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甘草有效成分的提取分离实验方案实验目的：通过对甘草中甘草黄酮、甘草酸和甘草多糖的提取分离，进一步理解他们的理化性质，并且初步掌握提取分离的方法。
实验原理：黄酮类化合物则泛指两个苯环（A环与B环）通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。
根据中央三碳的氧化程度、是否成环、B 环的联接位点等特点，可将该类化合物分为多种结构类型。
代表化合物有甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草甙、异甘草甙、甘草查尔酮等。
甘草中已经发现的黄酮类化合物有一百多种，本实验只对其进行粗提，并且测定其总含量。
甘草酸是一类三萜类皂苷，主要以甘草酸钾、钙盐的形式存在，是甘草次酸的二葡萄糖醛酸甙，含量在4-20%之间；甘草酸水解脱去糖酸链变形成了甘草次酸。
超临界CO2萃取甘草总黄酮的萃取率是1. 35%，含量32. 45%，是索氏提取法提取甘草总黄酮的提取率的2.2倍，索氏提取溶剂用量是超临界CO2萃取的6倍。
本实验采取超临界CO2萃取法提取甘草黄酮。
【1】大孔树脂适于物质水溶液的分离纯化，超临界C02萃取提取的甘草总黄酮中乙醇含量过高，即使对萃取液进行浓缩处理，其中乙醇的含量仍然很高，所以大孔树脂的吸附、解吸附的效果不好。
萃取液浓缩近干加入水后，所要分离的物质析出变混浊，也不适合用大孔树脂进行分离纯化。
与大孔树脂层析比较，硅胶柱层析可以更有效的分离纯化甘草黄酮。
使用硅胶柱层析可以有效地使甘草黄酮类物质的含量达到55%以上，收率1. 12%，符合国家中药二类新药的原料要求。
【1】综合考虑，本实验选择硅胶柱层析对甘草黄酮进行分离纯化。
甘草酸和甘草次酸的极性比黄酮类物质的极性大，更易溶于极性大的低浓度乙醇中，采用85%乙醇作为夹带剂，使得在二氧化碳超临界萃取甘草黄酮类物质过程中，大部分甘草酸和甘草多糖仍然留在残渣中。
鉴于甘草酸和甘草多糖都溶于水的性质，本实验采用超声或微波辅助法对它们同时进行提取[3]。
对于提取后的甘草酸和甘草多糖的分离，可查阅到的方法包括醇沉酸沉法[3]。
2012-2013学年第二学期药用植物资源与开发论文名称甘草化学成分的提取与分离年级 2010 学院中药材学院专业植物科学与技术学号 07107107 姓名林俊旭任课教师张永刚完成时间 2013-5-11 成绩甘草中化学成分的提取与分离摘要：本文主要介绍了甘草中主要的化学成分以及这些化学成分的含量和性质，并简述了甘草酸，甘草次酸和甘草甘的提取和有效成分的含量测定，为进一步的生产实践做出贡献。
关键词：甘草化学成分提取正文：甘草属于豆科甘草属，以根和根状茎入药。
甘草在我国集中分布于三北地区(东北、华北和西北各省区)，而以新疆、内蒙古、宁夏和甘肃为中心产区。
随着药学及其相关学科以及科研设备的发展，甘草中主要含有的甘草酸、甘草次酸、黄酮、生物碱和氨基酸等化学成分，具有广泛的生物活性。
一、化学成分药用甘草质量与其化学成分的组成、积累变化有直接的关系。
先后从甘草属植物中提取、分离、鉴定了200多种化学成分，涉及甘草属植物10个种。
其中最重要并已证实具有生物活性的成分主要是甘草酸等三萜皂苷类、黄酮类、香豆素类、多糖、生物碱、氨基酸等。
三萜皂苷类化合物：甘草属植物中三萜皂类成分具有量高、生理活性强的特点，甘草的许多药理作用都与这类成分有直接关系。
至今在甘草属植物中已鉴定得到61种三萜类化合物，其中苷元45个。
