普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法)

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线: 400-1683301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询: *****************网址: 碧云天网站 微信公众号阿尔新蓝-核固红染色试剂盒(pH2.5)产品编号产品名称包装C0155S 阿尔新蓝-核固红染色试剂盒(pH2.5) 100次C0155M 阿尔新蓝-核固红染色试剂盒(pH2.5) 500次产品简介：碧云天生产的阿尔新蓝-核固红染色试剂盒(pH2.5) (Alcian Blue & Nuclear Fast Red Staining Kit, pH2.5)是一种通过阿尔新蓝对含有硫酸根(sulfated)的组织如硫酸化黏液物质(sulfated mucosubstances)及含有羧基(carboxylated)的组织如唾液粘多糖蛋白(sialomucins)、透明质酸(hyaluronic acid)及上皮酸性黏蛋白(epithelial acid mucin)等进行染色的试剂盒，同时提供核固红进行复染。

本产品对不同组织的石蜡切片和冰冻切片均适用，也可用于血涂片和骨髓涂片的染色。

本试剂盒染色时无须额外的酸化操作步骤，染色步骤更加简单便捷。

阿尔新蓝(Alcian Blue)，也称阿尔新蓝8G、阿利新蓝或爱先蓝，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。

阿尔新蓝的分子式为C56H68N16S4Cl4Cu，分子量为1298.86，CAS号为33864-99-2，墨绿色结晶，有金属光泽，溶于水。

阿尔新蓝属于阳离子染料，中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成，异硫脲基呈中度碱性，使阿尔新蓝带阳离子。

阿尔新蓝使酸性物质着色的机制尚不十分明确，一般认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子如酸性黏液物质的羧基或硫酸根形成不溶性复合物，即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。

普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色的步骤包括：
1. 切片：将待染色的组织切成3~5微米的薄片。

2. 烤片：将切片放入烤片机中，在70℃下烤制30分钟。

3. 捞片：将烤好的切片放入水浴锅中，温度设置为49℃，浸泡20秒后取出。

4. 脱蜡、复水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中脱蜡，然后放入无水乙醇、75%乙醇、蒸馏水中复水。

5. 染色：将切片放入普鲁士蓝染色工作液中，完全覆盖组织，室温染色1小时。

染色后，用自来水冲洗切片，去除多余的染料。

6. 复染：将切片放入普鲁士蓝染液C中，室温染色3~5分钟。

染色后，用自来水冲洗至切片流水无色。

7. 脱水封片：将切片经3次无水乙醇脱水，每次5分钟，再经二甲苯透明5分钟，然后以中性树胶封片。

以上是普鲁士蓝染色的基本步骤，每一步都需要仔细操作以保证染色效果。

普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理
首先，普鲁士蓝是一种阳离子染料，可以与阴离子物质发生结合。

它的颜色为深蓝色，对于电镜染色或组织切片的染色非常适用。

其次，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理与铁离子的还原反应有关。

普鲁士蓝染色试剂盒中包含了还原剂和氧化剂。

还原剂将铁离子还原为两价的铁离子，而氧化剂将两价的铁离子氧化为三价的铁离子。

铁离子在试剂盒中的相互转变过程中，会和普鲁士蓝结合形成普鲁士蓝染料。

这种染料具有很强的颜色稳定性和耐光性。

在实际的染色过程中，首先需要准备待染物样本，通常是细胞切片或组织切片。

然后将待染物样本浸入染色试剂盒中，使其充分浸透。

接着，将样本置于特定条件下进行染色反应。

染色反应的条件通常包括温度、反应时间以及试剂盒中存在的其他化学物质的浓度等。

染色反应进行的时间越长，染色的深度越深。

染色反应进行的温度越高，染色的速度越快。

普鲁士蓝染色试剂盒中的其他化学物质对染色反应的影响也非常重要。

例如，存在过量的铁离子会抑制染色反应的进行，而存在过量的氧化剂会使染色淡化。

最后，染色完成后，需要通过温和洗涤、脱水和固定来清洁和稳定染色结果。

这样可以去除多余的染色物质，使染色结果更加清晰和稳定。

总而言之，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理主要涉及阳离子染料的结合特性，以及铁离子的还原和氧化反应。

这种染色方法适用于电镜染色和组织切片的染色研究中，具有简单、快速、稳定等优点。

含铁血黄素染色液说明书【产品名称】含铁血黄素染色液【包装规格】货号：DJ0001单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml；每套/盒包装规格分别为：3×20ml/盒、3×100ml/盒、3×250ml/盒。

【预期用途】用于定性组织学含铁血黄素的染色。

【检验原理】含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或黄棕色的大小形状不一的颗粒，因含铁所以称为含铁血黄素。

