病理科开展免疫组化抗体作用使用范围
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病理科免疫组化在临床上得应用及其意义免疫组化技术就是以免疫学得抗原抗体反应为其理论基础发展起来得一门方法学,在生物学领域尤其就是在医学得基础与临床研究中发挥重要得作用,对疾病尤其就是肿瘤得诊断、鉴别诊断及发病机制得研究提供了强有力得手段、免疫组化技术就是20世纪70年代初Sterb Berger 在酶标法得基础上发明得,80年代在外国开始应用于临床研究与诊断,90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例得诊断与鉴别诊断。
随着新技术得不断发展,抗体种类从研发开始得十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研得各个领域,我国在临床病理诊断上可用抗体293种。
由于抗体较昂贵,所以各院根据活检量与病种不同选择不同得抗体,这些抗体对大部分疑难病例得诊断起到重要得辅助作用、对病人得预后及指导治疗具有重要得意义。
一、目前常用得抗体分四大类1。
上皮性标记物:CKhigh(AE3), CK low,CK-pan,CK19,CK7, CK20,EMA,CEA,-CA 15-3,SCLC , E—Caldeherin,CA125, Tg(甲状腺球蛋白) ,TTF—1ﻫAFP。
这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于上皮组织,如果就是恶性肿瘤,就就是癌2ﻫ.间叶组织标记物:SMA ,Desmin,Vimentin,Lysozyme,AACT, CD68 MyoD1,CD117,这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于间叶组织,如果就是恶性肿瘤,就就是肉瘤、3ﻫ、神经及神经内分泌标记物:CgA ,Synaptophysin,NSE,S-100:NF (神经纤维丝蛋白),GFAP,CD99,CD56、4淋巴细胞标志物:T cell标记物:CD3, CD45RO, CD43,CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB , CD56 。
ﻫBcell标记物:CD—20 ,CD79a,CD23, CD10,Kappa ,Lambda CD21CD38 ,CyclinD1 ,Bcl—2。
免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(一)作者:联合病理转贴自:本站原创点击数:3833一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记·AE1/AE3最常用胞浆阳性着色,细丝状与低、中分子量角蛋白反应肝细胞为阴性,而胆管细胞阳性用于确定肿瘤为上皮源性·CAM 5.2胞浆阳性着色,细丝状包含CK8 和CK18,主要染色神经内分泌细胞和腺上皮,正常鳞状上皮阴性用于染小细胞癌用于胸腺瘤和梭形细胞癌用于肝细胞癌:AE1/AE3 - CAM5.2 +用于乳腺外的Paget’s病·CK34BE胞浆阳性着色鳞状上皮和鳞状细胞癌阳性用于染前列腺的基底层细胞,鉴别浸润癌用于染涎腺肿瘤的肌上皮用于染Mallory 小体·EMA细胞膜/细胞浆阳性着色上皮标记的替代品浆细胞阳性,很好的内对照用于染滑膜肉瘤 EMA +用于大细胞分化不良性淋巴瘤 EMA +用于L&H 富于淋巴细胞的结节状何杰金用于脑膜瘤 EMA+ AE1/AE3 –用于浆细胞瘤常常 EMA +·CK7 和CK20胞浆阳性着色两者联合应用可鉴别很多种癌的原发部位CK7 常常在胃肠道的癌为阴性CK20 只有胃肠道癌和Merkel 细胞癌阳性间皮细胞标记·Calretinin细胞核和细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需间皮强阳性,Sertoli和肥大细胞阳性用于鉴别间皮瘤(+)和腺癌(-),常加CEA用于鉴别梭形细胞间皮肉瘤(+)和其他的浆膜腔肉瘤(-)用于鉴别胸、腹水中的癌细胞和间皮细胞确定为间皮细胞,如大网膜内陷入的一团细胞或腺瘤样瘤神经元分化标记,如中枢神经细胞瘤帮助确诊心脏粘液瘤,几乎全为(+)白细胞标记·非何杰金淋巴瘤大致分类CD20 (L26),CD3怀疑T 细胞淋巴瘤者加UCHL-1(CD45RO)怀疑浆细胞瘤者LCA(CD45RB),CD79a, CD138小B 细胞淋巴瘤者,CD79a, CD43(MT1)·LCA (CD45RB)几乎所有的白细胞(+ )有些淋巴母细胞淋巴瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、外周T 细胞淋巴瘤(- )经典Hodgkin 的R-S 细胞(-)以往浆细胞瘤(-),现(+)HE 下明确的淋巴瘤不必要染LCAB细胞相关标记·CD20 (L26)胞膜阳性着色,浆阳者不可判为阳性各阶段B 细胞阳性,除了原始的前B 和非常成熟的浆母、浆细胞用于染B 细胞淋巴瘤,除了小细胞、淋巴母细胞(不恒定)和浆细胞瘤(常-)梭形细胞胸腺瘤(+)·CD79a胞浆阳性着色,有/无核周聚集全B 