残留溶剂方法学验证方案

阿莫西林残留溶剂分析方法验证方案文件编号： VP-01-06-00-041方案起草方案审核方案批准生效日期：年月日1、概述在阿莫西林制备工艺中，使用了甲醇与丙酮两种对人体具有危害的二类溶剂，我公司为了确保阿莫西林原料中甲醇与丙酮的残留在国家要求范围内，开发了阿莫西林胶囊中甲醇与丙酮残留的检测方法，按照《中国药典》2015年版的要求对此检测方法进行方法学验证。

2、验证目的证明本方法能满足阿莫西林原料中甲醇与丙酮的残留溶剂测定，确保阿莫西林原料中甲醇与丙酮的残留溶剂检测方法准确、重现并耐用，检测结果数据真实可靠。

3、验证范围本验证方案适用于阿莫西林中甲醇与丙酮的残留溶剂检验方法验证。

4、确认小组成员及职责5、验证前的风险评估5.1验证小组人员按照《质量风险管理规程》，对分析方法进行了风险评估，确定了需进行方法确认的项目。

5.1.1严重性（S）：危害可能产生后果的程度。

严重程度分为五个等级。

5.1.2可能性（P）：影响检测结果的事件发生的可能性频率或概率，建立以下五个等级：5.1.3可检测性（D）：检测到异常情况存在的能力的程度，定义如下：5.2风险优先数量等级判定（RPN）5.2.1风险等级判定标准的确定RPN是事件发生的严重程度、可能性和可探测性三者乘积，用来衡量可能的仪器缺陷，以便采取可能的预防措施。

RPN = Severity(严重程度)×Possibility(发生的可能性)×Detection(可探测性)5.2.2风险评价和处理注：当RPN≤8，但严重性S为5时，仍需按中等以上风险进行后续控制。

5.3风险分析6、验证前的准备6.1人员培训在本方案实施前，已对方案实施过程中涉及人员进行培训，以保证方案顺利实施，做好培训记录，培训记录见表1。

表1 训确认表7、验证内容7.1验证项目及可接受标准7.2仪器配置检查（见表2）表2仪器配置表7.3验证所用的试剂及样品(见表3)表3验证所用试剂及样品7.3实验条件：检测器：FID（氢火焰离子化检测器）色谱柱：WEL-624 30m×0.32mm×0.25um升温程序：50℃，维持6min，60℃/min的速率升温至240℃，维持3分钟进样口温度：200℃检测器温度：260℃载气：氮气流速：2.98 ml/min分流比1:1 进样方式：顶空进样，顶空瓶平衡温度80℃，平衡时间30min7.4方法学验证7.4.1专属性试验7.4.1.1目的：确定所需测定的目标溶剂可以很好的分离，并且不会受到来自溶媒及可能出现的杂质的干扰。

残留溶剂方法学验证方案残留溶剂是指在其中一种溶剂处理过程中，溶剂不能完全挥发，残留在处理物中的化合物。

残留溶剂的测试和分析对于保证产品质量和安全性非常重要。

下面是一个关于残留溶剂方法学验证方案的简要说明，包含实验步骤、仪器设备、数据处理和结果评估等。

1.实验目的：验证残留溶剂的测试方法是否准确可靠，适用于特定产品或材料的检测。

2.实验步骤：2.1样品准备：选取代表性的产品样品或材料样品，并按照标准或法规的要求制备样品。

2.2定量添加溶剂：根据实际应用情况，向样品中添加已知浓度的溶剂，以模拟实际环境中的残留情况。

2.3提取和浓缩：使用适当的提取方法（如固相萃取、溶剂萃取等）将残留溶剂从样品中提取出来，并将提取液浓缩。

2.4仪器分析：使用适当的分析仪器（如气相色谱-质谱联用仪、高效液相色谱仪等），对浓缩后的提取液进行定量分析。

3.仪器设备：3.1分析仪器：根据需要选择适当的分析仪器，如气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）、高效液相色谱仪（HPLC）、液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）等。