这些三萜类化合物其苷元均为3β-经基齐墩果烷型化合物的衍生物；皂苷一般为3β-羟基上的氧苷，糖元多为D-葡萄糖酸或D-葡萄糖。
甘草酸一直被认为是甘草中最重要三萜类化合物，《中国药典》把甘草酸的量作为评价甘草药材及其制品质量的重要指标，通常要求不低于2％。
黄酮类成分：是近年来研究最活跃的天然活性成分之一，广泛存在于植物界中。
这类化合物的存在对植物生长、发育、开花、结果以及抵御异物的侵入起着重要的作用。
目前，从甘草属植物中已发现黄酮及其衍生物153种，它们的基本母核结构类型有15种，其中包括：黄酮、黄酮醇、双氢黄酮、双氢黄酮醇、查尔酮、异黄酮、双氢异黄酮、异黄烷、异黄烯等。
甘草多糖的分离提取及含量测定研究引言甘草（Glycyrrhiza）是一种广泛分布于亚洲和欧洲的植物，其根部含有丰富的生物活性成分。
其中甘草多糖是一种具有重要药理活性的化合物，已被广泛应用于中药领域。
为了深入研究甘草多糖的含量以及提取方法，本文进行了一系列实验并对结果进行了统计分析。
材料与方法材料•甘草根部•甘草提取液•离心管•蒸馏水•甘草多糖标准品•硫酸•硝酸•灰色硫酸铁•磷钼酸铵•高速离心机•紫外分光光度计方法1.甘草分离提取：–甘草根部切成小片，并用蒸馏水洗净。
–将甘草根部片放入离心管中，用甘草提取液浸泡。
–在室温下提取24小时后，将提取液离心分离。
–将提取液转移到干燥的离心管中，用高速离心机离心15分钟，取上清液备用。
2.含量测定：–取一定量的甘草多糖标准品和未知甘草多糖提取液，分别制备浓度为0.1 mg/mL的溶液。
–分别将甘草多糖标准品和未知提取液的溶液转移到离心管中。
–加入硫酸，硝酸和灰色硫酸铁，混匀，并在室温下反应20分钟。
–分别加入磷钼酸铵溶液并混匀。
–用紫外分光光度计测定吸光度，并根据标准曲线计算甘草多糖的浓度。
结果与分析在进行甘草多糖的分离提取实验后，我们成功得到了甘草提取液。
在含量测定实验中，我们利用甘草多糖标准品和未知提取液制备了浓度为0.1 mg/mL的溶液，并进行了一系列反应和测定。
通过紫外分光光度计测定吸光度并根据标准曲线计算甘草多糖的浓度，我们得到了未知提取液中甘草多糖的含量。
根据统计分析，我们可以得出以下结论：1.甘草多糖的分离提取方法相对简单且有效，能够得到高纯度的甘草多糖提取液。
2.通过含量测定实验，我们确定了未知提取液中甘草多糖的含量为X mg/mL。
结论本研究成功地进行了甘草多糖的分离提取实验，并通过含量测定方法测定了其含量。
我们得出的结论是未知提取液中甘草多糖的含量为X mg/mL。
这些结果对于进一步研究甘草多糖的药理活性及其应用具有重要意义。
参考文献[1] 张三, 李四. 甘草多糖的提取与含量测定方法研究[J]. 中草药, 20XX, 10(1): 123-135.[2] 王五, 赵六. 甘草多糖的生物活性及应用研究进展[J]. 中药学杂志, 20XX, 25(3): 456-468.。
甘草中甘草酸的提取实验报告甘草中甘草酸的提取实验报告概述：本实验旨在通过提取甘草中的甘草酸，了解其提取方法和纯化过程，以及甘草酸的性质和应用。
实验采用了溶剂提取法和结晶法，最终成功提取出纯度较高的甘草酸。
实验步骤：1. 材料准备：甘草、无水乙醇、石油醚、醋酸乙酯、无水乙醚、浓盐酸、浓氨水。
2. 提取甘草酸：将甘草研磨成粉末状，加入无水乙醇中，搅拌均匀，静置一段时间，过滤得到甘草提取液。
3. 萃取甘草酸：将甘草提取液与石油醚混合，振荡均匀，分液漏斗分离有机相和水相。
4. 纯化甘草酸：将有机相转移至蒸馏烧瓶中，加入醋酸乙酯，加热回流，蒸发醋酸乙酯，得到甘草酸溶液。
5. 结晶甘草酸：将甘草酸溶液冷却至室温，加入无水乙醚，搅拌均匀，静置结晶，过滤得到甘草酸晶体。
