食品中对羟基苯甲酸酯类的检测方法

高效液相色谱法测定食品中的对羟基苯甲酸酯类邢晓慧;张淑玲;刘庆斌;李渊博;曹珍艳;邓玮【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2013(038)002【摘要】文章建立了高效液相色谱法测定食品中的对羟基苯甲酸酯的方法,色谱柱TC-C18,(4.6×250mm,5μm),流动相甲醇-水(70:30),流速0.8 mL/min.二极管阵列检测器,检测波长255 nm,柱温30℃.加标回收率为84％～103％,方法简便、快速、灵敏度高.【总页数】2页(P87-88)【作者】邢晓慧;张淑玲;刘庆斌;李渊博;曹珍艳;邓玮【作者单位】北京市朝阳区产品质量监督检验所,北京100124;北京市朝阳区产品质量监督检验所,北京100124;北京市朝阳区产品质量监督检验所,北京100124;北京市朝阳区产品质量监督检验所,北京100124;北京市朝阳区产品质量监督检验所,北京100124;北京市朝阳区产品质量监督检验所,北京100124【正文语种】中文【中图分类】TS201.1【相关文献】1.高效液相色谱-串联质谱法测定多种食品中7种酚类抗氧化剂和对羟基苯甲酸酯类防腐剂 [J], 张勋;刘韬;吴连鹏;高杰;康明芹;熊龙;仲文严;付瑶;邢燕燕2.高效液相色谱法测定酸奶和液体奶中对羟基苯甲酸酯类的研究 [J], 梁艳;吕海燕;刘丽君;李翠枝;王艳萍;任新志;邵振国3.HLB固相萃取--高效液相色谱法测定婴幼儿奶粉中对羟基苯甲酸酯类的研究 [J], 闫建康4.高效液相色谱法测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量 [J], 陈旭明;王侠文;谢鸿5.高效液相色谱法测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量 [J], 陈旭明;王侠文;谢鸿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

食品中对羟基苯甲酸酯类的检测摘要：文章采用超声提取-高效液相色谱法同时测定食品中3种对羟基苯甲酸酯（对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯）含量的方法。

对羟基苯甲酸酯类属于防腐剂，按gb/t5009.31-2003国家推荐方法检测[1]，样品提取比较繁琐、费时，且回收效果欠佳。

本文利用较为常见的紫外检测器通过优化条件，摸索出一个简捷、快速、经济、灵敏，又能保证一定精度的测定方法。

本方法加标回收率在86.08%～112.71%之间，线性系数r>0.9998，检出限可达0.10ug/ml，分析时间短，完全能够满足分析要求，可广泛应用于食品中对羟基苯甲酸酯类检测分析。

关键词：对羟基苯甲酸酯类；高效液相色谱法中图分类号：o657.7+2 文献标识码：a 文章编号：1674-0432（2012）-10-0064-21 实验部分1.1 仪器和试剂1.1.1 仪器 shimadzu lc 10vp plus高效液相色谱系统（日本shimadzu公司），配紫外检测器及lc solution色谱工作站；分析天平：感量0.1mg；氮吹仪：美国organomation n-evap112型；均质机：ikar werke t25型均质机；溶剂过滤装置；0.45μm和0.22μm过滤膜和过滤头；milli-q超纯水机。

1.1.2 试剂甲醇、乙腈为hplc级；乙醇为分析纯；水为超纯水。

标准品：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯，纯度为99.0%，美国进口，购于上海安谱。

1.2 标准溶液的配制[2]标准贮备液：精密称取三种标准物质0.05g，用无水乙醇溶解并定容于50ml容量瓶中，配制成浓度为1mg/ml的标准贮备液，贮于4℃冰箱中备用。

标准使用液：用刻度吸管准确吸取三种标准贮备液，根据需要用无水乙醇配制成不同浓度的标准溶液系列，待用。

1.3 色谱条件色谱柱：diamonsil c18，粒度5μm，4.6mm×250mm（id×l）；检测波长：254nm；流速：1.0ml/min；进样量：20 μl；流动相：水-乙腈（体积比为45：55）；柱温：室温。

