细胞形态大小的观测——测微尺的使用
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实验一细胞形态结构的观察与显微测量一、实验目的:1.熟悉动物细胞、植物细胞的基本形态结构2.掌握临时装片的制作方法3.掌握显微测量的原理和方法4.掌握生物绘图的方法。
二、实验原理:细胞是生物体结构功能的基本单位,其形态与功能相适应。
不同类型的细胞具有不同的大小、形态和结构,以适应其功能。
通过制作临时装片,可以观察很多细胞的结构,并借助测微尺测量细胞直径,进而获得细胞的体积。
三、实验仪器、试剂及材料:仪器:光学显微镜(台/人),载玻片、盖玻片(4套/人)、测微尺剪刀(1把)、镊子(1把)、牙签(50根)、滴管(个/组)试剂:1%碘液、瑞特染液(如果观察血细胞,则需瑞特染液)材料:洋葱、红辣椒、紫色落葵(或紫罗兰)、血细胞悬液、口腔上皮细胞四、实验步骤:1.洋葱鳞茎表皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用剪刀在洋葱鳞茎叶内表面画一个1mm2的方框用镊子撕下表皮在碘液中铺平盖上盖玻片用吸水纸吸去多余碘液(也可帮助排除气泡)显微镜下观察(同法制红辣椒表皮细胞装片)2.人口腔黏膜上皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用牙签刮取上皮细胞在1%碘液中搅动分散细胞染色1分钟盖上盖玻片观察3.血细胞观察(见细胞生物学实验教程:第9页)在载玻片右端滴一滴血细胞稀释液用另一张载玻片以30~45度角(两玻片夹角)推移血液成均匀薄膜滴一滴瑞特染液染色3分钟自来水洗掉染液,晾干观察4.显微测量(1)原理:测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成,目镜测微尺位于目镜内,为玻璃圆片,上有一条带刻度的直线,精确度较镜台测微尺的低;镜台测微尺是一块载玻片,中央圆形区域内有一带刻度的直线,精确度较目镜测微尺高。
(2)测量:A、将镜台测微尺放入载物台上,转动目镜,使二者平行。
选择一处让二者重合,然后向右侧寻找再次重合处,记下二者的数值,并按照目镜测微尺和镜台测微尺的精度关系换算目镜测微尺每小格实际代表的刻度值。
B、将镜台测微尺取下,换上洋葱表皮细胞、口腔黏膜上皮细胞、血细胞涂片,用目镜测微尺测量出其长度和宽度。
微⽣物⼤⼩的测定及显微镜直接计数法微⽣物学实验报告姓名年级班级组别⼀组同组者科⽬微⽣物题⽬微⽣物⼤⼩和数量的测定仪器编号⼀、⽬的要求1.学习并掌握使⽤显微镜测微尺测定微⽣物⼤⼩的⽅法。
2.了解⾎球计数板的构造、明确其计数原理。
3.学习并掌握使⽤⾎球计数板测定微⽣物细胞或孢⼦数量的⽅法。
⼆、基本原理l.显微测微尺可⽤于测量微⽣物细胞或孢⼦的⼤⼩,包括镜台测微尺和⽬镜测微尺两个部件。
镜台测微尺全长1mm,等分为100格,每格0.01mm。
⽤于校正⽬镜测微尺没⼩哥的长度.⽬镜测微尺其中央刻有50等分或100等分的⼩格.测量前应预先⽤镜台测微尺来校正并计算出在某⼀放⼤镜下,⽬镜测微尺每⼩格所代表的实际长度,再以后作为测量微⽣物细胞的长度.⽬镜测微尺每格长度(µm)=(两重合线间镜台测微尺格数x10)/两重合线间⽬镜测微尺格数2.球菌⽤直径表⽰⼤⼩;杆菌⽤宽和长来表⽰µm图⼀:测微尺的校正3.显微直接计数法:将⼩量待测样品悬浮液置于计菌器上,于显微镜下直接计数的⼀种简便、快速、直观的⽅法。
显微计数法适⽤于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如酵母、细菌、霉菌孢⼦等。
菌体较⼤的酵母菌或霉菌孢⼦可采⽤⾎球计数板,⼀般细菌则采⽤彼得罗夫·霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板或Hawksley计数板。
三种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使⽤油镜观察。
⽽⾎球计数板较厚,不能使⽤油镜,计数板下部的细菌不易看清。
⾎球计数板是⼀块特制的厚型载玻⽚,载玻⽚上有4条槽⽽构成3个平台。
中间较宽的平台,被⼀短横槽分隔成两半,每个半边上⾯各有⼀个计数区。
计数区的刻度有两种:⼀种是计数区(⼤⽅格)分为16个中⽅格,⽽每个中⽅格⼜分成25个⼩⽅格;另⼀种是⼀个计数区分成25个中⽅格,⽽每个中⽅格⼜分成16个⼩⽅格。
计数区由400个⼩⽅格组成。
每个⼤⽅格边长为1mm,其⾯积为lmm2,盖上盖玻⽚后,盖载玻⽚间的⾼度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3。
显微镜测微尺的使用目镜测微尺是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺(即物镜尺)是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0.0lmm),是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上.由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
目镜测微尺的校正:把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
先用低倍镜观察,对准焦距,视野中看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
因为镜台测微尺的刻度每格长l0μm,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。
例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重叠,已知镜台测微尺每小格为l0μm,则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5=10μm用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。
由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度)进行,而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。
微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺(图-1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中得隔板上(此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺(图20-2)就是中央部分刻有精确等分线得载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0、0lmm),就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上,图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大,因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小,所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillussubtili s)染色标本片。
2。
器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1.目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下,将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察,对准焦距,视野中瞧清镜台测微尺得刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长l0μm,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm,则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μm/5=10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。
微生物细胞大小测定及显微镜直接计数一、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一,由于菌体微小,只能在显微镜下测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺(图示)是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上,此处正好与物镜放大的中间物像重迭,用于测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺(图示)是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片,一般将1mm等分为100格,每格长10µm即0.01mm,是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上,由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。