3.2样品制备设备：如研磨仪、超声波清洗器、离心机等，用于样品制备和处理。

4.数据处理：4.1标准曲线绘制：根据已知浓度的溶剂标准品，利用分析仪器进行测定，得到残留溶剂的峰面积与浓度之间的关系，绘制标准曲线。

4.2样品测定：将提取液注入分析仪器，进行测定。

根据标准曲线，计算样品中残留溶剂的浓度。

5.结果评估：5.1方法验证：通过实验结果，验证残留溶剂的测试方法是否能准确测定残留溶剂的浓度，并评估方法的重复性和精密度。

5.2检出限和定量限：根据实验结果，计算出测定方法的检出限和定量限，评估方法的敏感度和适用范围。

5.3结果分析：对于不同样品的测定结果，进行统计分析和比较，评估残留溶剂的含量是否符合标准要求。

5.4结论：根据实验结果，得出对于残留溶剂测试方法的验证结论，并提出改进建议。

以上为残留溶剂方法学验证方案的简要说明，具体实验细节和方法参数需要根据实际情况进行调整。

化学药物有机溶剂残留量研究技术指导原则指导原则编号：化学药物有机溶剂残留量研究技术指导原则（第二稿）二OO四年三月一日目录概述一、有机残留溶剂的确定（一）、通则（二）、确定进行残留量研究的有机溶剂时需要考虑的问题1、原料药制备工艺2、制剂及其临床应用特点（三）、残留溶剂分类及研究原则1、第一类溶剂2、第二类溶剂3、第三类溶剂4、第四类溶剂二．研究方法的建立及方法学验证（一）、研究方法的建立1．GC法2.其他检测方法8（二）方法学验证1．专属性2. 检测限3. 定量限4. 线性5. 准确度6. 耐用性三、研究结果的分析及质量标准的制定（一）、有机溶剂残留量表示方法1、允许日接触量2、浓度限制3．两种表示方法的比较（二）、制定质量标准的一般原则及阶段性要求1、第一类溶剂2、第二类溶剂3、第三类溶剂四．需要关注的几个问题（一）、附录中无限度规定和未收载的有机溶（二）、未知有机挥发物（三）、多种有机溶剂综合影响（四）、中间体的有机溶剂残留量（五）、制剂工艺对制剂有机溶剂残留的影响（六）、辅料有机溶剂残留的研究及对制剂的影响[附录][参考文献][起草说明][著者][概述]药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用或产生的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。

根据国际化学品安全性纲要、美国环境保护机构、世界卫生组织等一些国际组织的研究结果，很多有机溶剂对环境、人体有一定的危害，因此，为保障药物的用药安全，控制产品质量，需要进行有机溶剂残留量的研究和控制。

本指导原则是在参考人用药物注册技术要求国际协调会（International Conference on Harmonization of T echnical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use，ICH）的有机溶剂残留量研究指导原则,美国药典（the United States Pharmacopoeia，USP）25版、英国药典(British Pharmacopoeia, BP)2002年版、欧洲药典(European Pharmacopoeia，EP)2003年版、中国药典(Chinese Pharmacopoeia, CP)2000年版相关内容的基础上，以药物研究开发本身的规律为出发点，同时结合我国药物研发的特点，通过分析、研究有机溶剂残留问题与药物的安全性、有效性及质量可控性之间的内在关系，总结形成的对有机溶剂残留问题的一般认识，希望可以帮助药物研发者科学合理的进行有机溶剂残留方面的研究，也为药物评价者提供一些指导。

