紫外分光光度法测定水样中的苯酚

紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定无机和有机物质的浓度。

在本实验中，我们将利用紫外可见分光光度法测定苯酚的含量。

下面是实验步骤。

实验原理苯酚在紫外和可见光区都有吸收峰，根据它的吸收峰特征可以测定其含量。

在本实验中，我们将利用苯酚在240 nm处的吸收峰进行测定。

实验仪器、试剂以及玻璃仪器仪器：紫外可见分光光度计试剂：苯酚、甲醇玻璃仪器：比色皿、移液管、醇灯、玻璃棒、烧杯等。

实验步骤步骤1：制备苯酚样品溶液将1 g的苯酚粉末称到50 mL的烧杯中，加入约30 mL甲醇并混合均匀，然后用甲醇稀释到50 mL。

最后用玻璃棒搅拌至完全溶解。

步骤2：制备苯酚标准曲线将制备好的苯酚样品溶液定容到50 mL，在紫外可见分光光度计中，设置检测波长为240 nm，然后将苯酚标准溶液分别放入比色皿中，取0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL苯酚标准溶液，然后用甲醇稀释成10 mL。

最后，利用紫外可见分光光度计测量各个标准溶液的吸光度。

步骤3：测定未知样品将待测样品取5 mL，加甲醇稀释成50 mL，然后放到紫外可见分光光度计中测量样品的吸光度。

根据标准曲线可以计算出样品中苯酚的含量。

注意事项1.制备苯酚样品溶液的时候，要充分混合均匀，防止苯酚沉淀。

2.操作过程中，不可碰触紫外光管等易损部件。

3.实验前，应进行紫外可见分光光度计的预热操作，以保证测试准确性。

实验结果及分析根据实验测定的吸光度可以绘制出苯酚标准曲线，通过计算未知样品的吸光度，即可求出其苯酚含量。

对测量的结果进行分析，可以了解到此方法的准确性和可行性。

总结本实验介绍了紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤。

通过本实验的学习，不仅能够掌握该分析方法的原理、仪器和操作要点，还能够提高实验技巧，从而为今后的实验研究奠定基础。

一、实验目的1. 熟悉紫外分光光度法的基本原理和操作方法。

2. 掌握苯酚在紫外光区域的吸收特性。

3. 通过紫外分光光度法测定水样中苯酚的含量。

二、实验原理紫外分光光度法是一种利用物质在紫外光区域吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。

苯酚分子中含有共轭双键，在紫外光区域具有特定的吸收峰，通过测定苯酚溶液在特定波长下的吸光度，可以计算出苯酚的浓度。

实验原理如下：1. 根据比尔定律，吸光度A与溶液的浓度c和光程L成正比，即A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数。

2. 通过绘制苯酚标准溶液的吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数。

3. 测定水样中苯酚的吸光度，根据吸光度-浓度曲线计算苯酚的浓度。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计、石英比色皿、移液管、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。

2. 试剂：苯酚标准溶液（浓度为 1.00mg/mL）、蒸馏水、无水碳酸钠、氢氧化钠、硫酸、盐酸等。

四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取6个50mL容量瓶，分别加入0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度线。

（2）将标准溶液置于石英比色皿中，在270-295nm波长范围内，每隔10nm测定一次吸光度。

（3）以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线。

2. 样品测定（1）取适量水样于50mL容量瓶中，加入适量无水碳酸钠和氢氧化钠，使水样pH 值调节至碱性。

（2）加入适量硫酸，使水样pH值调节至酸性。

（3）加入适量盐酸，使水样pH值调节至中性。

（4）按照标准曲线绘制步骤，测定水样中苯酚的吸光度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数为ε = 1.85×10^4 L·mol^-1·cm^-1。

2. 样品测定测定水样中苯酚的吸光度为0.576，根据吸光度-浓度曲线计算得到苯酚浓度为0.012mg/L。

紫外分光光度法测定水中总酚的含量苯酚是工业废水中一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检验饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。

一、实验目的1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。

2．熟悉紫外分光光度计的基本操作技术。

二、方法原理具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的第一类取代基(致活基团)使吸收更强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，其吸收程度与苯酚的含量成正比，因此可用紫外分光光度法，根据Lambert—Beer定律直接测定水中总酚的含量。

