细菌生化微量鉴定管实验结果判定说明

临床常见细菌的手工鉴定和结果判断一．细菌的鉴定步骤1、鉴定的概念：将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。

2、对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。

（我们这里一般都是预先纯化培养）+––+b）G，G，c，对待鉴定的菌种进行革兰染色，3、观察形态（Gc，Gb做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。

要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统，临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经设计好，参考鉴定质控单。

4、按鉴定质控单的要求填写好病人姓名，年龄，性别；标本类型，标本编号，送检日期等。

另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以及有无溶血。

5、复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。

⑴．革兰染色：是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方法。

首先要将待鉴定的细菌涂片，固定（目的：杀死细菌，改变细菌对染料的通透性）。

第一步：以结晶紫初染（染色液Ⅰ）第二步：以卢戈氏碘液媒染（染色液Ⅱ）乙醇脱色（染色液Ⅲ）95%第三步：用．第四步：最后用稀释复红复染（染色液Ⅳ）⑵．触酶实验(HO实验)：22a.原理：具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。

b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3%过氧化氢数滴，观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性）。

要注意不能在血平板上进行实验，这样易出现假阳性；另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果；还有不能在接种针或环上进行实验。

c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃冰箱保存。

d.应用：绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性，链球菌属阴性。

临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属（+），微球菌属（+），链球菌属（－）。

⑶．氧化酶实验（Kovac实验）：a. 原理：氧化酶又称细胞色素酶，是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。

细菌生化微量鉴定管及试纸试验结果判定说明细菌生化微量鉴定管及试纸试验结果判定说明名称结果判定培养时间（小时）注释阳性阴性各类糖（醇、苷）类黄色紫色或不变色18-24根据指示剂不同，如颜色不边为阴性。

非发酵细菌糖类黄色紫色24-48 供非发酵细菌鉴定用。

葡萄糖氧化-酵（OF）葡萄球菌OF 黄色黄色紫色紫色24-4824-48同时接种两支生化管，一支加入灭菌石蜡，覆盖液面，如两支均变黄色，为发酵型（F）；加石蜡管不变色，另一支变黄色，为氧化型（O）；如两支均不变色，为对糖不利用（NR0-）β-半乳糖苷（ONPG）深黄色无色4-18接种菌量要大，产生黄色深浅有不同，黄色加深即为阳性。

