病理科免疫组化常用抗体
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常用抗体(按字母排序)AE1/AE3阳性部位:细胞浆对照:结肠、乳腺AE1可与大多数的酸性细胞角蛋白(I型)反应,而AE3识别所有已知的碱性细胞角蛋白(Ⅱ型)。
AEl/AE3抗体的混合物,包括CKl-8、10,14、15、16、19。
该抗体可与几乎所有的上皮反应(除肾上腺、肝细胞肿瘤,精原细胞瘤,一些肾细胞肿瘤,一些类癌和胰岛细胞)而与一些中间丝状蛋白无交叉反应。
此抗体可用于鳞状细胞肿瘤(包括梭形细胞变异型)、腺癌、移形细胞癌、小细胞癌、类癌、多型性腺瘤(上皮成分)、胸腺瘤、间皮瘤(包括肉瘤样成分)、脊索瘤、生殖细胞肿瘤(除外精原细胞瘤)、滑膜肉瘤和上皮样肉瘤的诊断中。
AFP阳性部位:细胞浆对照:胎儿肝脏AFP可标记卵黄囊(内胚窦)肿瘤、某些生殖细胞肿瘤和肝细胞肿瘤。
在肝细胞癌的诊断中,AFP的敏感性较低,只有44%的肝细胞癌阳性,但其特异性高,因此可与其他抗体联合应用于肝细胞癌的诊断中。
AR阳性部位:细胞核对照:前列腺AR在前列腺癌的发生中起着重要的作用,AR的表达与肿瘤的组织学分型呈一定的相关性,高分化的肿瘤AR的表达要高于低分化的肿瘤。
在前列腺癌中,AR已作为病人对激素反虚性的一项指标,对抗激素治疗的选择具有指导意义。
Bcl-2阳性部位:细胞膜,浆对照:淋巴结Bcl-2可用于滤泡性淋巴瘤和滤泡性增生鉴别:85%的滤泡性淋巴瘤细胞浆阳性,而滤泡性增生只有生发中心部位散在的T细胞阳性。
Bcl-2在单核样B细胞淋巴瘤中阳性,而在单核样B细胞增生病灶中阴性,因而具有鉴别价值。
Bcl-2还可以用于确定滤泡性淋巴瘤是否累及骨髓。
原发性乳腺癌通常Bcl-2阳性,而肺和胃肠道肿瘤转移到乳腺的罕见阳性(即使阳性,也是灶性弱表达)。
Bcl-6阳性部位:细胞核对照:淋巴结Bcl-6表达于正常的滤泡生发中心B细胞和其相关的淋巴瘤。
在滤泡性淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤以及结节性淋巴细胞为主的Hodgkin淋巴瘤中,可以检测到Bcl-6的表达。
免疫组化检查在病理诊断中得应用及其意义免疫组化就是利用抗原与抗体特异性结合得原理,通过化学反应使标记抗体得显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽与蛋白质),对其进行定位、定性及定量得研究,称为免疫组织化学。
免疫组化实验中常用得抗体为单克隆抗体与多克隆抗体。
实验所用主要为组织标本与细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片与组织芯片)与冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片与细胞涂片。
其中石蜡切片就是制作组织标本最常用、最基本得方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定得影响,但可进行抗原修复,就是免疫组化中首选得组织标本制作方法。
石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。
所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成得交联破坏,而恢复抗原得原有空间形态。
常用得抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用得修复液就是pH6、0得0、01 mol/L得柠檬酸盐缓冲液。
免疫组化常用得染色方法根据标记物得不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲与组织化学法,后者就是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础得检测方法。
这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平得定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记AE1/AE3最常用,胞浆阳性着色,细丝状,与低、中分子量角蛋白反应,肝细胞为阴性,而胆管细胞阳性,用于确定肿瘤为上皮源性;CAM5、2胞浆阳性着色,细丝状,包含CK8 与CK18,主要染色神经内分泌细胞与腺上皮,正常鳞状上皮阴性,用于染小细胞癌、胸腺瘤与梭形细胞癌、肝细胞癌:AE1/AE3 CAM5、2 (+),用于乳腺外得Paget’s病;CK34BE胞浆阳性着色,鳞状上皮与鳞状细胞癌阳性,用于染前列腺得基底层细胞,鉴别浸润癌,染涎腺肿瘤得肌上皮,用于染Mallory小体;EMA细胞膜/细胞浆阳性着色,上皮标记得替代品,浆细胞阳性,很好得内对照,用于染滑膜肉瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、L&H 富于淋巴细胞得结节状何杰金、脑膜瘤EMA(+)AE1/AE3(–)、浆细胞瘤;CK7与CK20胞浆阳性着色,两者联合应用可鉴别很多种癌得原发部位,CK7 常常在胃肠道得癌为阴性,CK20 只有胃肠道癌与Merkel 细胞癌阳性。