溶剂残留方法学验证溶剂残留方法学验证是指在制药、化妆品、食品等工业生产中，对产品中残留溶剂进行检测的方法研究。

溶剂残留是指在产品制造过程中使用的溶剂没有完全蒸发或去除，残留在最终产品中的现象。

残留溶剂可能对人体健康造成危害，因此对溶剂残留进行准确的分析和检测是非常重要的。

1.溶剂残留的分析方法选择：根据待检测溶剂的物理性质、化学性质和毒性，选择合适的检测方法。

常用的方法包括气相色谱（GC）、液相色谱（LC）、质谱（MS）等。

此外，还需要选择合适的色谱柱、检测条件等。

2.样品的处理方法：对待检测样品进行适当处理，以提高分析方法的准确性和灵敏度。

样品处理方法包括提取、浓缩、净化等步骤。

3.方法的验证：通过对已知浓度的溶剂残留样品进行多次重复测定，验证方法的精密度、准确度、稳定性等指标。

根据不同的溶剂残留标准，对溶剂残留方法进行合格性验证。

4.溶剂残留限度的确定：根据国家或行业标准，确定溶剂残留的限度。

通过对溶剂残留样品进行测定，确定样品中溶剂残留的含量，并与溶剂残留限度进行比较，判断产品是否合格。

5.方法的应用：将验证合格的溶剂残留方法用于实际生产中，对批量产品进行溶剂残留检测。

定期对生产过程中的样品进行检测，确保产品的溶剂残留在允许范围内。

溶剂残留方法学验证的重要性在于保证产品的质量和安全性。

溶剂残留可能会对人体健康造成危害，比如致癌、变异等。

通过验证合格的溶剂残留方法，可以准确、快速地检测产品中的残留溶剂，确保产品符合国家和行业的标准要求。

同时，溶剂残留方法学验证也有助于改进产品的生产工艺。

通过对溶剂残留的检测，可以了解到溶剂在生产过程中的蒸发和去除情况，从而对生产工艺进行优化，减少残留溶剂的产生，提高产品的质量和竞争力。

综上所述，溶剂残留方法学验证是一项重要的质量控制技术，对各行业的工业生产都具有非常重要的意义。

通过合适的分析方法和验证步骤，可以准确地检测溶剂残留，确保产品的安全性和合规性。

一、目的：制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。

二、范围：本标准适用于样品残留溶剂的测定。

三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。

四、内容：简述：药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。

药品中常见的残留溶剂及限度见附表1，除另有规定外，第一、第二、第三类溶剂的残留限度应符合表1中的规定；对其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制定相应的限度，使其符合产品规范、药品生产质量管理规范（GMP）或其他基本的质量要求。

本法照气相色谱法（见EKSOP-QC7039气相色谱检验操作规程）测定。

1、色谱柱：1.1毛细管柱：除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间可以互换使用。

1.1.1非极性色谱柱：固定液为100%的二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。

1.1.2极性色谱柱：固定液为聚乙二醇（PEG-20M）的毛细管柱。

1.1.3中性色谱柱：固定液为（35%）二苯基-（ 65%）甲基聚硅氧烷、（50%）二苯基-（50%）二甲基聚硅氧烷、（35%）二苯基-（ 65%）二甲基聚硅氧烷、（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷、（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷的毛细管柱等。

1.1.4弱极性色谱：固定液为（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷、（5%）二苯基-（95%）二甲基硅氧烷的毛细管柱等。

1.2填充柱：以直径为0.18～0.25mm 的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适宜的填料作为固定相。

2、系统适用性试验：2.1用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数一般不低于5000；填充柱的理论板数一般不低于1000。

2.2色谱图中，待测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

2.3以内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差（RSD）不大于5％；若以外标法测定,所得待测物峰面积的RSD应不大于10％。

验证编号*****残留溶剂分析方法验证方案验证方案审批变更记载目录1. 目的 (5)2. 参考文献 (5)3. 验证的内容与预期标准 (5)4. 需验证的残留溶剂分析方法 (6)5.验证所需要的仪器、试剂及样品信息 (7)6. 残留溶剂验证方案 (9)6.1. 方法摸索与建立背景 (9)6.2. 系统适用性试验 (9)6.3. 专属性 (9)6.3.1. 空白溶剂干扰试验 (9)6.3.2. 残留溶剂的定位和分离度试验 (9)6.4. 检测限、定量限 (9)6.5. 线性和范围 (10)6.6. 溶液的稳定性(如有不稳定的残留溶剂存在，则需考察) (10)6.7. 精密度 (11)6.7.1. 进样精密度 (11)6.7.2. 重复性 (11)6.7.3. 中间精密度 (11)6.8. 准确度（加样回收率） (11)6.9. 耐用性 (12)几点说明：残留溶剂的测定一般采用气相色谱法，推荐使用毛细管色谱柱-顶空进样系统，也可以使用普通填充柱，溶液直接进样方法。

对不宜采用气相色谱法测定的含氮碱性化合物，如N-甲基吡咯烷酮等可采用其它方法，如离子色谱法等。

测定残留溶剂应从以下几个方面考虑：确定被测的有机溶剂、选择合适的色谱柱、制备供试品溶液和对照品溶液、选择合适的进样方法和满足检测灵敏度要求的检测器。

本验证方案以气相色谱法为例进行描述。

《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》及《中国药典》2015版四部“0861残留溶剂测定法”中未明确规定残留量检查是属于定量检查还是限度检查的范畴。

