试验八巴氏小体
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一、实验目的1. 掌握巴氏小体的制备方法;2. 观察并识别巴氏小体的形态特征及所在部位;3. 了解巴氏小体的形成机制及生物学意义;4. 通过实验学习显微镜操作技巧。
二、实验原理巴氏小体(Barr body)是指在雌性哺乳动物细胞中,除了活跃的X染色体外,另一条X染色体在间期细胞核中发生异固缩而形成的深染小体。
巴氏小体是X染色质的一种表现形式,其形成机制与性别决定和剂量补偿效应有关。
三、实验材料1. 生理盐水;2. 固定液(甲醇:冰醋酸=3:1);3. 巴比妥缓冲液(pH 7.4);4. 染色液(苯酚品红染液);5. 显微镜;6. 载玻片;7. 盖玻片;8. 牙签;9. 吸管;10. 镜台;11. 镜头;12. 光源。
四、实验步骤1. 取材:受检者清水漱口数次,用洁净牙签从女性口腔两侧刮取粘膜,原位刮2~3次,第一次舍去,第2、3次分别涂于干净载玻片上。
拔取女性带有毛囊的头发(约2cm),置于载玻片上。
2. 固定:将置于离心管中的材料(口腔粘膜细胞),首先2000rpm离心20min,弃上清,加入新配置的固定液(甲醇:冰醋酸=3:1),37℃下静置30min。
3. 染色:加入苯酚品红染液,染色约20min。
4. 洗涤:用生理盐水冲洗载玻片,去除多余的染液。
5. 观察与计数:在显微镜下观察细胞核,寻找巴氏小体。
对每个视野内的细胞核进行计数,记录巴氏小体的数量。
6. 数据处理:计算巴氏小体的出现频率,并与文献报道的正常女性口腔粘膜细胞中巴氏小体出现的概率(30%~50%)进行比较。
五、实验结果1. 巴氏小体在女性口腔粘膜细胞中普遍存在,且数量较为稳定。
2. 巴氏小体的出现频率在30%~50%之间,与文献报道的正常女性口腔粘膜细胞中巴氏小体出现的概率相符。
六、实验分析1. 巴氏小体的制备与观察方法简便易行,能够较好地反映女性细胞中X染色质的形态与数量。
2. 巴氏小体的存在与性别决定和剂量补偿效应密切相关。
人类巴氏小体的观察摘要巴氏小体是由雌性哺乳动物体细胞中失活的X染色体在间期细胞核中呈异固缩状态(染色质高度螺旋化),形成直径约1μm,贴近于核膜边缘的染色小体。
显微镜观察到男性有巴氏小体的细胞为1%,而女性则高达30%。
本次实验中采用女性的口腔黏膜细胞或者毛囊细胞(男性的作为对照)为材料,通过染色再在显微镜下观察巴氏小体。
关键字:巴氏小体、X染色体、女性1.引言巴氏小体又称X小体:正常女性,位于间期细胞核中,紧贴核膜内缘,大小约1~1.5 um,呈现三角或椭圆形小体。
巴氏小体是由于女性两个X染色体中的一个失活形成的。
具有两个(或以上)X染色体的细胞中,不活化的X染色体所浓缩形成的紧密结构。
它会依附在细胞核边缘的核膜内侧,虽然此染色体上的小部份区域能保持着活跃的状态,但大多数的基因都是不会表现的。
只有位于性腺之细胞内的巴尔氏体在进行减数分裂时会再度活化。
Lyon的剂量补偿学说认为:女性有两个X染色体,但所表达的绝大部分遗传物质与只有1个X染色体的男性是一样多的。
这是因为女性的X染色体中只有1个保持活性,而另一个是晚复制的,没有活性。
该失活的染色体在形态学上呈异染色体,即DNA螺旋压的很紧,染色深而致密,称之为巴氏小体。
X染色质的失活只是部分失活,仍然有部分基因具有转录活性,目前已知的大约有十几个基因有活性。
若失活X染色质为完全失活,则XXY(Klinefelter’s syndrome)及XO(Turner’s syndrome)型应表现正常。