细胞标记,包括浆母和浆细胞标记滤泡中心比mantle和滤泡间B要弱比CD20 贵得多用于鉴别淋巴母细胞淋巴瘤/白血病弥漫性小B 细胞淋巴瘤/白血病浆细胞瘤(常CD20–而CD79a >50% +T细胞相关标记·CD3 (polyclonal)胞浆阳性着色,核周凝聚,有时高尔基体也阳性极好的T 细胞标记,与CD43 不同,髓系细胞和组织细胞不着色极好的T 细胞和NK 淋巴瘤标记,虽然有些大细胞型T 细胞淋巴瘤阴性·CD43 (MT1)只有膜阳性才能判为阳性T 细胞、T 细胞淋巴瘤、真性组织细胞肿瘤、粒细胞肉瘤阳性一部分浆细胞瘤阳性小B 细胞淋巴瘤阳性,这一特点可辅助表明增生的小淋巴细胞为肿瘤性!EBV 感染的B 细胞阳性·UCHL-1(CD45RO)细胞膜阳性着色,有时Golgi 阳性,弥漫性胞浆阳性者非真阳性阳性:正常/ 反应性的T 细胞,组织细胞、粒细胞肉瘤和T 细胞淋巴瘤罕见情况下B 细胞淋巴瘤阳性·CD5细胞膜阳性着色T 细胞阳性,但极少B 细胞也阳性尤其用于慢性淋巴细胞性白血病和Mantle 淋巴瘤,而MALToma 和Marginal Zone 淋巴瘤阴性用于鉴别胸腺癌(CD5+)和其他癌瘤与激活相关的标记·CD30 (Ki-I,Ber-H2)只有膜染色和Golgi体染色才是真阳性正常淋巴滤泡周单个的大细胞为阳性激活的淋巴细胞阳性:如传单、弓浆虫感染、Kikuchi淋巴结炎等、浆细胞也阳性用于大细胞分化不良性淋巴瘤用于一些传统的大细胞淋巴瘤外周T和B细胞淋巴瘤中的一些单个大细胞经典何杰金病中的R-S细胞,但非L&H细胞淋巴瘤样丘疹病等皮下CD30+的淋巴增生疾病一些浆细胞瘤胚胎性癌组织细胞标记·CD68(PGM1)胞浆内颗粒状阳性着色较好的组织细胞和单核细胞(包括浆样单核细胞)及其肿瘤的标记有些非组织细胞也可阳性,包括:肾小管、粒细胞肉瘤、恶黑、血管瘤样恶纤组等髓系细胞标记·Myeloperoxidase胞浆阳性着色,常呈颗粒状髓系细胞及其肿瘤的高度特异且敏感的标记奇怪的是在Kikuchi 淋巴结炎和狼疮性坏死性淋巴结炎中,其中的组织细胞myeloperoxidase 也为阳性与淋巴瘤相关的标记·ALK-1(Anaplastic lymphoma kinase-1)胞核+ 胞浆阳性着色用于大细胞分化不良性淋巴瘤,不能证实ALK1+ 与良好预后有关用于一种罕见的大B 细胞细胞瘤,ALK1 阳性而CD20 阴性,但IgA 阳性·Bcl-2在核周围区阳性着色在正常淋巴结,生发中心阴性,但mantle 和滤泡间细胞强阳性在滤泡性淋巴瘤,(>80% 病例)生发中心强阳性,阴性不能排除滤泡性淋巴瘤也用于鉴别单核样B 细胞增生(- )和单核样B 细胞淋巴瘤(+ )有人用于诊断孤立性纤维性肿瘤·Cyclin-D1核阳性着色主要用于Mantle 区淋巴瘤,几乎所有病例均为阳性,有些可能为弱阳性与分化阶段相关的标记·Tdt细胞核阳性着色不成熟的T 或B 淋巴细胞标记,前T/ 前B 细胞用于诊断淋巴母细胞淋巴瘤/ 白血病诊断胸腺瘤(富于不成熟的T 细胞)肌原性标记·Desmin胞浆阳性着色平滑肌/ 骨骼肌及其肿瘤的良好标记,肌纤维母细胞有时也阳性,但肌上皮阴性一些间皮瘤阳性desmoplastic small cell tumor·MSA(Muscle-specific actin)胞浆阳性着色极好的肌源性标记用于·平滑肌、骨骼肌及其肿瘤·肌纤维母细胞及相关肿瘤(恶纤组、结节性筋膜炎等)·肌上皮及其肿瘤·血管周细胞肿瘤·一些间皮瘤血管原性标记·CD31细胞膜阳性着色内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性有时浆细胞/ 浆细胞瘤阳性主要用于诊断血管性肿瘤:特异且敏感用于识别骨髓中不正常的巨核细胞用于巨核细胞系白血病·CD34细胞膜+/-细胞浆阳性着色血管内皮/巨核细胞/血小板 +很好的血管标记,但特异性差多种肿瘤CD34阳性,包括:CD34阳性的肿瘤·a) Some myeloid leukemias (especially the primitive ones). ·b) Vascular tumors·c) Solitary fibrous tumor; angiomyofibroblastoma·d) Hemangiopericytoma·e) Dermatofibrosarcoma protuberans·f) Gastrointestinal stromal tumor·g) Mammary myofibroblastoma·h) Epithelioid sarcoma·i) Spindle cell lipoma·j) Scattered cells in peripheral nerve sheath tumors·k) Megakaryoblastic leukemia血管原性标记·Factor VIII related antigen (F-VIII)胞浆阳性着色,常为颗粒状内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性主要用于血管原性肿瘤特异性好,敏感性差神经、神经内分泌及神经外胚层细胞浆阳性着色是神经和神经内分泌细胞很好的标记特异性和敏感性均好·Paraganglioma ·Pheochromocytoma ·Neuroblastoma·Olfactory neuroblastoma ·Ganglioneuroma ·Ganglioneuroblastoma·PNET·Parathyroid tumor·Medullary thyroid carcinoma ·Islet cell tumor·Pituitary tumor·Carcinoid tumor·Small cell carcinoma·Merkel cell carcinoma ·Thyroid follicular cell tumor ·Adrenocortical tumor·CgA胞浆内颗粒状着色染神经内分泌细胞的分泌小泡,因此神经元和神经节细胞阴性神经内分泌非常特异性指标,敏感性较差,阳性信号取决于瘤细胞内神经内分泌颗粒的多少小细胞癌:信号少类癌、Merkel细胞癌、甲状旁腺腺瘤等强阳性神经性肿瘤可阳可阴·GFAP (Glial fibrillary acidic protein )胞浆阳性着色星形细胞、室管膜细胞阳性,一些肌上皮阳性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤阳性,少突胶质细胞瘤常阴性;一些外周神经鞘瘤可阳性涎腺多形性腺瘤常可阳性乳腺的肌上皮有时也可阳性·S-100细胞核+/-细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需用处非常多:·glial cells, Schwann cells (astrocytoma, schwannoma, neurofibroma, malignant peripheral nerve sheath tumor). In benign nerve sheath tumors, almost all the tumor cells are positive; while in malignant peripheral nerve sheath tumor, usually only a fraction of the neoplasticcells are S100 positive. Note that S-100 protein antibody can also highlight the sustentacular cells that envelope the islands of tumor cells in paraganglioma and olfactory neuroblastoma.S-100·Melanocytes and nevus cells (Melanocytic nevus, malignant melanoma, malignant melanoma of soft parts/clear cell sarcoma of tendons and aponeurosis)·Myoepithelial cells·Fat cells (Lipoma, liposarcoma)· Cartilage cells (Chondroma, chondroblastoma, chondrosarcoma·Histiocytes of sinus histiocytosis with massive lymphadenopathy (Rosai-Dorfman disease)·Interdigitating dendritic cells and Langerhans cells (Langerhans cell histiocytosis, interdigitating dendritic cell sarcoma). Juvenile CML is often S-100 positive·HMB45胞浆内颗粒状着色恶性黑色素瘤和交界痣,而正常的痣细胞常为阴性肾和肝的血管平滑肌脂肪瘤、肾被膜瘤肺的淋巴管肌瘤病、糖瘤·Melan-A胞浆内颗粒状着色阳性表达的细胞包括:黑色素细胞、肾上腺皮质、性索(Leydig, granulosa)用于:·黑色素瘤·支持- 间质细胞瘤和颗粒细胞瘤·血管周细胞瘤·肾上腺皮质肿瘤与乳腺癌相关的抗体·ER细胞核阳性着色·PR细胞核阳性着色·Ki-67细胞核阳性着色G1, S, G2 and M phases of the cell cycle 阳性Ki-67 index: 阳性细胞所占比例·P53细胞核阳性着色正常细胞因P53蛋白很快降解故阴性,而恶性肿瘤中因突变或存在使P53稳定的因素,故可阳性·C-erBb2细胞膜阳性着色分级Herceptine 治疗还用于鉴别乳腺内/外的Paget’s病和恶黑用于乳腺内/外Paget’s病和表皮的一些透明细胞(Toker cell)用于显示Paget’s病切缘是否干净激素类抗体·Thyroglobulin胞浆阳性着色极好的甲状腺滤泡上皮及肿瘤的标记,分化极差的甲状腺癌可阴性·Calcitonin胞浆阳性着色极好的C细胞及髓样癌的标记,如CgA+则更支持髓样癌个别喉的类癌+·PTH (parathyroid