尿碘国标检测方法

实验名称：尿碘测定实验日期：2021年10月10日实验地点：实验室一、实验目的1. 了解尿碘测定的原理和方法。

2. 掌握尿碘测定的操作步骤。

3. 学习利用分光光度法测定尿碘含量。

二、实验原理尿碘测定是采用分光光度法测定尿液中碘的含量。

尿碘是人体摄入碘的重要指标，测定尿碘含量可以反映人体碘营养状况。

本实验采用硫酸肼还原法将尿碘中的碘离子还原为碘单质，然后与碘化钾反应生成三碘化物，最后在特定波长下测定其吸光度，从而计算出尿碘含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、烧杯、移液管、滴定管、磁力搅拌器、电热板等。

2. 试剂：（1）尿碘标准溶液：准确称取0.1310g碘化钾（KIO3）于100ml容量瓶中，加入少量去离子水溶解，定容至刻度，配制成0.1mg/L的碘化钾标准溶液。

（2）硫酸肼溶液：称取5g硫酸肼于100ml容量瓶中，加入少量去离子水溶解，定容至刻度。

（3）碘化钾溶液：称取5g碘化钾于100ml容量瓶中，加入少量去离子水溶解，定容至刻度。

（4）显色剂：称取0.1g抗坏血酸于100ml容量瓶中，加入少量去离子水溶解，定容至刻度。

（5）盐酸溶液：1+1。

四、实验步骤1. 标准曲线绘制：（1）准确吸取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml尿碘标准溶液于6个10ml容量瓶中，分别加入1ml显色剂。

（2）将容量瓶置于电热板上，用盐酸溶液调节pH至3.0，煮沸3min，冷却至室温。

（3）用去离子水定容至刻度，摇匀。

（4）在波长525nm下，以去离子水为参比，测定各溶液的吸光度。

（5）以尿碘浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定：（1）准确吸取0.5ml尿液于10ml容量瓶中，加入1ml显色剂。

（2）同标准曲线绘制步骤（2）和（3）进行操作。

（3）在波长525nm下，以去离子水为参比，测定样品的吸光度。

（4）根据标准曲线，计算样品中尿碘含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线：根据实验数据绘制标准曲线，计算相关系数R²=0.999，说明标准曲线线性良好。

基本信息............................................................................................................................................. 临床意义............................................................................................................................................. 尿碘检测方法.....................................................................................................................................一、检测对象.............................................................................................................................二．缺碘的判断标准.................................................................................................................三、检测次数.............................................................................................................................四．缺碘的治疗..................................................................................... 错误！未指定书签。

实验室测定尿碘的质量控制杨志琼雷航琪万衍罗燕朱万明冯鑫（乐山市疾病预防控制中心乐山614000）尿碘的测定目前我国的标准方法是砷铈催化分光光度法。

该法测定尿碘的灵敏度高，结果准确，但由于尿碘含量的微量性加上尿碘测定的干扰因素较多。

因此对实验人员和实验条件及实验过程要求严格。

今年由于国家的十二五规划，我们实验室做了大量的尿碘样品，积累了一定的经验。

现对以往的经验进行总结并从以下几个方面谈谈砷铈催化分光光度法测定尿碘的质量控制。

1.实验前准备1.1实验人员的素质要求实验室检验结果的准确性与实验人员素质有着最直接的关系，为确保尿碘检测结果的准确可靠，尿碘检测工作必须由经过尿碘检测培训合格的人员担任，必须严格熟悉检验标准，掌握相关仪器的性能指标、正确操作方法和注意事项，并按照实验室内部质量控制体系进行实验。

1.2实验室环境的要求实验室环境条件的正常和稳定是检验工作正常开展的保障，也是确保检验结果有效性和准确性所必需的。

实验室的环境因素是指实验室内的温度、湿度、照明、采暖、通风、压力、气体污染以及空气悬浮微粒等条件。

这些因素都直接或间接对仪器的性能、或者反应本身产生影响从而影响实验结果。

本实验的环境条件要求：（1）由于尿碘的含量很低，为避免污染，建议采用专用实验室，条件实在不够的情况，必须与碘盐实验室分开且室内不能存放含碘的其他试剂和样品；（2）操作台面用1%的硫代硫酸钠搽洗。

