实验六蛋黄总胆固醇的测定(邻苯二甲醛法)(精)

实验六血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）实验六血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）一、实验目的掌握邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇的原理和方法二、实验原理胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物，它不仅参与血浆蛋白的组成，而且也是细胞的必要结构成分，还可以转化成胆汁酸盐、肾上腺皮质激素和维生素D等。

胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式存在，统称总胆固醇。

总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。

本实验采用前一种方法。

胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质，此物质在550nm 波长处有最大吸收，可用比色法作总胆固醇的定量测定。

胆固醇含量在400mg/100ml内，与OD值呈良好线性关系。

本法不必离心，颜色产物也比较稳定，胆红素及一般溶血对结果影响不大，严重溶血者才使结果偏高。

本法在20～37℃条件下显色，显色后5分钟开始至半小时以上颜色基本稳定。

温度过低，显色剂强度减弱；加混合酸后振摇过激能使产热过高，也可使显色减弱。

三、实验仪器（器材）722可见分光光度计、试管、移液枪等。

四、实验试剂和材料试剂：①邻苯二甲醛试剂：称取邻苯二甲醛50mg，以无水乙醇溶至50ml冷藏，有效期为一个半月。

②醋酸（90％）：取冰醋酸90ml加入10ml蒸馏水中。

③混合酸：90％醋酸100ml与浓硫酸100ml混合。

④标准胆固醇贮液（1mg/ml）：准确称取胆固醇100mg，以冰乙酸溶至100ml。

⑤标准胆固醇应用液（0.1mg/ml）：将上述贮存液以冰乙酸稀释10倍: 即取10ml 用冰乙酸稀释至100ml。

材料：动物血清五、实验步骤1、制作标准曲线取5支试管编号后，按下表顺序加入试剂，加毕，温和混匀，20～37℃下静置10分钟，于550nm下比色测定，以总胆固醇量（mg%）为横坐标，OD值为纵坐标做出标准曲线。

2、样品测定取4支试管编号后，分别加入试剂，加毕，温和混匀，20～37℃下静置10分钟，于550nm下比色测定。

实验名称：血清总胆固醇测定实验目的：通过本实验，掌握血清总胆固醇的测定方法，了解血清总胆固醇在临床诊断和预防治疗中的重要性。

实验原理：血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）是血液中所有胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。

血清总胆固醇的测定方法主要有酶法、比色法、沉淀法等。

本实验采用酶法测定血清总胆固醇，其原理是利用胆固醇酯酶（Cholesterol Esterase）将胆固醇酯水解为游离胆固醇，然后利用胆固醇氧化酶（Cholesterol Oxidase）将游离胆固醇氧化为胆汁酸，最后在碱性条件下与磷钼酸反应生成磷钼蓝，通过比色法测定其吸光度，从而计算出血清总胆固醇的浓度。

实验材料：1. 血清样品：取自健康志愿者，经离心分离后获得。

2. 胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸、抗坏血酸、硫酸铜、邻苯二甲酸氢钾、氯仿、无水乙醇等试剂。

3. 仪器：酶标仪、移液器、恒温水浴锅、离心机等。

实验步骤：1. 样品处理：取血清样品1.0ml，加入氯仿和无水乙醇（1:2，V/V）混合液5.0ml，涡旋混合，离心10分钟，取上清液待测。

2. 标准曲线绘制：将胆固醇标准品配制成一系列浓度梯度的标准溶液，分别加入胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸等试剂，按照实验步骤进行操作，测定吸光度。

以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 样品测定：取处理后的血清样品，按照标准曲线绘制步骤进行操作，测定吸光度。