含铁血黄素染色又称为Perls普鲁士蓝反应(Prussian Blue Reaction)，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，其染色原理在于亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物,可间接证明组织内含铁血黄素的存在，本染色液的复染液采用中性红或核固红，均是常用的复染液。

【主要组成成分】试剂组成主要成分1、亚铁氰化钾溶液亚铁氰化钾2、盐酸溶液盐酸3、中性红染色液或核固红染色液中性红或核固红【储存条件及有效期】5～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖．以免挥发或变质。

【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。

【检验方法】1、组织常规固定，常规脱水包埋；2、切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗1分钟；3、取适量的亚铁氰化钾溶液和盐酸溶液等量混合后，浸染若干分钟或滴染若干分钟；4、蒸馏水洗若干分钟；5、中性红染色液复染若干分钟或核固红染色液复染若干分钟；6、蒸馏水冲洗1～5秒；7、常规脱水,二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明，中性树胶封固。

【检验结果的解释】含铁血黄素或三价铁呈蓝色，根据复染时间不同细胞核呈不同程度的红色。

【检验方法的局眼性】仅限于病理组织内容物染色观察。

【注意事项】1、组织固定常采用10%中性福尔马林固定液，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤；避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

中性红染色液(液泡系专用)简介：中性红是一种弱碱性pH 指示剂，变色范围在pH6.4～8.0之间(由红变黄)。

分子式为C 15H 16N 4·HCl ，分子量为288.78。

在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌。

动物细胞内由单层膜包裹的小泡属于液泡系，如溶酶体、高尔基复合体、内质网、吞噬泡、转运泡等，尤以软骨细胞的液泡系发达。

Leagene 中性红染色液(液泡系专用)呈中性，是一种组织或细胞的液泡系的专一性活体染色剂，活细胞染色时只能将液泡系染成红色，细胞质和细胞核不会着色。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 短脊髓处死蟾蜍或其他动物，固定于腊盘上，剪开腹腔，取剑突软骨最薄弱部分的一小片，置于洁净载玻片上。

2、 滴加中性红染色液(液泡系专用)完全覆盖样本染色。

3、 用吸水滤纸沿玻片周围吸去染色液。

4、 滴加Ringer buffer ，盖上盖玻片，用滤纸从盖玻片侧面吸去多余液体。

5、立即镜下观察或拍照。

染色结果：软骨细胞呈椭圆形；液泡系为大小不一的小泡，呈玫瑰红色。

注意事项：1、 中性红染色液长期存放会产生少量沉淀，一般不影响使用。

2、 首次使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。

3、 中性红染色液时，可以根据染色结果和要求调整时间。

4、 对于活体染色，应注意保持样本的活体状态，尤其是在取材时应做到准确、快速。

5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号 名称 DA0075 Storage 试剂(A): 中性红染色液(液泡系专用) 100ml 4℃ 避光 试剂(B): Ringer buffer 250ml 4℃ 使用说明书 1份相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0111 中性福尔马林固定液(10%)DG0005 糖原PAS染色液DH0001 改良Lillie-Mayer苏木素染色液DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法)DK0022 尼氏染色液(焦油紫法)NH0043 SSC缓冲液(20×,pH7.0)TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。

红细胞内外铁粒染色一、原理：骨髓细胞外铁及有核红细胞中铁粒与亚铁氰化钾作用后，呈普鲁士兰阳性反应。

二、试剂：1、4%低铁氰化钾25ml（低铁氰化钾1g+蒸馏水25ml配成4%低铁氰化钾）2、4%HCL 25ml。

（+蒸馏水 ml即4％HCL）染色时1、2液混合即可。

3、1%核固红(核固红配制时，用5%硫酸铝溶解)25g硫酸铝+500 ml蒸馏水即5%硫酸铝,1g核固红+100ml5%硫酸铝即1%核固红.三、方法：1、干燥血片或骨髓片，用福尔马林37℃薰蒸固定5分钟水洗(蒸馏水)2、入4%低铁氰化钾盐酸混合液37℃(先预热20分钟)，置入血片或骨髓片40分钟水洗待干3、入1%核固红复染15~20分钟，水洗待干。

(蒸馏水)四、结果判定：铁粒幼细胞：胞质内出现兰色颗粒的幼红细胞。

环铁粒幼细胞：幼红细胞质内的兰色颗粒在6个以上，并围绕于核周排列成环形者。

铁粒红细胞：含有兰色铁颗粒的红细胞。

红细胞外铁：根据铁量的多少以“0”—“++++”表示，正常人一般为“+”—“++”（观察骨髓小粒）“0”：无铁粒可见“+”：有少数铁粒或偶见到铁小珠“++”：有铁粒小珠和少数小块“+++”：有很多的铁粒小珠和少数铁小块“++++”：有很多的铁粒、小珠并有小块红细胞内铁：计数100个有核红细胞，以含铁粒红细胞百分数报告。

