紫外吸收光谱法鉴定未知样及测定苯酚的含量

紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定无机和有机物质的浓度。

在本实验中，我们将利用紫外可见分光光度法测定苯酚的含量。

下面是实验步骤。

实验原理苯酚在紫外和可见光区都有吸收峰，根据它的吸收峰特征可以测定其含量。

在本实验中，我们将利用苯酚在240 nm处的吸收峰进行测定。

实验仪器、试剂以及玻璃仪器仪器：紫外可见分光光度计试剂：苯酚、甲醇玻璃仪器：比色皿、移液管、醇灯、玻璃棒、烧杯等。

实验步骤步骤1：制备苯酚样品溶液将1 g的苯酚粉末称到50 mL的烧杯中，加入约30 mL甲醇并混合均匀，然后用甲醇稀释到50 mL。

最后用玻璃棒搅拌至完全溶解。

步骤2：制备苯酚标准曲线将制备好的苯酚样品溶液定容到50 mL，在紫外可见分光光度计中，设置检测波长为240 nm，然后将苯酚标准溶液分别放入比色皿中，取0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL苯酚标准溶液，然后用甲醇稀释成10 mL。

最后，利用紫外可见分光光度计测量各个标准溶液的吸光度。

步骤3：测定未知样品将待测样品取5 mL，加甲醇稀释成50 mL，然后放到紫外可见分光光度计中测量样品的吸光度。

根据标准曲线可以计算出样品中苯酚的含量。

注意事项1.制备苯酚样品溶液的时候，要充分混合均匀，防止苯酚沉淀。

2.操作过程中，不可碰触紫外光管等易损部件。

3.实验前，应进行紫外可见分光光度计的预热操作，以保证测试准确性。

实验结果及分析根据实验测定的吸光度可以绘制出苯酚标准曲线，通过计算未知样品的吸光度，即可求出其苯酚含量。

对测量的结果进行分析，可以了解到此方法的准确性和可行性。

总结本实验介绍了紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤。

通过本实验的学习，不仅能够掌握该分析方法的原理、仪器和操作要点，还能够提高实验技巧，从而为今后的实验研究奠定基础。

紫外分光光度法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量摘要目的：探讨苯酚滴耳液中苯酚含量测定的简便方法。

方法：采用称量法取样和紫外分光光度测定法。

结果：标准曲线在15~45mg/L范围内线性关系良好（r=0.9999），测得8批的平均回收率为100.42%，RSD为0.68%。

结论：方法准确可靠，简便易行，回收率高，适用于该制剂的快速测定。

关键词苯酚滴耳液；苯酚；紫外分光光度法苯酚滴耳液是医院常用制剂，具有消炎、止痛的作用。

临床上主要用于中耳炎和外耳道炎的治疗。

中国药典和中国医院制剂规范规定，其含量测定采用溴量法[1,2]，但该法操作较为繁琐，测定结果易受一些因素的干扰，不能完全满足制剂快速检验的需要。

本文采用紫外分光光度法测定苯酚的吸收度，用吸收系数计算苯酚含量，方法简便可行，结果准确，现报告如下。

1仪器和试剂SP-752双光束紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司），苯酚滴耳液（本院制剂室自制），苯酚（分析纯，石家庄有机化工厂），甘油（医药用，浙江遂昌惠康药业有限公司）2处方和制备2.1处方苯酚20g,甘油适量[3]。

2.2制备取本分加入适量甘油中，搅拌至溶解，再加甘油使成1000ml。

摇匀，即得。

3试验方法3.1紫外吸收光谱精密称取苯酚3.2mg，置于100ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，得溶液⑴；精密量取甘油4ml，同法得溶液⑵。

以水为空白，在分光光度计上于200~400nm波长范围内扫描，得溶液⑴⑵的UV吸收曲线（图1），结果苯酚在270±1nm处有最大吸收，而甘油在此处吸收度很小，与有关文献报道[4]一致。