根据标准曲线，计算样品中血清总胆固醇的浓度。

实验结果：1. 标准曲线绘制：以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

结果显示，胆固醇浓度在0.5-10.0mg/dl范围内，吸光度与胆固醇浓度呈线性关系。

2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中血清总胆固醇的浓度为X mg/dl。

实验讨论：1. 血清总胆固醇是人体内重要的脂质成分，其浓度异常与心血管疾病、动脉粥样硬化等疾病密切相关。

鸡蛋胆固醇含量测定方法比较研究吴超;李润航;于中英;娄玉杰【摘要】试验随机选取了中华绿蛋鸡产的绿壳蛋和依莎褐蛋鸡产的褐壳鸡蛋各20枚,采用邻苯二甲醛分光光度计比色法和气相色谱法,测定鸡蛋中胆固醇的含量,比较两种方法在测定鸡蛋胆固醇含量上的差异.结果表明,用邻苯二甲醛比色法测得褐壳蛋蛋黄胆固醇含量176.79 mg/枚,浓度为13.35mg/g.用气相色谱法测得胆固醇含量142.74 mg/枚,浓度为9.69mg/g,二种方法测定的结果差异显著(P＜0.05).用邻苯二甲醛比色法测得绿壳蛋蛋黄胆固醇含量158.12mg/枚,浓度为10.65 mg/g.用气相色谱法测得胆固醇含量128.70 mg/枚,浓度为8.54 mg/g,二种方法测定的结果差异显著(P＜0.05).【期刊名称】《家畜生态学报》【年(卷),期】2013(034)011【总页数】4页(P57-60)【关键词】胆固醇;比色法;气相色谱;鸡蛋【作者】吴超;李润航;于中英;娄玉杰【作者单位】吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118【正文语种】中文【中图分类】S811.6在人们健康意识不断增强的今天，胆固醇往往片面的被认为是对人体有害的物质，但实际上，胆固醇是动物细胞各种膜结构及神经髓鞘的重要组成部分，可调节肠胃消化道中膳食脂肪的吸收，是胆汁酸、类固醇激素及维生素D3的前体，具有重要的生理功能[7]，但如果摄入量过多，可形成高血脂症，引起动脉粥样硬化，进而诱发冠心病、高血压等一系列心脑血管疾病[1-4]。

研究表明，来源于鸡蛋中的胆固醇与来源于其他原料的胆固醇相比更易导致人体血清胆固醇水平的提高[5-6]。

鸡蛋中的胆固醇总量在100～270 mg范围内变动[7]，为满足不同人群的需要，低胆固醇鸡蛋备受人们的关注，因而鸡蛋中胆固醇含量测定的方法及准确性是评定其营养价值的重要参数。

血清总胆固醇的测定实验报告胆固醇是人体内一种重要的脂质物质，它在维持细胞膜的完整性、合成激素和胆汁酸等方面发挥着重要作用。

然而，过高的血清总胆固醇水平会增加心脑血管疾病的风险。

因此，及时测定血清总胆固醇水平对于预防和治疗心脑血管疾病具有重要意义。

本实验旨在通过测定血清中总胆固醇的含量，掌握其测定方法，并了解不同因素对血清总胆固醇含量的影响，为临床诊断和研究提供参考。

1. 实验原理。

本实验采用酶法测定血清总胆固醇含量。

首先，将血清样本与试剂中的胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶发生反应，将胆固醇酯水解成游离的胆固醇和脂肪酸，然后游离的胆固醇与试剂中的胆固醇氧化酶再次发生反应，生成过氧化物酶，最终生成带有颜色的化合物。

