新人教版2018-2019学年高二生物选修1专题2课题1 微生物的实验室培养
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高二生物选修1 训练案一、选择题:1.下列4种生物中,哪一种生物的细胞结构与其他3种生物的细胞有明显的区别:()A.酵母菌B.乳酸菌C.青霉菌D.蘑菇2.细菌培养基通常在121℃压力锅中灭菌。
如果只有在100℃的温度下将细菌培养基灭菌,以下哪一种生物仍会存活?()A.大肠杆菌B.一种青霉菌 C.枯草芽孢杆菌D.鼠伤寒沙门氏菌3.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌:()A.接种针、手、培养基B.高压锅、手、接种针C.培养基、手、接种针D.接种针、手、高压锅4、在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是:()A.杀死所有的病原微生物B.杀死所有的微生物C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生长5.获得纯净培养物的关键是:()A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B.接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养 D.防止外来杂菌的入侵6.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是:()A..对比观察培养基有没有被微生物利用B.对比分析培养基上是否生有杂菌C.没必要放入未接种的培养基D.为了下次接种时再使用7.下列叙述错误的是:()A.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B.培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性C.培养细菌时需将PH调至中性或微碱性D.培养厌氧微生物时则需要提B供无氧的条件8.关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是:()A.称量B.灭菌C.溶化D.倒平板9、下列有关碳源的叙述不正确的是:()A.碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物B.某些碳源可以作为微生物的主要能源物质C.蛋白质一定不能做碳源 D.不同种类的微生物的碳源可能不同10、消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。
消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。
人教版高二生物选修一《课题1微生物的实验室培养》说课稿一、引言大家好,我是XX,今天我将为大家带来一堂关于《微生物的实验室培养》的生物选修课。
本课是高二学生生物选修课中的第一课题,主要介绍微生物在实验室中的培养方法和技术。
通过本课,我们将深入了解微生物的培养过程和相关实验操作,培养学生的动手实践能力和科学思维。
二、教学目标知识目标•了解微生物的实验室培养的意义和目的;•掌握微生物的实验室培养的基本方法;•了解常见的微生物培养基和培养条件。
能力目标•能够正确使用实验仪器和操作技术,完成微生物培养实验;•能够观察和记录微生物的形态和生长情况;•能够分析实验结果并进行科学推理。
情感目标•培养学生良好的科学态度,尊重生命,注重实验室安全;•增强学生对生物科学的兴趣和学习动力;•培养学生的团队合作和沟通能力。
三、教学内容本课的教学内容包括以下几个方面:1. 微生物培养的意义和目的介绍微生物培养的重要性,以及为什么需要进行实验室培养。
通过培养微生物,可以研究其生长情况、形态特征以及代谢过程,有助于深入了解微生物的生物学特性。
2. 微生物的实验室培养方法•准备培养基:介绍常见的培养基种类和配方,包括营养琼脂、肉葡萄糖琼脂等。
指导学生正确配制和消毒培养基。
•转接培养物:教授微生物的无菌转接方法,包括灭菌操作和转接技巧。
•培养条件控制:讲解微生物培养过程中的温度、湿度、氧气、光照等条件控制的重要性,以及如何正确控制这些条件。
3. 实验操作演示和实践通过实验操作演示和实践,让学生亲自进行微生物的实验室培养,以下是实验步骤的简要介绍: - 实验材料准备:介绍实验需要的培养器具和试剂。
- 培养基制备:指导学生根据实验配方制备培养基。
- 灭菌操作:讲解灭菌操作的目的和方法,要求学生正确使用高温灭菌器进行培养基消毒。
-无菌转接:演示无菌转接技术,要求学生熟练掌握转接方法。
- 培养条件控制:指导学生正确调节温度、湿度和光照等条件。
课题1微生物的实验室培养一、培养基1.概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2.种类:按照培养基的物理状态划分为液体培养基和固体培养基。
3.营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
二、无菌技术1.无菌操作获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,具体操作如下:(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2.消毒和灭菌(1)消毒①概念:使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。
②常用的方法有煮沸消毒法和化学药剂消毒法。
(2)灭菌①概念:使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。
②常用的方法有:灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
三、大肠杆菌的纯化培养 1.制备固体培养基的步骤计算溶化→倒平板 2.纯化大肠杆菌微生物接种的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
(1)平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(2)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
四、菌种保存(阅读教材P20)1.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。
2.对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。
1.培养基下面是察氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分,根据下表,回答下列问题:1.培养基的作用是什么?根据形态分为哪几种?其营养成分有哪些?2.区分消毒和灭菌,掌握不同物品的灭菌方法。
3.如何制备牛肉膏蛋白胨固体培养基? 4.什么是平板划线法,如何操作? 5.什么是稀释涂布平板法,如何操作? 6.菌种保藏有哪些方法?该培养基根据物理性质划分应是固体培养基,原因是该培养基中加入了凝固剂琼脂。