图13.2精密量取样品10ml，置250ml量瓶中，用蒸馏水洗涤移液管数次，合并洗涤液置容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。

精密量取储备液4ml，置100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

以甘油同法稀释的溶液做空白，在270±1nm波长处测定吸收度，以苯酚溶液吸收度对浓度的回归方程计算苯酚含量。

一、实验目的1. 熟悉紫外分光光度法的基本原理和操作方法。

2. 掌握苯酚在紫外光区域的吸收特性。

3. 通过紫外分光光度法测定水样中苯酚的含量。

二、实验原理紫外分光光度法是一种利用物质在紫外光区域吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。

苯酚分子中含有共轭双键，在紫外光区域具有特定的吸收峰，通过测定苯酚溶液在特定波长下的吸光度，可以计算出苯酚的浓度。

实验原理如下：1. 根据比尔定律，吸光度A与溶液的浓度c和光程L成正比，即A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数。

2. 通过绘制苯酚标准溶液的吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数。

3. 测定水样中苯酚的吸光度，根据吸光度-浓度曲线计算苯酚的浓度。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计、石英比色皿、移液管、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。

2. 试剂：苯酚标准溶液（浓度为 1.00mg/mL）、蒸馏水、无水碳酸钠、氢氧化钠、硫酸、盐酸等。

四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取6个50mL容量瓶，分别加入0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度线。

（2）将标准溶液置于石英比色皿中，在270-295nm波长范围内，每隔10nm测定一次吸光度。

（3）以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线。

2. 样品测定（1）取适量水样于50mL容量瓶中，加入适量无水碳酸钠和氢氧化钠，使水样pH 值调节至碱性。

（2）加入适量硫酸，使水样pH值调节至酸性。

（3）加入适量盐酸，使水样pH值调节至中性。

（4）按照标准曲线绘制步骤，测定水样中苯酚的吸光度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数为ε = 1.85×10^4 L·mol^-1·cm^-1。

2. 样品测定测定水样中苯酚的吸光度为0.576，根据吸光度-浓度曲线计算得到苯酚浓度为0.012mg/L。

用紫外可见分光光度计测废水中的苯酚含量项目实施方案学校：绵阳职业技术学院指导老师：石建屏组长：高晓宇组员：刘世樑、汤效飞刘彦汝、齐丽君胡楚卿、邓素容目录一、仪器工作原理二、仪器结构1、光源2、分光系统3、吸收池4、检测显示系统三、仪器使用方法四、工作曲线法测苯酚含量（一）溶液的制备1、容器的洗涤2、溶液的配制（二）样品的测定1、绘制吸收光谱曲线，确定最大吸收波长2、绘制苯酚溶液工作曲线，计算未知样品浓度3、实验完毕五、结果记录及实验数据处理一、仪器工作原理含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。

物质结构不同对紫外及可见光的吸收具有选择性。

其中，最大吸收波长λ、摩尔吸收系数ε及吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。

由于在λmax处吸光度A有最大值，在此波长下A随浓度的变化最为明显，方法的灵敏度最大，故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液（试液）的吸收光谱曲线，再由曲线上找出λmax，据此对物质进行定量分析。

用紫外分光光度计进行定量分析时，若被分析物质浓度太低或太高，可使透光率的读数扩展10倍或缩小10倍，有利于低浓度或高浓度的分析，其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εbc。