免疫组化常用抗体标记物(一)上皮源性标记物1、一般性标记物(1) CK(角蛋白)CK亚型:CK5/6、CK7、CK8、CK10/13、CK18、CK19、CK20(2) EMA(上皮膜抗原)2、特异性和(或)相对特异性上皮标记物(1)CEA(癌胚抗原,标记胃肠道癌、肺腺癌等)(2)CA242(肿瘤相关粘液抗原、标记胰腺癌、结、直肠癌等)(3)TG(甲状腺球蛋白,标记甲状腺癌)(4)PSA(前列腺特异性抗原,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(5)PSAP(前列腺特异性酸性磷酸酶,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(6)34βE12(高分子量细胞角蛋白,标记前列腺基底细胞)(7)AFP(甲胎蛋白,标记肝癌、内胚窦癌等)(8)Hepatocyte(标记肝细胞癌)(9)β-HCG(β绒毛膜促性腺激素,标记胎盘滋养叶细胞肿瘤、生殖细胞肿瘤)(10)CA125(卵巢癌抗原)(二)间叶源性标记物肌源性标记物1、Desmin(Des,结蛋白)2、Actin(肌动蛋白)3、SMA(平滑肌肌动蛋白)4、MSA(肌特异性肌动蛋白)5、Myosin(肌球蛋白)6、Myoglobin(MG,肌红蛋白)7、Myogen(肌浆蛋白)8、MyoD1(肌调节蛋白)(三)血管源性标记物1、FVⅧRAg(第8因子相关抗原)2、CD313、CD344、UEA-15、BNH9(四)组织细胞源性标记物1、CD68/KP-12、Lysozyme(溶菌酶)3、α-AT(α1-抗胰蛋白酶)4、α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶)5、Mac387(五)淋巴造血组织源性标记物1、全淋巴细胞(1)CD45/LCA(白细胞共同抗原)(2)TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)(3)CD30/ki-12、全B细胞(1)Igκ(2)Igλ(3) CD20/L26(4)CD79α(5)BLA36(B淋巴细胞抗原)(6)Pax-5(B细胞系特异性激活蛋白)3、B细胞亚型(1)CD10(2)CD21(标记滤泡性树突状细胞)(3)CD23(4)CD35(标记滤泡性树突状细胞)(5)CD384、全T细胞(1)CD3(2) CD5(3) CD43(4)CD45RO/UCHL-15、T细胞亚型(2)CD4(3)CD86、NK细胞(1)CD56(2)CD57/Leu-7(3) CD16/Leu-117、粒细胞和单核细胞(1)CD11c/LeuM5(2)CD15/LeuM5(3) Lysozyme(溶菌酶)(4)α-AT(α1-抗胰蛋白酶)(5)α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶)(6) CD68(7) S-100蛋白(8)Mac3878、其他(1) EMA(上皮细胞膜抗原)(2) CD99(尤因肉瘤标记物)(3) ALK-1(间变性淋巴瘤激酶)(4) HLA-DR(6) Bcl-6(7) Bcl-10(8) Ki-67(9) CyclinD1(周期素D1)(10) CD25(11) CD34(六)神经源性标记物1、S-1002、NSE(神经原特异性烯醇化酶)3、Leu-74、Neurofilament(NF,神经微细蛋白)5、GFAP(胶质纤维酸性蛋白)(七)神经内分泌源性标记物1、激素标记物(1)CA(儿茶酚胺)(2)5-HT(5-羟色胺)(3)垂体激素GH(促生长素)PRL(催乳素)ACTH(促肾上腺皮质激素)TSH(促甲状腺素)FSH(促滤泡素)LH(促黄体素)(4)甲状腺TG(甲状腺球蛋白)CT(降钙素)(5)甲状旁腺PTH(甲状旁腺素)(6)胰岛Insulin(胰岛素)Glucagon(胰高糖素)VIP(舒血管肠肽)PP(胰多肽)Someitostatin(生长抑素)Gastrin(胃泌素)2、非激素标记物(1)NSE(神经原特异性烯醇化酶)(2)CgA(嗜铬素A)(3)SY(突触素)3、激素受体(1)ER(雌激素受体)(2)AR(雄激素受体)(3)PR(孕激素受体)(八)细胞增殖标记物1、PCNA(细胞增殖核抗原)2、Ki-67(九)黑色素标记物1、S-100蛋白2、HMB453、Melanoma(十)癌基因和(或)抑癌基因1、Bcl-22、C-erbB-23、P534、P16(多肿瘤抑制基因)5、nm23(十一)病原体标记物1、Myocobacterium Bovis(分枝杆菌,抗卡介苗)2、HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原)3、HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原)4、HPV(人乳头状瘤病毒)5、HTLV-1(人类T细胞白血病病毒)。