（3）本实验最好保证温度在20℃-30℃之间进行，且波动不能超过1℃，最好在0.5℃之内。

如果外界环境温度达不到要求或者温度波动过大时，可采用空调或者超级恒温水浴箱进行温度控制。

1.3仪器设备的要求本实验要求控温消解仪、超级恒温水浴箱、723分光光度计、加样枪等进行了检定，误差在可接受范围之内，并保证这些仪器设备的稳定性和准确性。

1.4玻璃器皿的要求本实验所有采用的玻璃器皿：（1）移液管、容量瓶、刻度吸管均需要进行强制检定；（2）浸泡前清洗至不挂水珠，宜用品牌洗衣粉（雕牌、白猫等）洗刷有较好效果，不宜用洗洁精；（3）采用10%左右的盐酸浸泡过夜，必须保证浸泡盐酸浓度足够，也可先采用稀硫代硫酸钠溶液（10%）浸泡。

尿碘的测定方法尿碘是指人体内的碘元素在代谢后输出体外所形成的碘化物，其浓度可体现人体内碘的营养状况。

因此，尿碘是一种用于评价碘营养状态的非常重要的指标。

在本文中，将介绍一些测定尿碘的方法。

一、铁氰化钠比色法铁氰化钠比色法是一种常用的尿碘测定方法，是基于铁氰化钠和浓硝酸反应产生的蓝色化合物与尿液中碘的数量成正比的原理。

该方法具有操作简单，准确度高的优点。

具体操作如下：1. 用量吸取10 ml尿液，加入3滴3% HCl，振荡均匀;2. 将5 ml铁氰化钠试液加入其中，振荡混合;4.将试管放入沸水中加热3-5分钟;5. 从沸水中取出试管，立即置于冷水中冷却;6. 在400-700 nm波长范围内进行比色;7. 小心地取出2 mL荧光相似管，将其与上述试液一同进行比色，测量吸光度值并记录。

二、电化学法电化学法是一种依靠电化学反应来测定尿碘的方法，其原理是碘离子在阴极上还原为碘和在阳极上氧化为碘酸根离子，配合特定电极的使用，即可实现尿碘的检测。

该方法对尿液中其他化合物的影响比较小，具有极高的精度和敏感度。

1.准备银盘板、碘盘、平面滴布式玻璃电极、流量控制器等仪器设备;2.将电极接到电位计上，再接入电源将电压调至想要的值，并且设定阈值;3.将待测的尿液加入到碘盘中，和银盘放置在两端通电;4.调整平面滴布式玻璃电极的位置，使其与碘盘能够形成电流通路;5.开启流量控制器，将尿液流向碘盘中，并记录下测量结果。

三、光谱法光谱法是利用光谱学关于电磁波在物质中传播和相互作用的知识，对样品进行测量并通过光谱图的形式来分析样品。

光谱法可以通过傅里叶变化表征尿液中碘离子的吸收率。

1.采集10 mL尿液，取至不锈钢盆中，使用感应加热板摒灭水分，得到尿渣；2.将尿渣用100 mL去离子水将溶解，调整浓度为10μg/L;3.将溶液放入10 mm光路陶瓷池(P带)，进行测定。

尿碘快速定量试剂盒检测与国标法的对比雷航琪杨志琼朱万明万衍罗燕冯鑫（乐山市疾控预防控制中心乐山614000）碘是人体必须的微量元素，当摄入不足时人体会出现一系列的问题，导致所谓的“碘缺乏病”，特别是孕妇和儿童缺碘后会引起严重的后果。

尿碘是反应人体碘营养水平的重要指标，要想知道人体的碘营养状况，检测尿碘是较为直接的方法。

尿碘检测目前实验室所采用的方法是砷铈催化分光光度法（WS/T107-2006）。

该法是目前测定尿碘的国标方法，该方法的灵敏度高、准确度高，但由于尿碘含量很低且测定受多种因素干扰影响，外界环境的温度、湿度以及检测人员的操作都直接影响检测结果的准确性。