《微生物的实验室培养》作业设计方案(第一课时)一、作业目标通过本次作业,学生应掌握微生物实验室的基本操作规范,熟悉微生物的培养过程,理解实验室安全与卫生的重要性,并能独立完成简单的微生物培养实验。
二、作业内容1. 实验准备:学生需根据课程内容准备实验器材和培养基,包括试管、烧杯、三角瓶、接种环、培养皿等。
同时,需根据课程要求配置适合的培养基配方。
2. 实验室规则学习:学生需了解并遵守实验室的各项规则,如实验前后的卫生清洁、实验器材的正确使用和存放、个人防护措施等。
3. 微生物分离与培养:学生需根据课程内容,利用准备好的接种环,从普通环境中(如土壤、水)或临床样本中分离特定微生物,并在实验室条件下进行培养。
4. 观察与记录:学生需观察并记录微生物的生长过程,分析其形态、颜色、大小等特征,记录结果应详细且具有逻辑性。
5. 总结与反思:学生需总结实验过程中遇到的问题及解决方法,并对自己的表现进行反思,如操作规范性、时间管理等。
三、作业要求1. 学生需独立完成实验,不得抄袭。
2. 实验过程中需遵守实验室规则,注意个人安全与卫生。
3. 实验报告应详尽,包括实验准备、操作过程、观察结果及总结反思等。
4. 实验器材需妥善处理,实验后的卫生需由学生自行负责。
四、作业评价1. 实验报告评价:根据实验报告的详尽程度、分析的准确性和逻辑性以及总结的全面性,给予学生相应的成绩。
2. 操作规范性评价:观察学生在实验过程中的操作是否规范,如接种环的使用、培养基的配置及存放等,给予相应的成绩。
3. 观察结果评价:根据学生的观察记录,评价其对微生物特征的描述是否准确,是否能够正确识别不同类型的微生物。
4. 反思与改进建议:根据学生的总结反思,给予针对性的建议,帮助学生提高实验技能和操作水平。
五、作业反馈1. 学生应积极提交作业,并在遇到问题时及时与教师沟通。
2. 教师应对学生的作业进行及时批改和反馈,针对学生的问题和不足,给予针对性的指导和建议。
专题1 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养【学习目标】1.了解有关培养基的基础知识2.进行无菌技术的操作3.进行微生物的培养【重点难点】重点:无菌技术的操作难点:无菌技术的操作【预习案】任务一、基础知识1.培养基(1)培养基的种类包括培养基和培养基等。
(2)培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分,(3)在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如:培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加;培养霉菌时需要将培养基的PH调至;培养细菌时需要将培养基的PH调至;培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件2.无菌技术(1)获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容:①②③④(2)消毒是指灭菌是指(3)实验室常用的消毒方法是,此外,人们也常使用化学药剂进行消毒,如用、等。
常用的灭菌方法有、、,此外,实验室里还用或进行消毒。
任务二、实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:→→→→倒平板2.纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。
稀释涂布平板法是指。
【探究案】探究点一概括制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤。
认真阅读P17倒平板操作过程,并回答讨论的问题。
探究点二微生物纯化培养技术中的平板划线法和稀释涂布平板法的原理分别是什么?探究点三认真阅读P18平板划线法的操作过程,用红笔画出关键词,并回答讨论的问题。
探究点四认真阅读P19稀释涂布平板法的操作过程,用红笔画出关键词,并回答讨论的问题。
【训练案】1.下列有关培养基的叙述正确的是 ( )A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个菌落2.不同培养基的具体配方不同,但一般都含( )A.碳源、磷酸盐和维生素 B.氮源和维生素C.水、碳源、氮源和无机盐 D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3.获得纯净培养物的关键是 ( )A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B.接种纯种细菌C.适宜环境条件下培养D.防止外来杂菌的入侵4.下列常用的无菌操作中错误的是 ( )A.用酒精擦拭双手 B.用氯气消毒水源C.验操作应在酒精灯火焰附近进行 D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭5.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6.有关倒平板的操作错误的是 ( )A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上 D.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7.有关平板划线操作正确的是 ( )A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞C.沾有菌种的接种环迅速伸人平板内,划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置,放人培养箱中培养8.有关稀释涂布平板法,叙述错误的是 ( )A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C.再放在适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落9.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是 ( )A.对比观察培养基有没有被微生物利用 B.对比分析培养基是否被杂菌污染C.没必要放人未接种的培养基 D.为了下次接种时再使用10.自养生物唯一碳源的是()A.糖类 B.石油 C.二氧化碳 D.花生粉饼11.菌种保存控制的条件是()(1)湿度(2)低温(3)干燥(4)有光(5)隔绝空气(6)适当有氧A.(1)(4)(6) B.(2)(3)(6) C.(1)(5)(6) D.(2)(3)(5)12.下列物质中,不能用作酵母菌碳源的是()A.含碳有机物 B.蛋白胨C.含碳无机物 D.花生粉饼等天然物质13.平板冷却凝后要将平板倒置,其意义是()A.利于大肠杆菌的接种 B.防止杂菌污染C.利于培养的冷却 D .防止皿盖冷却水倒流入培养基14.含C、H、O、N的大分子化合物可以作为()A.异养微生物的氮源、能源B.异养微生物的碳源、氮源C.自养微生物的氮源、能源、碳源 D.自养微生物的氮源、能源、碳源15. 关微生物营养物质的叙述中,正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量16. 下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前17.鉴定培养基的制作是否合格的方法是:将制备好的培养基放在中保温1-2天看有无,如果没有说明制作合格,反之则不合格。