二、仪器组成紫外分光光度计由光源、分光系统、吸收池、检测显示系统等四大部分组成，其组成框图见下图。

1、光源光源的作用是提供符合要求的入射光。

分光光度计对光源的要求是：在使用波长范围内提供连续的光谱，光强应足够大，有良好的稳定性，使用寿命长。

紫外光光源多为气体放电光源，如氢，氘，氙放电灯等。

其中应用最多的是氢气灯及同位素氘灯，其使用波长范围为185～357nm。

为了保证发光强度稳定，也要用稳压电源供电。

氘灯的光谱分布与氢灯相同，但光强比同功率氢灯大3～5倍，寿命比氢灯长。

2、分光系统分光系统是紫外可见分光光度计的核心部分。

它主要由入射狭缝、准直镜、光栅、物镜和出射狭缝组成。

入射狭缝起着限制杂散光进入的作用, 它一般处在准直镜的焦点上；准直镜将从入射狭缝射进来的复合光变成平行光；光栅用来分光。

紫外吸收光谱法测定苯酚含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法，它是研究分子吸收200.0~800.0nm波长范围内的吸收光谱。

紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。

通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。

苯酚已经被列入有机污染物的黑名单。

但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。

如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。

苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。

对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。

定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。

在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。

定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并绘制标准曲线。

再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。

三、仪器与试剂1．紫外可见分光光度计2．容量瓶（1000ml、250ml、50ml）3．吸量管（5ml、10ml）4．苯酚（AR）于5支50ml的容量瓶中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。

四、最大吸收波长的选择在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸光度，在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定，直至找到最大吸收波长。

五、数据记录及结果分析(1)、标准表(2)、苯酚的吸收曲线图（根据上表任意组标准溶液数据作图）(3)、标准曲线图C phenol （mg/L）标准曲线方程：Y =0 .055+ 0.1515 * X相关系数r=0.9979六、苯酚浓度的测定在相同情况下，直接测定未知样品的吸光度。

紫外吸收光谱法测定苯酚含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法，它是研究分子吸收200.0~800.0nm波长范围内的吸收光谱。

紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。

通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。

苯酚已经被列入有机污染物的黑名单。

但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。

如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。

苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。

对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。

定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。

在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。

定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并绘制标准曲线。

再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。

三、仪器与试剂1．紫外可见分光光度计2．容量瓶（1000ml、250ml、50ml）3．吸量管（5ml、10ml）4．苯酚（AR）于5支50ml的容量瓶中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。

四、最大吸收波长的选择在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸光度，在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定，直至找到最大吸收波长。

五、数据记录及结果分析(1)、标准表(2)、苯酚的吸收曲线图（根据上表任意组标准溶液数据作图）(3)、标准曲线图C phenol （mg/L）标准曲线方程：Y =0 .055+ 0.1515 * X相关系数r=0.9979六、苯酚浓度的测定在相同情况下，直接测定未知样品的吸光度。

苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定
苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定可以通过以下步骤进行：
绘制苯酚的紫外光谱：
（1）准备苯酚样品：将苯酚溶解在适当的溶剂中，例如甲醇或乙腈，制备成适当浓度的溶液。