国标方法规定的操作较为复杂，时间控制严格，需多人配合完成。

现市场上有原理大致相同、操作更为简洁的试剂盒出现。

现采用试剂盒法和国标法对相同样品、相同质控样同时进行测定，统计测定结果。

对两种方法的灵敏度、准确度、精密度方面进行比较。

1实验部分1.1 样品井研县、金口河县、犍为县各140份尿样，包含儿童和孕妇。

共420份。

1.2 试剂国标法：按照国标方法的要求进行配制。

试剂盒：尿碘快速定量试剂盒AR型（武汉众生）。

1.3 标准物质：冻干人尿中碘成分标准物质GBW(E)09108i、GBW(E)09109g、GBW(E)09110n以及试剂盒中自带的质控样品。

1.4测定方法国标法：取各尿样及标准使用液系列0.25mL置于试管中，加入1.0mL过硫酸铵溶液（1.0mol/L），置于100℃烘箱中消化60min，冷却后加入2.5mL亚砷酸（0.10mol/L），混匀后放置15min，间隔30s加入0.3mL硫酸铈铵（0.076mol/L）反应，上分光光度计间隔30s比色。

试剂盒：取各尿样及标准使用液系列0.20mL置于试管中，加入0.5mL消解夜，置于100℃烘箱中消化60min；冷却后加入0.5mL还原剂，混匀。

再加入0.5mL指示剂摇匀。

国标法的r值变异范围为-0.9994— -0.9999，平均相关系数为-0.9996.试剂盒的r值变异范围为-0.9985— -0.9995，平均相关系数为-0.9991。

一、实验目的1. 了解尿碘检测的基本原理和方法。

2. 掌握尿碘检测的实验步骤和操作技巧。

3. 评估个体碘营养状况，为预防和治疗碘缺乏病提供依据。

二、实验原理尿碘检测是利用化学滴定法测定尿液中碘的含量。

碘在酸性条件下与淀粉反应，形成蓝色复合物，根据蓝色深浅可以判断尿液中碘的含量。

本实验采用氧化还原滴定法，以硫代硫酸钠为滴定剂，利用碘与硫代硫酸钠的反应进行滴定。

三、实验材料1. 尿样：收集受试者24小时尿液，混合均匀后取10ml待测。

2. 氢氧化钠溶液：0.1mol/L。

3. 硫代硫酸钠溶液：0.01mol/L。

4. 淀粉指示剂：1%。

5. 标准碘溶液：0.1mg/ml。

6. 实验器材：滴定管、移液管、烧杯、锥形瓶、玻璃棒等。

四、实验步骤1. 准备标准溶液：准确吸取标准碘溶液0.5ml于100ml容量瓶中，加入少量蒸馏水，用氢氧化钠溶液定容至刻度，配制成0.5mg/L的标准碘溶液。

2. 标准曲线绘制：取6个锥形瓶，分别加入0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml标准碘溶液，加入5ml蒸馏水，滴加淀粉指示剂，用硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，记录滴定消耗硫代硫酸钠溶液的体积。

3. 样品测定：准确吸取10ml尿样于锥形瓶中，加入5ml蒸馏水，滴加淀粉指示剂，用硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，记录滴定消耗硫代硫酸钠溶液的体积。

4. 计算尿碘含量：根据标准曲线，计算样品中尿碘含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：绘制标准曲线，横坐标为碘含量（mg/L），纵坐标为硫代硫酸钠溶液消耗体积（ml）。