6. 纯化甘草酸晶体：将甘草酸晶体溶解于浓盐酸中，加热搅拌，过滤得到甘草酸纯品。
7. 验证甘草酸：将甘草酸溶解于浓氨水中，观察其颜色变化，测定其溶解度。
结果与讨论：通过以上实验步骤，成功提取出了纯度较高的甘草酸。
在提取过程中，溶剂的选择和比例对提取效果有重要影响。
无水乙醇是较好的提取溶剂，能够将甘草中的甘草酸有效溶解出来。
而石油醚和醋酸乙酯则用于萃取和纯化过程，能够去除杂质，提高甘草酸的纯度。
在结晶过程中，温度和溶剂的选择也是关键。
将甘草酸溶液冷却至室温后，加入无水乙醚，可以通过溶剂效应促进结晶的发生，得到较大且纯度较高的甘草酸晶体。
而浓盐酸则用于纯化甘草酸晶体，通过酸解结晶，去除杂质，得到纯净的甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性，广泛应用于中药和食品工业中。
它具有抗炎、抗氧化、抗溃疡、降血压等作用，可用于治疗消化系统疾病、心血管疾病等。
此外，甘草酸还可用于食品添加剂，具有增香、保鲜等功能。
结论：本实验成功提取出了纯度较高的甘草酸，并验证了其性质和应用。
通过溶剂提取法和结晶法，可以有效提取和纯化甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性和广泛应用前景，对于中药研究和食品工业具有重要意义。
甘草膏及甘草酸的提取方法
一、硫酸法提取甘草膏及甘草酸：
1.将甘草粉料放入陶瓷容器中，用硫酸液（浓度为0.1mol/L）充分混匀；
2.溶解后的混合液用紫外线波长为254 nm的功率恒定滤过，所滤液就是甘草膏；
3.将滤渣用水冲洗清洗干净；
4.把滤渣断重加水1~2倍，放入容器中加热蒸发至干，再细碎，加入硫酸液（浓度为0.1mol/L）混匀；
5.蒸馏出溶液，再滤过，得到滤液；
6.将滤渣断重加水反复提取，最后再用石蜡过滤，冷却醇可收集得甘草酸。
二、氢氧化钠溶液提取甘草膏及甘草酸：
1.将甘草粉料放入陶瓷容器中，加入氢氧化钠溶液（100g）；
2.溶解后的混合液用水洗滤拭干净，得到甘草膏；
3.将滤渣用无水乙醇提取；
4.把滤渣断重加水放入容器中加热蒸发至干，再细碎，加入氢氧化钠溶液（50g）混匀，放入容器；
5.蒸馏出溶液，再滤过，得到滤液；
6.将滤渣断重加水反复浸提，每次最后用石蜡过滤，冷却醇可收集得甘草酸。
甘草酸的生产流程
甘草酸是从甘草根中提取出来的一种药用成分，具有抗炎、抗过敏、抑制免疫和肝保护等功效。
以下是甘草酸的生产流程：
1. 采集甘草根，削去表皮、根须和泥土，洗净后晾干备用。
2. 将甘草根研碎成粉末，加入水中浸泡，浸泡时间为6-8小时。
3. 将浸泡后的甘草根取出，进行水蒸气蒸馏，得到甘草酸的粗提液。
4. 粗提液经过酸碱中和、反复结晶和洗涤等多个步骤，得到纯度高的甘草酸晶体。
5. 最后，对甘草酸晶体进行干燥处理，即可得到成品甘草酸。
以上就是甘草酸的生产流程。
在生产过程中，需要注意控制温度、pH值等参数，确保甘草酸的质量和纯度。
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甘草酸的提取和测定一．实验目的：1掌握干草的提取原理2熟悉皂甙的性质和测定方法二实验原理甘草酸是由甘草中提取。
甘草，又名美草、蜜甘、甜根子，多生长在我国西北、华北、东北地区，为多年生草本植物。
甘草酸作为其主要成分，随产地不同含量亦不同，一般在(4～14)％之内。
甘草酸是甘草甜味的有效成分，又名甘草甜素、甘草皂甙。
分子式42H62O16，相对分子质量822.92。
甘草酸为白色或淡黄色结晶型粉末，熔点220 ℃，有特殊甜味，其甜度约为蔗糖的250倍，溶于热水和热的稀乙醇，不溶于无水乙醇和乙醚。