hormone)胞浆阳性着色甲状旁腺细胞及其肿瘤的标记·垂体腺瘤类激素胞浆阳性着色GH,PRL,TSH,FSH,ACTH,LH·HCG胞浆阳性着色极好的滋养叶细胞及肿瘤的标记:绒癌、胚胎性癌等一些胃和膀胱的癌也可阳性·PSA胞浆阳性极好的前列腺癌标记有时膀胱和尿道周的癌也可阳性·TTF-1(thyroid transcription factor-1)单纯的核阳性着色正常情况下只有甲状腺和肺泡上皮细胞阳性,大的支气管上皮阴性在肿瘤中:主要用于确定肿瘤来源于肺或甲状腺·AFP胞浆+/- 核阳性成熟组织中阴性,而胚胎性肝、胃肠道、神经上皮成分中+用于诊断肝细胞癌和肝母细胞瘤用于诊断胚胎性癌和卵黄囊瘤用于显示不成熟畸胎瘤中的神经上皮成分其他抗体·CD99细胞膜阳性着色正常存在于不成熟T细胞(胸腺细胞)和胰岛细胞用于T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病胸腺瘤(淋巴组织成分+)尤文氏肉瘤和PNET间叶性软骨肉瘤颗粒细胞瘤和支持细胞(Sertoli)瘤孤立性纤维性肿瘤其他:滑膜肉瘤、血管周细胞瘤、脑膜瘤等·CD117 (c-Kit)胞膜阳性着色+/- 胞浆阳性,胞膜为必需正常时胃肠道的Cajal 细胞、黑色素细胞、肥大细胞阳性用于诊断GIST用于诊断mastocytosis用于诊断精原细胞瘤/ 无性细胞瘤·Inhibin胞浆内,常呈颗粒状着色用于诊断性索间质肿瘤:颗粒细胞瘤、Sertoli-Leydig细胞瘤用于诊断肾上腺皮质肿瘤·BRST-2(Gross cystic disease fluid protein-15, GCDFP-15)用于确定肿瘤来源于乳腺少部分汗腺、涎腺或其他肿瘤也可+·CEA细胞膜+/- 细胞浆阳性着色几乎所有的腺癌为阳性用于诊断乳腺/ 乳腺外的Paget’s 病,+ 而恶黑-显示涎腺或汗腺肿瘤中的腺体成分用于鉴别腺癌和间皮瘤用于诊断甲状腺髓样癌,尤其是小细胞型用于诊断肝细胞癌前列腺癌的免疫组化表型·AE1/AE3 +·PSA +·P504S +·CK34BE -·P63 –免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(二)作者:联合病理整理转贴自:中杉生物公司交流资料点击数:4071二、免疫组化在病理诊断中的应用(一)免疫组织化学在外科病理诊断中的重要性免疫组织化学染色技术发展到今天,已经成为外科病理诊断中必不可少的手段,如同组织化学染色一PAS、网染等一样,同时也是提高诊断水平、为临床提供诊疗依据,预测治疗效果和预后,减少医疗纠纷的重要手段。
免疫组化在病理诊断中的应用自1854年德国病理学家Rudolf Virchow(1821~1902)创立“细胞病理学”,百余年来病理学进展很快,但在应用和解释形态学标准时仍有困难,单靠组织切片检查有时并不能作出全面的诊断,随之发展了特殊染色和各种组化技术,为病理诊断提供了新的参考依据。
其中,免疫组化技术在病理诊断中发挥着极为重要作用。
免疫组化是免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)的简称,它是利用抗原抗体的特异性反应来定位组织和细胞中某种化学成分的一种组织化学方法。
免疫组化能将形态学改变与功能和代谢变化结合起来,一方面保持了传统形态学对组织和细胞的观察客观、仔细的优点;另一方面克服了传统免疫学反应只能定性和定量,而不能定位的缺点。
免疫组化技术以其特异性强、灵敏度高、定位准确等特点,已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。
那么,免疫组化在临床病理诊断中有哪些应用呢?我们下面加以详细说明:1、对“未分化”恶性肿瘤的分类如在HE切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞起源的特征,不能分类,但临床上又必须根据肿瘤的种类作出治疗与预后判断,这种情况下需要应用免疫组化技术。
通过特定抗体标记出细胞内相应抗原成分,以确定细胞类型。
如角蛋白是上皮性标记,前列腺特异性抗原仅见于前列腺上皮,甲状腺球蛋白抗体是甲状腺滤泡型癌的敏感标记,而降钙素抗体是甲状腺髓样癌的特有标记。
在进行免疫组化前病理医生应根据肿瘤发生部位、组织学的蛛丝马迹及临床特征正确地选择抗体。
有时这些抗体用于这种目的诊断中并不完全理想,如分化差的癌可显示Vimentin或S-100蛋白,有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原,一些黑色素瘤表现出角蛋白,除黑色素瘤以外的一些肿瘤有时也可以表达HMB-45,这就强调了在肿瘤诊断中应使用一组抗体而不是单个抗体。
2、辨认细胞产物利用某些细胞产物为抗原制备的抗体,可作为相应产物的特殊标记,如内分泌细胞产生的各种激素,大多数可用免疫组化技术标记出来,据此可对内分泌肿瘤作功能分类,检测分泌异位激素的肿瘤等。
免疫组化的临床应用一、什么是免疫组化?免疫组化是一种通过特异性抗体与细胞或组织中的特定分子结合来检测蛋白质表达的技术。
它可以用于确定肿瘤类型、诊断某些感染性疾病、评估免疫系统功能等。
二、免疫组化的原理免疫组化的原理是利用抗体与抗原间的特异性结合来检测蛋白质表达。
首先,需要制备特异性抗体,然后将其标记上荧光素或酶等物质,使其能够被检测出来。
