不同浓度重组登革病毒1型病毒样颗粒免疫效果的评价

登革病毒初次感染患者循环登革病毒NS1抗原和抗体的动力学分析以及非标记技术对NS1单克隆抗体亲和力的测定登革热是一种由登革病毒(DengueVirus，DENV)引起的虫媒传染病，通过蚊子（以埃及伊蚊和白纹伊蚊为主）的叮咬在人群中传播。

人类感染DENV后将产生从轻到重的很大范围的临床症候群。

尽管绝大多登革热患者显示为一种类似流感样的自限性疾病，如登革热(DengueFever，DF)，然而患者的病情有可能发展到重症登革热，如登革出血热(DengueHemorrhageFever,DHF)或登革休克综合征(DengueShockSyndrome，DSS)。

在未能得到及时、有效治疗的情况下，重症登革热将对患者的生命造成巨大的威胁。

目前，登革热被认为是世界上最为关注的公共卫生问题，其原因主要在于该病的发病率高，流行范围广，并且缺乏行之有效的防治方法。

近50年来，尽管全世界在登革热的防治方面做了很多的努力，但是登革热的发病率还是呈现出急剧上升的趋势，给流行国家的卫生防控体系以及患者的家庭带来了沉重的经济负担。

DENV属于黄病毒科，黄病毒属，是一种有包膜的单股正链的RNA病毒，基因组大约11kb 长，包含一个开放性的阅读框，编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白。

三种结构蛋白分别是衣壳蛋白(capsidprotein，C)，膜蛋白(membraneprotein，M)和包膜蛋白(envelopeprotein，E)。

7种非结构蛋白依次为NS1-NS2a-NS2b-NS3-NS4a-NS4b-NS5。

根据不同的E蛋白基因序列，DENV可被划分为四种血清型，DENV-1～4。

各种DENV的血清型之间存在60-70％的同源序列。

DENV的初次感染可以产生针对感染血清型的终生免疫保护反应，但对其它三型DENV仅有短暂而微弱的交叉免疫保护作用。

当二次感染的血清型不同于初次感染的血清型时，患者体内存在的非中和交叉反应性抗体或亚中和浓度的中和抗体可促进DENV进入Fc受体容受细胞，增加病毒的复制，容易导致严重的DHF/DSS的发生。

呼吸道合胞病毒新型表位的鉴定及免疫效果评估第一部分呼吸道合胞病毒预防性肽疫苗的设计目的: 尝试运用理论设计和分子模拟技术确定和优化呼吸道合胞病毒的肽疫苗。

方法: 首先检索蛋白质晶体结构数据库中呼吸道合胞病毒相关蛋白晶体结构数据和呼吸道合胞病毒中和抗体- 识别肽段的复合物晶体结构数据。

后采用分子模拟, 分析了中和抗体与表位肽间作用方式;通过分子动力学模拟技术评估FFL-001 抗原蛋白的各个部分对其稳定结构的作用及与中和抗体结合的影响;通过理性设计优化得到抗原肽, 并评估其与中和抗体的作用,最终通过实验来验证其效果。

结果:1.成功从蛋白质晶体结构数据库中获取RSV F蛋白变构前后高级结构晶体数据,抗体Motavizumab 与其表位肽的共晶结构数据。

2. 对F 蛋白变构前后的高级结构分析可知,F 蛋白的结构中存在高级结构相对稳定的肽段，该肽段受F蛋白变构影响较小。

该肽段亦是已开发的RSV中和抗体的靶标。

3. 结构和能量分析Motavizumab-FFL₀01 作用表明,FFL-001 与抗体Motavizumab的结合区仅局限于H2和H3螺旋连接转角区（氨基酸65-89）, 在此相互作用界面上, 存在9 个氢键和一条盐桥作用。

4. 分子动力学结果表明, 完整FFL-001能在整个动力学模拟时段内能维持稳定的空间结构，而缺少H1螺旋束的FFL₀01的结构出现明显变构;H2和H3螺旋连接转角区（即Motavizumab结合位点肽段（氨基酸65-89））肽段结构只有其N端的一小段螺旋结构维持着，而其C-端和中间的氨基酸序列呈完全的无序状态。

5. 能量评估显示,全长的FFL-001产生的结合能△ Gtotal为-23.6kcal/mol;其中可分解为FFL-001与Motavizumab有益作用能△ Gint=-110.8kcal/mol, 和不益的去溶剂化作用△ Gslv=71.5kcal/mol以及一部分较弱的熵惩罚作用-T △S=15.7kcal/mol;双螺旋束H2-H3和Motavizumab结合位点肽段与完整的FFL-OO1相比呈现出完全不同能量变化；在与Motavizumab结合时,这两个肽段出现了较大的熵惩罚（-T △ S分别为47.2和27kcal/mol ）和不利的去溶剂化作用（△ Gslv 分别为52.6 和58.8kcal/mol ）。