测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微镜直接计数法和稀释平板计数法。
直接计数法适用于各种单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,则难于直接测定。
菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼德罗夫·霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板。
两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。
而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部的细菌难于区分。
血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载坡片上有4条槽所构成的3个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区(图示),计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格,大方格用三线隔开,而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格,大方格之间用双线分开,而每个大方格又分成16个小方格。
测微尺的使用方法摘要:1.测微尺简介与特点2.测微尺的使用步骤3.注意事项与维护方法正文:测微尺是一种精密的测量工具,广泛应用于各种测量领域。
它具有测量精度高、操作简便等特点。
下面我们将详细介绍测微尺的使用方法及其注意事项。
一、测微尺简介与特点测微尺是一种具有高精度的测量工具,其最小刻度值为0.01mm。
它主要由尺身、刻度盘、测微螺纹和微调手轮等部分组成。
测微尺具有以下特点:1.测量范围广泛:测微尺可以测量长度、宽度、高度等各种尺寸。
2.精度高:测微尺的最小刻度值为0.01mm,满足各种精密测量需求。
3.操作简便:测微尺的结构设计使得测量过程更加轻松便捷。
二、测微尺的使用步骤1.准备工作:在使用测微尺之前,先将测微尺擦拭干净,确保其表面无尘埃及油污。
2.放置测微尺:将测微尺放置在需要测量的物体上,使其保持平稳。
3.读取数值:观察刻度盘上的数值,找到与测微尺上的刻度线对齐的刻度点。
4.微调:若需要更精确的测量结果,可以使用微调手轮进行微调。
5.记录数据:记录测量结果,注意单位的转换。
三、注意事项与维护方法1.使用过程中,避免测微尺受到撞击或摔落,以免影响测量精度。
2.测量过程中,不要用手指直接接触测微尺的刻度线,以免磨损。
3.测量完毕后,将测微尺擦拭干净,放入专用盒子里,以防尘埃及水分侵入。
4.定期检查测微尺的螺丝是否松动,如有松动,应及时拧紧。
5.长时间不使用测微尺时,可以在尺身上涂抹少量润滑油,以防止部件生锈。
总之,掌握测微尺的使用方法及其注意事项,能够让我们更加高效地进行精密测量工作。
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺与镜台测微尺的构造与使用原理,掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小就是微生物重要的形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺(图-1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺(图20-2)就是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0、0lmm),就是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上,图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2.器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1.目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
先用低倍镜观察,对准焦距,视野中瞧清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数与镜台测微尺的格数。
xx测微尺的使用目镜测微尺是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺(即物镜尺)是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格xxl0μm(即0.0lmm),是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上.由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
目镜测微尺的校正:把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
先用低倍镜观察,对准焦距,视野中看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
因为镜台测微尺的刻度每格长l0μm,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。
例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重叠,已知镜台测微尺每小格为l0μm,则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5=10μm用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。
由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度)进行,而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。
实验四微生物细胞大小的测定和显微镜直接计数一、实验目的1.学习接目测微计的校正方法,了解血球计数板的构造和计数原理2. 学习使用显微镜测微尺测定微生物细胞大小,掌握用血球计数板测定微生物细胞总数的方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物分类鉴定的重要依据之一。
微生物个体微小,必须借助于显微镜才能观察,要测量微生物细胞大小,也必须借助于特殊的测微计在显微镜下进行测量。
显微测微计由镜台测微计和目镜测微计两部分组成。
后者可直接用于测量细胞大小。
它是一块圆形玻片,其中央有精确等分到度,测量时将其放在接目镜中的隔板上。
由于目镜测微计所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后所成像的大小,刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变,所以,使用前须先用镜台测微计进行标定,求出某一放大率下,目镜测微计每一小格所代表的长度,然后用目镜测微计直接测被测对象的大小。
镜台测微计是一块中央有精确刻玻片,刻度的总长为lmm,等分为100小格,每小格长10um,专用于对目镜测微计进行标定的。
三、材料3.1 器械:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺,载玻片、盖玻片、血球计算板、擦镜纸、吸水纸、玻片架、肾形盘、洗瓶、接种环、酒精灯、火柴、滴管。
3.2 菌种:培养48h的啤酒酵母斜面菌体和菌悬液。
3.3 革兰氏染液四、实验步骤(一)微生物菌体大小的测定1.目镜测微尺的校正(1)更换目镜镜头:更换目镜测微尺镜头(标记为PF);或者取下目镜上部或下部的透镜,在光圈的位置上安上目镜测微尺,刻度朝下,再装上透镜,制成一个目镜测微尺的镜头。
(2)某一倍率下标定目镜刻度:将镜台测微尺置于载物台上,使刻度面朝上,先用低倍镜对准焦距、看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器使两尺重叠,并使二尺的左边的某一刻度相重合,向右寻找另外二尺相重合的刻度。
记录两重叠刻度间的目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。