通过测定产生的有色产物的光密度，即可计算出血清中总胆固醇的含量。

2. 实验步骤。

（1）取适量血清样本，离心沉淀，取上清液备用。

（2）将标准品和上清液分别加入反应管中，加入试剂A和试剂B，混匀后放置37℃恒温水浴中反应一定时间。

（3）加入硫酸后，混匀放置10min，再加入试剂C混匀后放置2min。

（4）测定吸光度值，并根据标准曲线计算出血清总胆固醇的含量。

3. 实验结果。

通过实验测定，得出不同血清样本中总胆固醇的含量分别为X mg/dL、Ymg/dL和Z mg/dL。

根据实验结果，我们可以得出……（根据实验结果进行分析和讨论）。

4. 实验结论。

本实验通过酶法测定了血清中总胆固醇的含量，结果表明……（根据实验结果进行结论）。

5. 实验注意事项。

（1）在实验过程中，要注意血清样本的保存和处理，避免样本受到污染或变质。

（2）在试剂配制和使用过程中，要按照相关操作规程，严格控制试剂的质量和使用量。

（3）实验操作过程中，要注意实验室安全，避免发生意外。

6. 实验意义和应用。

本实验方法可以准确测定血清中总胆固醇的含量，为临床诊断和研究提供了重要的参考数据。

同时，也为进一步研究血清总胆固醇与心脑血管疾病的关系提供了实验基础。

血液总胆固醇含量的测定实验报告
简介
本实验旨在测定血液样本中的总胆固醇含量。

总胆固醇是一种与心脏疾病风险密切相关的指标，因此准确测量总胆固醇含量对于健康评估至关重要。

实验方法
1. 准备工作
- 收集实验所需材料，包括血液样本、试剂和实验装置。

- 保持实验环境清洁，并准备好相关的安全设施。

- 根据实验所需，对仪器进行校准和预热。

2. 样本处理
- 提取一份血液样本，确保样本无污染。

- 将样本转移到一个干净的试管中，避免氧气接触。

3. 试剂操作
- 按照试剂使用说明书的指导，将所需试剂加入血液样本中。

- 注意使用量和顺序，并确保充分混合。

4. 光度测量
- 使用光度计测量处理后的样本的光吸收值。

- 将光吸收值与标准曲线进行对比，确定总胆固醇含量。

实验结果
根据测量结果，我们得出了血液样本中的总胆固醇含量。

请见下表：
结论
实验测定的结果显示，这些血液样本中的总胆固醇含量在正常范围内。

然而，为了确切评估血液中的总胆固醇水平对身体健康的影响，需要进一步的研究和分析。

结束语
本次实验成功测定了血液样本中的总胆固醇含量，这是一个重要的健康指标。

我们鼓励进一步研究和实验，以便更好地理解总胆固醇与心脏健康之间的关系，并采取适当的预防措施。

以上是血液总胆固醇含量的测定实验报告。

血清总胆固醇的测定实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过测定血清中的总胆固醇水平，了解被检测者的心血管健康状况，为预防和治疗心血管疾病提供参考依据。

二、实验原理。

血清总胆固醇是指血液中所有脂蛋白和游离胆固醇的总和，通常以毫摩尔/升（mmol/L）为单位进行测定。

在实验室中，我们采用酶法测定血清总胆固醇，即通过酶的催化作用将胆固醇氧化成酮醇，然后通过比色法测定产生的色素来确定总胆固醇的浓度。

三、实验步骤。

1. 采集被检测者的静脉血样本，放置于离心管中，离心10分钟后取上清液。

2. 将上清液放入试剂盒中，按照说明书的操作步骤进行样本处理和试剂添加。

3. 使用分光光度计测定样本吸光度，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。

四、实验结果。

根据实验测定，被检测者的血清总胆固醇水平为X mmol/L。

五、实验分析。

根据血清总胆固醇的测定结果，结合被检测者的年龄、性别、生活方式等因素，可以初步判断其心血管健康状况。

若总胆固醇水平偏高，可能存在心血管疾病的风险，需要进一步进行相关检查和干预措施。

若总胆固醇水平正常，被检测者的心血管健康状况良好。

六、实验注意事项。

1. 在采集血样和进行实验操作时，要严格遵守无菌操作规范，确保实验结果的准确性和可靠性。

2. 实验过程中要注意化学试剂的使用安全，避免接触皮肤和吸入气体，必要时戴上防护手套和口罩。

3. 实验设备的使用和维护要符合相关规定，保证设备的正常运转和数据的准确性。

七、实验结论。

通过本次实验测定，我们成功得出了被检测者的血清总胆固醇水平，并对其心血管健康状况进行了初步分析。

实验结果对于预防和治疗心血管疾病具有一定的参考价值。

八、实验展望。

在今后的实验中，我们将进一步完善实验方法，提高测定精度和准确性，为更多人群的心血管健康提供更多的数据支持和科学依据。

以上就是本次血清总胆固醇的测定实验报告，希望对大家有所帮助。

实验名称：蛋黄中胆固醇的提取与测定实验目的：1. 学习从蛋黄中提取胆固醇。

2. 掌握薄层层析法分离混合物。

3. 了解胆固醇的定性分析方法。

实验原理：胆固醇是一种重要的生物活性物质，存在于动物组织中。

本实验采用有机溶剂提取蛋黄中的胆固醇，然后利用薄层层析法分离胆固醇与其他脂类成分，最后通过紫外灯下观察斑点的颜色和位置，对胆固醇进行定性分析。

实验仪器：1. 烧杯2. 玻璃棒3. 烘箱4. 薄层层析板5. 展开器6. 紫外灯7. 移液管8. 电子天平实验试剂：1. 蛋黄2. 氯仿3. 乙醇4. 硅胶5. 碘6. 碘化钾实验步骤：1. 称取一定量的蛋黄，加入适量的氯仿，用玻璃棒搅拌至蛋黄完全溶解。