三、仪器与试剂1．紫外分光光度计；2．苯酚标准溶液，250mg/L：准确称0.0250g苯酚于250 mL烧杯中，加去离子水20 mL使之溶解，移入100mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。

四、内容与步骤1、标准系列溶液的配置取5支25ml比色管，分别加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀待测。

2．吸收曲线的测量取上述标推系列溶液中任一溶液，用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，在220～350 nm波长范围内，每5nm测量一次吸光度。

3．标准曲线的测量在苯酚的最大吸收波长(λmax)下, 用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，测量标准系列溶液的吸光度。

4．水样的测定与测量标准系列溶液的相同条件下，测量水样的吸光度五、数据记录与处理1．列表记录不同波长下同一标准溶液的吸光度值，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制吸收曲线，找出λmax，计算其 max。

2．列表记录标冶系列溶液与水样的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准系列溶液浓度为纵坐标，绘制标推曲线；根据水样的吸光度查找出其相当的标准溶液的浓度并算出水样中苯酚的含量(g／L)。

六、问题与讨论1．紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同?部件有何异同?。

紫外分光光度法测定苯酚的浓度
一、实验目的
1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。

2．掌握应用紫外分光光度计进行定量分析的方法和基本操作。

二、实验原理
苯酚是工业废水中的一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检测饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。

苯具有环状共轭体系，由π→π*跃迁在紫外吸收光区产生三个特征吸收带：强度较高的E1带，出现在180nm左右；中等强度的E2带，出现在204nm左右；强度较弱的B带，出现在255nm。

有机溶剂、苯环上的取代基及其取代位置都
可能对最大吸收峰的波长、强度和形状产生影响。

具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的部分取代基（助色团）使吸收增强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，在一定范围内其吸收强度与苯酚的含量成正比，符合Lambert-Beer定律，因此，可用紫外分光光度法直接测定水中总酚的含量。

三、实验步骤
1.原溶液的配制
准确称取0.0250g苯酚与烧杯中，用蒸馏水溶解后定容于100ml的容量瓶中，则此溶液的浓度为250mg/L。

2.标准溶液的配制
取5支50ml的容量瓶，分别编号为1、2、3、4、5，向其中分别移取1ml、5ml、10ml、20ml、40ml的250mg/L的苯酚溶液，并用蒸馏水定容。

计算其浓度分别
3．标准曲线的测定
选择苯酚的最大吸收波长（270nm），用1cm石英比色皿，以溶剂空白（去离子水）作参比，按浓度由低到高顺序依次测定苯酚标准溶液的吸光度。

四、数据记录与处理。

紫外－可见分光光度法测定废水中微量苯酚班级:化01 实验时间:2013-9-17组员:常宽(2010011839) 郭雅容(2010011822)肖雅博(2010011824) 孙悦(2010011825)一、实验目的1.学会使用UV-2100型紫外-可见分光光度计；2.掌握分光光度法测定废水中微量苯酚的方法。

二、实验原理苯酚是一种剧毒物质，可以致癌，已经被列入有机污染物的黑名单。

但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。

如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。

苯酚的中性溶液在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。

对苯酚中性溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。

定量分析是基于Lambert-beer定律，在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并自动绘制标准曲线。

再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。

三、仪器和试剂岛津UV-2100型紫外可见分光光度计，容量瓶（1000ml1个，50ml6个），苯酚储备液体（0.3g/L），废水四、实验内容及步骤1.以去离子水作为参比，先后测绘苯酚标准溶液和废水的吸收光谱，确定最大吸收波长，并粗略估计废水中苯酚的浓度；2.根据废水中苯酚的浓度和工作曲线的要求，配制标准系列溶液，测定标准系列的吸光度，绘制标准曲线；3.测定废水中苯酚的吸光度，根据标准曲线求出废水中苯酚的含量；五、数据处理1.配置标准溶液称取0.3088g苯酚定容于1000ml，苯酚标准溶液浓度c0=0.3088g/L，分别取标样2、4、6、8、10ml定容于50ml容量瓶，则各标准溶液的浓度列如下表：表1标准溶液的配制与吸光度测量标准液的体积/mL计算浓度/mg.L-1紫外吸光度00212.3520.190424.7040.384637.0560.588849.4080.7831061.7600.9782.测定标准工作曲线通过对比标样与废水样品的吸收谱图，将检测波长定为269.20nm。

