HLA简介

HLA仿真体系简介：HLA/RTI入门

一直以来，信息应用系统、仿真应用系统都是由各单位自行组织设计建设，仿真应用间的重用和互操作性较低，极大影响了系统效益，标准化正是解决这类问题的典型方式。美国国防部的MSMP计划就是一个”为建模和仿真提供共同的技术框架”的计划，该框架有CMMS、HLA和一系列数据标准组成。HLA由此作为建模仿真的通用技术框架的一部分而出现在众多仿真应用中。

一、HLA思想

HLA，High Level Architecture，高层体系结构，是一个通用的建模仿真的技术框架，其主要关注仿真应用间的互操作性和重用性。HLA的组成类似于面向对象的思想，认为客观世界是由对象以及对象间的交互组成。HLA将 实现某种特定仿真目的的仿真系统抽象为联邦，将仿真系统中存在交互关系的仿真应用抽象为联邦成员（Federate），将系统仿真过程中的实体通过对象进行组织。一个联邦包含多个联邦成员，一个联邦成员包含多个对象。仿真执行的过程正是基于联邦成员间的交互过程。

HLA将仿真过程中的所需的交互信息通过统一的、规范的格式进行表述。仿真过程的执行，正是基于一致的信息表述，联邦成员间的相互交互而完成。联邦成员间的交互不是两两独立进行，而是通过公共的基础服务支持框架RTI（Run Time

Infrastructure）实现。仿真系统被抽象为联邦成员的组合和交互。RTI是HLA的核心部分之一，它为仿真执行提供底层的基础服务支撑。类似于局域网内的“HUB”，仿真过程中所有的信息交互必须通过RTI完成。

基于Hub式的架构风格，将仿真应用的实现与基础支撑服务分隔开，仿真人员只关注于特定垂直领域的仿真实现，而不必关系复杂的底层通信服务。同样，基于一致的信息表述和服务接口，使得联邦成员的表述以及成员间的信息交互变得行为更加一致。

二、HLA结构

美国国防部建模与仿真办公室DMSO发布的HLA官方文档，HLA主要包括规则、对象模型模板以及接口规范三个部分。

HLA-I、II 类基因分型检测标准操作程序

1 目的

规范 HLA-I、II 类基因分型检测的操作程序，以保证临床检测结果的准确性。

2 检测方法和原理

采用 PCR-SSP 方法。根据 HLA 核苷酸碱基序列的多态性和已知的 DNA 序列，设计一系列等位基因型特异性顺序引物。引物的 3’-端碱基根据多态性序列与其严格互补。因此，每一型别都具有特定的引物对相对应。通过特定的 PCR

反应体系扩增各等位基因的型别特异性 DNA 片段，产生相对应的特异性扩增产物条带。如果是纯合子，产生一条与特异引物相对应的拉增带；如果是杂合子则

产生两条与特异引物对应的扩增带。其特异性可精确到分辨出一个碱基的差异。扩增产物仅需借助常规的琼脂糖凝胶电泳，即可根据是否存在特异性产物的电泳带直接进行 HLA 基因分型。

3 性能参数

特异性为 100%，敏感性为 100%。

4 原始样品要求

全血。

5 容器和添加剂类型

EDTA-K2抗凝血 1～2 ml，不能立即测定的标本 4℃保存。

6 试剂和设备

6.1 试剂：采用德国 Biotest 有限公司生产 HLA-I、II 类基因分型试剂盒。

6.2 试剂保存与有效期

6.2.1 新购试剂保存于 2-8℃，勿冷冻，在有效期内使用。

6.2.2 若有剩余试剂，应立即放回冰箱，保存于 2-8℃。

6.3 质控：扩增产物中有内参照条带。

6.4 仪器：美国 PE2700 扩增仪、法国 VL 凝胶成像系统。

7 操作程序

7.1 DNA 提取

7.1.1 将 0.5ml 混匀全血加入 1ml 纯化树脂中，颠倒混匀 5~6 次，室温下放置 3 分钟，颠倒混匀一次，5000rpm 离心 3 秒，收集沉淀。

7.1.2 用 1ml GN 结合液将纯化树脂悬浮，颠倒混匀，5000rpm 离心 3 秒，收集沉淀。 7.1.3 用 0.5ml 漂洗液漂洗 2 次，颠倒混匀，5000rpm 离心 3 秒，收集沉淀。如果纯化树脂仍呈现黄色或褐色，重复漂洗一次。