DBS 53 云南省食品安全地方标准DBS 53/ 014—2013食品中对羟基苯甲酸酯类的测定高效液相色谱法2013-10-20发布2014-04-20实施前言本标准为首次发布。

食品中对羟基苯甲酸酯类的测定高效液相色谱法1 范围本标准适用于酱油、醋、果酱、糕点、腌制品、果酒及饮料等食品中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯。

本标准检出限：对羟基苯甲酸甲酯：1.8 mg/kg；对羟基苯甲酸乙酯：1.2 mg/kg；对羟基苯甲酸丙酯：0.9 mg/kg；对羟基苯甲酸丁酯：1.3 mg/kg。

2 规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。

3 原理试样用乙醇超声波提取，取上清液过滤，以高效液相色谱法分离，二极管或紫外检测器检测，外标法定量。

4 试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

4.1 甲醇（色谱纯）。

4.2 乙酸铵（分析纯）。

4.3 20 mmol/L乙酸铵溶液：准确称取1.54 g乙酸铵（4.2）用水定容至1000 ml，过0.45μm滤膜。

4.4 无水乙醇（分析纯）。

4.5 对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯：99 %以上。

4.6 对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的标准储备溶液：准确称取对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯各0.050 g于50 mL容量瓶中，用甲醇（4.1）稀释至刻度，该溶液每毫升相当于1 mg的对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯。

4.7 对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的标准工作溶液：将混合标准溶液用甲醇（4.1）依次稀释成1.0 μg/ml、10.0 μg/ml、25.0 μg/ml、50.0 μg/ml、100.0 μg/ml 的系列标准溶液，使用前配制。

实验四高效液相色谱法检测食品中对羟基苯甲酸酯类苯甲酸、山梨酸和对羟基苯甲酸酯类是食品中常用的防腐剂，广泛存在于酱油、醋、化妆品中。

对羟基苯甲酸酯类有：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯。

它们对食品均有防止腐败的作用，苯甲酸的杀菌、抑菌效力随介质的酸度增高而增强，在碱性介质中则失去杀菌、抑菌效力。

山梨酸是使用最多的防腐剂，也是酸性防腐剂。

对羟基苯甲酸酯类以丁酯的防腐作用最好，由于对羟基苯甲酸酯类都难溶于水，所以通常是将它们先溶于乙酸、乙醇、乙腈等强极性溶液中，然后使用，为更好发挥防腐作用，最好是将两种或两种以上的该酯类混合使用。

虽然在限量范围内食用上述防腐剂对人体影响不大，但若大量摄入，则会危害人体健康。

各国都对食品中可以使用的防腐剂种类和用量有严格的要求，如中国的GB2760《食品添加剂使用卫生标准》明确规定了使用范围和最大使用量。

不同商品中的最大限量：苯甲酸0.2-1g/kg（中），山梨酸0.2-1g/kg（中），甲酯1g/kg（中），乙酯0.1-0.25g/kg（中），丙酯0.012-0.2g/kg（中），丁酯0.25g/kg（日），异丁酯0.25g/kg（日）。

本方法可同时检测食品中上述8种防腐剂。

本实验检测溶液中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯。

一、实验目的和要求1、学习高效液相色谱外标法定量定性分析方法；2、熟悉超高压液相色谱的分析操作规程；3、学习高效液相色谱检测食品中的防腐剂的方法。

二、实验原理在对羟基苯甲酸酯类混合物中含有对羟基苯甲酸酯类，它们都是强极性化合物，可采用高效液相色谱进行分析。

以对羟基苯甲酸酯类标样保留时间定性，采用外标法定量对羟基苯甲酸酯类含量。

X=(A2×C)/A1（为样品中对羟基苯甲酸酯类的含量单位为ug/mL，单位；A1为标样对羟基苯甲酸酯类的峰面积；A2为样品中对羟基苯甲酸酯类峰面积；C为对羟基苯甲酸酯类标准液质量浓度。