接着,将标记好的抗体与待检测样本中的蛋白质结合,形成抗原-抗体复合物。
最后,在显微镜下观察样本中是否有荧光素或酶反应产生,从而确定蛋白质是否存在。
三、免疫组化在肿瘤诊断中的应用1 .确定肿瘤类型在肿瘤诊断中,常常需要确定肿瘤类型以制定治疗方案。
通过对肿瘤标本进行免疫组化分析,可以检测出肿詹细胞表面或内部的特定蛋白质,从而确定肿瘤类型。
例如,对于淋巴瘤的诊断,常常需要检测CD20、CD3等标志性分子。
2 .判断预后免疫组化还可以用于判断肿瘤患者的预后。
例如,在乳腺癌中,HER2 阳性患者比HER2阳性患者更容易出现转移和复发。
因此,通过检测HER2的表达情况,可以预测患者的预后。
四、免疫组化在感染皎病诊断中的应用1 .检测细菌感染免疫组化可以用于检测细菌感染。
例如,在肺结核的诊断中,可以通过检测结核分枝杆菌特有的抗原来确定是否感染。
2 .检测病毒感染免疫组化还可以用于检测病毒感染。
例如,在乙型肝炎中,可以通过检测HBsAg和HBeAg来确定是否感染。
五、免疫组化在评估免疫系统功能中的应用1 .检测T细胞T细胞是免疫系统中的重要组成部分,参与体内的免疫反应。
通过检测CD4和CD8等标志性分子,可以评估T细胞的数量和功能状态。
2 .检测B细胞B细胞是免疫系统中产生抗体的主要细胞。
通过检测CDI9、CD20等标志性分子,可以评估B细胞的数量和功能状态。
六、免疫组化的优缺点1.优点(1)高度特异性:免疫组化可以针对特定蛋白质进行检测,具有高度特异性。
(2)高灵敏度:免疫组化可以检测非常小的蛋白质量级。
病理科开展免疫组化抗体目录
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病理科开展免疫组化抗体作用/使用范围
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达。
Melan-A ---此抗体可以特异性识别存在于胎儿和新生儿黑色素细胞核交界痣上的一种抗原,而内皮痣及正常成人的黑色素细胞阴性表达,可用于黑色素瘤及具有黑色素细胞分化的其他肿瘤的诊断,同窗情况下,上皮性肿瘤、淋巴瘤、
神经胶质瘤和间质来源的肿瘤阴性表达。
HMB45鼠
抗人黑
色素瘤
HMB45可特异性识别交界痣、兰痣细胞及黑色素瘤细胞,而与正常黑色
素细胞、皮内痣细胞及非黑色素细胞不反应。
常用于黑色素瘤及伴有黑色素
细胞分化倾向的肿瘤的诊断。
M
elano
ma
Insuli n
胰
岛素
胰岛素是胰岛ß细胞分泌的一种激素,可以减低血糖浓度。
此抗体和人胰岛素反应,并与大多数哺乳类动物的一套苏有交叉反应,主要用于胰岛细
胞瘤的功能性分类研究。
Inhibi n
抑
制素ɑ
抑制素是由ß亚单位所组成的异二聚体糖蛋白类激素,属于转化生长因子ß(TGF-ß)超家族成员,可以抑制垂体促性腺激素的合成和分泌。
此抗
I
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免疫组化检测标准处理# 免疫组化检测标准处理## 一、前言嘿,朋友们!咱们今天来说说免疫组化检测这个事儿。
你看啊,在医学研究和疾病诊断领域呢,免疫组化检测就像是一个超级侦探。
它能帮助医生和研究人员发现细胞里面那些小小的变化,比如说哪里出现了癌细胞,或者某种特定的蛋白质是怎么分布的。
这个检测这么重要,要是没有个标准来规范它,那就像一群人在黑暗里摸索,乱了套了。
所以呢,咱们今天就来好好讲讲免疫组化检测的标准处理,让大家心里都有个底儿。
## 二、适用范围(一)病理诊断在医院里,病理科的医生经常会用到免疫组化检测。
比如说,有个患者的肿瘤组织看起来很复杂,医生很难判断它到底是良性的还是恶性的。
这时候,免疫组化检测就上场了。
这个标准就适用于这种情况,它能确保检测结果准确可靠。
就像给医生的诊断配上了一副高清眼镜,能让医生清楚地看到肿瘤细胞的“真面目”。
(二)疾病研究在科研人员研究疾病的时候,也离不开免疫组化检测。
例如研究某种新型疾病,想要了解病毒对人体细胞的影响,免疫组化检测可以显示出病毒感染后细胞内蛋白质的变化情况。
这个标准适用于从样本采集到最终结果分析的整个研究流程,就像一个路线图,让科研人员不会在研究的过程中“迷路”。
(三)药物研发制药公司在研发新药的时候,也需要用到免疫组化检测来看看药物对细胞内特定靶点的作用。
这个标准能保证不同实验室、不同研究人员做出来的结果具有可比性。
就好比大家都按照同一个菜谱做菜,做出来的菜味道才能有个比较。
## 三、术语定义(一)抗原咱们可以把抗原想象成是身体里的一个小标签。
它是一种能够刺激机体产生免疫反应的物质,就像一个小信号,让免疫系统知道有外来的东西或者身体里不正常的东西存在了。
在免疫组化检测里,抗原就是我们要找的那个“小目标”,检测就是看这个“小目标”在细胞里的什么地方,有多少。
(二)抗体抗体呢,就是身体的免疫系统为了对付抗原产生的一种特殊蛋白质。
你可以把它当成是专门针对抗原这个“小目标”的小卫士。