甘草酸遇酸则沉淀，常利用此性质进行提取和精制。
为了使用方便，一般都把甘草酸制成水溶性的盐类，如甘草酸钠、甘草酸二钠、甘草酸三钠、甘草酸铵等。
方法：甘草酸在原料中以钾盐和钙盐的形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂溶解，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离的甘草酸。
三．实验步骤甘草酸的制备（1）粉碎：将干净干燥的甘草放入粉碎机中粉碎，过10目筛选，制得甘草粉。
（2）提取：称取一定质量的甘草粉放入反应器中，加入其5倍质量的水，在搅拌下于85 ℃以上加热回流2．5 h，过滤、滤渣再加3倍质量的水重复提取一次，合并泸液。
（3）浓缩：将甘草酸提取液用薄膜蒸发器进行真空浓缩，当滤液体积减少4／5时，趁热过滤。
（4）分离：在已经冷却的浓缩滤液中，加入其1／2容量的95%的乙醇，然后静止过夜，经过滤除去植物蛋白、多糖等沉淀物。
（5）沉淀：在经上述处理的甘草酸浓缩液中，用浓硫酸调其PH值，使甘草酸沉淀析出，然后进行离心分离，得粗甘草酸。
（6）重结晶：用(60～70) ℃的稀乙醇进行重结晶，减压过滤后得甘草酸湿品。
（7）干燥：将湿甘草酸放入真空干燥箱内，调节真空度，在(70～80) ℃温度下加热(40～60) min，即得干甘草酸。
（8）成品：将干燥的甘草酸粉碎，过筛，即得甘草酸成品。
甘草酸的定性和定量测定1 甘草酸的定性鉴别取样品4 mg，置白磁板上，加4%硫酸7滴，渐渐变成橙黄色至橙红色。
甘草有效成分（甘草酸，甘草次酸，甘草苷）的提取一、甘草酸的提取：试剂：甘草粗粉，浓H2SO4，95%乙醇，80%乙醇，浓氨水，冰醋酸。
取甘草粗粉40g,加水煮沸2次(15倍,1.25h;12倍，1h),脱脂棉过滤，合并滤液，浓缩，冷却，搅拌下加入浓硫酸至不再析出甘草酸粘性沉淀为止（约PH=1）。
放置，倾出上清液，棕色粘性沉淀用水洗涤数次，60℃以下干燥，粉碎，即得甘草酸粗品，称重。
将甘草酸粗品称重后加3.5—4倍量95%乙醇浸泡0.5—1h，抽滤，滤渣加3倍量80%乙醇回流1—2h，滤液冷却后加浓氨水（边加边搅拌）调至弱碱性（PH=8），减压回收乙醇至糖浆状，趁热加入等体积冰醋酸浸泡洗涤，放冷，析出结晶，过滤，即得甘草酸单铵盐粗品。
称重后，用70—80%乙醇重结晶，即得甘草酸单铵盐纯品，称重，得率。
二、甘草次酸的提取：试剂：5%H2SO4，氯仿，乙醇。
取甘草酸单铵盐，加5%H2SO4，加热10h,抽滤，水洗至中性，干燥，即得白色甘草次酸粗品，加热氯仿溶解，趁热过滤，所得滤液放冷，通过AL2O3柱，用氯仿洗脱，得甘草次酸粗品，加乙醇重结晶，得甘草次酸结晶。
三、甘草苷的提取：试剂：70％乙醇，甲醇。
取干燥药材粗粉约lOg，精密称定，加10倍量70％乙醇，回流提取2次，每次3h回流提取，纱布过滤，将提取液倒入已恒重的蒸发皿中，水浴浓缩至干，再减压干燥至恒重，得浸膏。
精密称取甘草浸膏量的l／20置于25mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理30min，冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用045um的微孔滤膜过滤，即制得供试品溶液。
四、药典同时提取甘草酸和甘草苷：试剂：70％乙醇，取本品粉末（过三号筛）0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
甘草中甘草酸的提取实验报告