讲课提纲

HLA基本知识

HLA基因

HLA抗原

HLA分型：血清学分型：特异性

基因分型：等位基因

HLA抗原的体内功能

HLA在血站系统的应用

HLA配型在组织器官移植方面的应用

HLA在强直性脊柱炎诊断方面的应用

HLA与疾病相关性：举例

HLA-B27与强直性脊柱炎相关

HLA与输血反应：成分血的应用

HLA与血小板输注无效

血小板输注无效的定义

血小板表面的抗原

血小板配血

多数血站已将HLA的研究作为血站科研的一个分支，随着时间的推移及各位同仁的不断努力，HLA研究将不断深入，人们必将弄清HLA的方方面面。

HLA理论与技术在血站的应用

 HLA基因组成

 HLA分子的功能

 骨髓库HLA基因分型

 组织器官移植配型：HLA在移植排斥中起作用

 HLA-B27检查早期诊断强直性脊柱炎 HLA与疾病相关

 去白细胞的血液成分输注预防输血GVHD HLA抗体：去白相关血液成分种类

 血小板配合性输注 针对血小板输注无效或预防

一 HLA基因

 人类的MHC称为HLA复合体，位于第6对染色体的短臂上，长度为4分摩（centimorgan，cM），约为4000kb。

 整个复合体上有近60个基因座，已正式命名的等位基因500多个。

 根据编码分子的特性不同，可将整个复合体的基因分成三类：Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类基因

 I类基因区 位于着丝点的远端，主要包括HLA-A、B、C三个位点；另外E、F、G、H、K和L位点。

 II类基因区 位于着丝点的近端，是结构最为复杂的一个区，主要由DR、DQ、DP三个亚区构成，每个亚区又有若干个位点。另外DO、DZ、DX三个亚区。

 III类基因区 含有编码补体成分C2、C4、B因子及TNF、热休克蛋白和21羟化酶的基因。

讲课提纲

HLA基本知识

HLA基因

HLA抗原

HLA分型：血清学分型：特异性

基因分型：等位基因

HLA抗原的体内功能

HLA在血站系统的应用

HLA配型在组织器官移植方面的应用

HLA在强直性脊柱炎诊断方面的应用

HLA与疾病相关性：举例

HLA-B27与强直性脊柱炎相关

HLA与输血反应：成分血的应用

HLA与血小板输注无效

血小板输注无效的定义

血小板表面的抗原

血小板配血

多数血站已将HLA的研究作为血站科研的一个分支，随着时间的推移及各位同仁的不断努力，HLA研究将不断深入，人们必将弄清HLA的方方面面。

HLA理论与技术在血站的应用

 HLA基因组成

 HLA分子的功能

 骨髓库HLA基因分型

 组织器官移植配型：HLA在移植排斥中起作用

 HLA-B27检查早期诊断强直性脊柱炎 HLA与疾病相关

 去白细胞的血液成分输注预防输血GVHD HLA抗体：去白相关血液成分种类

 血小板配合性输注 针对血小板输注无效或预防

一 HLA基因

 人类的MHC称为HLA复合体，位于第6对染色体的短臂上，长度为4分摩（centimorgan，cM），约为4000kb。

 整个复合体上有近60个基因座，已正式命名的等位基因500多个。

 根据编码分子的特性不同，可将整个复合体的基因分成三类：Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类基因

 I类基因区 位于着丝点的远端，主要包括HLA-A、B、C三个位点；另外E、F、G、H、K和L位点。

 II类基因区 位于着丝点的近端，是结构最为复杂的一个区，主要由DR、DQ、DP三个亚区构成，每个亚区又有若干个位点。另外DO、DZ、DX三个亚区。

 III类基因区 含有编码补体成分C2、C4、B因子及TNF、热休克蛋白和21羟化酶的基因。