Barr小体的数目=n-1(n为X染色体数目) 正常女人的体细胞间期核中Barr小体为1;正常男人的体细胞间期核中Barr小体为0;XXX女人的体细胞间期核中Barr小体为2;XXXX 女人的体细胞间期核中Barr小体为3。
2.实验材料2.1实验材料2.1.1实验材料:口腔粘膜细胞或者毛囊细胞2.1.2实验用品:显微镜、载玻片、盖玻片、1M盐酸溶液、蒸馏水、硫堇染液、吸水纸2.2实验步骤2.2.1用牙签轻轻地刮取口腔上皮细胞或拔一根头发将毛囊细胞,均匀的涂于干净的载玻片上,自然干燥5-10min;2.2.2 用1M HCl水解细胞3-5min;2.2.3 用水洗3次,每次1min;2.2.4用蒸馏水将HCl清洗干净后,再用硫堇染液染色20min;2.2.5水洗去染料,在显微镜下观察标本。
巴氏小体,又叫巴尔体(Barr body),指雌性动物的体细胞在间期时,在核膜内面的一块染色很深的染色质。
巴氏小体实际上是浓缩了的X染色体,其上的基因不转录。
哺乳动物的雌性细胞有两个X染色体,其中一条来自母方,另一条来自父方,在胚胎发育的早期,这两个X染色体中的一条浓缩形成巴氏小体,因此雌性哺乳动物的体细胞中都含有一个巴氏小体和一个能转录的X染色体,而雄性哺乳动物的体细胞有一条可转录的X染色体和一条Y染色体。
随着细胞分裂,巴氏小体也要复制,但上面的基因从不转录。
如果这个动物是三倍体,体细胞中也只有一个能转录的X染色体,其余的X染色体都会浓缩形成巴氏小体。
巴氏小体的临床意义在于鉴别性别。
例如,从胎儿羊水中取得脱落的细胞检查,如有巴氏小体,胎儿为女性,如果细胞中无巴氏小体,胎儿为男性。
运动员参加女子项目,可通过检查其白细胞中有无巴氏小体而确定其性别。
在哺乳动物体细胞核中,除一条X染色体外,其余的X染色体常浓缩成染色较深的染色质体,此即为巴氏小体。
又称X小体,通常位于间期核膜边缘。
1949年,美国学者巴尔(M.L.Barr)等发现雌猫的神经细胞间期核中有一个深染的小体而雄猫却没有。
在人类,男性细胞核中很少或根本没有巴氏小体,而女性则有1个。
以后研究表明,巴氏小体就是性染色体异固缩(细胞分裂周期中与大部分染色质不同步的螺旋化现象)的结果。
体育运动会上的性别鉴定主要采用巴氏小体方法。
[编辑本段]莱昂氏假说英国学者莱昂(M.F.Lyon)认为,这种异固缩的X染色体(巴氏小体)缺乏遗传活性,提出“莱昂氏假说”,其内容主要是:(1)正常雌性哺乳动物体细胞中的两个X染色体之一在遗传性状表达上是失活的;(2)在同一个体的不同细胞中,失活的X染色体可来源于雌性亲本,也可来源于雄性亲本;(3)失活现象发生在胚胎发育的早期,一旦出现则从这一细胞分裂增殖而成的体细胞克隆中失活的都是同一来源的染色体。
巴氏小体的数目及形态可通过显微镜观察得知,如可从人的口腔内刮取少许上皮细胞或取头发的发根,经染色处理后即可看到。
人类巴氏小体的快速检测09级生命基地刘翠翠(37)一、实验目的1、了解巴氏小体的位臵、形态、形成机理。
2、掌握巴氏小体的玻片制备方法。
二、实验原理1949年,神经生物学家Barr在检测雌猫的神经细胞间期核时发现有一个深染的结构,之后在女性的许多组织间期细胞核中也发现这种深染的结构普遍存在,而男人体内没有发现。
现在一般认为巴氏小体是存在于XY型性别决定的生物中,雌性动物的一条X染色体在间期异染色质化形成深染的结构。
这个小体叫巴氏小体,又叫X小体,性染色质(Barr body, sex-chromatin body, X-body),与性别和X染色体的数量有关。
剂量补偿效应(Dosage complement effect)显示:在XY型性别决定的生物中,性连锁的基因表达在两性间有相同或相近的剂量遗传效应,也就是说,在雌雄动物的细胞中,由X 染色体编码的酶或其它蛋白等基因产物在数量和质量上相等或相近。