考虑到药物合成情况比较复杂，根据所使用的有机溶剂种类、数量等的不同，残留溶剂研究需要进行的程度、目标也可能不同，对方法学的要求也可能随之不同。

当检测结果明显低于规定限度时, 通常按限度检查要求，无需得出准确含量；当检测结果明显高于规定限度（尤其当检测结果为限度边缘时），或需残留溶剂量进行含量纯度折算时，需按定量检查要求进行方法学研究。

467有机挥发性杂质残留溶剂限度在药典中，药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产过程中，以及在制剂制备过程中使用过或产生的有机挥发物。

残留溶剂在实际的生产工艺中未能完全去除。

在原料药或辅料合成过程中选择适当的溶剂可以提高产量，或用于测定物质特性，如结晶形态、纯度、可溶性等。

所以，溶剂有时候是合成过程中的关键因素。

本章讨论的溶剂并非辅料，也不是溶剂化物。

但是，药品中的溶剂必须要评价并证明符合要求。

由于残留溶剂没有任何医疗效果，因此应尽可能地去除，使达到原料和成品的规定标准，生产工艺规定以及其它的质量要求。

药品中的残留溶剂的含量不得高于规定的安全范围。

已知会产生严重毒性的溶剂（表1，第一类）在药品原料、辅料和成品的生产中必须避免使用，除非它们严格符合毒性安全评估。

毒性稍低的溶剂（表2，第二类）必须限制含量，从而保护病患免除可能的副作用。

理论上，毒性最低的溶剂（表3，第三类）在实际需要的时候可以使用。

本章讨论的溶剂在附录1中已全部列出。

但这些表格和附录并不全面。

当有关调整部门正式批准同意使用其它溶剂时，这些溶剂可能就要添入表格和目录。

如果已知药品生产或净化过程中存在残留溶剂，那么原料、辅料和成品中必须检测残留溶剂。

但仅需检测在药品生产或净化过程中使用或产生的残留溶剂。

生产厂家可能会选择检测药品成品，但药品各成分的残留溶剂限度都可能需要逐步计算。

若计算的结果低于或在本章规定的范围内，那药品成品就没有必要检测残留溶剂。

但是若计算的结果高于规定范围，那成品就必须检测残留溶剂以确定处方在配制过程是否将有关的溶剂范围降低到可接受的量。

药品生产过程中如果使用了残留溶剂，那成品也必须检测。

见附录2有关残留溶剂的附加资料。

残留溶剂按毒性评估的分类国际化学安全会用“每日容许摄取量”（TDI）来衡量毒性化学药品的接触极限，而世界卫生组织（WHO）与其它国家、国际卫生机构和研究所则使用“每日允许摄取量”（ADI）。

