动物细胞培养和核移植技术原创总结

动物细胞培养·心得在学习动物细胞培养的过程中，我了解到是动物细胞工程中最常用的技术手段，而且动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础点，细胞培养是生物医学中一项重要技术，应用较为广泛，目前已渗透到细胞生物学、生物化学、临床检验学等多个领域。

在这次PPT 制作中，我对无脊椎动物和脊椎动物两大领域细胞培养取得的进展及应用作了较为详细的了解，并在此基础上探讨了动物细胞培养存在的问题以及未来的发展方向。

为相关领域研究者探讨其他种类细胞系的建立及筛选合适的细胞系培养方法作为理论的参考依据我了解到历史上组织培养技术创建于 18 世纪末，之后于 1907 年美国生物学家Harrison在无菌条件下，以淋巴液为培养基在试管中培养蛙胚神经组织宣告成功后，才逐渐发展成为一种从体内组织取出细胞，模拟体内生存环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖并维持结构和功能的实验技术。

这种技术为细胞学、遗传学、病毒学、免疫学的研究和应用做出了重要贡献。

特别是随着近年来现代生物科学领域的迅速拓展，各种分子生物学实验诸如核移植、细胞杂交、DNA 介导的基因转移等，都是借助细胞培养技术而得以实现的。

然而，在种类繁多的动物世界里，细胞培养实验技术的发展并不均衡，构建动物细胞培养体系的研究效率和效果上也存在较大的局限性。

而动物细胞培养，在1907年，哈里森（Harrison）在无菌条件下用淋巴液作培养基，培养蛙胚神经组织存活数周，并观察到神经细胞突起的生长过程，由此创建了盖片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法，奠定了动物组织体外培养的基础。

之后，又有人将悬滴培养法改良为双盖片培养，提高了传代效率并减少了污染；1923年，卡雷尔（Carrel）设计了卡氏瓶培养法，扩大了组织生存空间。

1951年，厄尔（Earle）发明了体外培养动物细胞的人工合成培养基。

1951年，波米拉（Pomerat）设计了灌流小室，使细胞生活在不断更新的培养液中，便于作显微摄影和细胞代谢的研究。

2.2 动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

2.2.1 动物细胞培养和核移植技术在治疗烧伤病人时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。

但对一个大面积烧伤的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源不足，而且会产生排异反应。

那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢?许多动物的细胞能够分泌蛋自质，如抗体等。

但是，单个细胞产生的蛋白质量是很少的，怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?细胞工程中的动物细胞培养技术为解决这些问题找到了出路（图2-15）。

动物细胞培养动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

那么，动物细胞培养的过程是怎样的?培养时又需要提供哪些必要的条件呢?动物细胞培养的过程成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖，因此，进行细胞培养时(图2-16)，首先将组织分散成许多单个细胞。

方法是从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞。

然后，用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养。

悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。

培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖(图2-17)，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。

以后，细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。

贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。

这样的培养过程通常被称为传代培养。

传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。

动物细胞工程：动物细胞培养和核移植技术原创介绍动物细胞工程是指将器官、组织或细胞培养繁殖，并利用它们的代谢能力、功能特异性、遗传变异性等特性进行实验或者生产活动。