（2）准备紫外光谱仪：将紫外光谱仪预热并校准，确保仪器处于良好状态。

（3）设置参数：设置扫描范围、扫描速度、扫描间隔等参数，这些参数将影响光谱的精度和分辨率。

（4）开始扫描：将制备好的苯酚溶液倒入样品池中，开始扫描紫外光谱。

（5）记录数据：在扫描过程中，记录每个波长下的吸光度值。

定量测定苯酚：
（1）选择合适的工作曲线：根据苯酚的浓度范围，选择合适的工作曲线，例如线性工作曲线或非线性工作曲线。

（2）绘制工作曲线：使用不同浓度的苯酚溶液，按照相同的方法绘制紫外光谱，并记录每个波长下的吸光度值。

将这些数据点绘制在图上，拟合一条直线或曲线作为工作曲线。

（3）测定未知样品：将未知样品的苯酚溶液按照相同的方法绘制紫外光谱，并记录每个波长下的吸光度值。

（4）定量分析：根据工作曲线的斜率和截距，计算未知样品中苯酚的浓度。

需要注意的是，在进行定量分析时，需要保证实验条件的一致性，包括溶剂、温度、pH值等。

此外，还需要注意紫外光谱仪的校准和仪器的维护保养，以保证实验结果的准确性和可靠性。

紫外分光光度法测定苯酚消毒液中苯酚的含量
张春来;孙运风
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2003(015)005
【摘要】目的探讨用紫外分光光度法测定苯酚消毒液中苯酚含量的效果.方法采用紫外分光光度法.结果测定波长为287nm,平均回收率为99.77%,CV=0.34%.苯酚浓度在5～40μg·mL-1范围内,A值与C值线性关系良好.结论本方法简便、快速、准确、合理性好,为测定苯酚剂中苯酚含量的好方法.
【总页数】2页(P55-56)
【作者】张春来;孙运风
【作者单位】山东临沂市红十字会中心血站,临沂,276002;山东临沂市红十字会中心血站,临沂,276002
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.可见-紫外分光光度法测定器械消毒液中甲醛与苯酚的含量 [J], 陈新梅;吴丽燕;林涛
2.紫外分光光度法测定苯酚消毒液中苯酚含量 [J], 方兴华;钱亚萍;缪华蓉
3.紫外分光光度法测定器械消毒液中苯酚含量 [J], 廉萍
4.可见-紫外分光光度法测定器械消毒液中甲醛、苯酚的含量 [J], 陈新梅;吴丽燕;
林涛;卡哈尔·扎依尔
5.紫外分光光度法测定苯酚消毒液中苯酚含量 [J], 孝建华;郭丰广
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第1篇一、实验目的1. 掌握紫外可见分光光度法的基本原理和应用。

2. 学习紫外可见分光光度计的使用方法。

3. 了解苯酚在紫外可见光区的吸收特性，并测定苯酚溶液的浓度。

二、实验原理苯酚是一种有机化合物，分子式为C6H5OH。

苯酚在紫外可见光区具有特征吸收，其最大吸收波长为270-295nm。

紫外可见分光光度法是利用苯酚在紫外可见光区吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。

根据朗伯-比尔定律，苯酚溶液的吸光度与其浓度成正比，即A = εcl，其中A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，c为苯酚溶液的浓度，l为光程。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 紫外可见分光光度计- 10mL移液管- 50mL容量瓶- 100mL容量瓶- 烧杯- 玻璃棒- 酸式滴定管- pH计- 电子天平2. 试剂：- 苯酚标准溶液（0.1mg/mL）- 硫酸- 氢氧化钠- 水为二次蒸馏水四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：1.1 准备标准溶液：准确移取0.1mg/mL苯酚标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于50mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。

1.2 吸取各标准溶液2.0mL于10mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。

1.3 在紫外可见分光光度计上，选择波长为270nm，以二次蒸馏水为参比溶液，测定各标准溶液的吸光度。

1.4 以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定：2.1 准确移取待测苯酚溶液2.0mL于10mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。

2.2 在紫外可见分光光度计上，选择波长为270nm，以二次蒸馏水为参比溶液，测定样品溶液的吸光度。

2.3 根据标准曲线，计算样品溶液中苯酚的浓度。

3. 结果分析：3.1 计算样品溶液中苯酚的浓度，并与理论值进行比较。

3.2 分析实验误差，讨论实验过程中可能存在的问题。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：通过绘制标准曲线，可以得出苯酚溶液的浓度与吸光度之间的关系。

紫外分光光度法测定苯酚的含量紫外分光光度法是一种常用的分析测定方法，可用于元素或分子组分浓度、光谱特性等多种分析测定。

这种方法是通过电子翻译和科学研究，发现物质吸收合能分子作用时，它和傅立叶调制光耦合，形成以如下算式为基础的内电子吸收系数反应理论：A=ελlog.C，且ε为内电子吸收系数，λ为辐射波长，C为测定物质的浓度。