新人教版2018-2019学年高二生物选修1专题2课题1微生物的实验室培养一、培养基1.概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2.种类:(按物理性质分)3.营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对pH 、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1.获取纯净培养物的方法获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,具体操作如下: (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2.消毒和灭菌 (1)概念:[填表]1.培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。
2.消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,灭菌则是杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
3.实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒,常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
4.固体培养基的配制过程为:计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。
5.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
6.长期保存菌种可以采用甘油管藏法。
(2)常用方法:[连线]三、大肠杆菌的纯化培养1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)操作步骤:计算称量→溶化灭菌倒平板(2)倒平板的方法及注意事项:①请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:丙→乙→甲→丁。
②甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
③丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
2.纯化大肠杆菌(1)纯化原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
(2)接种方法:①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
(3)培养:将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中,培养12 h和24 h 后,分别观察、记录。
四、菌种的保存[连线]1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含( )A.碳源、磷酸盐和维生素B.氮源和维生素C.水、碳源、氮源和无机盐D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析:选C 培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。
2.获得纯净培养物的关键是( )A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B.接种纯种细菌C.适宜环境条件下培养D.防止外来杂菌的入侵解析:选D 获得纯净培养物的关键是防止外来微生物的污染。
3.下列关于消毒和灭菌方法的选择,对应错误的是( )A.培养基——高压蒸汽灭菌B.牛奶——煮沸消毒C.接种环——灼烧灭菌D.实验者双手——化学消毒解析:选B 对牛奶应采用巴氏消毒法进行消毒。
4.下列叙述错误的是( )A.右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞,为避免污染需放在酒精灯火焰附近B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行C.打开培养皿的皿盖,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖D.为避免水滴滴入培养基,平板应倒过来放置解析:选C C项应是用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是完全打开,以防杂菌污染。
5.下列有关稀释涂布平板法的叙述,错误的是( )A.首先将菌悬液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌悬液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C.在适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落解析:选D 稀释涂布平板法是将菌悬液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌悬液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,在适宜条件下培养。
只有在稀释度足够高的菌悬液里,聚集在一起的微生物才能被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个的菌落。
核心要点一| 培养基及无菌技术1.培养基配制的原则(1)目的要明确:不同的微生物需求不同,根据培养目的进行配制。
(2)营养要协调:营养物质的浓度和比例要适宜。
营养物质浓度过低不能满足微生物营养需要,过高对微生物的生长有抑制作用。
(3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同,如细菌的适宜pH约为6.5~7.5、放线菌的适宜pH约为7.5~8.5、真菌的适宜pH约为5.0~6.0。
为维持pH的相对恒定,可在培养基中加入缓冲剂,常用的缓冲剂是磷酸氢二钾—磷酸二氢钾。
2.培养基的成分[名师点拨] 几种微生物的营养和能量来源3.几种常用灭菌和消毒方法的比较[题组冲关]1.下列对灭菌和消毒的理解,错误的是( )A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B.消毒和灭菌实质上是完全相同的C.接种环用灼烧法灭菌D.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析:选B 消毒是使用较为温和的物理或化学方法,仅杀死物体表面或内部一部分微生物,不包括芽孢和孢子。
灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
2.下表是某微生物培养基的配方。
请分析回答下列问题:(1)。
利用该培养基培养微生物时,微生物所需要的碳源来自____________。