2. 样品测定：根据实验数据，计算尿碘含量。

3. 结果分析：根据尿碘含量，评估受试者碘营养状况。

六、实验总结1. 本实验成功进行了尿碘检测，掌握了实验原理、操作步骤和结果分析。

2. 实验过程中，应注意滴定速度和指示剂的使用，以保证实验结果的准确性。

3. 尿碘检测有助于评估个体碘营养状况，为预防和治疗碘缺乏病提供依据。

尿碘的正常范围为每升150至500微克。

碘是合成甲状腺激素所必需的微量元素。

人体碘摄入不足或过量会影响甲状腺功能，导致甲状腺损伤，导致甲状腺疾病。

肾脏是碘的主要排泄器官。

碘通过90%的尿液和10%的粪便排出体外。

24小时尿碘排泄量已被证明是衡量碘总体水平的良好指标。

尿碘排泄量基本不变，排泄量基本能反映其摄入量。

消化法测定的尿碘值为尿液中总碘含量，主要反映尿液中无机碘含量和胃肠道吸收的碘摄入量。

尿碘正常值由人群决定。

对于儿童和一般人群的适当碘营养水平标准，尿碘中位数为100-199ug/l。

对于孕妇和哺乳期妇女，由于婴儿对碘的需求相对较大，孕妇和哺乳期妇女所需的尿碘中位数为150-249ug/l。

碘主要来自食盐中的碘盐，即碘盐。

自20世纪90年代初以来，中国的食盐中添加了碘，因此市场上的大多数食盐都是碘盐。

其次，碘来自海鲜，如虾皮、海带、紫菜、海鲜等。

消化法测得尿碘值，是尿液中的总碘含量，主要反应尿液中的无机碘含量，也反应胃肠道吸收的碘摄入量。

如果尿碘<150μG/l，说明碘不足，因此需要快速及时补充碘，以防止甲状腺激素合成不足影响妊娠或胎儿智力，因此需要合理补充碘。

碘的补充需要适量。

碘过量和碘不足，如尿碘＞300μG/l或尿碘＜100μG/l，这两个人群甲状腺相关疾病的发病率也显著增加。

如果尿碘在适当的范围内，患此类疾病的风险很低。

尿碘采样操作规程尿碘的浓度每日每时对每个人来说都可有变化，一般认为24h尿更可靠，但采样有一定难度，晨尿代表性较好，尿碘作为群体指标，选择一定样本数量的即时尿能够反应群体的碘营养水平，是评价人群碘营养状况的良好指标，但不能对个体的碘营养水平做出准确评价。

1.尿样的采集1.1尿样采集容器可用玻璃管或聚乙烯塑料管，必须能够用塞或盖紧密密封。

需经无碘化洗涤处理后才可以使用，使用前用10%盐酸溶液浸泡，然后用自来水和去离子水冲洗，晾干备用。

1.2 尿样的体积不少于5ml1.3尿样的采集用清洁的一次性塑料采样杯采集随意一次尿的中段尿样不少于10ml，分装于具塞塑料或玻璃管中（不少于5mL尿）。

2.尿样的保存采样后应尽快送实验室检测，不能尽快检测可常温或4℃冰箱保存（不适宜低温冷冻保存）。

常温保存的尿样必须在一个月内完成检测，4℃保存的尿样必须在二个月内完成检测。

3.说明尿样的最佳保存条件是4℃，且至少能够稳定2个月。

相同的尿样随着保存温度的升高，尿碘的检测结果也升高，可能随温度的升高尿样由于水分的挥发浓度有所提高，导致尿碘值升高。

尿样不适宜加酸保存，加酸后检测的变异增大，降低了样品的稳定性。

可能是盐酸参与同尿样的反应，生成的物质可能影响砷铈反应，或者是酸的存在会影响样品的消解。

尿样不适宜冷冻保存，如遇特殊情况需要冷冻，建议不加酸且冷冻时间不要超过2周。

如果现场采样不能及时送到实验室，样品可以在室温甚至高温下保存一段时间，但不要超过2周。

盐样的采集与保存采集居民户正食用的盐样装入塑料自封袋中，采样量不少于50g。

采集的样品应为干燥的盐样，明显吸潮（如结块、不流动）的盐样应于105℃下烘烤2小时，冷却后再进行检测。

在常温下于阴凉干燥处避光保存。

注意防止尿样和盐样交叉污染。