因此，紫外分光光度法在电子吸收系数和被测物质浓度变动范围内，都可以准确、快速地测定物质含量。

紫外分光光度法测定苯酚的含量，是指在实验室使用紫外分光光度仪测定苯酚物质的量值。

具体实验步骤是：首先将一定体积的样品放入实验皿中，加稀释溶液，将稀释后的样本放入紫外分光分析仪的测量池中，在紫外分光分析仪中设定所需的参数，然后将玻璃管放入测量池内，按试验运行程序测量，再将取得的实验数据进行分析，从而得出苯酚的含量。

由于紫外分光光度法结果受到紫外分光光度仪本身的影响，因此苯酚含量测定之前需要进行仪器检定，以确保实验准确性。

在检定当中，有一定的质控指标，我们需要严格按照标准进行，以保证实验的结果的可靠性。

此外，紫外分光光度测定苯酚的含量的实验能够受到测定介质的影响。

因此，在实验中，在选择测定介质时，要根据不同测定物质的特性，并考虑苯酚与测定介质的溶解度来选择适当的测定介质。

另外，紫外分光光度测定苯酚含量时，还需要考虑苯酚本身的稳定性以及周围环境温湿度。

稳定性考虑如：放入测量池中的样品要限定容量，且时间也不宜太久，以保证试验结果的一致性；环境温湿度要求室温在25℃左右，湿度控制在60%以下，否则，有一定的影响实验结果的准确性。

紫外分光光度法测定苯酚的含量既快速、精确，而且容易操作，也无需添加化学药品，因此被广泛应用于微量苯酚测定和相应含量控制，具有一定的重要价值。

实验一紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时）一、实验目的1. 学习使用UV757CRT紫外可见分光光度计。

2.掌握紫外－可见分光光度法测定水中微量苯酚含量的方法。

二、实验原理紫外－可见吸收光谱属分子吸收光谱法，当分子吸收到外来的辐射能量（光区范围在200-800 nm）时，分子外层价电子发生能级跃迁，进而产生吸收光谱。

紫外光谱具有灵敏度高、准确度好、仪器价格低廉、操作简便等许多优点，主要应用于化合物的定量分析。

其定量分析的主要依据为朗伯－比尔定律A = εbc式中，A---吸光度，ε--化合物的摩尔消光系数（L/(mol cm)），b—比色皿厚度（cm），c—溶液浓度（mol/L）。

根据上述公式，吸光度与溶液浓度呈线性关系，如已知某物质的摩尔吸光系数，就可以根据吸光度值得出待测溶液的摩尔浓度。

三、实验仪器、试剂四、实验步骤1. 打开电源，开机进行自检。

2. 配制苯酚标准溶液a. 精确称取苯酚0.3000 g，放入1 L容量瓶中，加蒸馏水摇匀，定容至刻度；b. 分别精确量取上述标准液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，分别定容至50 ml，按序编号。

3. 绘制苯酚的标准吸收曲线取上述3(4)号标准液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，在190-400 nm波长范围内进行扫描，绘制苯酚的标准吸收曲线，并选取272 nm 附近最大吸收波长为本实验的入射波长。

4. 绘制吸光度-浓度工作曲线分别取上述配制的5组溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，并绘制成吸光度-浓度曲线，计算得到回归方程。

5. 待测溶液浓度的测定取待测苯酚溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，代入回归方程中，计算待测溶液的克浓度和摩尔浓度(mol/L)；并通过朗伯-比尔公式计算苯酚的摩尔吸光系数。

紫外分光光度法测定苯酚的含量（实验2）学生姓名：钟国莉学号：20072401175专业：化学年级班级：07化4课程名称：仪器分析化学实验实验时间：09-03-20指导老师：梁勇实验评分：【实验目的】1、掌握紫外光谱法进行物质定性、定量分析的基本原理；2、以及学习UV8500型紫外-可见分光光度计的使用方法。