紫外分光光度法测定苯酚的含量2011-01-24紫外分光光度法测定苯酚的含量2011-01-19紫外分光光度法测定苯酚的含量【测试目的】一、掌握紫外光谱法举行事物定性、定量分析的基本原理。

二、学习UV8500型紫外--可见分光光度计的施用方法。

【测试原理】含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特性吸收。

事物结构不同对紫外及可见光的吸收曲线不同。

其中,最大吸收波长λmax、摩尔吸收系数εmax 及吸收曲线的形状不同是举行事物定性分析的依据。

由于在λmax处吸光度A有最大值,在此波长下A随浓度的变化最为明显,方法的灵敏度最大,故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液(试液)的吸收光谱曲线,再由曲线上找出λmax,据此对事物举行定量分析。

用紫外分光光度计举行定量分析时,若被分析事物浓度太低或者太高,可以使透光率的读数扩大10倍或者缩小10倍,有利于低浓度或者高浓度的分析,其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εbc。

【仪器与试药】⑴主要仪器：岛津UV1700型紫外-可见分光光度计；1cm石英吸收池二个；25mL容量瓶7支；5mL、10mL移液管各1支；100mL、250mL烧杯各一个；吸耳球一个。

(2)试药：苯酚标准溶液：100mg/L；样品溶液(未知浓度)【测试内部实质意义与步骤】一、定性分析⑴、分析溶液的配合制造取5支25mL的容量瓶,用移液管分别准确加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL浓度为100mg/L的苯酚标准溶液,用去离子水稀释至25mL刻度,摇匀。

测试数据记录于标准表中。

(2)、确定最大吸收波长苯酚未知液的配合制造：取A或者B溶液1mL于25mL的容量瓶中,蒸馏水定容,浓度大约为0.003mol/L,取稀释后的苯酚标准溶液,在UV1700型紫外-可见分光光度计上,用1cm石英吸收池,去离子水作参比溶液,在200~330nm波长规模内举行扫描,绘制苯酚的吸收曲线。

在曲线上找出λmax一、λmax2。

大学学生实验报告开课学院及实验室：化学化工学院室2013年月日学院化学化工学院年级、专业、班姓名学号实验课程名称分析化学实验成绩实验项目名称紫外吸收光谱法测定水中的苯酚指导老师一、实验目的1．学会使用UV1100型紫外分光光度计。

2．学会并掌握紫外吸收光谱曲线的绘制和测量波长的选择以及标准曲线的绘制。

二、实验原理通过紫外分光光度计测定苯酚的紫外吸收光谱图，以确定苯酚的λmax。

在仪器设置的λmax下，用1cm石英比色皿，以蒸馏水作空白对照，测定苯酚标准浓度系列溶液的吸光度值，根据A=εbc，绘制苯酚水溶液的标准工作曲线。

在相同条件下，测得待测苯酚溶液的吸光度值，以确定试样中苯酚的含量。

三、仪器与试剂1．仪器UV1100型紫外分光光度计（附1cm石英皿1套），25mL容量瓶7个，10mL吸量管1支，10mL 移液管1支，洗耳球，烧杯，洗瓶，镜头纸。

2．试剂⑴1g·L-1苯酚标准溶液⑵100mg·L-1苯酚标准溶液⑶苯酚水样。

四、实验步骤1．绘制吸收光谱曲线和选择测量波长⑴用吸量管取5.00mL苯酚标准溶液（100mg·L-1）1份，于25mL容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

⑵以蒸馏水为参比溶液，在UV1100型紫外分光光度计上，选择波长扫描，波长范围设置225～300nm，获得苯酚的吸收曲线，求得苯酚最大吸收波长λmax。

2．绘制标准曲线用吸量管分别吸取1.50、3.00、4.50、6.00、7.50mL苯酚标准溶液（100mg·L-1），分别放入25mL 容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度线定容后，混匀。

此苯酚标准溶液系列对应的浓度分别为6.0、12.0、18.0、24.0和30.0 mg·L-1。

同样以蒸馏水为参比溶液，在苯酚最大吸收波长λmax处，按浓度从低到高依次测定对应的苯酚标准溶液系列的吸光度值，并记录。

以苯酚标准溶液的含量（mg·L-1）为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。

紫外分光光度法测定苯酚的浓度
一、实验目的
1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。

2．掌握应用紫外分光光度计进行定量分析的方法和基本操作。

二、实验原理
苯酚是工业废水中的一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检测饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。