泌尿与男性生殖系统肿瘤1.前列腺癌:CK、P63、34ßE12、PSA、P504S(9AMAC)、AR2.前列腺增生/腺瘤:CK、P63、34BE12、P504S3.肾癌:CK、EMA、Inhibin、Melan-A、CK7、Vimentin、PAX2、CD104.肾母细胞瘤:WT-1、CK、P53、Ki-675.膀胱尿路上皮癌:CK7、CK20、P53、Ki-67、P636.精原细胞瘤:CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3/4淋巴造血系统肿瘤7.胸腺肿瘤:CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV*8.霍奇金淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*、PAX-59.非霍奇金淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD4310.间变大细胞淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*11.弥漫性大B细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki-6712.小B细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT13.T细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA-1、Perforin14.套细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl-2、Ki-6715.T/NK细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA-1、Perforin、粒酶B16.淋巴上皮病变/癌:CK、EMA、S-100、Ki-67、P53、EBV*、P63、CD30、CD2017.Burkitt淋巴瘤:CD3、CD20、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki-67、EBV*、TdT18滤泡性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki6719.脂膜炎样T细胞淋巴瘤:CD2、CD3、CD7、CD20、CD43、Perforin、TiA-1、EBV*20.浆细胞瘤:CD3、CD20、CD38、CD138、CD79α、EMA、κ*、λ*21.坏死性淋巴结炎:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD68、Mac387、CD16322.粘膜相关淋巴瘤:CK、CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD43、CD79a、CyclinD123.血管免疫母细胞性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD43、CD79α24.组织细胞肉瘤:S100、CD10、CD21、CD35、CD68、Lysozyme、MPO、CD33、CD34、CD11c、CD14、CD45RO25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD4526.指状突树突细胞肉瘤/肿瘤:S100、CD1α、CD68、CD21、CD35、CD3、CD20、CD30、CK、EMA、Ki67、CD4527.滤泡树突细胞肉瘤/肿瘤:CD21、CD35、S100、CD1α、CD68、CD3、CD23、EMA、VIM、MPO、CD34、CD79α、CK、HMB4528.肥大细胞肿瘤:CD117、CD45、CD33、CD68、CD15、CD3、CD20消化系统肿瘤29.胃癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**30.肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**31.肝细胞癌:AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、P53、HbsAg、Hepatocyte32.肝胆管细胞癌:CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、Hepatocyte、HbsAg33.食道癌:P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、P6334.胰腺癌:CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、Villin、CK7、CK20、35.胰岛细胞瘤:CD56、Syn、CgA、Ki-67、Insulin、CK8/18、CK1939.肝炎病毒:HbsAg、HbcAg、HCV涎腺肿瘤37.涎腺粘液性囊腺癌:CK、P63、SMA、Vimentin、Myosin-heavy chain38.上皮肌上皮癌:CK、P63、SMA、Vimentin、S-100、Myosin-heavy chain39.导管腺癌:CK、P63、SMA、AR、HER2、Myosin-heavy chain40.多形性腺瘤:CK、P63、SMA、S-100、GFAP、Myosin-heavy chain神经内分泌肿瘤41.神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/1842.肺神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/18、CD99、TTF-1、P63、Sp-B43.甲状腺乳头状癌:Tg、TTF-1、CK19、HMBE-1、Gelactin-3、Ki-67、TPO44.甲状腺髓样癌:Tg、CT、CD56、CD57、Syn、CgA、CEA45.