动物细胞工程是现代化生物工程的基础和核心。

动物细胞培养技术是动物细胞工程的重要组成部分。

它是在体外将动物细胞培养并增殖的技术。

动物细胞培养技术应用广泛，可以用于生产药品、生物材料等。

比如，利用动物细胞培养技术生产抗癌药物、生物仿制药等。

核移植技术是指将某个细胞核植入其他细胞中的一种技术。

它可以用于繁殖优良的动物和植物，实现人工繁殖和育种的效果。

同时，核移植技术在基因工程领域也起到了重要作用。

动物细胞培养技术细胞培养的定义细胞培养是指将组织、器官或个体细胞从组织中或其它来源中获得的原始细胞，在细胞培养基上培养，进行细胞生长及增殖。

细胞培养技术的应用细胞培养技术可应用于医学、药学、农学、生物学等多种领域。

在生物制药领域，细胞培养技术被广泛应用于生产重要的生物药品（如免疫抑制剂、血液制品、疫苗等）。

在研究领域，细胞培养技术可用于开拓疾病治疗新思路、筛选药物、分析细胞信号传导等。

动物细胞培养技术的原理和步骤动物细胞培养技术是将动物组织分离、培养至单细胞状态后，定期更换细胞培养基，以提供适宜的营养物质和维生素，协助细胞生长及增殖。

动物细胞培养技术的主要步骤包括：1.细胞分离和培养基制备：将组织断成小块，利用胶原酶或胰蛋白酶等酶类，分离出单个细胞。

同时将细胞培养基在无菌条件下制成培养基，以支持细胞的生长和增殖。

2.细胞摆放：使用细胞培养器等培养设备，將获得的细胞放置在上面，然后静置数小时，以便细胞附着于培养器的表面。

3.细胞的适应性：将晶体管中的初始培养基更换为所需培养基，使细胞能够适应不同的环境。

4.细胞处理和维护：定期给细胞更换培养基，控制细胞的数量，并进行细胞质染色或形态学检查，观察细胞形态和生长情况。

改进细胞培养技术的策略现代细胞培养技术的进步，对于提高细胞生产能力、分化、培养、利用和存储等方面均具有重要的意义。

《动物细胞培养》一节教学设计及实践反思导读：学校每学期每位老师都有一节校内公开课。

本学期我选择了《2.2.1动物细胞培养和核移植技术（第一课时）》即《动物细胞培养》作为公开课即录像课的教学内容。

在课前经过了自己精心准备但是具体实施的教学结果却不令人满意。

通过“有效上课”专题的学习研究，我认真反思了自己这节课不成功的原因，与大家交流。

说明：第一部分公开课时《动物细胞培养》的教学设计第二部分课后的几点教学反思第三部分反思后的《动物细胞培养》教学设计一、教学目标简述动物细胞培养的过程、条件及应用。

二、教学重点、难点1. 教学重点动物细胞培养的过程及条件。

2. 教学难点动物细胞培养的过程及条件三、教材分析动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

在动物细胞培养技术之后介绍的核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体以及胚胎工程都要用到动物细胞培养技术。

掌握好这项技术才能为其他技术打好铺垫。

所以把动物细胞培养讲的清清楚楚、明明白白就十分重要了。

在动物细胞培养的教学中，可把这部分内容归纳成三个问题：（1）为什么要进行动物细胞的培养？——即培养的用途（2）什么是动物细胞的培养？（3）怎样进行动物细胞的培养？第三个问题是本节课的重点。

四、学情分析动物细胞在体内的增殖学生是了解的，在体外如何实现细胞增殖的，有什么特点以及培养后的细胞有什么用途都是可以激发学生的学习兴趣。

对于动物细胞培养的条件，则要从学生已有的内环境的知识出发，启发学生自己动脑思考这个问题，以加深对培养条件的理解。

学习了植物细胞工程的基础上再去联系动物细胞培养技术，并能作出二者的比较。

五、教学过程（我将本节所以设置的问题或问题组或活动编号）5.1课堂导入：师展示两幅烧伤程度不同的病人图片。

提问如何治疗呢？生答。

师进一步提问：如何获得大量健康的自体皮肤来治疗？生答。

5.2新知学习师：通过培养皮肤细胞可获得健康皮肤细胞，那么什么是动物细胞培养?培养过程有什么特点以及培养的细胞用途有哪些呢？本节课一起来解决？师展示图片:动物细胞培养的概念。

2.2.1动物细胞培养和核移植技术知识点一、动物细胞培养1、动物细胞培养的概念：从动物机体中取出相关的组织，将它___________________，然后，_______________________________，让这些细胞_____________________。

2、动物细胞培养的过程：取动物组织块→_____________________→胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理→_________________________→制成细胞悬液→______________________→分瓶→________________________细胞株→10-50代，遗传物质改变→细胞系。

