 卵巢
2、时期: 胚胎性别分化以后
卵泡细胞
排卵
第一极体 卵丘细胞 核 透明带 卵黄膜
不同发育阶段的卵泡
黄体
退化 黄体
卵巢中有卵泡,每个卵泡中有一个初级卵母细胞。
卵 子 结 构 图
3、过程
胎
有丝分裂
儿
期
卵原细胞
初情期后
初级卵母细胞
MⅠ 次级卵母细胞
+
第一极体
MⅡ 分裂
合子和 第二极体
初级卵母胞 地点:卵巢
透明带
卵黄膜
马 绵羊 牛 猪
生长,透明带生成
时间:排卵前后 地点:卵泡
排卵
时间:受精时 地点:输卵管
卵子受精得标志:
当在卵黄膜和透明带得间隙可以 观察到两个极体时,说明卵子已经完成 了受精。
讨论:
1、一个卵泡中能形成几个成熟得卵子？
高中生物选修三体内受精与早期胚 胎发育
胚胎工程
胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所 进行得多种显微操作和处理技术,如胚胎移 植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培 养等技术。经过处理后获得得胚胎,还需要 移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类 各种需求。

的合子，
也就是受精卵。 二倍染色体
• 2．胚胎发育的过程
受精卵→ 卵裂期 →桑椹胚 3―2―个――细―胞――左―右→ 囊胚细――胞―开――始――分―化→原
肠胚
[思维激活2] 受精过程中有防止多精入卵的两道屏障，其意义 是什么？ 提示 保证子代细胞中染色体数目正常。
• 1．受精 • (1)受精作用的场所：输卵管。
• (5)有丝分裂中的变异类型只有基因突变、染色体变异， 没有基因重组。
• 答案 (1)第一极体 合子 受精 胎儿期 初情期后
• (2)初情期 需要变形 细胞核 线粒体
• (3)卵子已经完成了受精 (4)①、④
• (5)基因突变、染色体变异
胚胎发育
• 【例2】 下图表示高等动物的个体发育过程，判断 下列说法中正确的是 ( )。
同时，大家要开动脑筋，思考老师是怎样提出问题、分析问题、解决问题的，要边听边想。为讲明一个定理，推出一个公式，老师讲解顺序是怎样的， 为什么这么安排？两个例题之间又有什么相同点和不同之处？特别要从中学习理科思维的方法，如观察、比较、分析、综合、归纳、演绎等。 • 作为实验科学的物理、化学和生物，就要特别重视实验和观察，并在获得感性知识的基础上，进一步通过思考来掌握科学的概念和规律，等等。 • 二、听文科课要注重在理解中记忆 • 文科多以记忆为主，比如政治，要注意哪些是观点，哪些是事例，哪些是用观点解释社会现象。听历史课时，首先要弄清楚本节教材的主要观点，然 后，弄清教材为了说明这一观点引用了哪些史实，这些史料涉及的时间、地点、人物、事件。最后，也是关键的一环，看你是否真正弄懂观点与史料间 的关系。最好还能进一步思索：这些史料能不能充分说明观点？是否还可以补充新的史料？有无相反的史料证明原观点不正确。 • 三、听英语课要注重实践 • 英语课老师往往讲得不太多，在大部分的时间里，进行的师生之间、学生之间的大量语言实践练习。因此，要上好英语课，就应积极参加语言实践活 动，珍惜课堂上的每一个练习机会。

在生物学中，把体外受精胚胎移植到母体后获得 的动物称试管动物(test-tube animal)
从广义上讲，体外受精又包含卵母细胞的体外成 熟培养和受精卵的体外培养两项密切相关的技术。6
.
一、基本原理：人工模 拟体内环境（包括营养、 温度、pH等），使初级 卵母细胞成熟，同时使 精子获能，最终完成受 精作用，并有计划地保 存胚胎。
因是：更大卵泡的闭锁 比例可能较高，更小卵 泡的发育程度可能低。
24
.
•镜检卵母细胞－卵丘复合物： •用吸管吸取经静置后试管底部的混合物于平
皿中，用吸管铺平，在实体显微镜下用吸管 检出卵母细胞－卵丘复合物，置于另一平皿 中，用洗涤液在实体显微镜下洗涤2次，在洗 涤过程中要剔除不合格的卵母细胞－卵丘复 合物。选择合格的卵母细胞－卵丘复合物非 常重要，否则将降低卵母细胞的成熟比例。
18
牛卵巢
.
牛卵巢中采卵
19
.
20
B超活采仪
.
21
.
活 体 采 集 的 牛 卵 母 细 胞
22
二、卵母细胞的分类
➢ 合格卵母细胞标准：放射 冠细胞扩散良好，质地均 一，放射冠细胞间透明；
透明带清晰；卵母细胞圆
.
形，直径大小适中，细胞
质质地均匀，色泽柔和， 透明度适中。 2、体外成熟的卵母细胞 1）卵母细胞来源 （1）卵巢来源：从屠宰
➢ （1）生发泡期（GV期）
卵母细胞的胞质中可见到一个大而圆的细胞 核（俗称生发泡），核膜清晰，界限明显。
生发泡：生长期的卵母细胞核内核仁增大增多、 39 合成活跃，细胞核膨大，称为生发泡。
.
➢ （2）生发泡破裂期（GVBD）
核膜变得模糊，核膜的一侧出现缺口，染色质 隐约可见。