苯具有环状共轭体系，由π→π*跃迁在紫外吸收光区产生三个特征吸收带：强度较高的E1带，出现在180nm左右；中等强度的E2带，出现在204nm左右；强度较弱的B带，出现在255nm。

有机溶剂、苯环上的取代基及其取代位置都
可能对最大吸收峰的波长、强度和形状产生影响。

具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的部分取代基（助色团）使吸收增强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，在一定范围内其吸收强度与苯酚的含量成正比，符合Lambert-Beer定律，因此，可用紫外分光光度法直接测定水中总酚的含量。

三、实验步骤
1.原溶液的配制
准确称取0.0250g苯酚与烧杯中，用蒸馏水溶解后定容于100ml的容量瓶中，则此溶液的浓度为250mg/L。

2.标准溶液的配制
取5支50ml的容量瓶，分别编号为1、2、3、4、5，向其中分别移取1ml、5ml、10ml、20ml、40ml的250mg/L的苯酚溶液，并用蒸馏水定容。

计算其浓度分别
3．标准曲线的测定
选择苯酚的最大吸收波长（270nm），用1cm石英比色皿，以溶剂空白（去离子水）作参比，按浓度由低到高顺序依次测定苯酚标准溶液的吸光度。

四、数据记录与处理。

大学学生实验报告开课学院及实验室：化学化工学院室2013年月日学院化学化工学院年级、专业、班姓名学号实验课程名称分析化学实验成绩实验项目名称紫外吸收光谱法测定水中的苯酚指导老师一、实验目的1．学会使用UV1100型紫外分光光度计。

2．学会并掌握紫外吸收光谱曲线的绘制和测量波长的选择以及标准曲线的绘制。

二、实验原理通过紫外分光光度计测定苯酚的紫外吸收光谱图，以确定苯酚的λmax。

在仪器设置的λmax下，用1cm石英比色皿，以蒸馏水作空白对照，测定苯酚标准浓度系列溶液的吸光度值，根据A=εbc，绘制苯酚水溶液的标准工作曲线。

在相同条件下，测得待测苯酚溶液的吸光度值，以确定试样中苯酚的含量。

三、仪器与试剂1．仪器UV1100型紫外分光光度计（附1cm石英皿1套），25mL容量瓶7个，10mL吸量管1支，10mL 移液管1支，洗耳球，烧杯，洗瓶，镜头纸。

2．试剂⑴1g·L-1苯酚标准溶液⑵100mg·L-1苯酚标准溶液⑶苯酚水样。

四、实验步骤1．绘制吸收光谱曲线和选择测量波长⑴用吸量管取5.00mL苯酚标准溶液（100mg·L-1）1份，于25mL容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

⑵以蒸馏水为参比溶液，在UV1100型紫外分光光度计上，选择波长扫描，波长范围设置225～300nm，获得苯酚的吸收曲线，求得苯酚最大吸收波长λmax。

2．绘制标准曲线用吸量管分别吸取1.50、3.00、4.50、6.00、7.50mL苯酚标准溶液（100mg·L-1），分别放入25mL 容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度线定容后，混匀。

此苯酚标准溶液系列对应的浓度分别为6.0、12.0、18.0、24.0和30.0 mg·L-1。

同样以蒸馏水为参比溶液，在苯酚最大吸收波长λmax处，按浓度从低到高依次测定对应的苯酚标准溶液系列的吸光度值，并记录。

以苯酚标准溶液的含量（mg·L-1）为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。

4 紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量.doc
紫外-可见分光光度法是常用的检测水源中有机有毒物含量的实验方法，其中也包括
苯酚，也就是苯乙醇。