七叶苷棕黑色不变色18-24链球菌如阴性反应，需继续观察至第3天。

胆汁七叶苷棕黑色不变色18-24链球菌如阴性反应，需继续观察至第3天。

美蓝牛乳白色蓝色18-24 适用于肠球菌属、链球菌属的鉴定。

蛋白胨水（靛基红色不24-48 加靛基质试剂1滴，接触处出现红色质用）变色为阳性，不变色为阴性。

含水1%Nacl 作弧菌科细菌鉴定用，使用方法相同。

葡萄糖磷酸盐胨水（MR、VP用）红色不变色24-48加MR试剂1滴，即可观察结果。

加VP甲液2滴、VP乙液1滴放35℃孵箱孵育2小时后观察。

含1%Nacl作弧菌科细菌鉴定用，使用方法相同。

西蒙氏枸橼酸盐蓝色绿色24-48含1%Nacl作弧菌科细菌鉴定用，使用方法相同。

尿素红色黄色8-24 使用于尿素分解的细菌。

硫化氢黑色不变色18-24 硫酸亚铁法。

乙酰胺红色黄色24-48如阴性，应继续培养至颜色不加深，才可确认。

硝酸盐胨水（霍乱红用）红色不变色6-24 加浓硫酸1滴。

苯丙氨酸脱氨酶蓝绿色不变色18-24加10%Fecl31滴，在表层产生蓝绿色为阳性。

氧化酶试纸红→紫黑色不变色10秒用灭菌牙签刮取菌苔于氧化酶湿纸片上。

氧化酶试剂红→紫黑色不变色10-30秒将试剂滴于18-24小时培养的菌落上，观察颜色变化，本试剂配好后储冰冻室内可保存2周。

细菌鉴定技术生化实验报告实验目的：本实验旨在通过生化实验方法，对细菌进行鉴定，以确定其种属特征，为细菌分类和研究提供科学依据。

实验原理：细菌的生化特性是其代谢活动和酶系的反映，不同的细菌具有不同的生化反应模式。

通过测定细菌对特定生化底物的代谢能力，可以鉴别出细菌的种类。

常用的生化实验包括氧化酶试验、触酶试验、糖发酵试验、硝酸盐还原试验等。

实验材料：1. 待鉴定的细菌菌株2. 生化试剂盒（包括氧化酶试剂、触酶试剂、糖发酵基、硝酸盐还原试剂等）3. 无菌操作器材4. 培养基（如LB培养基）5. 显微镜6. pH计7. 其他必要的实验室设备和耗材实验步骤：1. 细菌培养：将待鉴定的细菌菌株接种于LB培养基中，37°C恒温培养箱中培养24小时。

2. 氧化酶试验：取培养好的细菌菌液，滴加氧化酶试剂，观察颜色变化，记录结果。

3. 触酶试验：取细菌菌液，滴加触酶试剂，观察是否产生气泡，记录结果。

4. 糖发酵试验：将细菌接种于含有不同糖类的发酵基中，37°C培养一定时间，通过pH计测定pH变化，记录结果。

5. 硝酸盐还原试验：将细菌接种于含有硝酸盐的培养基中，观察是否产生亚硝酸盐，记录结果。

6. 数据分析：根据生化试验结果，结合细菌的形态学特征，进行综合分析，确定细菌的种类。

实验结果：1. 氧化酶试验结果：[具体结果]2. 触酶试验结果：[具体结果]3. 糖发酵试验结果：[具体结果]4. 硝酸盐还原试验结果：[具体结果]实验讨论：根据生化实验结果，结合细菌的形态学特征，可以初步判断细菌的种类。

在实验中，氧化酶和触酶试验是快速筛选细菌的重要手段。

糖发酵试验和硝酸盐还原试验则可以提供更多的代谢信息，有助于进一步的细菌鉴定。

需要注意的是，生化实验结果应结合其他实验数据和文献资料进行综合分析，以提高鉴定的准确性。

结论：通过本次生化实验，我们对[具体细菌名称]进行了鉴定。

实验结果显示，该细菌具有[具体生化特性]，符合[具体细菌种类]的生化特性。

怎么解读细菌学检验报告细菌学的检验报告是进行体检的常见报告。

作为一名医生，在日常生活中也有许多朋友拿着报告来问我应该如何看懂，今天就为大家详细解读如何来看懂一份细菌学检验报告。

正常菌群人体表面以及和外界相通的泌尿生殖道、口腔、肠道、鼻咽部等腔道中都寄居着微生物，在正常情况下对宿主有利且无害，这种微生物属于正常的微生物群，其中以细菌为主，统称为正常菌群。

人体皮肤中含有的正常菌群有白色念珠菌、丙酸杆菌、棒状杆菌、大肠诶希菌、葡萄球菌、铜绿假单胞菌、非典型分歧杆菌等。

鼻咽腔中含有梭杆菌、甲型链球菌、奈瑟菌、葡萄球菌、肺炎链球菌、丙型链球菌等。

胃部一般无菌。

肠道中含有假单胞菌、乳杆菌、破伤风梭菌、白色念珠菌、大肠诶希菌、产气荚膜梭菌、消化链球菌、变形杆菌、葡萄球菌、产气肠杆菌、真杆菌、双歧杆菌等。

口腔中含有螺旋体、表皮葡萄球菌、类杆菌、奈瑟菌、肺炎链球菌、念珠菌、丙型链球菌、梭杆菌、甲型链球菌、棒状杆菌。

阴道中含有厌氧菌、乳杆菌、大肠诶希菌、棒状球菌、念珠菌。

眼结膜中含有结膜干燥杆菌、葡萄球菌。

前尿道中含有肠球菌、葡萄球菌、非致病性废弃杆菌、棒状杆菌。

病原菌病原菌是指能够入侵宿主产生感染的微生物，包括病毒、细菌、真菌等。

按照病性能够将病原菌分为致病菌和条件致病菌。

致病菌的种类少但毒性强，条件致病菌的种类多且不断增加，毒性较弱。

临床上一般将病原菌和致病菌进行混合称呼，但病原菌的范围要明显大于致病菌。

细菌药敏试验，测试抗菌药物品种如何确定抗菌药有两百余种，药敏试验中不需要包括每一种抗菌药。

测试的抗菌药纸片种类是根据各类细菌对抗菌药的敏感性及临床可能选用药物进行确定的，同类药物一般选择一到两个代表品种。

美国临床实验室标准委员会对各种细菌的药敏试验中适合测试的药物品种机型推荐，例如测定葡萄球菌属的药敏试验中应当包括红霉素、复方磺胺甲恶唑、苯唑西林、克林霉素、万古霉素、青霉素。

