邻苯二甲醛检测试剂

领苯二甲醛它是医药中间体，是新的外用高效安全抗菌消毒剂，作为医院的内窥镜手术用器械的消毒灭菌，可用于合成新抗血小板聚集，也是化学领域分析试剂，有些相关的特点大家可能不太了解，接下来就为大家详细的讲解一下，希望对大家有所帮助。

主要有以下4种特点：1、邻苯二甲醛4800mg／L水溶液作用1mm，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌平均杀灭率为很高；以含5969mg／L邻苯二甲醛对白色念珠菌作用1min，平均杀灭率达很高。

2、对枯草杆菌黑色变种芽孢作用70min和120min，平均杀灭率也很高。

以含5969mg／L邻苯二甲醛作用10min，可有效破坏不锈钢载体上HBsAg抗原性。

3、有机物对邻苯二甲醛杀菌效果有一定影响。

含5969mg／L邻苯二甲醛消毒液对不锈钢、碳钢、铜、铝浸泡72h，除对铜有中度腐蚀之外，对其他金属均基本无腐蚀。

4、将其贮存于54℃14d，邻苯二甲醛含量下降率为4．98％。

5、该消毒剂对细菌繁殖体、酵母菌和细菌芽孢均有良好的杀灭效果，且性能稳定，腐蚀性小。

醛在强碱环境下共热（或遇到强碱），会发生歧化反应，生成醇和羧酸钠。

可能遇酸也会使醛活化，可能发生某些反应而使醛失效。

至于邻苯二甲醛由于它的特殊结构，避免遇热，一般有一定稳定性。

当然，邻苯二甲醛会被空气氧化，一般的醛遇到空气中的氧气会缓慢氧化，此反应机理类似于自由基氧化反应。

在空气中缓慢氧化会变成羧酸，但注意应在这种物质周围用铁质物密封起来，或用其它方法使其与空气隔绝，随用随取，然后放入冰箱就会存放很长时间。

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紫外分光光度法测定消毒剂中邻苯二醛的含量田佩瑶李洁李长青(北京市疾病预防控制中心, 北京 100013)2003年7月，北京终于赢得了抗击“非典”的胜利，这中间消毒工作起了非常重要的作用。

许多新型消毒剂应运而生。

为了规范和管理消毒剂市场，需要建立相应的消毒剂检测方法，以适应市场的需求。

邻苯二醛（OPA）是国内外近年来研究出的一种新型化学消毒剂。

它无刺激性，无毒性，腐蚀性低，使用浓度低，作用时间短，具有与戊二醛相同的杀灭微生物的能力，是一种很好的戊二醛的替代品，具有良好的应用前景。

目前，美国已将其列入了消毒剂序列，并已形成了消毒灭菌常用参数。

我国也已开始研制此类消毒剂。

为了准确检测此类产品中OPA含量，保证消毒剂的质量，根据OPA分子中的醛基具有紫外吸收的特点，我们建立了紫外分光光度法测定消毒剂中OPA含量的方法。

该法灵敏、快速，通过对实际样品的测定，结果另人满意。

1．实验：1.1仪器与试剂：1.2方法：1.2.1工作曲线制备：准确称取OPA标准品0.1000g，用去离子水定容至100ml容量瓶中，配成OPA标准储备液,浓度为1.0mg/ml。

准确移取0.0、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml的OPA标准储备液于100ml容量瓶中,用去离子水定容至刻度，配成浓度为0.0、10.0、30.0、50.0、70.0、100.0μg/ml标准系列。

1.2.2样品制备与测定：准确移取1.0ml样品于100ml容量瓶中,用去离子水定容至刻度。

在仪器最佳条件下，测定标准系列，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制工作曲线。

同时测定样品及空白溶液吸光度值，用工作曲线计算，得到所对应的样品浓度。

1.2.3仪器最佳条件：波长：260.0nm；测定因子：1.0；纸速：50nm/cm；光源：UV+VIS灯；扫描速度：240nm/min；测量方式：吸光度A；最大吸光度：1.000A；最小吸光度：1.000A；响应时间：1s；2.结果：2.1溶剂的选择及最大吸收波长的确定：OPA成品是一种淡黄色针状结晶，能溶于水、醇、醚等。

仅供科研版本号：171013邻苯二甲醛试剂【产品组成】【保存条件】室温,避光,6个月【产品概述】胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇，是一种环戊烷多氢菲的衍生物，分子式C27H46O，分子量为3860.65。