实验四高效液相色谱法检测食品中对羟基苯甲酸酯类苯甲酸、山梨酸和对羟基苯甲酸酯类是食品中常用的防腐剂，广泛存在于酱油、醋、化妆品中。

对羟基苯甲酸酯类有：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸异丁酯。

它们对食品均有防止腐败的作用，苯甲酸的杀菌、抑菌效力随介质的酸度增高而增强，在碱性介质中则失去杀菌、抑菌效力。

山梨酸是使用最多的防腐剂，也是酸性防腐剂。

对羟基苯甲酸酯类以丁酯的防腐作用最好，由于对羟基苯甲酸酯类都难溶于水，所以通常是将它们先溶于乙酸、乙醇、乙腈等强极性溶液中，然后使用，为更好发挥防腐作用，最好是将两种或两种以上的该酯类混合使用。

虽然在限量范围内食用上述防腐剂对人体影响不大，但若大量摄入，则会危害人体健康。

各国都对食品中可以使用的防腐剂种类和用量有严格的要求，如中国的GB2760《食品添加剂使用卫生标准》明确规定了使用范围和最大使用量。

不同商品中的最大限量：苯甲酸0.2-1g/kg（中），山梨酸0.2-1g/kg（中），甲酯1g/kg（中），乙酯0.1-0.25g/kg（中），丙酯0.012-0.2g/kg（中），丁酯0.25g/kg（日），异丁酯0.25g/kg（日）。

本方法可同时检测食品中上述8种防腐剂。

本实验检测溶液中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯。

一、实验目的和要求1、学习高效液相色谱外标法定量定性分析方法；2、熟悉超高压液相色谱的分析操作规程；3、学习高效液相色谱检测食品中的防腐剂的方法。

二、实验原理在对羟基苯甲酸酯类混合物中含有对羟基苯甲酸酯类，它们都是强极性化合物，可采用高效液相色谱进行分析。

以对羟基苯甲酸酯类标样保留时间定性，采用外标法定量对羟基苯甲酸酯类含量。

X=(A2×C)/A1（为样品中对羟基苯甲酸酯类的含量单位为ug/mL，单位；A1为标样对羟基苯甲酸酯类的峰面积；A2为样品中对羟基苯甲酸酯类峰面积；C为对羟基苯甲酸酯类标准液质量浓度。

食品中对羟基苯甲酸酯类的测定2009.81. 实验步骤：采用GB/T5009.23—2003的方法测定食品中对羟基苯甲酸乙酯的含量。

1.1 标准系列配制：对羟基苯甲酸乙酯标准溶液（acros ，含量99.%）：用1#天平精密称取0.0513g 对羟基苯甲酸乙酯标准品，加乙醇定容至50ml A 级容量瓶中，摇匀。

该溶液每毫升含甜蜜素1.026毫克。

标准系列：用10ml 分度移液管分别取0.5、1、2、4、6、8ml 对羟基苯甲酸乙酯标准溶液于10ml 容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀。

该标准系列为： 0.0513、0.1026、0.2052、0.4104、0.6156、0.8208 mg/ml 。

1.2样品制备：称取5g 左右试样到100具塞比色管中，加1ml 盐酸（1+1）酸化，加入10ml 饱和氯化钠溶液，摇匀，加入75、50、50ml 乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液于250ml 分液漏斗中，加入10ml 饱和氯化钠溶液洗涤一次，然后加入30、30、30ml 1g/100ml 碳酸氢钠溶液洗涤3次，弃去下层水溶液，将分液漏斗出口处水用滤纸吸干，塞上脱脂棉，加入10g 无水硫酸钠脱水30min 。

将滤液转入150ml 梨形瓶，在40℃水浴上，吹氮浓缩到近干，用5ml 单标移液管加入5ml 乙醇，溶解残渣，分析。

2. 实验条件：使用 PE AutoSystem XL 气相色谱仪进行测定； 检测器：FID ；色谱柱：SE-54 30m ×0.530mm ×0.6μm ； 柱温：130℃（1min ）；→5℃/min →170℃(3min)检测器温度：250℃；进样口温度：220℃。

3. 定量数学模型：1000)/(⨯⨯=mv c kg mg XX ——样品中被测物含量，mg/kg ；c ——由标准曲线计算出的提取液中被测物含量，mg/ml ； v ——提取液定容体积，ml ； m ——称样量，g 。