免疫组化抗体应用免疫组化抗体应用一、淋巴造血系统疾病诊断常用抗体1、ALK-1 阳性定位:细胞核\细胞浆\细胞膜阳性对照组织:间变性大细胞性淋巴瘤用途:ALK-1正常淋巴细胞完全阴性,间变性大细胞性淋巴瘤:CD30+、EMA+、ALK-1+\-2、Bcl-2 阳性定位:细胞浆\细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:主要应用在滤泡性淋巴瘤(Bcl-2+)的诊断与反应性滤泡增生(Bcl-2-)的鉴别诊断3、Bcl-6 阳性定位:细胞核阳性对照组织:淋巴结用途:在淋巴瘤中,下列情况显示Bcl-6阳性反应:a滤泡性淋巴瘤b弥漫大B细胞性淋巴瘤c伯基特淋巴瘤d一些间变性大细胞淋巴瘤e滤泡性T细胞淋巴瘤4、CD2 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:应用于T淋巴细胞淋巴瘤的诊断5、CD3 阳性定位:细胞浆阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:T淋巴细胞淋巴瘤、NK细胞淋巴瘤阳性6、CD4 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:辅助T淋巴细胞抗原,辅助\诱导T淋巴细胞、髓细胞及组织细胞染色阳性7、CD5 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:正常及胸腺T淋巴细胞以及未成熟阶段的B淋巴细胞阳性;通常用在T淋巴细胞性淋巴瘤\白血病的辅助诊断标记物8、CD7 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:主要应用于T淋巴细胞瘤的诊断,在全分化的阶段T淋巴细胞、NK 细胞呈阳性表达9、CD8 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:胸腺用途:应用于外周T淋巴细胞淋巴瘤和脾脏的各种血管性疾病10、CD10 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:CD10阳性表达于以下类型的淋巴瘤:a滤泡性淋巴瘤b伯基特淋巴瘤c部分弥漫大B细胞性淋巴瘤d前驱B淋巴母细胞性淋巴瘤\白血病e滤泡性T细胞淋巴瘤11、CD15 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:霍奇金淋巴瘤用途:几乎所有的慢性髓性白血病(CML)CD15染色阳性,而急性淋巴细胞白血病(ALL)极少表达;经典型霍奇金淋巴瘤的HRS 细胞阳性,结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤阴性12、CD20 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:正常B淋巴细胞阳性;B淋巴细胞淋巴瘤、结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤阳性13、CD21 阳性定位:细胞膜阳性对照组织:淋巴结、扁桃体用途:是EB病毒受体及B淋巴细胞的重要标记物。
免疫组化技术在病理诊断中的作用发表时间:2019-08-15T11:06:49.553Z 来源:《中国医学人文》(学术版)2019年3月下第6期作者:李智泉[导读] 在现代科学飞速发展的时代,核酸分子的杂交技术有也有了巨大的突破,而使免疫组化变得更加强大,甚至到达了研究基因的科学水平。
四川省广安市武胜县人民医院病理科 638400什么是免疫组化?免疫组化是利用抗体与抗原的特异性的结合(少部分有非特异性结合),通过化学实验得出的反应促使抗体在显色剂作用下显现出不同的颜色,从而确定组织细胞内的抗原,对其结果进行研究,研究它的属性及定量等。
免疫组化方法的价值非常高,具有非常强的识别能力、对于抗原抗体的定位非常准确、特异性很强的诸多特点,还可以把功能性的研究、形态方面的研究巧妙地结合到一起,因为它的特殊性在很多方面都得到广泛的应用,比如医学方面的研究、生物学方面的研究等,这项技术都表现得非常出色[1]。
对于肿瘤来说,免疫组化的运用对于肿瘤的病理研究提高了一个新的水平,在免疫组化技术还没出现之前,对于肿瘤的诊断和肿瘤的分类仅仅停留于对于组织结构及细胞的研究水平,而现在有了免疫组化技术后,除了停留在组织学细胞的水平外,已经深入到分子免疫和生物化学的水平。
在现代科学飞速发展的时代,核酸分子的杂交技术有也有了巨大的突破,而使免疫组化变得更加强大,甚至到达了研究基因的科学水平。
在最近这十年时间,这项技术更是迅猛发展,对于现代的医疗和现代的临床研究来说非常的重要。
对于肿瘤和疾病的诊断、鉴别诊断,分类、分型、定性等都起着决定性的作用。
但是随着免疫标记物的增多,原来被定为特异性的标记物也出现了交叉反应和标记异常的情况,所以对于标记物的结果也不能绝对化,要结合其他检查合理的应用免疫组化技术。
一、免疫组化标记的形态和特征1、阳性标记色度的特征,免疫组化标记阳性的细胞时,着色的程度取决于细胞内抗原的含量是多少、细胞分布的密度、敏感性和标记的方法所决定[2]。
病理科免疫组化在临床上的应用及其意义病理科免疫组化在临床上的应用及其意义免疫组化技术是以免疫学的抗原抗体反应为其理论基础发展起来的一门方法学,在生物学领域尤其是在医学的基础和临床研究中发挥重要的作用,对疾病尤其是肿瘤的诊断、鉴别诊断及发病机制的研究提供了强有力的手段。