重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞和酵母）及其序贯免疫的效果评价目的评价不同类型基因重组乙型肝炎疫苗（Hepatitis B Vaccine，HepB）及其序贯免疫的免疫效果。

方法将观察对象分为3组，按照0、1和6个月免疫程序分别接种重组HepB（CHO细胞），重组HepB（酵母）及两种疫苗序贯免疫，全程免疫1年后，检测血清抗-HBs阳转率和抗-HBs几何平均浓度（Geometrical mean concentration，GMC）。

结果3个免疫组抗体阳性率和GMC差别均没有显著性。

结论重组HepB（CHO细胞）及HepB（酵母）序贯免疫免疫原性良好。

标签：重组乙肝疫苗疫苗；免疫效果接种乙型肝炎疫苗（Hepatitis B Vaccine，HepB）是预防和控制乙型肝炎最有效的手段，我国目前使用较为广泛的是重组HepB（CHO细胞）[以下简称HepB （CHO）]和重组HepB（酵母）[以下简称HepB（酵母）]。

且由于省级采购的疫苗种类时有变化，为比较接种HepB（CHO）、HepB（酵母）和两种HepB疫苗序贯免疫的免疫效果，在保定市进行了有效性观察，现报告如下。

1材料与方法1.1疫苗华北制药生产的HepB（CHO）疫苗，规格10μg/剂，北京天坛生产的HepB（酵母）疫苗，规格5μg/剂。

1.2观察对象及分组选择保定市8个县（市、区）为观察地区，107名新生儿，按照随机性原则编入3个不同的观察组，注射不同种类的HepB疫苗：第1组接种HepB（CHO）；第2组接种HepB（酵母）；第3组第1或第1、2针接种HepB（酵母），第2、3或第3针接种HepB（CHO）。

比较各组抗体阳转率和几何平均浓度（Geometrical mean concentration，GMC）。

1.3免疫程序及接种方法以上观察对象均按照0、1、6个月程序接种，接种部位为上臂三角肌肌内。

1.4血清学检测对每一观察对象收集免疫后1年的血清，用雅培Abbott AXSYM全自动免疫发光仪对乙肝病毒表面抗体（抗-HBS）（试剂批号：10367LF01）和乙肝病毒核心抗体（抗-HBc）（试剂批号：05238LFOO）进行检测。

成人接种重组乙型肝炎疫苗后免疫效果的评价发表时间：2017-04-24T17:04:06.417Z 来源：《中国蒙医药》2017年4月第4期作者：龙丽莲[导读] 成人注射国产重组乙型肝炎疫苗免疫原性以及安全性较高，其中20ug接种剂量免疫效果更佳，应予以推广使用。

湘乡市疾病预防控制中心湖南湘乡 411400【摘要】目的：观察并研究成人接种不同剂量重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）后的免疫效果。

方法：将276例健康接种人员分为低剂量组（140例）与高剂量组（136例），两组均给予国产重组乙型肝炎疫苗，其中低剂量组注射剂量为10ug，高剂量组注射剂量为20ug，对比两组表面抗体阳转率和几何平均滴度。

结果：免疫接种后6月，高剂量组表面抗体阳转率和几何平均滴度明显高于低剂量组，二者差异具有统计显著性（P＜0.05）；低剂量组20~29岁、30~39岁、40~49岁中HBs-Ab阳转率分别为82.9%、80.0%、75.0%，高剂量组20~29岁、30~39岁、40~49岁中HBs-Ab阳转率分别为91.2%、93.9%、89.5%，两组内不同年龄分布的表面抗体阳转率差异无统计显著性（P＞0.05）。

结论：成人注射国产重组乙型肝炎疫苗免疫原性以及安全性较高，其中20ug接种剂量免疫效果更佳，应予以推广使用。

【关键词】乙肝疫苗接种；国产重组乙肝疫苗；表面抗体阳转率；几何平均滴度乙型肝炎是一种高发性传染病，接种乙肝疫苗是乙型肝炎的一种有效防控措施。

测定表面抗体则是乙型肝炎预防成效的首要评估指标[1]。

本研究主要观察分析成人接种不同剂量重组乙型肝炎疫苗后的免疫效果，现将结果报告如下：1资料与方法1.1 一般资料随机纳入2015年4月~2016年4月我市某企业的276例新员工为研究对象，入组对象既往无乙肝疫苗接种史和本次研究用药禁忌症。

按照接种剂量不同将其分为两组，低剂量组140例，其中男80例，女性患者60例；年龄最小20岁，最大49岁，平均年龄（31.4±6.7）岁；高剂量组136例，其中男79例，女性患者57例；年龄最小20岁，最大49岁，平均年龄（30.3±5.9）岁。