苯酚是一种有毒物质，在细菌和微生物群落污染物质中也常见，有
可能危害水源的安全。

紫外-可见分光光度法是一种定性和定量测试水源中有毒物质苯酚含量的方法，分析
过程很简单，测定结果也精准。

主要步骤有：
1.取样
首先，从原水源中取等量的水样，经过预处理，将有毒物质苯酚预先固定在容器中就
可以用于测定。

2.准备标准溶液
准备一定浓度的苯酚标准溶液，建立比较体系，通过实验可以分析水样中苯酚的实际
含量。

特别注意，使用前需对标准溶液进行校准，以确保测得的含量是准确的。

采用紫外-可见分光光度仪将标准溶液和水样的Wavelength处的波长浓度记录下来，
使用基本的光度学计算公式可以得出水样中苯酚的实际浓度。

4.通过定性和定量结合判断浓度
最后，比较水样中的苯酚含量与标准溶液的比例，通过定性和定量结合的方式判断水
源中苯酚的浓度，从而确定水源中苯酚是否有超标现象。

紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量，能够更准确地反映水源中苯酚实际浓度，
因此，紫外-可见分光光度法经常被用来对环境水体中有毒物质含量进行监测和分析。

同时，此实验还能提醒实验者注意取样，准备标准溶液等操作过程，在取样时也要格外注意，以获得准确的实验结果。

第1篇一、实验目的1. 掌握紫外可见分光光度法的基本原理和应用。

2. 学习紫外可见分光光度计的使用方法。

3. 了解苯酚在紫外可见光区的吸收特性，并测定苯酚溶液的浓度。

二、实验原理苯酚是一种有机化合物，分子式为C6H5OH。

苯酚在紫外可见光区具有特征吸收，其最大吸收波长为270-295nm。

紫外可见分光光度法是利用苯酚在紫外可见光区吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。

根据朗伯-比尔定律，苯酚溶液的吸光度与其浓度成正比，即A = εcl，其中A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，c为苯酚溶液的浓度，l为光程。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 紫外可见分光光度计- 10mL移液管- 50mL容量瓶- 100mL容量瓶- 烧杯- 玻璃棒- 酸式滴定管- pH计- 电子天平2. 试剂：- 苯酚标准溶液（0.1mg/mL）- 硫酸- 氢氧化钠- 水为二次蒸馏水四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：1.1 准备标准溶液：准确移取0.1mg/mL苯酚标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于50mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。

1.2 吸取各标准溶液2.0mL于10mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。

1.3 在紫外可见分光光度计上，选择波长为270nm，以二次蒸馏水为参比溶液，测定各标准溶液的吸光度。

1.4 以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定：2.1 准确移取待测苯酚溶液2.0mL于10mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。

2.2 在紫外可见分光光度计上，选择波长为270nm，以二次蒸馏水为参比溶液，测定样品溶液的吸光度。

2.3 根据标准曲线，计算样品溶液中苯酚的浓度。

3. 结果分析：3.1 计算样品溶液中苯酚的浓度，并与理论值进行比较。

3.2 分析实验误差，讨论实验过程中可能存在的问题。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：通过绘制标准曲线，可以得出苯酚溶液的浓度与吸光度之间的关系。

紫外分光光度法测定苯酚的含量紫外分光光度法是一种常用的分析测定方法，可用于元素或分子组分浓度、光谱特性等多种分析测定。

这种方法是通过电子翻译和科学研究，发现物质吸收合能分子作用时，它和傅立叶调制光耦合，形成以如下算式为基础的内电子吸收系数反应理论：A=ελlog.C，且ε为内电子吸收系数，λ为辐射波长，C为测定物质的浓度。

因此，紫外分光光度法在电子吸收系数和被测物质浓度变动范围内，都可以准确、快速地测定物质含量。

紫外分光光度法测定苯酚的含量，是指在实验室使用紫外分光光度仪测定苯酚物质的量值。

具体实验步骤是：首先将一定体积的样品放入实验皿中，加稀释溶液，将稀释后的样本放入紫外分光分析仪的测量池中，在紫外分光分析仪中设定所需的参数，然后将玻璃管放入测量池内，按试验运行程序测量，再将取得的实验数据进行分析，从而得出苯酚的含量。