正常人一般铁粒幼红细胞占40%，以I、II型为主，无环形铁粒幼红细胞。

“+”仅含1个铁颗粒“++”含2-5个铁颗粒“+++”含6-9个铁颗粒“++++”含10个以上铁颗粒五、临床意义：1.鉴别缺铁性与非缺铁性贫血：缺铁性贫血时，细胞外铁消失，铁粒幼红细胞减少，平均为3%，因此铁染色可作为诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的重要方法。

2.诊断铁粒幼红细胞性贫血：铁粒幼细胞性贫血时，细胞外铁显著增多（++++），其所含铁颗粒的数目也较多，颗粒也粗大。

因此本染色可作为诊断铁粒幼细胞性贫血的重要方法。

出现较多的环形铁粒幼细胞，可占幼红细胞的15%以上。

北京华越洋生物提供QQ:1733351176
核固红染色液(0.1%)
核固红染色液是组织切片染色中常用的复染液，染色后细胞核呈红色。

本产品为工作液，可直接使用。

染色液可重复使用多次，但染色效果会逐渐降低。

使用方法：
1、切片脱蜡至水，可进行其他染色，染色后蒸馏水洗2-5min。

2、将组织切片浸入核固红染色液，也可以直接滴加到样本上染色5-10分钟(浅染细胞核)，染色时间可根据染色深度做相应调整。

3、自来水中冲洗去除多余的染色液。

4、常规脱水透明，中性树胶封固。

注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净。

2、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。

3、染色过程推荐浅染，通常能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞颜色。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

保存：室温避光保存，有效期至少一年。

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普鲁士蓝测定法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分:普鲁士蓝测定法是一种常用的分析化学方法，用于测定溶液中的亚铁离子（Fe2+）的浓度。

该方法以其简单、快速和准确的特点而被广泛应用于环境监测、化学分析和生物科学研究等领域。

在普鲁士蓝测定法中，普鲁士蓝（Prussian Blue）作为指示剂，通过与亚铁离子形成可见光谱的深蓝色沉淀来进行浓度的测定。

普鲁士蓝是一种由亚铁离子和氰酸根离子所组成的无机化合物，其具有较高的稳定性和灵敏度。

本文旨在全面介绍普鲁士蓝测定法的原理、步骤和应用，并对其进行评价和展望。

首先，我们将详细阐述普鲁士蓝测定法的原理，包括指示剂的选择和反应机理。

随后，我们将介绍该方法的具体步骤，包括样品的处理和浓度计算等。

最后，我们将探讨普鲁士蓝测定法在不同领域的应用，例如环境水质监测和医学诊断等。

通过对该方法的全面分析和综合评价，我们可以更好地了解普鲁士蓝测定法的优势和局限性，并为未来的研究提供一些建议和展望。

综上所述，本文将对普鲁士蓝测定法进行深入的探讨和总结，旨在为读者提供一个关于该方法的全面介绍，并推动其在实际应用中的进一步发展和运用。

1.2 文章结构文章结构部分的内容可以描述普鲁士蓝测定法长文的整体框架和各个部分的内容摘要。

文章结构如下：1. 引言：本部分介绍普鲁士蓝测定法的概述，包括其基本原理、步骤和应用范围。

同时，描述文章的结构和各个部分的内容概要。

2. 正文：2.1 普鲁士蓝测定法的原理：该部分详细解释普鲁士蓝测定法的基本原理，包括反应机理和主要的化学反应过程。

同时，探讨普鲁士蓝与待测物质之间的关系和相互作用。

2.2 普鲁士蓝测定法的步骤：本节介绍普鲁士蓝测定法的具体操作步骤，包括实验所需试剂和仪器设备，以及每个步骤详细的操作流程。

同时，说明每个步骤的目的和原理，并提供实验中可能遇到的注意事项。

2.3 普鲁士蓝测定法的应用：该部分列举普鲁士蓝测定法在不同领域中的应用案例，包括环境分析、化学分析和生物医学研究等。

化学普鲁士蓝的制备及检测方法化学普鲁士蓝是一种著名的化合物，它是一种金属配合物，可作为重要的指示剂和催化剂。

我们生活中很多物品中都含有普鲁士蓝，如墨水、染料、医药、垃圾处理等领域。

在化学实验中，制备普鲁士蓝是一项基础性的实验，本文将介绍化学普鲁士蓝的制备及检测方法。

一、化学普鲁士蓝的制备1. 实验原理化学普鲁士蓝来源于二价铁离子与六价铁氰化物的配合，化学式为Fe4[Fe(CN)6]3，又称偏铁氰化铁。

在制备过程中，需要先制备出三价铁离子，再与六价铁氰化物反应，最终得到化学普鲁士蓝。

2. 实验步骤（1）将5g硫酸铁加入到酸性的、含有5g亚硝酸钠的水中，搅拌均匀；（2）将稀盐酸滴加到混合液中，直至溶液变为浑浊，继续搅拌；（3）反应结束后，滴加硫酸铵的饱和溶液并充分搅拌。