收稿日期:2006204211;修回日期:2006205204作者简介:范行良(19702),男,硕士,助理研究员,主要从事分子生物学和诊断试剂的研究。

E 2mail:fxl@ .cn人巨细胞病毒结构蛋白p150、p38的原核表达纯化及免疫性鉴定范行良,邢宇坤,李长贵,王剑锋(中国药品生物制品检定所,北京100050)摘　要:应用聚合酶链式反应(PCR )扩增HC MV 结构蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048和p38aa117～aa373基因片段,将其分别克隆于表达载体pGEX 24T 21和pET30a 2Set B 中,转化大肠杆菌BL21(DE3),I PTG 诱导表达,重组质粒经酶切鉴定及DNA 测序证实pGEX 24T 21/p150aa595～aa614/aa1006～aa1048和pET30a 2Set B /p38aa117～aa373构建正确;通过优化表达和纯化,分别获得分子量约为35k D 和43k D 纯化的表达产物。

经亲和层析纯化以免疫印迹实验对纯化的重组蛋白进行免疫反应性检测,证实重组蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373能够与抗HC MV I g M 阳性血清反应,说明表达的重组蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373具有良好的免疫性,对HC MV 的原发感染具有潜在的应用价值。

关键词:巨细胞病毒;结构蛋白;免疫性中图分类号:R373.1+1文献标识码:A文章编号:100525673(2006)0320009204Expressi on,pur i f i ca ti on and i den ti f i ca ti on of reco m b i n an t v i ra l structura l prote i n s p150and p38of hum an cyto 2m ega lovirus FAN X ing 2liang,X I N G Yu 2kun,L I Chang 2gui,et al .(N ational Institute for the Control of Phar m aceutocal and B iological Products,B eijing 100050,China )Abstract:Both gene frag ments of P150(a m ino acids aa 595t o 614and 1006t o 1048which were fused t ogether )and p38(aa 117t o 373)were a mp lified by PCR fr om te mp late DNA of hum an cy to m ega lovirus .The t w o targetDNA frag ments were cl oned int o exp ressi on vect or pGEX 24T 21and pET30a 2Set B separately .After transf or med int o competent E .coli BL21(DE3)cell and induced by I PTG,the recombinant fusi on p r oteins p150aa595～aa614/aa1006～aa1048and p38aa117～aa373were exp ressed and then purified by an affinity chr omat ography .Restricti on enzy mes cleavage and DNA sequencing confir med that the p las 2m id p150aa595～aa614/aa1006～aa1048and pET30a 2Set B /p38aa117～aa373were correctly constructed .T wo purified recombinantp r oteins with molucular weight about 35k D and 43k D were obtained by op ti m izing the conditi ons f or both exp ressi on and purifica 2ti on .W estern bl ot showed that these t w o recombinant p r oteins could be recognized by positive I g M seru m of hu man cyt o 2megal ovirus .These t w o recombinant p r oteins showed good i m munity and had a potential value f or diagnosis of p ri m ary HC 2MV infecti on .Key words:Hum an Cy to m ega lovirus ;viral structural p r otein;I m munity 人类巨细胞病毒(Hum an cy to m ega lovirus,HC 2MV )属疱疹病毒科β属的双螺旋DNA 病毒,是人类疱疹病毒中最大的一组病毒。

华南农业大学学报 Journal of South China Agricultural University 2024, 45(2): 190-198DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.202211015肖宇, 吴凡, 张宝石, 等. 狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节I型干扰素作用的差异分析[J]. 华南农业大学学报, 2024, 45(2): 190-198.XIAO Yu, WU Fan, ZHANG Baoshi, et al. The different regulatory effect of glycoproteins from virulent and attenuated strain of rabies virus on type I interferon signaling pathway[J]. Journal of South China Agricultural University, 2024, 45(2): 190-198.狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节I型干扰素作用的差异分析肖　宇，吴　凡，张宝石，徐孟磊，龙家慧，罗　均，郭霄峰，罗永文(华南农业大学 兽医学院/广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室, 广东 广州 510642)摘要: 【目的】狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus，RABV)引起的一种高致死性人兽共患传染病。

I型干扰素(IFN-I)通路在抵抗RABV感染中发挥重要作用。

RABV可通过磷蛋白及核蛋白的功能逃逸IFN-I的抗病毒作用，本研究旨在探讨对RABV的致病性有重要影响的糖蛋白(Glycoprotein，G)在调节IFN-I通路方面扮演怎样的角色。

【方法】将RABV弱毒株Hep-Flury的G基因替换成致病株CVS-11的G基因，拯救得到重组病毒HepG，分析Hep-Flury、CVS-11和HepG这3种毒株在体内和体外感染对IFN-I通路激活和调控的差别，比较它们在神经细胞中对抗IFN-I抗病毒作用的差异性。