由于紫外分光光度法结果受到紫外分光光度仪本身的影响，因此苯酚含量测定之前需要进行仪器检定，以确保实验准确性。

在检定当中，有一定的质控指标，我们需要严格按照标准进行，以保证实验的结果的可靠性。

此外，紫外分光光度测定苯酚的含量的实验能够受到测定介质的影响。

因此，在实验中，在选择测定介质时，要根据不同测定物质的特性，并考虑苯酚与测定介质的溶解度来选择适当的测定介质。

另外，紫外分光光度测定苯酚含量时，还需要考虑苯酚本身的稳定性以及周围环境温湿度。

稳定性考虑如：放入测量池中的样品要限定容量，且时间也不宜太久，以保证试验结果的一致性；环境温湿度要求室温在25℃左右，湿度控制在60%以下，否则，有一定的影响实验结果的准确性。

紫外分光光度法测定苯酚的含量既快速、精确，而且容易操作，也无需添加化学药品，因此被广泛应用于微量苯酚测定和相应含量控制，具有一定的重要价值。

实验一紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时）一、实验目的1. 学习使用UV757CRT紫外可见分光光度计。

2.掌握紫外－可见分光光度法测定水中微量苯酚含量的方法。

二、实验原理紫外－可见吸收光谱属分子吸收光谱法，当分子吸收到外来的辐射能量（光区范围在200-800 nm）时，分子外层价电子发生能级跃迁，进而产生吸收光谱。

紫外光谱具有灵敏度高、准确度好、仪器价格低廉、操作简便等许多优点，主要应用于化合物的定量分析。

其定量分析的主要依据为朗伯－比尔定律A = εbc式中，A---吸光度，ε--化合物的摩尔消光系数（L/(mol cm)），b—比色皿厚度（cm），c—溶液浓度（mol/L）。

根据上述公式，吸光度与溶液浓度呈线性关系，如已知某物质的摩尔吸光系数，就可以根据吸光度值得出待测溶液的摩尔浓度。

三、实验仪器、试剂四、实验步骤1. 打开电源，开机进行自检。

2. 配制苯酚标准溶液a. 精确称取苯酚0.3000 g，放入1 L容量瓶中，加蒸馏水摇匀，定容至刻度；b. 分别精确量取上述标准液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，分别定容至50 ml，按序编号。

3. 绘制苯酚的标准吸收曲线取上述3(4)号标准液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，在190-400 nm波长范围内进行扫描，绘制苯酚的标准吸收曲线，并选取272 nm 附近最大吸收波长为本实验的入射波长。

4. 绘制吸光度-浓度工作曲线分别取上述配制的5组溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，并绘制成吸光度-浓度曲线，计算得到回归方程。

5. 待测溶液浓度的测定取待测苯酚溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，代入回归方程中，计算待测溶液的克浓度和摩尔浓度(mol/L)；并通过朗伯-比尔公式计算苯酚的摩尔吸光系数。

实验二紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量苯酚是工业废水中一种有害污染物质，需对水中酚含量控制。

苯酚在270-295nm波长处有特征吸收峰，其吸光度与苯酚的含量成正比，应用Lambert－Beer定律可直接测定水中总酚的含量。

一、实验目的1．学会使用Cary50型紫外-可见分光光度计2．掌握紫外-可见分光光度计的定量分析方法二、原理简介紫外-可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生，同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁，因此吸收光谱具有带宽。

紫外-可见吸收光谱的定量分析采用朗伯-比尔定律，被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比，即：其中A是吸光度，I、分别为透过样品后光的强度和测试光的强度，为摩尔吸光系数，b为样品厚度。

由于苯酚在酸、碱溶液中吸收波长不一致（见下式），实验选择在碱性中测试，选择测试的波长为288nm左右，取紫外-可见光谱仪波长扫描后的最大吸收波长。

Cary50是瓦里安公司的单光束紫外-可见分光光度计。

仪器原理是光源发出光谱，经单色器分光，然后单色光通过样品池，达到检测器，把光信号转变成电信号，再经过信号放大、模/数转换，数据传输给计算机，由计算机软件处理。

三、仪器与溶液准备1、Cary50型紫外-可见分光光度计2、1cm石英比色皿一套3、25 ml容量瓶5只，100 ml容量瓶1只，10ml移液管二支配置250 mg/L苯酚的标准溶液：准确称取0.0250 g苯酚于250 mL烧杯中，加入去离子水20 mL使之溶解，加入0.1M NaOH 2mL，混合均匀，移入100 mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。

取5只25 mL容量瓶，分别加入1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀，作为标准溶液系列。