实验目的：了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
实验原理：甘草又名甘草根，是一种广泛使用的中草药。
其主要成分是甘草酸、甘草素、甘草皂苷等。
甘草酸是甘草的主要有效成分，具有降糖、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用。
该实验是利用无机酸法将甘草酸从甘草中提取出来。
实验步骤：
1.样品制备：取适量甘草，去除杂质后切碎成小片备用。
2.提取：将切碎的甘草用石英研钵研成粉末，加入适量无水乙醇，浸泡6小时后，过滤得到提取液。
3.提取液浓缩：将提取液加热至70℃左右，缓慢加入盐酸，使pH达到1左右，再继续加热浓缩。
4.结晶：将制得的浓缩液室温下静置冷却，过滤得到结晶固体，用少量无水乙醇反复洗涤，干燥后得到纯净的甘草酸。
实验结果：经过提取、浓缩和结晶得到了白色粉末状的甘草酸，对其进行紫外分光光度计检测其吸收峰在235nm处。
经过质谱实验表明，得到的结晶物是纯净的甘草酸。
实验讨论与分析：通过本实验我们可以了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
甘草酸是甘草中的主要有效成分，具有重要的药理作用。
本实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
不过，无机酸法提取时要注意浓
度和pH值的控制，以免影响提取效率。
同时，在结晶过程中还需要注意温度和过滤的方式和时间，以得到高纯度的甘草酸。
实验总结：本次实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
通过本次实验，我们了解了分离纯化技术的应用、掌握了无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作，同时也体验了一把科学实验并学到了新的实验技能。
甘草有效成分的提取纯化方法研究进展甘草为豆科(Zeguminosae)植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)、胀果甘草(Glycyrrhiza infIata Bat．)和光果甘草(Glycyrrhia glabra L．)的根及根茎，始载于《神农本草经》，列为上品，传统中医药认为它具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和药性的功效。
甘草中的化学成分比较复杂，主要有三萜皂苷类化合物(甘草酸、甘草次酸)、黄酮类化合物(甘草苷、异甘草苷)及甘草多糖等。
现代药理学实验表明黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌抗病毒等作用；甘草酸具有保肝和治肝、治疗肾病和心脏疾病、抗病毒、抗菌等作用；甘草多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免疫功能。
随着对甘草化学成分研究的不断深入，如何将有限的甘草资源分离纯化成更多、更纯的甘草有效成分具有广泛的经济效益和社会效益，受到越来越多国内外学者的关注，甘草有效成分的提取、纯化工艺已成为近年来的一个研究热点。
目前甘草有效成分提取、纯化方法很多，本文将有关其提取、纯化甘草有效成分的方法做一概述，为进一步研究甘草有效成分的提取、纯化工艺提供参考。
1提取方法1．1溶剂法1．1．1水提法水提取法是最原始，也是过去常用的提取甘草有效成分的一种方法，此法虽然对提取设备要求简单、操作简便，但提取得率较低，并且提取液存放易腐败变质，后续的过滤等操作困难、费时，原因可能是由于极性大的水作溶剂，易把蛋白质、糖类等易溶于水的成分浸提出来，因此也易霉变。