【实验原理】苯酚含有苯环，具有由π→π*跃迁产生的三个特征吸收谱带。

由于-OH的取代，吸收峰红移。

从而使π*轨道的能量降低。

首先在文献上查的苯酚的紫外吸收光谱数据，找出苯酚的入max并根据公式lg A=lg k+lg bc与其相对应的吸光度的比值，与所查数据进行对照，进行入max及吸光度比值比较，看其是否一致。

【仪器与试剂】1、仪器：UV8500型紫外分光光度计；1cm石英吸收池2个；25mL比色管10支；10mL、5mL、1mL移液管各一支；100mL、250mL烧杯各一个；洗耳球2个。

实验试剂：约0.0003mol/L苯酚水溶液；2、试剂：苯酚标准水溶液称取1.000g苯酚，用去离子水溶解，转入1000mL容量瓶中，用水溶液稀释至刻度，摇匀，即为1g/L苯酚标准溶液。

吸取1g/L苯酚10mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即为100mg/mL。

【实验内容与步骤】1、标准曲线的制作：取5支25mL的比色管，分别加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL苯酚（100mg/L）。

用去离子水稀释到刻度，摇匀。

用1cm石英比色皿，去离子水作参比，在选定的最大波长下，分别测定各溶液的吸光度，以吸光度对浓度作图，做出工作曲线。

2、定量测定废水中的本分含量：准确移取未知液10mL于25mL比色管中，用去离子水稀释到刻度，摇匀。

在同样条件下测定其吸光度，根据吸光度在工作曲线上查出苯酚待测液的浓度，并计算出未知液中苯酚含量。

【数据记录及结果分析】数据记录处理及作图分析如下：样品的浓度c=20.488mg/L×2.5=51.220mg/L【思考题】苯酚的紫外吸收光谱中210nm、270nm的吸收峰是由哪类价电子跃迁产生的？答：210nm是由π→π*跃迁产生的，270nm是由n→π*跃迁产生的。

实验二紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量苯酚是工业废水中一种有害污染物质，需对水中酚含量控制。

苯酚在270-295nm波长处有特征吸收峰，其吸光度与苯酚的含量成正比，应用Lambert－Beer定律可直接测定水中总酚的含量。

一、实验目的1．学会使用Cary50型紫外-可见分光光度计2．掌握紫外-可见分光光度计的定量分析方法二、原理简介紫外-可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生，同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁，因此吸收光谱具有带宽。

紫外-可见吸收光谱的定量分析采用朗伯-比尔定律，被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比，即：其中A是吸光度，I、分别为透过样品后光的强度和测试光的强度，为摩尔吸光系数，b为样品厚度。

由于苯酚在酸、碱溶液中吸收波长不一致（见下式），实验选择在碱性中测试，选择测试的波长为288nm左右，取紫外-可见光谱仪波长扫描后的最大吸收波长。

Cary50是瓦里安公司的单光束紫外-可见分光光度计。

仪器原理是光源发出光谱，经单色器分光，然后单色光通过样品池，达到检测器，把光信号转变成电信号，再经过信号放大、模/数转换，数据传输给计算机，由计算机软件处理。

三、仪器与溶液准备1、Cary50型紫外-可见分光光度计2、1cm石英比色皿一套3、25 ml容量瓶5只，100 ml容量瓶1只，10ml移液管二支配置250 mg/L苯酚的标准溶液：准确称取0.0250 g苯酚于250 mL烧杯中，加入去离子水20 mL使之溶解，加入0.1M NaOH 2mL，混合均匀，移入100 mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。

取5只25 mL容量瓶，分别加入1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀，作为标准溶液系列。

将溶剂，标准溶液，待测水样依此装入石英比色皿。

按测试程序的提示，依次放入样品室中进行测试。

四、测试过程1、确认样品室内无样品2、开电脑进入Window 系统3、点击进入Cary50 主菜单4、双击Cary-WinUV图标5、在Win-UV 主显示窗口下，双击所选图标“SCAN”以扫描测定吸收曲线：取上述标准系列任一溶液装进1cm石英比色皿至4/5，以装有蒸馏水的1cm石英比色皿作为空白参比，设定在220－350 nm波长范围内扫描，获得波长-吸收曲线，读取最大吸收的波长数据。