肾上腺皮质癌:CK、CEA、Inhibin、Melan-A、CD10、CgA、Syn、S10046.肾上腺嗜铬细胞瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、47.肾上腺外副神经节瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、GFAP48.Merkel细胞癌:CK7、CK20、Syn、CgA、CK、CD99软组织肿瘤49.促纤维增生性小圆细胞肿瘤:CK、EMA、CD99、S-100、Des、Syn、CgA、50.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin51.上皮样血管平滑肌脂肪瘤:HMB45、S-100、Melan-A、CD34、CK、SMA、Vimentin52.上皮样血管瘤:CK、CD34、CD31、CD68、EMA53.孤立性纤维性肿瘤:CD34、Bcl-2、CD99、S-100、CK、Vimentin、SMA54.间皮瘤:CK5/6、HMBE-1、Calretinin、TTF-1、D2-40、CK、WT155.横纹肌(肉)瘤:MyoD1、Myogenin、Desmin、SMA、CK、S100、CD9956.滑膜肉瘤:EMA、CK、CD34、CD99、CD68、S-100、Bcl-2、Vimentin57.皮隆突/恶纤组:CD34、CD68、S-100、SMA、Vimentin58.血管球瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-10059.血管周肌细胞瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-100、Desmin60.梭形/多形性脂肪:CD34、SMA、S-100、HMB45、CK、CD31、CD6861.脊索/副脊索瘤:SMA、S-100、EMA、CK、GFAP、CD6862.腱鞘巨细胞瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、Vimentin63.平滑肌(肉)瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、S-100、CD34、Vimentin64.软骨母细胞瘤:CD99、S-100、CK、Vimentin65.结节性筋膜炎:CK、SMA、MSA、DES、CD68、S100、Vimentin66.缺血性筋膜炎:VIM、SMA、CD68、DES、S100、CD34、Vimentin67.肌纤维瘤/肌纤维瘤病:VIM、SMA、Actin、S100、EMA、CK、Vimentin68.硬化性纤维母细胞瘤:VIM、SMA、CK、DES、EMA、S100、CD3469.乳腺型肌纤维母细胞瘤:DES、CD34、EMA70.钙化性腱膜纤维瘤:VIM、SMA、MSA、CD99、S10071.血管肌纤维母细胞瘤:DES、SMA、Actin、ER、PR、CD34、S100、CK、fast myosin72.富于细胞性血管纤维瘤:VIM、CD34、DES、Actin、SMA、MSA73.项型纤维瘤:VIM、CD34、CD99、DES、Actin74.Gardner纤维瘤:VIM、CD34、SMA、MSA、DES、ER、PR75.钙化性纤维性肿瘤:Vim、VⅢ因子、XⅢa因子、Des、Actin、S100、CD31、CD34、CK76.巨细胞血管纤维瘤:CD34、CD99、Bcl-277.韧带样型纤维瘤:Vim、SMA、Des、S10078.脂肪纤维瘤病:CD34、Bcl-2、S100、Actin、EMA、CK、Des、CD9979.炎症性肌纤维母细胞性肿瘤:Vim、SMA、Des、CK、S100、ALK、CD11780.低度恶性肌纤维母细胞瘤:Actin、Des、CD34、CD99、S100、CK81.黏液炎症性肌纤维母细胞瘤:Vim、CD34、CD68、SMA、CK、LCA、CD30、T and B转移性肿瘤鉴别82.转移性肺/肝癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CK、AFP、CD34、Hepatocyte83.转移性肺/胃肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、Sp-B、CDX-284. 转移性肺/前列腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、PSA、PSAP85. 转移性肺/甲状腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、TG86. 转移性腺/鳞癌:CKAE1、CKAE3、CK8/18、CK5/6、EMA、CD15、P6387. 转移性肺/鼻咽癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、EMA、EBV*88.食道低分化癌/神经内分泌癌:Syn、P63、CgA、CD56、CD99、CKAE3、CK5/689.转移性卵巢粘液/浆液性癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CA125、CDX-2神经系统肿瘤90.垂体瘤:TSH、FSH、GH、LH、ACTH、PrL、P5391.