免疫组化技术是20世纪70年代初Sterb Berger在酶标法的基础上发明的,80年代在外国开始应用于临床研究和诊断,90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例的诊断和鉴别诊断。
随着新技术的不断发展,抗体种类从研发开始的十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研的各个领域,我国在临床病理诊断上可用抗体293种。
由于抗体较昂贵,所以各院根据活检量和病种不同选择不同的抗体,这些抗体对大部分疑难病例的诊断起到重要的辅助作用。
对病人的预后及指导治疗具有重要的意义。
一、目前常用的抗体分四大类1.上皮性标记物:CK high(AE3),CK low ,CK-pan,CK19,CK7,CK20,EMA,CEA,-CA15-3,SCLC , E-Caldeherin, CA125, Tg(甲状腺球蛋白) ,TTF-1AFP。
这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于上皮组织,如果是恶性肿瘤,就是癌2.间叶组织标记物:SMA ,Desmin,Vimentin,Lysozyme,AACT , CD68 MyoD1,CD117,这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于间叶组织,如果是恶性肿瘤,就是肉瘤。
3.神经及神经内分泌标记物:CgA ,Synaptophysin,NSE,S-100:NF (神经纤维丝蛋白),GFAP,CD99,CD56。
4淋巴细胞标志物:T cell标记物:CD3, CD45RO , CD43, CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB , CD56 。
B cell标记物:CD-20 ,CD79a ,CD23,CD10 ,Kappa ,Lambda CD21 CD38 ,CyclinD1 ,Bcl-2。
病理报告中的免疫组化到底有什么作用?俗话说:“金钱不是万能的,但没有钱是万万不行的。
”套用在病理学诊断上,可以说:“免疫组化不是万能的,但是没有免疫组化是万万不行的。
”现在的病理报告,特别是肿瘤的病理报告,没有几份没有进行免疫组化试验的,那么免疫组化到底有什么作用呢?请看专家们的解释免疫组化图片免疫组化报告现在,免疫组化基本在市级医院普及了,但应用的范围,或者说使用免疫组化抗体的种类还是有很大差别的。
对于免疫组化的重要作用,还没有受到足够的理解和重视,甚至至今还有人认为免疫组化可有可无,或者因为其他原因尽量少开或不开。
为此,本文把免疫组化的重要作用再梳理一遍。
01确定细胞类型利用细胞内某些特定成分制备的抗体,可以标记出细胞内的相应抗原成分,用以确定细胞类型。
如角蛋白是上皮细胞内的特有成分,可以作为各种上皮的广谱标记;甲状腺球蛋白是甲状腺滤泡上皮的特异成分,前列腺特异性抗原仅见于前列腺上皮,突触素用于识别神经细胞核神经内分泌细胞等。
02辨认细胞产物利用某些细胞产物作为抗原制备的抗体,可以作为相应产物的特殊标记。
如内分泌细胞产生的各种激素,大多可以用免疫组化技术标记出来,如降钙素是甲状腺滤泡旁细胞分泌的激素,可用于甲状腺髓样癌的诊断。
肝癌细胞产生的甲胎蛋白可用于诊断肝细胞癌等。
03了解分化程度大多数标记物都有其特定的分布部位,如上皮细胞膜抗原(EMA)着色部位在细胞膜上,但在差分化癌中癌细胞胞质亦可呈阳性;角蛋白的含量也与分化程度有关,低分化或未分化癌中角蛋白含量较少,染色亦较弱。
上皮细胞发生间充质转化,可表达间充质标记波形蛋白(Vimentin),而角蛋白和E-钙黏附素表达下降。
04鉴定病变性质淋巴结的反应性增生与恶性淋巴瘤不易鉴别时,可做T和B细胞标记,观察其数量与分布情况,如淋巴结结构破坏,且单一种细胞弥漫增生则可考虑淋巴瘤,并可借此区分T细胞性或B细胞性;上皮细胞异型增生如突破基底膜或破坏肌上皮细胞,则考虑为浸润性癌。
病理科展开免疫组化抗体目录AACT CK低分子量CD99PSA Hepa-1CD21 EMA CK高分子量CD117P63TdT CD23MCAE1/AE3(CK广谱)CD138P504S CyclinD1CD30CEA CK5CDX2Galectin-3D-40CD312NF CK5/6CA125CgA ALK CD34 Desmin CK7Calcitonin E-Cadherin OLIG2CD38 AFP CK8Calponin P120Napsin-A CD43 GFAP CK18Villin P53P16CD45RO PLAP CK19Vim ER Pax-5CD45 NSE CK20CD19-9PR MyoD CD561Bcl-2CD1аKi-67Glypican-3CD68 Bcl-6CD3ToPo-ⅡMUM-1CD79aMelan-A CD5EGFR Tg Actin(广谱)HMB45CD10VEGF TTF-1SMA Insulin CD15Her-2Syn Kappa Inhibin CD20S-100CR Lambda病理科展开免疫组化抗体作用/使用范围序抗体中文作用/使用范围备注号简称名称1.AACT抗胰糜AACT是一种丝氨酸蛋白酶克制剂,存在于大部分的组织细胞、巨噬细胞以及蛋白酶多种胃肠道和肺部肿瘤中,主要用于标记恶性纤维组织细胞瘤,可是在好多癌、瘤子和淋巴瘤中叶能够阳性反响。