同时也可以根据具体情况来增加其他品种例如呋喃妥因、环丙沙星、利福平、氯霉素、庆大霉素等。

细菌学检验的方法和结果分析摘要】目的：探讨细菌学检验的方法和结果分析。

方法：对细菌标本进行采集和送检。

结论：细菌的检验对细菌的感染控制有很大的帮助。

因此，要加大力度,更好地发挥临床微生物检验在医院感染控制中的作用。

【关键词】细菌学；检验；【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）01-0220-011.标本采集与注意事项1.1 标本采集的时间标本采集应在早期和未服用抗菌药物之前。

1.2 标本采集的种类检验标本主要以患者的大便为主。

某些情况下，患者的呕吐物、沾染粪便的衣物和尸体的肠内容物及环境水样亦可作为检材。

1.3 标本采集的方法以采集患者粪便为主，采样时可用灭菌小勺或棉拭采取自然排出的新鲜大便，亦可用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内3～5cm处转动取出。

采用后者应注意棉拭大小适宜，避免采便量过少。

一般要求水样便采取1～3ml，成形便采取指甲大小(2～3g)的粪量；采呕吐物、沾染粪便的衣物等，用无菌棉拭蘸取标本后插入碱性蛋白胨水管中送验；采水样时，用无菌采样瓶采水450ml送验(检验时将标本全部倒入含5％食盐及10％蛋白胨的浓蛋白胨水50m1中，增菌培养后按粪便标本检验方法进行分离培养。

1.4 标本的送检采得的患者标本应在床边立即接种于培养基，不能立即检查的，要接种于碱性蛋白胨水或文．腊保存液或插入Cary-Blair半固体保存培养基中保存，尽快送往检验室。

标本与保存液的比例要适当，8～10ml保存液可加入l～3ml液体便或指甲大小的成形便，过多的大便量可降低保存液的pH。

送检标本时应填写“标本送检单”，人源性标本应写明患者姓名、地址、发病时间、采集时间、临床诊断等。

2.检验方法和结果2.1 病原学检查2.1.1显微镜检取黏液絮状的粪便标本直接涂片，空气自然干燥，在火焰上加热固定，用革兰或用l：10稀释的复红染色，镜检有无弧菌。

一般新鲜粪便中弧菌形态较典型，排列成鱼群状。

北京索莱宝科技有限公司
第1页，共1页细菌微量生化鉴定管使用说明书
货号：L7710
规格：20支
保存：RT，有效期一年。

产品说明：
一、实验准备：
1、安瓿瓶：从包装盒中取出安瓿瓶，朝易折点（瓶颈上方蓝点）反方向用力折开安瓿瓶；或用砂轮划一圈安瓿瓶瓶颈，然后用力折开安瓿瓶，插入安瓿瓶架中。

如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。

2、试管：从包装盒中取出试管，插入试管架中。

如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。

注：折开安瓿瓶时最好包裹纱布，以免划伤手指。

二、接种方法：
1、直接接种：用接种针从平板上挑取已纯化分离的同一菌落接种于需要试验的试管（安瓿瓶）中。

2、菌悬液法：取一内盛2mL 无菌水试管，用接种针从平板上挑取已纯化单个菌落至无菌水中仔细研磨制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液，滴入需要试验的试管（安瓿瓶）中，每管3滴。

注：如内容物为半固体或斜面，请直接穿刺接种。

三、接种完成后放36℃±1℃培养或检测标准中所规定的培养温度。

（建议加盖）产品名称
结果判断
培养时间（h）
阳性
阴性乳糖发酵管黄色紫色或紫灰色18-24。