但如果需要提取多糖、苷类等极性大的成分时，因为此法溶剂价格低廉，仍为一种可取的提取方法。
1．1．2有机溶剂提取法有机溶剂提取法是提取甘草有效成分最常用的方法，由于其生产成本较低，设备简单，在工业中得到广泛应用。
该方法工艺简单，收率高，同时可以实现工业化生产，但容易造成环境污染以及产品中的有机溶剂残留，影响产品质量。
由于甘草的主要成分是黄酮类和三萜皂苷类，因此广泛用于提取甘草的有机溶剂主要有甲醇、乙醇、丙酮和氯仿。
甘草酸与甘草多糖的提取与测定摘要：甘草酸的提取是甘草开发和甘草应用的关键技术之一。
综述了甘草中有效成分甘草酸、甘草多糖的提取和测定方法的研究概况。
稀醇溶液对甘草酸的提取效果较好，添加稀氨水后可以提高甘草酸的提取收率，超声辅助提取可以提高并节约提取溶剂和提取时间。
因此，本次试验以甘草粉末为原料,乙醇与稀氨水作溶剂,用超声波辅助提取法提取甘草酸。
关键词：甘草酸甘草多糖超声提取测定1、前言甘草是蝶形花科（Fabaceae）、甘草属(Glycyrrhiza)植物，我国药典记载药用甘草有乌拉尔甘草、胀果甘草、光果甘草。
甘草地下部分是名贵中药材，地上部分是多年生牧草。
甘草具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性，适生性和抗逆性强，生命力旺盛，为干旱、半干旱地区重要的植物资源之一。
早在2000多年前，《神农本草经》就将其列为药之上乘，医药家陶弘景将甘草尊为“国老”。
甘草味甘、性平，有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒的功能，用于脾胃虚弱、中气不足、咳嗽气喘、解毒等病症。
现代研究表明，甘草还有肾上腺皮质激素样的作用，可治慢性肾上腺皮质机能低下症和胃、十二指肠溃疡，以甘草配伍的古方有“四君子汤”、“甘草甘姜汤”、“凉隔丸”、“复脉丸”、“甘草大枣汤”等，近年来又发现甘草可抗癌和防治艾滋病，又是预防和治疗SARS的复方组份之一。
甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)及甘草次酸(glycyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。
药理研究表明，甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用。
近年来，还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。
甘草酸作为其主要有效成分, 随产地不同含量亦不同,一般在(4～14)%之内，它属于三萜皂苷，甘草根及根茎含甘草甜素，为甘草酸的钾、钙盐。
甘草酸作为甘草的主要成分，质量分数一般在4%--14%之间。
甘草酸一般为白色或淡黄色的结晶型粉末。
熔点220，有特殊甜味，溶于热水或者热的稀乙醇，不溶于无水乙醇和乙醚。
2、实验部分2.1 实验材料2.1.1 实验药品与试剂0.5%氨水、10%乙醇、50%乙醇，70%乙醇、95%乙醇、2%氢氧化钠，5%盐酸，3.5mol /L硫酸、50%稀醇、葡萄糖标准品、70%硫酸、氨醇（氨—乙醇—水（0.5：10：89.5））。
2.1.2 实验器材实验室台式超声、FW177型中草药粉碎机、旋转蒸发仪、电子天平、HH-Z型数显恒温水浴锅、电热恒温干燥箱、循环水式真空泵、722S可见光分光光度计、80目尼龙筛。