在药品领域中，为了避免同一物质有不同的ADI S，将“每日安全接触量”（PDE）统一规定为残留溶剂的允许摄取量。

残留溶剂检测的方法学验证残留溶剂检测是一种用于分析样品中存在的有机溶剂残留的方法。

这种方法可以用于不同行业，如食品、制药、化妆品、包装和印刷等，以确保产品的质量和安全性。

在进行残留溶剂检测之前，需要进行一系列方法学验证，以确保该方法的可靠性和准确性。

方法学验证通常包括以下几个方面：1.准确性验证：准确性验证是评估残留溶剂检测方法准确性的关键步骤。

它可以通过制备含有已知浓度残留溶剂的标准样品来完成。

然后，使用所验证的方法进行分析，并与标准样品的浓度进行比较来评估该方法的准确性。

2.精密度验证：精密度验证是评估残留溶剂检测方法的重复性和可再现性的指标。

它可以通过重复制备和分析相同标准样品来完成。

然后，计算分析结果的标准偏差以评估该方法的精密度。

3.线性验证：线性验证是评估残留溶剂检测方法线性范围的能力。

它可以通过制备一系列含有不同浓度的标准样品，并使用所验证的方法进行分析来完成。

然后，绘制标准样品浓度与分析结果之间的线性关系来评估该方法的线性范围。

4.检测限和定量限验证：检测限和定量限是评估残留溶剂检测方法灵敏度的重要参数。

检测限是指能够检测到的最低残留溶剂浓度，定量限是指能够准确测量的最低残留溶剂浓度。

这些参数可以通过制备一系列浓度逐渐减小的标准样品，并使用所验证的方法进行分析来确定。

5.特异性验证：特异性验证是评估残留溶剂检测方法在存在其他物质的情况下的准确性和选择性的指标。

这可以通过制备包含其他可能干扰分析的物质的样品，并使用所验证的方法进行分析来完成。

然后，评估分析结果是否仅与溶剂残留相关，而不受其他物质的干扰。

6.稳定性验证：稳定性验证是评估残留溶剂检测方法稳定性的指标。

这可以通过在一定时间内存储标准样品，并使用所验证的方法进行周期性分析来完成。

然后，评估分析结果的稳定性，并确定方法的稳定时间。

在进行方法学验证之后，还需要进行验证结果的统计分析和数据处理。

这包括计算各个指标的平均值、标准偏差和置信区间，并进行结果的可靠性评估。

残留溶剂及其气相分析方法注意事项残留溶剂是指在化学合成过程中，未完全挥发或与产品分离不彻底的溶剂。

溶剂的残留会对产品的质量和安全性产生重要影响，因此需要进行分析和控制。

下面将详细介绍残留溶剂以及气相分析方法的注意事项。

1.危害：残留溶剂可能对人体健康造成危害，如引起过敏反应、致癌、毒性等。

此外，溶剂的残留也可能导致产品品质下降、毒性增加、变色、异味等问题，甚至影响产品的市场竞争力。

二、气相分析方法：1.气相色谱法（GC）：气相色谱法是分析残留溶剂的常用方法。

根据不同残留溶剂的挥发性和化学特性，可以选择不同的检测器和分析条件。

在进行气相色谱分析时，需要注意以下几点：（1）样品制备：样品必须经过适当的前处理，如溶解、稀释、净化等。

此外，对于不容易挥发的溶剂残留，还需要进行萃取、浓缩等步骤，以提高检测灵敏度。

（2）GC条件选择：根据样品的特性选择适当的色谱柱、流动相、进样方式、温度程序等。

（3）检测器选择：常用的检测器有火焰离子化检测器（FID）、质谱检测器（MS）、傅里叶变换红外检测器（FTIR）、氮磷检测器（NPD）等。

根据样品的特性选择最合适的检测器。

（4）定量方法：根据样品的残留量确定定量的方法，如外标法、内标法、标准品法等。

2.其他气相分析方法：除了气相色谱法，还有其他一些气相分析方法可以用于残留溶剂的分析，如气相色谱质谱联用技术（GC-MS）、气相色谱红外联用技术（GC-FTIR）等。

这些方法可以提高检测的特异性和准确性。

三、注意事项：1.样品的采集和储存：样品的采集和储存要注意防止污染和挥发。

采集前应进行充分的准备工作，如清洗工具、容器、抽取装置等。

样品采集后应尽快封存，避免挥发和外界环境的干扰。

2.样品的前处理：样品的前处理过程中要注意避免氧化、光照、加热等导致溶剂挥发的条件，确保残留溶剂的稳定性。

3.样品的分析方法验证：在进行残留溶剂的分析前，应对分析方法进行验证，包括灵敏度、准确度、精密度、重复性等指标的确定。

ＧＣ法测定羟苯甲酯、乙酯、丙酯、丁酯中的残留溶剂谢莹莹，刘雁鸣 ，龙海燕，李颖［湖南省药品检验研究院（湖南药用辅料检验检测中心）；湖南省药品质量评价工程技术研究中心，长沙４１０００１］摘要　目的：建立气相色谱法（ＧＣ）测定羟苯甲、乙、丙、丁酯中的甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇和叔丁醇８种有机溶剂残留量。

方法：采用ＤＢ ６２４毛细管柱（０ ３２ｍｍ×３０ｍ，１ ８μｍ）；ＦＩＤ检测器；进样口温度为２００℃，检测器温度为２５０℃；载气为高纯氮气，载气流速为２ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温为升温程序，起始温度４５℃，保持２ｍｉｎ，以５℃·ｍｉｎ－１升温至６５℃保持５ｍｉｎ，再以４０℃·ｍｉｎ－１升温至２００℃保持３ｍｉｎ。