将溶剂，标准溶液，待测水样依此装入石英比色皿。

按测试程序的提示，依次放入样品室中进行测试。

四、测试过程1、确认样品室内无样品2、开电脑进入Window 系统3、点击进入Cary50 主菜单4、双击Cary-WinUV图标5、在Win-UV 主显示窗口下，双击所选图标“SCAN”以扫描测定吸收曲线：取上述标准系列任一溶液装进1cm石英比色皿至4/5，以装有蒸馏水的1cm石英比色皿作为空白参比，设定在220－350 nm波长范围内扫描，获得波长-吸收曲线，读取最大吸收的波长数据。

紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量紫外-可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定水中苯酚含量。

以下是该方法的实验步骤和实验结果的解释。

一、实验原理紫外-可见分光光度法是一种基于分子吸收光谱的定量分析方法。

当光通过样品溶液时，样品溶液中的物质会吸收特定波长的光，导致透射光强度降低。

吸收光谱的强度和波长之间的关系可用于确定物质的浓度。

苯酚是一种常见的污染物，在水中含量较高时会对环境和人类健康产生负面影响。

因此，测定水中苯酚含量对于环境保护和水质监测具有重要意义。

在紫外-可见光谱范围内，苯酚具有明显的吸收峰，可用于其定量分析。

二、实验步骤1.试剂与仪器实验所需试剂包括苯酚标准品、纯水、显色剂（如溴酸钾、溴化钾等）。

实验所需仪器包括紫外-可见分光光度计、比色皿（1cm）、容量瓶（25mL）、吸管（1mL、5mL）等。

2.样品准备将待测水样进行过滤，以去除悬浮物和杂质。

取5mL滤后的水样于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。

3.标准曲线制作分别取0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL苯酚标准品于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。

用纯水定容至刻度，摇匀。

在紫外-可见分光光度计上分别测量各容量瓶中溶液的吸光度，绘制标准曲线。

4.样品测定在紫外-可见分光光度计上测量待测样品溶液的吸光度。

根据标准曲线可得到待测样品中苯酚的浓度。

三、实验结果解释通过对比标准曲线和样品溶液的吸光度，可以确定样品中苯酚的浓度。

根据测定的苯酚浓度，可以进一步计算水中苯酚的含量。

具体计算方法如下：水中苯酚含量（mg/L）= 样品溶液中苯酚浓度（mg/L）× 水样体积（L）通过实验结果解释可知，紫外-可见分光光度法是一种可靠的测定水中苯酚含量的方法。

该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等优点，适用于水中苯酚含量的监测和分析。

在实际应用中，需要注意控制实验条件，如显色剂种类和浓度、反应温度和时间等，以提高测定结果的准确性和可靠性。

实验四紫外可见分光光度法测定苯酚一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)，又称紫外吸收光谱法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry)，它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波长范围内的吸收光谱。

紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。

通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。

苯酚是一种剧毒物质，可以致癌，已经被列入有机污染物的黑名单。

但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。

如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。

苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。

对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。

定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。

在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。

定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并自动绘制标准曲线。

再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。

三、仪器与试剂1．Cintra10e型紫外可见分光光度计（GBC公司）2．容量瓶（1000ml、250ml）3．比色管（50ml）4．吸量管（5ml、10ml）5．苯酚（AR）准确称取苯酚1.000g于200ml蒸馏水中，溶解后定量转移到1000ml的容量瓶中，作为储备液。

四、实验步骤1．打开仪器及计算机、显示器、打印机电源，进入“Spectral”软件操作系统，待仪器自检结束，点击OK，进入操作主页面。

2．波长扫描(1)确定波长扫描参数：狭缝宽度 1.5nm光度测量形式吸光值扫描范围200～500nm扫描速度1000nm/min数据间隔点1nm存储文件选择路径和文件名（如F:\phenol.UVD）(2)做基线将盛有参比液的比色皿分别放入参比光路和样品光路，点击“Baseline”开始进行基线扫描(3)波长扫描将盛有样品和参比液的比色皿分别放入参比光路和样品光路，点击“Scan”开始扫描(4)定性分析将试样的波长扫描图与已知样的在相同条件下的波长扫描图或已知的谱图相比较，对试样进行定性分析3．定量分析(1) 标准系列的配制于5支50ml的比色管中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml 苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。