对羟基苯甲酸酯类混合物的反相高效液相色谱测定一、实验目的⒈学习高效液相色谱用保留值定性和用归一化法定量的技术。

⒉熟悉高效液相色谱分析操作。

3.掌握用高效液相色谱法测定食品中防腐剂的含量。

二、实验原理高效液相色谱仪是一种色谱分析仪器，主要用于有机化合物的分析，可以对已知80%左右的有机化合物进行分离和分析。

特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物以及生物活性物质的分离和分析。

液相色谱仪在医药、食品、农业、生命科学、化工和环保等领域都有广泛的应用。

液相色谱分析方法实质上是一种物理化学分析方法，又称色层法或层析法。

它是利用不同物质在两相（固定相和流动相）中具有不同的分配系数和吸附能力及其他亲和作用性能的差异为分离依据，当混合物中各组分随流动相移动时，在两相中反复进行多次分配，从而使各组分得到分离。

流动相为液体的色谱分析叫做液相色谱分析。

根据分离原理的差异，液相色谱通常分为以下几种类型：液固吸附色谱、液液分配色谱、离子交换色谱和离子对色谱、凝胶色谱。

在对羟基苯甲酸酯类混合物中含有对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯，它们都是强极性化合物，可采用反相液相色谱进行分析，选用非极性的C-18烷基键合相作固定相，甲醇的水溶液作流动相。

在一定的色谱条件下，酯类各组分的保留值是恒定的，因而在同样条件下，记录纯酯类各组分和未知样品的色谱图，将测得的未知样品的各组分保留时间与已知纯酯类各组分保留时间对照，便可确定未知样品中各组分存在与否。

这种利用纯物质对照定性分析的方法适用于来源已知且组分简单的混合物。

本实验采用归一化法定量。

归一化法适用条件及计算公式与气相色谱法相同： Ci（%）=(fiAi)/(ΣfiAi)在对羟基苯甲酸酯类混合物属同系物，具有相同的生色团和助色团，因此紫外光度检测器测量时，它们的校正因子相同，故上式便可检测为Ci（%）=Ai/ΣAi×100％三、仪器和试剂仪器：高效液相色谱仪LC-20aT试剂：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、甲醇、水（GB/T 6682规定的一级水）、乙酸铵（分析纯）实验条件1 色谱柱：长15cm、内径3mm，装填C-18烷基键合相、颗粒度为10um的固定相。

毛细管气相色谱法直接测定食品中4种对羟基苯甲酸酯陈利国;曹小彦;黄辉;张燕;彭新凯【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2010(026)001【摘要】建立一种毛细管气相色谱法直接测定槟榔、酱腌菜等食品中4种对羟基苯甲酸酯(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯)含量的检测方法.样品用乙酸乙酯直接提取,不需浓缩,直接进样,用毛细管柱气相色谱法测定.4种对羟基苯甲酸酯在0～500 μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限分别为0.01 mg/kg(S/N=3),添加平均回收率88. 5% ～103.5%,RSD＜10%.方法前处理简单、快速、准确,灵敏度高,选择性好,回收率高,简单快捷, 能满足常规检测及食品安全控制的需要.【总页数】4页(P67-69,85)【作者】陈利国;曹小彦;黄辉;张燕;彭新凯【作者单位】长沙市食品质量安全监督检测中心,湖南,长沙,410013;长沙市食品质量安全监督检测中心,湖南,长沙,410013;长沙市食品质量安全监督检测中心,湖南,长沙,410013;长沙市食品质量安全监督检测中心,湖南,长沙,410013;长沙市食品质量安全监督检测中心,湖南,长沙,410013【正文语种】中文【相关文献】1.超声提取-毛细管气相色谱法检测酱腌菜中对羟基苯甲酸酯 [J], 张全美;黄锦燕;王守卿2.毛细管气相色谱法测定化妆品中对羟基苯甲酸酯的含量 [J], 朱克旭;汪海宣3.毛细管气相色谱法测定酱腌菜中对羟基苯甲酸酯类防腐剂含量 [J], 宗万里4.毛细管气相色谱法测定酱腌菜中的对羟基苯甲酸酯类含量 [J], 杨卫花;赵浩军;杨慰;张蕾;韩勤5.毛细管气相色谱法测定食品中对羟基苯甲酸酯类防腐剂 [J], 晋玉霞;张莉莉;刘文杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。