胆固醇广泛存在于动物体内，其中脑、神经组织最丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。

邻苯二甲醛试剂属于总胆固醇检测(邻苯二甲醛比色法)的核心成分之一，检测原理是胆固醇及其脂，在强酸存在下与邻苯二甲醛反应，产生紫红色化合物，该化合物在550nm波长处有最大吸收峰，分光光度计在550nm处进行比色测定，胆固醇含量在4mg/ml之内与吸光度呈良好线性关系。

本试剂用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。

该检测优点是：1、操作简便；2、灵敏；3、稳定；4、无需将胆固醇单独抽提出来或去除样品中的蛋白质。

本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

【使用方法】1、样本处理：①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。

②细胞样本：a、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。

b、用PBS或生理盐水清洗1~2次，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。

c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔30s，重复3~5次。

亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。

亦可用1~2%TritonX-100冰浴30~60min，制备好的裂解液不可离心，待用。

③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水=1：4的比例，加入生理盐水，冰浴条件下手动或机械匀浆。

2500~3000g离心10min，取上清待用。

2、配制胆固醇标准工作液。

3、配制邻苯二甲醛工作液：取1瓶(10mg)邻苯二甲醛粉剂的准确加入邻苯二甲醛稀释液10ml，充分混匀，即为邻苯二甲醛工作液。

实验六蛋黄总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）一、实验目的1、学习分光光度计的原理及操作。

2、学习用分光光度法测定蛋黄中总胆固醇（脂肪）含量及标准曲线的制作。

二、基本原理胆固醇及其酯在硫酸存在下与邻苯二甲醛作用，产生紫红色物质，此物质在550nm由最大吸收值，可用比色法测定。

胆固醇含量在400mg/100ml之内与吸光度呈现良好线性关系。

本法操作简便，灵敏、稳定。

实验相关原理根据物质对光的吸收特征和吸收强度，对物质进行定性和定量的分析方法，称为分光光度法(spectrophotometry)。

该法具有一定的灵敏度和准确度，分析手续较简便快速，仪器设备也不复杂，故应用很广。

吸光度与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比，称为朗伯—比尔定律，简称比尔定律，即光的吸收定律。

吸光系数的大小，取决于物质(溶质、溶剂)的本性和光的波长。

1. 物质不同，则吸光系数不同，所以吸光系数可作为物质的特性常数。

在分光光度法中，常用摩尔吸光系数ε来衡量显色反应的灵敏度，ε值越大，灵敏度越高。

2. 溶剂不同，其吸光系数亦不同。

3. 光的波长不同，其吸光系数亦不同。

如将不同波长的单色光依次通过被分析物质，分别测得吸光度，然后绘制吸光度—波长曲线，称为吸收曲线(absorption curve)，吸收曲线上有极大值的部分，称为吸收峰。

吸收峰所对应的波长，称为最大吸收波长，以符号λmax表示，这是物质定性的依据之一。

4.单色光的纯度也影响吸光系数。

单色光越纯，即经单色器分光后的波长范围越窄，其吸光系数越大。

定量方法：1、吸光系数法2、标准曲线法不是任何情况下都能适用的。

特别是在单色光不纯的情况下，测得的吸光度值可以随所用仪器不同而在一个相当大的幅度内变化不定，若用吸光系数换算成浓度，则将产生很大误差。

先配制一系列浓度不同的标准溶液，在测定条件相同情况下，分别测定其吸光度，然后以标准溶液的浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标，绘制A—C关系图，在相同条件下测出样品溶液的吸光度，就可以从标准曲线上查出样品溶液的浓度。

实验六血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）实验六血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）一、实验目的掌握邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇的原理和方法二、实验原理胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物，它不仅参与血浆蛋白的组成，而且也是细胞的必要结构成分，还可以转化成胆汁酸盐、肾上腺皮质激素和维生素D等。

胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式存在，统称总胆固醇。

总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。

本实验采用前一种方法。

胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质，此物质在550nm 波长处有最大吸收，可用比色法作总胆固醇的定量测定。