为更好的解释剂量补偿效应,Lyon M.F于1961年提出莱昂假说(Lyon hypothesis):(1)正常的雌性哺乳动物两条X染色体只有一条在遗传上有活性,另外一条失活;(2)失活是随机的。
有些细胞是来自父方的失活,有的来自母方;因此表达是随机的,结果在杂合子中会出现嵌合现象(mosaic)。
例如,有袋类失活的全部是父方的。
(3)失活发生在胚胎发育的早期,如人在受精后的16天(5000-6000个细胞时)。
一个细胞的一条染色体一旦失活,这个细胞的后代细胞中该染色体均失活。
玳瑁猫和毛色镶嵌小鼠的成因以及人类的6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6PD)的测定等都是莱昂假说的有力证据。
三、实验材料及器具1、实验材料:口腔上皮细胞发根细胞2、实验器具:载玻片盖玻片牙签1N盐酸硫瑾95%乙醇生理盐水显微镜四、实验步骤1、取材用灭菌的牙签轻刮口腔上皮(第一遍弃去,注意不要刮破上皮),涂3-4个玻片,晾干(或刮取发根毛囊臵于载玻片上,晾干)。
人体性染色质体的观察实验报告一、实验目的1、掌握人体性染色质的检测方法;2、观察人体性染色质的形态特征及存在部位;为进一步研究人体染色体的畸变与疾病提供参考条件;3、了解雌性哺乳动物X染色体失活假说和剂量补偿效应的机制。
二、背景知识二十世纪六十年代,M.L.Barr等研究发现雌猫神经细胞核膜内凝缩的深染小体[性染色质体(sex-chromatin body)或巴氏小体(Barr body)],而雄性个体细胞中则没有。
进一步研究发现:所有哺乳类雌体细胞中都可以见到这一结构。
此后研究发现这种与性别有关的两型现象在有袋类、食肉类和灵长类等动物的多数组织细胞中存在,而在啮齿类中在少数组织中可以观察到。
三、实验原理在雌性个体的细胞中的2条染色体,在间期,有一条呈松散状态,参加细胞生理活动;另一条保持异固缩状态,我们称之为Barr小体。
由于Barr小体是处于失活状态,所以一般位于细胞核内边缘。
形状多样(微凸形、三角形、卵形、短棒形等)。
一般,在正常女性细胞中可能出现一个Barr小体,正常男性细胞中不可能出现Barr小体;(正常女性口腔粘膜细胞中约30-50%有一个Barr小体。
在不同实验室中计数的差别较大,而在男性中则仅只偶尔可见不典型者——这是环境引起代谢的暂时现象,约2%以下)。
对于性染色体畸变的个体。
Barr小体数 = 细胞内X染色体数–1。
Barr小体特征及位置:它是处于失活状态的X染色体,一般位于细胞核膜内侧边缘的一个深染区(较细胞核要小),形状多样。
剂量补偿效应:是指XY型性别决定的生物,由X染色体上的基因决定的性状在两性的表现几乎相同。
即X染色体上的基因的表达产物在雌、雄细胞中是等量的。
哺乳动物X染色体随机失活或父源X染色体失活有袋动物父源X染色体失活黑腹果蝇雄性个体X染色体基因表达水平加倍秀丽线虫雌性个体两条X染色体基因表达水平减半补偿的实现途径: X染色体转录速率的差异性,雄性细胞中的X 染色体转录速率>雌性细胞中2条X染色体的转录速率;雌性细胞中有一条X染色体失活。
巴氏小体巴氏小体是一种神经细胞内的病理结构,最早由德国神经病学家和精神病学家阿洛伊斯·阿尔茨海默于1906年首次描述并命名。
巴氏小体是阿尔茨海默病的标志性病理特征之一,阿尔茨海默病是一种常见的神经退行性疾病,是老年人痴呆的最常见原因之一。
巴氏小体主要由两种蛋白质组成,分别是tau蛋白和阿尔茨海默病相关蛋白41(amyloid beta-42)。