相关概念：接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

原代培养：将动物组织用胰蛋白酶处理成单个细胞，配制成一定浓度的悬浮液，放入培养瓶中在培养箱中培养的过程。

传代培养：培养瓶中的细胞越来越多，用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成悬浮液，分瓶培养的过程。

3．动物细胞培养的条件①无、无的环境a．对和进行无菌处理；b．在细胞培养液中添加一定量的；c．定期。

②营养有等，另外还需要加入等一些天然成分。

③和哺乳动物多以℃为宜，多数细胞生存的最适pH 为。

④环境细胞培养所需气体主要有和，是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的。

进行细胞培养时，通常采用或培养瓶，将其置于含加的混合气体的培养箱中进行培养。

4．动物细胞培养技术的应用①大规模生产有重要价值的；如：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。

②为技术提供受体细胞；③检测；④用于生理、病理、药理等方面的。

如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。

二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1．动物核移植技术概念：将动物一个细胞的，移入一个已经的细胞中，使其并发育成一个新的，这个新的胚胎最终发育成动物。

克隆动物：用核移植得到的动物成为克隆动物。

和动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养技术动物细胞培养技术是通过外部环境的调控，使动物细胞在无机媒体以及生长因子的作用下继续生长、分裂和繁殖的一项细胞生物学技术。

该技术可用于研究和生产许多生物制品。

动物细胞培养的应用研究应用在生物医学、病毒学和免疫学等领域中，动物细胞培养是一项重要的实验技术。

科学家可以通过体外培养细胞，研究细胞生长和分裂的机制，探究细胞活动的各个环节以及生物物质的生成和代谢方式。

生产应用通过体外培养的方法，可以大规模生产某些生物制品。

例如，用细胞培养法生产疫苗、抗生素、胰岛素、干细胞等。

这种生产方法能够避免传统的动物或植物药材所潜藏的标准不一、药效不稳定等问题，能够生产出高品质、高效、更安全的药品和生物制品。

动物细胞培养的技术难点动物细胞培养需提供适宜的温度、酸碱度、氧气、营养元素和生长因子等条件才能成功进行。

同时，这些条件的每一个细节都会对培养结果产生影响。

培养基细胞培养基是一种含有营养和生长因子的培养条件，不同细胞类型需要不同类型和浓度的培养基。

细胞培养基也会随着时间推移逐渐耗尽其中的营养成分，进而影响到培养细胞的生长和分裂情况。

针对不同细胞类型的技术难点不同类型的细胞要求不同的生长环境和营养条件，例如培养体外造血组织干细胞则需要添加足量的细胞生长因子，而产生癌细胞株则需要添加足量的营养物质。

动物细胞培养的优缺点优点•可以探究细胞的机制，并且可连续、长时间地进行研究。

•无需配对性强的两个动物繁殖，减少了动物实验的数量和成本。

•增加了药品或生物制品的生产效率和质量。

缺点•无法检测培养出来的细胞是否与原动物形态和基因特性一致，使得这种生产方式无法完全代替动物的实验方式。

•产生的细胞可能会突变，并且有可能会失去其特定的功能，这也会对整个实验结果产生影响。

核移植技术核移植技术是将一个成熟细胞的细胞核移植到另一个细胞外空泡内的实验操作和过程。

该技术可以用于研究和生产许多生物制品，例如体细胞克隆。

专题二：动物细胞工程——动物细胞培养和核移植技术概述动物细胞工程是一门研究关于动物细胞的技术，其中包括了动物细胞培养和核移植技术。

动物细胞培养是指在体外对动物细胞进行组织培养和细胞培养，以便进行相关研究。

核移植技术是将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞或胚胎中，从而产生具有相同遗传信息的生物体。