胶质瘤:GFAP、MBP、Vim、EMA、S-10092.少突胶质细胞瘤:Pax-5、GFAP、MBP、Vim、EMA、S-100、CD5793.胶质肉瘤:GFAP、CD68、Vim、S-100、Ki-6794.节细胞胶质瘤:Syn、CgA、GFAP、S-100、CD68、Vim、Ki-6795.神经束膜瘤:S-100、EMA、GFAP、CK、Vim96.恶性外周神经鞘瘤:S-100、CK、HMB45、Desmin、SMA、MyoD1、CD57、MBP97.脑膜瘤:GFAP、EMA、Vim、S-10098.神经纤维/神经鞘瘤:GFAP、EMA、Vim、S-100、CK99.中枢神经细胞瘤:GFAP、S-100、Syn、CD57、MBP、EMA、CgA、Calretinin100.室管膜瘤:EMA、CK、S-100、GFAP、Syn、CD57、MBP、101.脉络丛乳头状瘤:GFAP、CK、S-100、Syn、EMA、Ki-67、CgA102.颅咽管瘤:CKAE1、EMA、GFAP、CKAE3、Ki-67103.颅内血管母细胞瘤:CD34、CD31、EGFR、CK、EMA、VEGF乳腺及女性生殖器官104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GCDFP-15 105.浸润性筛状癌/腺样囊性癌:ER、PR、HER2、P63、Laminin 106.实性神经内分泌癌:ER、PR、HER2、GCDFP-15、CK7、CK20、CgA、Syn107.子宫内膜样肿瘤/宫颈腺癌:Vim、CK、ER、PR、Inhibin、P16、CEA108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK117.非妊娠绒毛膜癌:CK、hPL、ß-Hcg恶性肿瘤预后与耐药监测指标P53、Bcl-2、PCNA、Ki67、P-gp、TOPOⅡα、GSTπ宫颈CIN病变分级检测指标P16、P53、Ki-67、CD68、Pro-EXC1.前列腺癌:CK、P63、34ßE12、PSA、P504S(AMACR)、AR25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD45、CD207 50.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin、Fli-1 104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GCDFP-15、P120-catenin108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin-α109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63、uroplakin III110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin-α、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin-α112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin-α113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin-α、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100、OCT3/4115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK、OCT3/4。
免疫组化抗体选择免疫组化是一种广泛应用于生物医学研究的技术,可以利用特异性抗体对组织或细胞中的分子进行定位和分析。
在实际操作中,选择合适的抗体是至关重要的,因为抗体选择的正确性决定了实验结果的准确性和可信度。
本文将对免疫组化抗体选择的相关内容进行介绍。
一、抗体来源在抗体选择中,首先要确定抗体的来源。
常见的抗体来源有动物、人类和单克隆抗体等。
1.动物抗体:常用的动物抗体包括兔、小鼠、大鼠、绵羊、猪等。
其中,小鼠和兔的抗体较为常用。
小鼠抗体制备相对容易,价格较便宜,但存在交叉反应和不同克隆间的差异等问题;兔抗体的特异性较高,但价格相对较高,且易产生非特异性的背景信号。
2.人类抗体:人类抗体的来源可以是人体免疫细胞库、人类B淋巴细胞杂交瘤等。
人类抗体具有高度的特异性和亲和性,且不存在动物来源抗体引起的交叉反应等问题,但价格较高。
3.单克隆抗体:单克隆抗体是指来自同一种克隆细胞的抗体。
与多克隆抗体相比,单克隆抗体具有更高的特异性和更好的重复性,但价格较高,且制备过程复杂。
二、抗原选择抗体的特异性是由其结合的抗原决定的,因此选择合适的抗原对于获得特异性抗体是至关重要的。
1.天然蛋白:天然蛋白是最常见的抗原形式之一。
其中,重组蛋白是一种受欢迎的选择,因为其可以通过工程技术来优化其受体结合性能。
2.肽段:肽段也是常用的抗原,其具有较低的价格和良好的重复性。
通常,选择相应的肽段以覆盖目标蛋白质中的所需区域,从而提高抗原的特异性。
3.人工合成分子:人工合成分子可以通过选择特定的化合物或糖类等,以获得与目标分子不同的抗原。
这种抗原的优点在于其纯度高、具有良好的重复性以及可控性高。
三、特异性测试在选择抗体之前,需要进行一系列的测试来确定其特异性和亲和力。