实验苯酚紫外吸收光谱的绘制及定量测定一、实验目的1.了解紫外可见分光光度法的基本原理。

2.掌握紫外可见分光光度计的基本操作。

3.紫外可见吸收光谱的绘制和定量测定方法二、实验原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。

它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。

可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。

根据Lambert-Beer定律：A=εbc，（A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度）可以对溶液进行定量分析。

在紫外可见吸收分光光度分析中,必须注意溶液的pH值的影响。

因为溶液的pH值不但有可能影响被测物吸光强度,甚至还可能影响被测物的峰位形状和位置。

酚类化合物就有这一现象，例如苯酚在溶液中存在着如下电离平衡：苯酚在紫外区有三个吸收峰,在酸性或中性溶液中, λmax为196.3nm,210.4nm和269.8nm;在碱性溶液中λmax位移至207.1nm,234.8nm和286.9nm. 图3-3为0.021g/L的苯酚分别在0.010mol/L 盐酸溶液与氢氧化钠溶液中的紫外吸收光谱.。

由图知在盐酸溶液与氢氧化钠溶液中，苯酚的紫外吸收光谱有很大差别，所以在用紫外可见吸收分光光度分析苯酚时应加缓冲溶液，本实验是通过加氢氧化钠强碱溶液来控制控制溶液的pH。

图3-2苯酚的紫外吸收光谱曲线A: 苯酚在0.010mol/L氢氧化钠溶液中的紫外吸收光谱曲线B: 苯酚在0.010mol/L盐酸溶液中的紫外吸收光谱三、仪器和试剂1.仪器：（1）紫外可见分光光度计（2）1.0cm石英比色池2.试剂：（1）苯酚标准溶液:0.5g/L（2）0.25mol/L NaOH四、实验操作1.准确移取0.5g/L的苯酚标准溶液5.00ml于50 ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀.分别准确移取上述苯酚溶液0.00, 5.00,10.00,15.00ml于25ml 比色管中,另准确移取合适体积的未知溶液(视未知溶液中苯酚溶液的浓度而定)2份于25ml比色管中，上述各比色管中分别各加1ml 0.25mol/L的NaOH溶液,用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量紫外-可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定水中苯酚含量。

以下是该方法的实验步骤和实验结果的解释。

一、实验原理紫外-可见分光光度法是一种基于分子吸收光谱的定量分析方法。

当光通过样品溶液时，样品溶液中的物质会吸收特定波长的光，导致透射光强度降低。

吸收光谱的强度和波长之间的关系可用于确定物质的浓度。

苯酚是一种常见的污染物，在水中含量较高时会对环境和人类健康产生负面影响。

因此，测定水中苯酚含量对于环境保护和水质监测具有重要意义。

在紫外-可见光谱范围内，苯酚具有明显的吸收峰，可用于其定量分析。

二、实验步骤1.试剂与仪器实验所需试剂包括苯酚标准品、纯水、显色剂（如溴酸钾、溴化钾等）。

实验所需仪器包括紫外-可见分光光度计、比色皿（1cm）、容量瓶（25mL）、吸管（1mL、5mL）等。

2.样品准备将待测水样进行过滤，以去除悬浮物和杂质。

取5mL滤后的水样于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。

3.标准曲线制作分别取0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL苯酚标准品于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。

用纯水定容至刻度，摇匀。

在紫外-可见分光光度计上分别测量各容量瓶中溶液的吸光度，绘制标准曲线。

4.样品测定在紫外-可见分光光度计上测量待测样品溶液的吸光度。

根据标准曲线可得到待测样品中苯酚的浓度。

三、实验结果解释通过对比标准曲线和样品溶液的吸光度，可以确定样品中苯酚的浓度。

根据测定的苯酚浓度，可以进一步计算水中苯酚的含量。

具体计算方法如下：水中苯酚含量（mg/L）= 样品溶液中苯酚浓度（mg/L）× 水样体积（L）通过实验结果解释可知，紫外-可见分光光度法是一种可靠的测定水中苯酚含量的方法。