本文将重点介绍动物细胞培养和核移植技术的原理和应用。

动物细胞培养动物细胞培养是一种体外对动物细胞进行繁殖和培养的技术。

通过培养，可以获得足够数量的细胞用于研究和应用。

常见的动物细胞培养包括原代细胞培养、细胞系培养和转染细胞培养。

原代细胞培养原代细胞培养是指直接从动物体内获取新鲜组织，将组织进行分离和培养而得到的细胞。

该技术常用于从动物体内获取稀有细胞或目标细胞。

原代细胞培养需要特殊培养基和适宜的培养条件，如温度、湿度和二氧化碳浓度等。

细胞系培养细胞系培养是指从原代细胞培养中分离出的细胞，通过适当的处理和转接，使其能够连续增殖和培养。

细胞系培养可以获得大量的同种细胞，用于各种细胞实验和研究。

常见的细胞系包括L929、HEK293等。

转染细胞培养转染细胞培养是指将外源基因导入到细胞中，使其表达特定蛋白或功能。

该技术常用于研究基因功能、蛋白表达和疾病机制等。

常用的转染方法有化学法、电穿孔法和病毒载体法等。

核移植技术核移植技术是指将一个细胞的细胞核移到另一个细胞或胚胎中，使其具有相同的遗传信息。

核移植技术可以用于克隆动物、治疗疾病和基因编辑等领域。

克隆动物核移植技术在克隆动物中的应用较为广泛。

通过将成年动物的成体细胞的细胞核移植到无性生殖细胞或受精卵中，可以得到与捐赠细胞相同遗传信息的动物。

克隆动物技术在畜牧业中有着重要的应用，如克隆优质肉牛和高产奶牛等。

治疗疾病核移植技术可以应用于治疗某些疾病。

例如，将患者的细胞核移植到遗传性疾病患者的空胚胎中，得到一个与患者基因完全匹配的胚胎，再将其移植回患者体内，可以为患者提供一种治疗该疾病的方法。

221动物细胞培养和核移植技术1随着技术的不断发展，细胞培养和核移植技术正在得到越来越多的应用。

动物细胞培养和核移植技术1主要是通过对动物细胞进行培养和操作，实现人工制造和改良不同物种的细胞。

本文将从细胞培养和核移植技术两方面介绍动物细胞培养和核移植技术1。

一、动物细胞培养技术1. 细胞培养介绍细胞培养是指将非常小的组织样本分离成单个细胞，并将它们放入到含有生长因子和营养成分的合适环境中，使其继续生长和分裂。

细胞培养一般有以下几个步骤：1.细胞来源的选择2.细胞的分离和处理3.细胞培养基的选择4.细胞培养的环境条件2. 细胞培养的类型细胞培养可以分为原代细胞培养和细胞系培养两种类型。

（1）原代细胞培养原代细胞是指从组织样本中分离出的原始细胞。

原代细胞培养是在细胞刚分离出来时进行的。

由于原代细胞数量有限，这种培养方式一般只能保持数代细胞。

原代细胞培养一般用于研究细胞功能、细胞生物学、生物药物、组织工程等领域。

（2）细胞系培养细胞系是指来源于某一个细胞的细胞群，在一定条件下，可以无限制地生长下去，形成和维持特定的形态、功能和生长特点的细胞文化。

细胞系培养过程相对简单，可以制备大批量的细胞用于科学研究和生产制品。

常用的细胞系包括HeLa等。

3. 细胞培养的应用动物细胞培养具有广泛的应用，可以用来生产药物、生物材料、移植组织、医学诊断、基因治疗和细胞工程等方面。

二、核移植技术核移植技术是指将DNA核捐赠者的细胞核移植到一个去核、零时停止分裂的细胞中，经过培养和分裂，从而重新形成一个克隆，即克隆细胞。

克隆细胞是与捐赠者基因几乎相同的细胞，是获得特定个体的有效途径之一。

1. 核移植的历史核移植技术的历史可以追溯到1950年代。

当时的研究者通过将原核细胞完成核相互转移，成功地进行了多倍体动物的克隆。

1962年，谢开福等通过细胞核移植成功地实现了青蛙的克隆。

在此之后，人们在多个物种中成功地进行了核移植。

2. 核移植的过程（1）核移植器材核移植的器材主要包括显微操作仪、专用细胞操作台、液泵、离心机、CO2培养箱等。