此时出现“石花”结晶沉淀；（4）用蒸馏水洗涤沉淀，再用丙酮去除水分；（5）将6g氰化钾加入蒸馏水中并搅拌均匀，再加入95%乙醇以提高反应速率；（6）将“石花”沉淀溶于稀盐酸中，慢慢滴入氰化钾的混合溶液中，同时保持搅拌，形成深蓝色的溶液；（7）将深蓝色的溶液过滤、洗涤，干燥于80度的烘箱中，最终得到普鲁士蓝。

二、化学普鲁士蓝的检测方法化学普鲁士蓝的检测方法包括重量法、红外光谱法、紫外光谱法、X光粉晶衍射法、磁性测定法等多种方法。

其中，常见的是红外光谱法和重量法。

1. 红外光谱法红外光谱法通过分析普鲁士蓝分子的振动频率来反推其分子结构，从而进行检测。

普鲁士蓝分子的结构中包含一个六面环的铁氰化物配体和一个四面体的铁离子，其中六面环的氰基的振动频率与铁离子形成的四面体的振动频率有明显差异，因此可以利用红外光谱检测鉴定化学普鲁士蓝的结构。

2. 重量法重量法是利用重量测量的方法来检测普鲁士蓝的含量，常用的方法是恒重法。

在此方法中，首先需要将普鲁士蓝溶解于适当的溶剂中，然后将溶液滴加到干燥稳定的瓷皿中，置于烘箱中烘烤至恒重，通过计算瓷皿的重量，可以简单粗略地测量普鲁士蓝的含量。

一、实验目的1. 了解普鲁士蓝染色的原理和操作步骤。

2. 掌握利用普鲁士蓝染色观察组织中铁元素分布的方法。

3. 提高实验操作技能，培养严谨的科学态度。

二、实验原理普鲁士蓝是一种亚铁氰化铁，具有较强的亲和力，可以与组织中的铁元素结合形成蓝黑色沉淀。

在酸性条件下，切片内的高铁盐与亚铁氰化钾反应生成亚铁氰化铁，进而与组织中的铁元素结合，形成蓝黑色沉淀。

通过显微镜观察，可以观察到组织中铁元素的分布情况。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 人肝组织切片- 亚铁氰化钾- 氯化铁- 核固红染液- 固定液- 20倍样本体积的固定液- 石蜡切片- 冰冻切片- 显微镜2. 实验仪器：- 烧杯- 移液器- 离心机- 显微镜- 显微摄影仪四、实验步骤1. 样本准备：- 将人肝组织切片置于20倍样本体积的固定液中固定24小时以上，常温运输。

- 固定时间不宜过长，以免组织结构变形，切勿冷冻结冰。

- 石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。

2. 染色：- 将固定好的切片置于烧杯中，加入适量的亚铁氰化钾溶液，在室温下进行染色。

- 染色时间约为30分钟。

3. 核固红染色：- 将染色好的切片用蒸馏水冲洗干净。

- 加入核固红染液，室温下进行染色。

- 染色时间约为10分钟。

4. 脱水封片：- 将染色好的切片用无水乙醇进行脱水处理。

- 最后用中性树胶封片。

5. 显微镜观察：- 将封片后的切片置于显微镜载物台上，使用显微镜观察。

- 观察组织中铁元素的分布情况，记录观察结果。

五、结果与分析1. 铁元素、含铁血黄素呈蓝色，细胞核呈红色。

2. 在显微镜下观察，可见肝组织内存在蓝色颗粒，为铁元素、含铁血黄素的沉积。

3. 铁元素主要分布在肝细胞内的线粒体、溶酶体等细胞器中。

六、讨论1. 普鲁士蓝染色是一种简单、快速、灵敏的染色方法，可用于观察组织中铁元素的分布。

2. 实验过程中，固定时间的控制对组织结构的影响较大，应严格按照实验要求进行固定。

3. 染色过程中，亚铁氰化钾和氯化铁的浓度、染色时间等因素会影响染色效果，应进行优化。