植产生后代得技术。
根据资料回答下列问题: 1、试管婴儿技术包括哪些操作步骤？ (体外受精、早期胚胎培养与胚胎移植) 2、试管婴儿培育与母亲正常怀孕得过程有何 异同？ 相同之处:都通过有性生殖产生;都要在母体子 宫内发育形成胎儿。 不同之处:受精作用在体外,并在体外发育成早 期胚胎进行胚胎移植。
大家应该也有点累了,稍作休息
分不能生育得男女重新获得了生育得机会,也为人类得优生开辟
了新得途径。据此回答:
(1)“试管婴儿”技术在生物学上所依据得原理就是A
A、有性生殖
B、组织培养
C、克隆技术
D、基因工程
(2)“试管婴儿”得形成用到下列哪些技术？ ①②③ (填序号)
①体外培养 ②人工授精 ③胚胎移植 ④核移植
8、下图就是培育能产生凝血因子牛得过程示意图,回答相关问题:
物
电刺激法 野生或经济动物
此外,啮齿类实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。
2、精子细胞得采集与获能
b、体外受精需要哪些前处理？
(2)体外精子获能得方法:
培养法: 放入人工配制得获能液中 如:啮齿动物、家兔与猪等
化学诱 放在一定浓度得肝素或钙离子 导法: 载体A23187溶液中
如:牛、羊等
卵巢
3、体外受 精过程
三、胚胎得早期培养
复习:动物细 胞培养得条件 就是什么？ 动物细胞培养 液成分?
糖、氨基酸、
促生长因子、
无机盐、微量
元素、血清等
CO2培养箱
三、胚胎得早期培养
精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液 中继续培养,以检查受精状况与受精卵得发育能力。 培养液成分: 有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、
不同动物胚胎移植时间不同

六、胚胎冷冻保存
（一）常规的慢速冷冻法
冷冻液 1.5M甘油+0.25M蔗糖+PBSS液 +0.1mg/mlPVP和1.5M乙二醇+0.25蔗糖+P BSS液+0.1mg/mlPVP
冷冻步骤为：①在室温下，先将牛胚胎放入 防冻液中平衡一段时间；②装管；③以每分 钟0.3~0.5℃的速度降温至–35℃；④植冰； ⑤平衡10分钟后，投入液氮中保存。
（三）卵母细胞的体外成熟培养
1. 成熟培养液与培养条件
最常用的是碳酸氢钠或Hepe’s缓冲的 TCM-199;
5%CO2、饱和湿度、38.5--39度，24H。
2. 成熟培养中添加成分的影响
1)促性腺激素与E2的影响 2)EGF的影响 3)颗粒细胞的影响:低浓度能促进成熟分裂 4)血清的影响
三、牛精子的体外获能与体外受精
二、卵巢卵母细胞的获得与体外成熟培养
1. 活体卵巢上采集
母畜超排处理后，利用剖腹术或腹腔 镜技术已能成功地采集卵泡卵母细胞。
2. 屠宰后卵巢上采集
(1)卵巢的采集与保存:宰后立即无菌采集, 30--37度灭菌生理盐水中6H内运回实验室。 (2)卵巢表面卵泡细胞的获得
1)抽取法:18号针头;最常用; 2)剥离法: 3)切开法:
3. 卵巢内卵泡卵母细胞的获得
数量多，用一组特制刀片对卵巢组织进 行深部切割，采卵率约提高1倍。
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要小声点
9
（二）卵母细胞的筛选
只有周围包被着完整卵丘（A级） 或部分卵丘脱落（B级）、胞浆均质 并充满于透明带内的卵母细胞才能进 行成熟与胚胎发育的培养。
哺乳动物胚胎体外生产技术