烧杯、玻璃棒、容量瓶（10ml、50ml、100ml）、吸量管、胶头滴管、试管2.1.3 原料经过前期加工的甘草粉末2.2 实验过程2.2.1 粉碎选用优质市售甘草，采用中草药粉碎机将其粉碎成粉末。
2.2.2 超声提取甘草酸用电子分析天平准确称取30．00 g、过80目尼龙筛的甘草粉末于锥形瓶中,加入的提取液，即氨性醇溶剂（氨水浓度(V/V)为0.5%,乙醇浓度(V/V)为(50%)）,料液比为1:20，超声30min，再将其残渣用相同方法进行第2次提取，此时溶剂和时间变为原来的2/3，即加入140ml的氨醇，超声30min。
分开收集上清液和沉淀渣籽并记录两次收集的滤液体积。
将两次的收集提取液放于试剂瓶中，静置24小时，用于测定甘草酸的浓度计提取率。
2.2.3 测定将收集的提取液置于旋转蒸发仪中，60℃减压浓缩，浓缩体积为68ml。
提取液摇匀，准确移取0.1ml的提取液转移到25ml容量瓶中，用70%乙醇定容，静置20min后，于254nm处测定吸光度。
2.2.4 标准曲线的制作精密称取甘草酸标准品10.00mg，置于10mL容量瓶中，加70%乙醇溶解定容。
精密吸取0.50mL，0.75mL， 1.00mL，1.25mL，1.50mL，分别置于25mL容量瓶中，加70%乙醇摇匀，定容，静置20min，在波长254nm处测定吸光值。
以浓度x(mg/mL)为横坐标，吸光度y为纵坐标绘制标准曲线，计算出回归方程。
2.2.4.1 标准曲线编号0 1 2 3 4 5 吸光度0 0.2731 0.3899 0.4936 0.5865 0.7336 浓度mg/ml 0 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06甘草酸标准曲线y = 11.866x + 0.0172R 2 = 0.995400.10.20.30.40.50.60.70.800.010.020.030.040.050.060.07甘草酸浓度 mg/ml 吸光度 2.2.5 实验结果样品甘草酸的吸光度： 序号一 二 三 四 平均 吸光度 0.625 0.630 0.630 0.633 0.6295 根据回归方程：y=11.866x+0.0172 可得：x=0.0516样品甘草酸的浓度为：0.0516mg/ml2.2.6 甘草多糖的提取称取50g 甘草残渣，置500ml 锥形瓶中，用体积分数80%乙醇187.5ml 于35kHz 超声提取30min ；过滤，再加水31.25ml ，重复提取1次，合并2次水提液，离心；用旋转蒸发仪80℃减压浓缩25~31.25ml ，加入5倍体积无水乙醇沉淀，静置过夜，下层沉淀用10000r/min离心机离心5min,倒掉上清液，将所得沉淀在干燥箱中进行24h的干燥，得甘草多糖，并用电子天平称量，质量为0.0345g。
2.2.7 甘草多糖标准曲线：用葡萄糖绘制标准曲线精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。
以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。
2.2.7.1 甘草多糖标准曲线编号0 1 2 3 4 5 6 7吸光度0.0000 0.06270.15140.21020.31540.42930.53420.6015取液体积0 0.4 0.8 1.2 1.6 2 2.4 2.8 浓度0 0.008 0.016 0.024 0.032 0.04 0.048 0.056葡萄糖标准曲线y = 11.171x - 0.0247R 2 = 0.9923-0.10.00.10.20.30.40.50.60.700.010.020.030.040.050.06葡萄糖浓度mg/ml 吸光度2.2.8 样品甘草多糖含量测定准确称取干燥的甘草多糖样品20mg,置于50 mL 容量瓶中定容,吸取样品溶液1 mL 于试管中,然后按标准曲线制备步骤操作,测定样品的吸光度。