结果：８种残留溶剂在各自浓度范围内线性关系良好（ｒ均＞０ ９９９）；羟苯甲、乙、丙、丁酯的平均回收率在１０２ １％～１０６ ０％。

结论：本法操作简单、准确度高、重现性好，可用于羟苯甲酯、乙酯、丙酯、丁酯中８种有机溶剂残留量的测定。

关键词：残留溶剂；ＧＣ法；羟苯甲酯；羟苯乙酯；羟苯丙酯；羟苯丁酯中图分类号：Ｒ９２１ ２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９－３６５６（２０２０）－３－０２４９－５ｄｏｉ：１０ １９７７８／ｊ ｃｈｐ ２０２０ ０３ ０１３Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｒｅｓｉｄｕａｌｓｏｌｖｅｎｔｓｉｎｍｅｔｈｙｐａｒａｂｅｎ，ｅｔｈｙｌｐａｒａｂｅｎ，ｐｒｏｐｙｌｐａｒａｂｅｎａｎｄｂｕｔｈｙｌｐａｒａｂｅｎｂｙＧＣＸＩＥＹｉｎｇｙｉｎｇ，ＬＩＵＹａｎｍｉｎｇ ，ＬＯＮＧＨａｉｙａｎ，ＬＩＹｉｎｇ［ＨｕｎａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ（ＨｕｎａｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｘｃｉｐｉｅｎｔｓＴｅｓｔｉｎｇａｎｄＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒ）ＨｕｎａｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｆｏｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＱｕａｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００１，Ｃｈｉｎａ］Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａＧＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｉｇｈｔｒｅｓｉｄｕａｌｓｏｌｖｅｎｔｓｏｆｍｅｔｈａｎｏｌ，ｅｔｈａｎｏｌ，ｎ ｐｒｏｐａｎｏｌ，ｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌ，ｎ ｂｕｔａｎｏｌ，ｉｓｏｂｕｔａｎｏｌ，ｓｅｃ ｂｕｔａｎｏｌａｎｄｔｅｒｔ ｂｕｔａｎｏｌｉｎｍｅｔｈｙｐａｒａｂｅｎ，ｅｔｈｙｌｐａｒａｂｅｎ，ｐｒｏｐｙｌｐａｒａｂｅｎａｎｄｂｕｔｈｙｌｐａｒａｂｅｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎＤＢ ６２４ｃａｐｉｌｌａｒｙｃｏｌｕｍｎ（０ ３２ｍｍ×３０ｍ，１ ８μｍ）ｕｎｄｅｒｔｈｅｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ＦＩＤｗａｓｕｓｅｄ，ｔｈｅｉｎｌｅｔｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ２００℃ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｏｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ２５０℃ Ｔｈｅｈｉｇｈｐｕｒｅｎｉｔｒｏｇｅｎｗａｓａｓｔｈｅｃａｒ ｒｉｅｒｇａｓａｎｄｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆｃａｒｒｉｅｒｇａｓｗａｓ２ｍＬ·ｍｉｎ－１ Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｅｗａｓｓｅｔａｓ：ｒｅ ｍａｉｎｔｈｅｓｔａｒｔｉｎｇｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆ４５℃ｆｏｒ２ｍｉｎ，ｉｎｃｒｅａｓｅｔｏ６５℃ａｔｔｈｅｒａｔｅｏｆ５℃·ｍｉｎ－１ａｎｄｒｅｍａｉｎ６５℃ｆｏｒ５ｍｉｎ，ｔｈｅｎｉｎｃｒｅａｓｅｔｏ２００℃ａｔｔｈｅｒａｔｅｏｆ４０℃·ｍｉｎ－１ａｎｄｒｅｍａｉｎ２００℃ｆｏｒ３ｍｉｎ Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｅｉｇｈｔｒｅｓｉｄｕａｌｓｏｌｖｅｎｔｓｈａｄａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｉｎｔｈｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅｓ（ｒ＞０ ９９９） Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓｗｅｒｅ１０２ １％－１０６ ０％ Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ Ｉｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ８ｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｖｅｎｔｓｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎｍｅｔｈｙｐａｒａｂｅｎ，ｅｔｈｙｌ　第一作者简介：谢莹莹，主管药师；研究方向：药用辅料检验检测。