该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等优点，适用于水中苯酚含量的监测和分析。

在实际应用中，需要注意控制实验条件，如显色剂种类和浓度、反应温度和时间等，以提高测定结果的准确性和可靠性。

实验4 紫外吸收光谱法测定苯的含量一、实验目的1、了解紫外光谱法测定苯的原理及方法。

2、了解TU-1901双光束紫外可见分光光度计的使用。

3、学习利用吸收光谱曲线进行化合物鉴定和纯度检查。

二、实验原理许多有机化合物或其衍生物，在可见光或紫外光区有吸收光谱，各种物质分子有其特征的分子吸收光谱（吸收曲线）。

吸收光谱的形状和物质的特性有关，可作为定型鉴定的依据，而在某选定的波长下，测量其吸收光度即可对物质进行定量分析。

紫外吸收光谱用于定量分析时，符合朗伯--比尔定律，即A=κbc，式中A为吸光度，κ为摩尔吸收系数，b为液层厚度。

三、仪器和试剂1、仪器：TU-1901型紫外-可见分光光度计，1cm石英比色皿，5ml吸量管，10ml容量瓶。

2、试剂：苯（色谱纯），乙醇（AR、95%），0.1g/L苯标准溶液。

四、实验内容1、准备工作依次打开主机、计算机以及显示器的电源开关，预热30min。

2、吸收曲线的绘制将装有参比溶液和标准试样的比色皿放入光路中，在紫外分光光度计上，从波长200-300nm，每隔0.5nm扫描出苯的吸收曲线。

指出苯的B吸收带，找出B吸收带的最大吸收波长。

3、试样中苯含量的测定（1）苯标准曲线的绘制分别吸取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL 0.1g/L的苯标准溶液于5只10ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。

用1ml石英比色皿，以乙醇做参比溶液，在最大吸收波长处分别测定其吸光度。

以吸光度为纵坐标，苯的含量为横坐标绘制标准曲线。

（2）测定乙醇试样中苯的含量准确吸取含苯的试样5mL于10mL容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，用1cm石英比色皿，以乙醇做参比溶液，在最大吸收波长处测定试样溶液的吸光度，根据苯标准曲线查得相应的样品浓度。

4、结束工作（1）实验结束，关闭紫外工作软件、电脑电源。

（2）取出吸收池，清洗晾干放入盒内保存。

（3）清理台面，填写仪器使用记录。

五、实验结果序号峰/谷波长(nm) Abs 注释1 峰261.00 0.1432 峰255.00 0.2073 峰249.00 0.1664 峰244.00 0.106最大吸收波长λmax=255.00nm在255.00nm下分别测定苯标准溶液的吸光度数据记录序号编号类型浓度[g/L] Abs 波长255.00nmSD RSD [%]1 标准样品1标准样品0.1000 0.210 0.210 0.0000 0.0000 2 标准样品2标准样品0.2000 0.383 0.383 0.0000 0.0000 3 标准样品3标准样品0.3000 0.556 0.556 0.0000 0.0000 4 标准样品4标准样品0.4000 0.711 0.711 0.0000 0.0000 5 标准样品5标准样品0.5000 0.925 0.925 0.0000 0.0000 数据处理在255.00nm波长下测得苯试样溶液的吸光度为0.460 由标准曲线可得：序号编号类型浓度[g/L] Abs 波长255.00nmSD RSD [%]1 未知样品1未知样品0.3780 0.695 0.695 0.0000 0.0000 从标准曲线上可查得乙醇试样中苯的实际含量c=0.3780g/L。