2.2.9 实验结果经测定，甘草多糖的吸光度为：0750。
由回归方程y=11.171x-0.0247可得甘草多糖的浓度为：0.069mg/ml.2.3 实验结论经本实验可得，样品甘草酸浓度为0.0516mg/ml 。
；其中可溶性甘草多糖的浓度为0.069mg/ml 。
2.4 实验误差分析a:在实验过程中由于称量等方面所造成的误差。
b:提取时间太短，造成甘草酸与甘草多糖提取不充分，造成实验误差。
3. 实验感悟俗话说，万事开头难。
第一次自己设计大实验，难度对我们来说是不言而喻的，所以我们首先需要学会搜查和阅读资料，如果不然，我想我们是不可能将实验进行下去的。
对于我们接触的许多东西，我们可能没有学过，甚至没有见过，我们需要学会从各种渠道搜集这个方面的知识，去学习它，知道怎么应运它。
其次，我们在实验过程中要报以严谨的科学研究的态度，否则我们实验的意义就会荡然无存。
另外，对于实验过程中碰到的问题要冷静的思考，选择最佳的实验途经。
而且，认真思考后再做实验，会让我们少走很多弯路，避免浪费时间。
总之，从这次实验中我学到了较之以前实验中更多的东西，不只是学校了基本的实验操作技能，更让我学会了思考。
可以这样说，以前我基本是用手做实验，老师怎么说就怎么做，这次实验是用脑加手做，不仅锻炼了自己的动手能力，更通过实验开发了我的大脑。
不仅如此，这次实验还锻炼了我们团队协作的能力。
更让我意识到我们所学的东西都要付诸实践，不然所学的都是空谈。
另外，要感谢王老师给我们的机会，而且帮助我养成了很多好的实验习惯，教会我在以后学习，工作和科研方面应该如何去做，所有的一切都会让我受益终生的。
所以，在此我对老师表示感谢，而且在这次设计试验中我们组都积极参与，合作愉快。
我这次的团体的自主设计实验后，以后再碰上类似的实验时我不会表现得措手不及，我会总结这次实验的经验教训，我相信我一定能做的更好的！4. 参考文献[1] 王照兰，杜建材，于林清等.甘草的利用价值、研究现状及存在的问题[J].中国草地，2002， 24（1): 73.[2] 侯长军，方艾权.甘草酸提取的分数维数研究[J].天然产物研究与开发，2003，15（4）：310-312.[3] 谢果, 霍丹群．超声波法从甘草中提取甘草酸的工艺研究[J].食品工业科技，2002，23（4)： 42-44．[4] 王巧娥, 沈金灿,于文佳等.甘草中甘草酸的微波萃取[J].中草药, 2003, 34（5): 26.[5] 崔杏雨，崔健．甘草酸制备新工艺的研究[J].太原理工大学学报，2001，3（3):271-273.[6] 张继，姚健，丁兰.甘草的利用研究进展[J].草原与草坪, 2000, 89（2): 12.[7] 安建忠，许志惠．新技术新方法在中草药提取方面的应用[J].时珍国医国药，2001, l2（5)：465-467．[8] 潘学军, 刘会洲, 贾光和等.从甘草中提取甘草酸不同提取方法的比较[J].过程工程学报, 2001, 1（1): 102.[9] 李巧玲, 周明华, 陈俊南.超临界流体萃取在甘草酸分析中的应用[J].分析测试学报, 1998, 17(1): 37.[10] 冯斯婷，唐其柱，易方方.甘草酸提取纯化现状[J].中国药师，2006，9（1): 61-63.甘草酸与甘草多糖的提取学院：生物科学与工程专业：食品科学与工程姓名：熊一学号：20103861 指导老师：王薇日期：2012/5/7。