胆固醇含量在400mg/100ml内，与OD值呈良好线性关系。

本法不必离心，颜色产物也比较稳定，胆红素及一般溶血对结果影响不大，严重溶血者才使结果偏高。

本法在20～37℃条件下显色，显色后5分钟开始至半小时以上颜色基本稳定。

温度过低，显色剂强度减弱；加混合酸后振摇过激能使产热过高，也可使显色减弱。

三、实验仪器（器材）722可见分光光度计、试管、移液枪等。

四、实验试剂和材料试剂：①邻苯二甲醛试剂：称取邻苯二甲醛50mg，以无水乙醇溶至50ml冷藏，有效期为一个半月。

②醋酸（90％）：取冰醋酸90ml加入10ml蒸馏水中。

③混合酸：90％醋酸100ml与浓硫酸100ml混合。

④标准胆固醇贮液（1mg/ml）：准确称取胆固醇100mg，以冰乙酸溶至100ml。

⑤标准胆固醇应用液（0.1mg/ml）：将上述贮存液以冰乙酸稀释10倍: 即取10ml 用冰乙酸稀释至100ml。

材料：动物血清五、实验步骤1、制作标准曲线取5支试管编号后，按下表顺序加入试剂，加毕，温和混匀，20～37℃下静置10分钟，于550nm下比色测定，以总胆固醇量（mg%）为横坐标，OD值为纵坐标做出标准曲线。

2、样品测定取4支试管编号后，分别加入试剂，加毕，温和混匀，20～37℃下静置10分钟，于550nm下比色测定。

青霉素邻苯二甲醛衍生荧光法测定方法分析【摘要】目的以邻苯二甲醛衍生荧光法对牛奶中苄青霉素残留进行测定为例，对青霉素邻苯二甲醛衍生荧光法测定方法进行分析与探讨。

方法随机选取某品牌的牛奶，准确量取1毫升，加入酸化乙腈5毫升后进行震荡等处理后经衍生反应后配制成样品溶液，与标准溶液共同进行荧光检测，并将检测结果进行比较分析。

结果通过对检测结果进行分析得出，样品溶液水解50分钟后衍生产物的荧光强度趋于稳定；且样品溶液的平均回收率约为89.1%左右，与相关文献报道结果基本一致。

结论经试验研究分析结果证实，邻苯二甲醛衍生荧光法能够对青霉素的检测要求得以满足，值得在今后的实验研究中对其予以推广使用。

【关键词】青霉素；邻苯二甲醛衍生荧光法；水解；荧光分光光度计对含高浓度苄青霉素残留的牛奶予以长期饮用能够对人们的健康问题产生十分严重的影响，因此对一种可对其进行灵敏检测的方法予以有效的合理的建立具有很大的必要性。

在酸性条件下苄青霉素的水解产物之一为青霉胺，能够同邻苯二甲醛发生衍生反应后生成具有较强荧光的1-硫代2-烷基异吲哚衍生物，以此为依据对采用荧光分光光度法对苄青霉素进行测定的新方法予以了有效的建立［1］。

在本次研究中出于对采用邻苯二甲醛衍生荧光法对青霉素测定的效果以及应用价值进行分析与探讨，从而为今后的实验研究提供具有一定价值的参考依据的目的，我们以邻苯二甲醛衍生荧光法对牛奶中苄青霉素残留进行测定为例进行了实验研究。

以下为本次试验的结果报告。

1 资料与方法1.1 仪器与试剂本次研究所用的分析仪器为fp-750型荧光分光光度计，还用到了phs-4型酸度计以及tg-16型离心机。

所用的试剂主要有：邻苯二甲醛试剂、β一巯基乙醇、苄青霉素等试剂，还有甲酸、柠檬酸、乙酸钠、甲醇、硼酸、h3po4、乙腈、na2s03以及h20均为分析纯试剂，所用到的水为去离子水。

1.2 方法1.2.1衍生反应去适量的苄青霉素标准工作液放置在小烧杯中。

邻苯二甲醛试剂简介：胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇，是一种环戊烷多氢菲的衍生物，分子式C 27H 46O，分子量为3860.65。

胆固醇广泛存在于动物体内，其中脑、神经组织最丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。

Leagene 邻苯二甲醛试剂属于总胆固醇检测(邻苯二甲醛比色法)的核心成分之一，检测原理是胆固醇及其脂，在强酸存在下与邻苯二甲醛反应，产生紫红色化合物，该化合物在550nm 波长处有最大吸收峰，分光光度计在550nm 处进行比色测定，胆固醇含量在4mg/ml 之内与吸光度呈良好线性关系。

产品：操作步骤(仅供参考)：1、样本处理：①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。

②细胞样本：a、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，1000g 离心，弃上清，留取沉淀。

b、用PBS 或生理盐水清洗1~2次，1000g 离心，弃上清，留取沉淀。

c、加入200~300μl 的PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔30s，重复3~5次。

亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。

亦可用1~2%Triton X-100冰浴，制备好的裂解液不可离心，待用。

③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水=1：4的比例，加入生理盐水，冰浴条件下手动或机械匀浆。

2500~3000g 离心，取上清待用。

2、配制胆固醇标准工作液。

3、配制邻苯二甲醛工作液：取1瓶(10mg)邻苯二甲醛粉剂的准确加入邻苯二甲醛稀释液10ml，充分混匀，即为邻苯二甲醛工作液。

4℃避光保存，2周有效。

4、配制强酸工作液：取适量的TC assay buffer 和浓硫酸等量混合，即为强酸工作液。

注意：本试剂盒不提供浓硫酸，需用户自备。

二者混合时，一定小心操作，以免误伤自己。

配制好的强酸工作液工作液中的硫酸含量应准确，否则有可能影响显色效果。

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法检测珍珠粉中的氨基酸含量【摘要】目的测定珍珠粉中的氨基酸含量。

方法邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生反相高效液相色谱法，采用荧光检测，梯度洗脱。

结果该法在28 min之内分离出15种氨基酸。

结论该法样品用量少、灵敏度高、线性范围宽、重现性好，适于分离大量样品。

【关键词】高效液相色谱；柱前衍生法；氨基酸；珍珠粉Determination of the Contents of Amino Acids in Pearl Powder by RP-HPLC after Pre��column Derivation with O��Phthaldialdehyde (OPA)Abstract：ObjectiveIn this paper， we determined amino acids in pearl powder. Methods A manual pre-column derivation procedure has been developed by reversed-phase HPLC with O-phthalaldehyde and fluorescence detector. Results More than 15 amino acids were separated within 28 min. Conclusion The method is sensitive， precise and shows good repeatability.Key words：High��performance liquid chromatography；Pre��column derivation； Amino acids； Pearl powder随着生命科学和生物工程的发展，氨基酸作为组成生物大分子的基本单元，其分析方法受到重视。

20世纪70年代以后，反相高效液相色谱技术在氨基酸分析中得到广泛应用，使分离时间缩短。

邻苯二甲醛测定氨基酸原理邻苯二甲醛(OPA)是一种常用的氨基酸分析试剂，它能够与氨基酸反应生成荧光产物，通过测定荧光产物的荧光强度可以定量测定氨基酸的含量。

下面将详细介绍邻苯二甲醛测定氨基酸的原理。

1.反应机理邻苯二甲醛与氨基酸的反应机理主要包括两个步骤：第一步是邻苯二甲醛与氨基酸的活性基团发生亲核加成反应，生成中间产物；第二步是中间产物发生水解反应，生成荧光产物。

具体反应过程如下:(1)亲核加成反应：邻苯二甲醛的醛基与氨基酸的氨基发生亲核加成反应，生成中间产物。

这一步需要酸催化剂的存在，如盐酸HC1等。

(2)水解反应：中间产物在酸性条件下发生水解反应，生成荧光产物。

这一步也需要酸催化剂的存在。

(3)荧光产物的生成：荧光产物经过进一步反应，生成具有荧光的化合物。

该化合物的荧光强度与氨基酸的含量成正比，从而可以定量测定氨基酸的含量。

2.邻苯二甲醛与氨基酸的反应条件及产物性质(1)反应条件：邻苯二甲醛与氨基酸的反应需要在酸性条件下进行，一般使用盐酸HC1等作为酸催化剂。

反应温度和反应时间也会影响反应结果，通常在室温下进行反应，反应时间约为10分钟至2小时。

(2)产物性质：生成的荧光产物具有较高的荧光强度和稳定性,可以用于定量测定氨基酸的含量。

荧光产物的波长范围在340nm至40Onn1之间，具有较高的量子产率和寿命。

3.测定方法及注意事项(1)样品准备：将待测氨基酸样品用适量的缓冲液稀释，加入适量的邻苯二甲醛试剂，充分混合均匀。

然后将样品在室温下反应一定时间，生成荧光产物。

(2)激发波长和发射波长的选择：选择合适的激发波长和发射波长是测定荧光产物的关键步骤。

通常选择的激发波长范围为340nm至360nm,发射波长范围为400nm至450nm o通过调整激发波长和发射波长可以获得最佳的荧光信号。

(3)荧光强度的测量：使用荧光光谱仪或荧光光度计测量荧光产物的荧光强度。

在测量时需要注意仪器的校准和标准化，以保证测量结果的准确性。