这两种蛋白质的异常积聚和沉积是巴氏小体形成的主要原因。
巴氏小体主要存在于神经元的胞体和轴突末梢中。
在正常情况下,tau蛋白是神经元细胞骨架的重要组成部分,维持神经元的正常结构和功能。
然而,当tau蛋白发生异常磷酸化和聚集时,就会形成巴氏小体。
巴氏小体的形成对神经细胞的功能产生了负面影响。
它干扰了细胞内信号传导和运输,导致细胞死亡和失去功能。
此外,巴氏小体还与细胞凋亡(细胞自我毁灭)的过程有关。
这些病理改变最终导致了阿尔茨海默病患者认知功能的丧失和其他神经系统症状的发展。
巴氏小体的形成与阿尔茨海默病的发病机制密切相关。
大多数情况下,巴氏小体主要存在于阿尔茨海默病患者的大脑皮层和海马体等结构中,这些区域与学习、记忆和其他高级认知功能有关。
尽管巴氏小体并非阿尔茨海默病的唯一病理特征,但它是这种疾病的重要标志之一。
目前,研究人员正在努力寻找阿尔茨海默病和巴氏小体形成的具体原因,并开展了许多相关的研究。
一些研究表明,遗传因素可能在巴氏小体形成和阿尔茨海默病发病中起到重要作用。
一些基因变异被发现与巴氏小体的形成和tau蛋白异常积聚有关。
此外,环境因素也被认为与巴氏小体形成和阿尔茨海默病的发病有关。
例如,慢性炎症、氧化应激和毒物暴露等环境因素可能导致tau蛋白磷酸化和聚集,从而促进巴氏小体的形成。
在巴氏小体和阿尔茨海默病的研究中,有许多重要的进展。
科学家们已经开发出许多药物和治疗策略,旨在抑制巴氏小体的形成,减缓疾病的进展。
例如,针对tau蛋白的抗体、酶和药物已被用于研究和治疗阿尔茨海默病。
女性巴氏小体实验报告简介巴氏小体是一种关键的细胞器,通过分析它在女性身体中的存在和功能,我们可以更好地了解妇科疾病的发生机制。
在本次实验中,我们使用细胞培养和显微镜技术,研究了巴氏小体在女性体内的定位和变化。
实验步骤1. 细胞培养:从女性志愿者的宫颈组织中提取巴氏小体样本,并将其置于细胞培养基中。
细胞培养基中含有足够的营养物质,以促进样本中细胞的生长和分裂。
2. 细胞固定:当细胞生长到合适的数量之后,我们使用乙酸甲酯进行细胞固定。
这可以让细胞在显微镜下保持原始形态和结构。
3. 标记:我们使用特殊的染色剂,如血红蛋白染色剂,将巴氏小体标记为红色。
这可以使我们在显微镜下更容易观察和分析巴氏小体的位置和变化。
4. 显微镜观察:将样本放置在显微镜下进行观察。
我们使用高倍放大镜和干涉显微镜等技术,以获得更清晰和详细的图像。
实验结果在观察过程中,我们发现了巴氏小体在女性组织中的存在,并且在不同的细胞类型中有不同的分布。
在宫颈细胞中,巴氏小体主要集中在紧贴细胞核的位置,形成一个有序的结构。
而在其他细胞类型中,巴氏小体则分散在细胞质中。
此外,我们还观察到巴氏小体在细胞分裂过程中发生了变化。
在细胞分裂前,巴氏小体的数量会增加,表示细胞正在准备与前细胞分开。
经过细胞分裂后,巴氏小体会重新分布和定位。
通过这些观察结果,我们可以初步推断巴氏小体在女性身体中起到细胞分裂和调控的重要作用。
然而,进一步的研究和实验证实仍然是必要的。
结论在本次实验中,我们成功地观察到了巴氏小体在女性体内的存在和变化。
巴氏小体的位置和数量变化可能与细胞分裂和调控有关。
这一发现为进一步研究妇科疾病的发生机制提供了基础,并有助于开发相关的治疗方法。
然而,本实验还存在一些局限性。
首先,我们使用的细胞样本有限,无法代表所有女性的情况。
其次,我们观察的时间和空间范围也相对较小。
因此,未来的研究可以进一步扩大样本规模并深入探究巴氏小体的功能和调控机制。
参考文献参考文献根据实际情况添加,并按照学术要求格式进行引用,以支持实验结论的可靠性和准确性。