2. 将溶液转移至烧杯中，用乙醇稀释，直至溶液澄清。

3. 将溶液过滤，收集滤液。

4. 取一张薄层层析板，用铅笔轻轻画出起始线。

5. 用移液管取少量滤液，滴加在起始线上，重复三次，每次间隔约1cm。

6. 将薄层层析板放入展开器中，用碘蒸气饱和展开器，使碘蒸气上升到层析板。

7. 展开一定时间后，取出薄层层析板，用紫外灯照射，观察胆固醇斑点的位置和颜色。

8. 记录胆固醇斑点的位置和颜色。

实验现象：在紫外灯下，胆固醇斑点呈现亮黄色，位于层析板的较下端。

实验数据记录与处理：1. 胆固醇斑点的位置：距离起始线约3cm。

2. 胆固醇斑点的颜色：亮黄色。

实验结果与讨论：根据实验结果，蛋黄中的胆固醇在薄层层析板上呈现亮黄色斑点，位于较下端。

这表明胆固醇在氯仿中溶解度较高，通过薄层层析法可以将其与其他脂类成分分离。

实验问题：1. 胆固醇在氯仿中的溶解度如何？2. 薄层层析法分离胆固醇的原理是什么？讨论与改进：1. 胆固醇在氯仿中的溶解度较高，因此可以使用氯仿作为提取剂。

2. 薄层层析法分离胆固醇的原理是利用不同成分在展开剂中的分配系数不同，从而实现分离。

为了提高实验结果的准确性，可以采取以下改进措施：1. 在提取过程中，确保蛋黄与氯仿充分混合，以提高胆固醇的提取率。

血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）测定是临床生化检验中常见的项目之一。

本次实验的目的是掌握血清总胆固醇测定的基本原理、操作方法和结果分析，了解血清总胆固醇水平在健康评估和疾病诊断中的意义。

二、实验原理目前常用的血清总胆固醇测定方法为酶法。

胆固醇酯酶（CE）首先将胆固醇酯水解为游离胆固醇和脂肪酸，胆固醇氧化酶（COD）催化游离胆固醇氧化生成胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下与 4-氨基安替比林（4-AAP）和酚反应生成红色醌亚胺化合物。

在 500nm 波长处测定吸光度，吸光度的高低与血清中总胆固醇的含量成正比，通过与标准品比较可计算出血清总胆固醇的浓度。

三、实验材料1、仪器分光光度计恒温水浴箱移液器离心机2、试剂胆固醇测定试剂盒（包括胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、酚等）标准胆固醇溶液（浓度已知）血清样本四、实验步骤1、试剂准备按照试剂盒说明书将试剂配制成工作液，置于 37℃恒温水浴箱中预温。

2、样本处理采集空腹静脉血，离心分离血清。

3、标准曲线绘制取 5 支试管，分别加入0μl、50μl、100μl、150μl、200μl 标准胆固醇溶液，用生理盐水补足至200μl。

各管中胆固醇的浓度分别为0mmol/L、25mmol/L、50mmol/L、75mmol/L、100mmol/L。

向各管中加入 20ml 工作液，充分混匀，37℃水浴 10 分钟。

以空白管调零，在 500nm 波长处测定各管吸光度。

以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

4、样本测定取200μl 血清样本，加入 20ml 工作液，充分混匀，37℃水浴 10 分钟。

测定样本管的吸光度，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。

五、实验结果1、标准曲线记录各标准管的胆固醇浓度和对应的吸光度值，绘制标准曲线。

标准曲线应呈线性关系，相关系数（r）应大于 098。