溶剂残留方法学验证溶剂残留检查多采用气相色谱法。

一般认为残留溶剂测定属限度检查,按相关指导原则只需提供专属性、检测限、定量限及进样精密度等方法学研究资料,故未进行线性、准确度和耐用性方面研究.残留量检查究竟是属于定量还是限度检查的范畴，《化学药物残留溶剂研究的技术指导原则》中未明确规定。

考虑到药物合成情况比较复杂，根据所使用的有机溶剂种类、数量等的不同,残留溶剂研究需要进行的程度、目标也可能不同，对方法学的要求也可能随之不同.当检测结果明显低于规定限度时，通常按限度检查要求,无需得出准确含量;当检测结果明显高于规定限度（尤其当检测结果为限度边缘时）,或需残留溶剂量进行含量纯度折算时，需按定量检查要求进行方法学研究。

一、系统适用性试验取对照品溶液，进样，记录色谱图.柱效：以被测物的色谱峰计，填充柱法的理论板数应大于1000,毛细管色谱柱的理论板数应大于5000。

分离度：色谱图中被测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

重复性:以内标法测定时,对照品溶液连续进样5次，所得被测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差（RSD)应不大于5％；以外标法测定时，所得被测物峰面积的相对标准偏差（RSD)应不大于10％。

二、专属性1、对各种残留溶剂定位和进行混合溶剂的分离度试验，并附代表性图谱. 取各种残留溶剂对照品溶液，分别单独进样,记录色谱图。

取混合溶液,进样，记录色谱图。

2、排除供试品中的未知杂质或其挥发性热降解产物对残留溶剂的测定产生的干扰。

①如果未知杂质或其挥发性热降解产物与被测物的保留值相同（共出峰)，通常采用在另一种极性相反的色谱柱系统中对相同样品进行测定,比较不同色谱系统的测定结果的方法。

如二者结果一致,则可以排除测定中有共出峰的干扰；如二者结果不一致，则表明测定中有共出峰的干扰.②热降解产物与被测物的结构相同（如甲氧基热裂解产生甲醇）,通常要通过测定已知不含该溶剂的对照样品来加以判断.三、检测限和定量限检测限为信噪比3:1时相应浓度或注入仪器的量。

原料药中残留溶剂限度的确定方法原料药中残留溶剂限度的确定方法前言药品的三个性质为安全、有效和质量可控。

杂质的研究应从对药品安全性和质量可控性两个方面的影响来考虑。

化学试剂作为广义概念上的杂质的一部分，也需要评估其残留对药品安全性和质量可控性的影响，其残留限度的制定也是如此。

如某化学试剂有基因警示结构，其限度应根据相应指导原则（《ICHM7》）制定。

如为无机盐，应根据无机盐的控制策略及相应指导原则制定，在API成品检测炽灼残渣，研究元素杂质（《ICHQ3D》）等。

某些有机试剂如残留溶剂中的四类溶剂的限度则应该先查找相应的安全性的数据，如动物毒理研究数据、职业环境暴露量研究数据等，然后根据安全性的数据计算相应的残留限度。

本文着重论述如何根据查到的安全性的数据计算化学试剂允许的残留限度。

通过PDE 计算限度ICHQ3C中收载了PDE的计算方法：PDE = NOEL x Mass Adjustment/[F1 x F2 x F3 x F4 x F5] 其中PDE为允许日暴露量，单位为mg/天；NOEL为该杂质的最大无作用的剂量，单位为mg/kg/天。

Mass Adjustment为体重调整系数，一般取为50kg。

F1….. F5为各种修正因子，其含义与应取的值请查阅ICHQ3C相应内容，不再细述。

通过以上公式得出PDE的值之后，然后除以药品的最大日剂量，即得出该化学试剂的限度。

从LD50 计算NOEL很多时候我们查找不到NOEL的数据，我们只能查到LD50（半数致死量）。

目前最权威的计算方法出自欧盟原料药委员会在其发布的《原料药工厂中清洁验证指南》，其中收载了由LD50计算NOEL的公式：NOEL=LD50×70/2000。

但这一公式却会误导PDE的计算，因为很多人会用这一公式计算出来的NOEL直接代入上文的公式计算PDE，却没有注意到《原料药工厂中清洁验证指南》一文中的NOEL 的单位是mg/天，而不是上文公式中的mg/kg/天。