2.EMA上皮膜EMA是一种400kDa糖蛋白,宽泛散布于各样上皮细胞及其根源的肿瘤。
此抗抗原体能够用于标记上皮及上皮根源性的肿瘤,EMA阳性表达的肿瘤包含大部分的癌、间皮瘤、滑膜瘤子和上皮样瘤子等,恶性淋巴瘤、黑色素瘤和软组织肿瘤阴性表达。
3.MC鼠抗-人该抗体是肥大细胞较好的标记物。
研究表示在皮肤、鼻与肺等变态反响性疾Mast肥大细病中,肥大细胞胰蛋白酶表达水均匀由增高。
该抗体可与肥大细胞中的胰蛋Cell胞胰蛋白酶ɑ和?亚基反响,有助于评估此类疾病的肥大细胞中胰蛋白酶的含量。
病理科免疫组化在临床上的应用及其意义免疫组化技术是以免疫学的抗原抗体反应为其理论基础发展起来的一门方法学,在生物学领域尤其是在医学的基础和临床研究中发挥重要的作用,对疾病尤其是肿瘤的诊断、鉴别诊断及发病机制的研究提供了强有力的手段。
免疫组化技术是20世纪70年代初Sterb Berger在酶标法的基础上发明的,80年代在外国开始应用于临床研究和诊断,90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例的诊断和鉴别诊断。
随着新技术的不断发展,抗体种类从研发开始的十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研的各个领域,我国在临床病理诊断上可用抗体293种。
由于抗体较昂贵,所以各院根据活检量和病种不同选择不同的抗体,这些抗体对大部分疑难病例的诊断起到重要的辅助作用。
对病人的预后及指导治疗具有重要的意义。
一、目前常用的抗体分四大类1.上皮性标记物:CK high(AE3),CK low ,CK-pan,CK19,CK7,CK20,EMA,CEA,-CA15-3,SCLC , E-Caldeherin, CA125, Tg(甲状腺球蛋白) ,TTF-1AFP。
这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于上皮组织,如果是恶性肿瘤,就是癌2.间叶组织标记物:SMA ,Desmin,Vimentin,Lysozyme,AACT , CD68 MyoD1,CD117,这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于间叶组织,如果是恶性肿瘤,就是肉瘤。
3.神经及神经分泌标记物:CgA ,Synaptophysin,NSE,S-100:NF (神经纤维丝蛋白),GFAP,CD99,CD56。
4淋巴细胞标志物:T cell标记物:CD3, CD45RO , CD43, CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB , CD56 。
B cell标记物:CD-20 ,CD79a ,CD23,CD10 ,Kappa ,Lambda CD21 CD38 ,CyclinD1 ,Bcl-2。
浅谈免疫组化技术在病理诊断中的应用价值随着我国现代医学水平提升,医学技术发展逐渐得到完善。
在临场医学病理诊断中,免疫组化技术是一种重要的技术手段。
免疫组化技术在病理诊断中,对肿瘤诊断、肿瘤分类具有重要意义。
免疫组化技术在病理诊断中应用,对于肿瘤形成以及认识过程具有重要意义。
本文针对免疫组化技术在病理诊断当中的应用进行分析,明确免疫组化技术应用价值。
标签:免疫组化技术;病理诊断;应用价值。
在病理诊断中,各种新型抗体以及用途被不断发现。
免疫组化技术在肿瘤诊断当中具有重要意义,对鉴别、分类以及预判方面有着重要作用。
但在医学实际发展中,免疫组化技术同样存在一定局限性。
因此,明确免疫组化技术在病理诊断中原理以及技术,才能够实现免疫组化技术的发展。
1免疫组化技术概述免疫组化技术,又称免疫组织化学。
其能够实现组织切片当中的抗原数量在组织当中的分布状况,对于抗原进行定位、定性以及定量的研究。
由于抗体与抗原之间特异性结合,通过免疫组化使得标记抗体显色剂进行实际显色,确定组织细胞当中的多肽以及蛋白质。
IHC涉及到的标本种类为两个大类:分别为细胞标准和组织标本,其中组织标本最常用,基本方法是石蜡切片。
石蜡切片对于组合保存效果较好,是一种首选组织标本的制作方法。
2免疫组化技术在病理诊断中的作用在临床诊断当中,免疫组化技术的主要应用体现在以下几个方面。
2.1良恶性肿瘤判断免疫组化技术能够判定肿瘤良恶性,并且准确度较高。
可以运用免疫球蛋白(Ig)的轻链抗体检测B淋巴细胞增生单克隆或者多克隆,对反应性增生或者肿瘤性增生进行区分。
滤泡反应性增生过程中,反应中心细胞不能够及时表达细胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2性质为阴性。
滤泡性肿瘤当中,有90%以上bcl-2为高表达,并且bcl性质为阳性。
而PCNA即增殖细胞核抗原、Cycling即周期素、Ki-67为核抗原,通过具体分析,对细胞增生的程度做出相应评价,通过这样的方式判定细胞的良性或者恶性[1]。