(2)此表中含有的微生物的营养成分包括____________。
(3)若除去该培养基中的①后再加入不含氮元素的有机物,则此培养基可培养的微生物种类是__________________________。
(4)培养基若加入氨基酸,则它可充当的营养成分是_______________________________。
(5)若要观察微生物的菌落特点,培养基中还应添加的成分是____________________。
解析:(1)从培养基的成分看,该培养基无有机物,因此可以培养自养型微生物,微生物所需的碳源只能由空气中的CO2提供。
(2)培养基中的成分包括微生物需要的氮源、无机盐和H2O。
(3)培养基中的①是该培养基中唯一的氮源,去掉后则成为无氮培养基,可用于培养自生固氮微生物,因为自生固氮微生物可以利用大气中的N2作为氮源。
(4)在培养基中加入氨基酸,可以为微生物提供碳源、氮源和特殊营养。
(5)微生物的菌落需要在固体培养基的表面生长,因此培养基中需要添加凝固剂(琼脂),使液体培养基凝固成固体培养基。
答案:(1)自养型空气中的CO2(2)H2O、无机盐、氮源(3)自生固氮微生物(4)碳源、氮源和特殊营养(5)凝固剂(琼脂)核心要点二| 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.操作步骤2.倒平板操作的注意事项(1)培养基要冷却到50 ℃左右时开始倒平板。
温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。
(2)要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。
通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
(3)倒平板时,要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开,以免杂菌污染培养基。
(4)平板冷凝后,要将平板倒置。
因为平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,培养基表面的温度也较高,平板倒置后,既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
(5)在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,那么这个平板不能用来培养微生物,因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
(6)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。
[题组冲关]3.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是( )A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.加热溶化琼脂时应不断用玻璃棒搅拌D.待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板解析:选A 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,其顺序不能颠倒。
牛肉膏容易吸潮,所以称好后需将称量纸一同放入烧杯,当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸。
在溶化时,加入琼脂后应不断用玻璃棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
待培养基冷却至50 ℃左右,并且培养基处于溶化状态时开始倒平板。
4.下列有关倒平板操作的叙述,错误的是( )A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌面上D.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置解析:选C 整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵,因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁,打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰,培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不能将培养皿盖完全打开,等待平板冷却凝固后需要倒过来放置。
核心要点三| 纯化大肠杆菌1.平板划线法(1)操作步骤(2)注意事项①第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环。
②灼烧接种环之后,要等其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
③在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样才能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
④划线时最后一区域不要与第一区域相连。
⑤划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。
(3)平板划线操作中几次灼烧接种环的目的2.稀释涂布平板法 (1)操作步骤 ①系列稀释操作:a .将分别盛有9 mL 水的6支试管灭菌,并按101~106的顺序编号。
b .用移液管吸取1 mL 培养的菌液,注入101倍稀释的试管中。
用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸3次,使菌液与水充分混匀。
c .从101倍稀释的试管中吸取1 mL 稀释液,注入102倍稀释的试管中,重复b 步的混匀操作。
依次类推,直到完成最后一支试管的稀释。
②涂布平板操作:(2)注意事项①每支试管及其中的9 mL 水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离酒精灯火焰1~2 cm 处。
②涂布器用体积分数为70%的酒精消毒,取出时,让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。
③不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。
④酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体。
[名师点拨] 平板划线法和稀释涂布平板法的比较(1)单细胞菌落的获得:利用平板划线法接种时,单细胞菌落从后划线的区域挑取;利用稀释涂布平板法接种时,只有合适的稀释度才能得到单细胞菌落。
(2)两种接种方法的应用:两种方法都能将微生物分散到固体培养基表面,以获得单细胞菌落,达到分离纯化微生物的目的;稀释涂布平板法还能对微生物进行计数,而平板划线法不能用于微生物的计数。
3.实验结果分析与评价(1)未接种的培养基表面若有菌落生长,说明培养基被污染;若无,则说明未被污染。