1. Western Blot: Western blot是一种常见的蛋白质检测方法,可以用于检测抗体对蛋白质的特异性,同时检测蛋白质是否纯化以及蛋白质的大小。
在选择抗体时,可以将其与不同表达蛋白质的细胞系一起进行Western blot测试,以确定其特异性。
免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。
免疫组化实验所用的抗体有哪些?免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。
单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。
多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些?实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
石蜡切片为什么要做抗原修复?有哪些方法?石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。
所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。
常用的抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。
免疫组化常用的染色方法有哪些?根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。
这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
抗体交叉反应的原因:指抗体除与其相应的抗原发生特异性反应外还与其它抗原发生反应。
产生的原因有以下几个方面:1. 抗原特异性指用于免疫动物的抗原性物质中含有多种抗原分子,它引起动物产生针对多种抗原分子特异性的相应抗体。
病理诊断常用免疫组化抗体及表达(CD21---D)CD21阳性部份:细胞膜对照:淋巴结CD21是CD3的互动受体,表达于滤泡树突状细胞(FDC)和 B淋巴细胞。
此抗体主要用于标记B细胞及其来源的肿瘤,并且可以显示滤泡中FDC网。
通过显示FDC网可以帮助了解淋巴结结构是否破坏、FDC肉瘤阳性。
血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤中的FDC网增多、变形、围绕血管,是重要诊断指标之一。
CD23阳性部份:细胞膜对照:淋巴结CD23表达于生发中心的活化B细胞,大多数低级别的B细胞淋巴瘤(主要是慢性B淋巴细胞白血病/B小淋巴细胞淋巴瘤)以及经典型霍奇金淋巴瘤中R-S细胞,但套细胞淋巴瘤不表达CD23,也可标记滤泡树突状细胞(FDC).CD30(Ki-1抗原)阳性部份:细胞膜/浆对照:淋巴结几乎所有经典型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞表达CD30.此抗体主要标记霍奇金淋巴瘤的R-S细胞,大细胞间变性淋巴瘤,淋巴瘤样丘疹病。
CD31阳性部份:细胞膜对照:淋巴结、血管瘤CD31在良性和恶性血管肿瘤均100%阳性表达,且其特异性和敏感性均优于CD34、Ⅷ因子相关抗体。
此抗体主要用于良/恶性血管源性肿瘤的诊断和鉴别诊断。
CD34阳性部份:细胞膜对照:淋巴结、血管瘤、胃肠间质肿瘤CD34在血管肿瘤中性表达,但CD34的特异性和敏感性均低于CD31。
CD34主要用于判定是否有内皮细胞的分化,与CD117联合应用鉴定胃肠道间质瘤,鉴别单纯性纤维肿瘤(通常阳性)和肉瘤样间皮瘤(通常阴性)、隆凸型皮肤纤维瘤(通常阳性)和良性纤维组织细胞瘤(通常阴性)、乳腺的梭形细胞癌(CD34-)和恶性叶状肿瘤(CD34+).CD45RO阳性部份:细胞膜/浆对照:淋巴结CD45RO是CD45的一种异构体。
CD45RO可作为反应性T细胞和T淋巴细胞性肿瘤的标记物,用于鉴别低级别T细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤(敏感性和特异性均为95%),鉴别高级别T细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤(敏感性80%、特异性85%)CD56(Leu19)阳性部份:细胞膜对照:淋巴结CD56抗原主要表达于、星形细胞、施万细胞、NK细胞和小部份活化的T淋巴细胞。
免疫组织化学常用抗体标记谱系第一节上皮细胞标志1.细胞角蛋白Cytokeratin(CK)CK是一种中间丝蛋白,是上皮细胞及其肿瘤较特异标志物。
CK分子量为40~60KD,根据其分子量不同分为20余种,并粗略划分为高分子CK(HCK)和低分子CK(LCK)。
2.广谱细胞角蛋白PCKPCK标记所有单层上皮、复层上皮、移行上皮细胞,各种上皮细胞来源的良恶性肿瘤、滑膜瘤和间皮瘤等少部分间叶源性肿瘤亦可阳性。
3.高分子角蛋白HCKHCK主要标记复层鳞状上皮及鳞状细胞癌,HCK(34βE12)常用于标记前列腺基底细胞,观察基底细胞存在与否有助于前列腺癌的诊断。
4.低分子细胞角蛋白LCKLCK主要存在于单层上皮及腺上皮细胞,因此,LCK主要用于内脏腺上皮肿瘤的诊断与鉴别诊断。
5.细胞角蛋白7 CK 7CK7分子量为54KD。
主要标记腺上皮和移行上皮细胞,卵巢、肺和乳腺上皮为CK7阳性,而结肠、前列腺和胃肠道上皮为CD7阴性,因此可用于卵巢癌(CD7+)和结肠癌(CK7-)的鉴别。
6.细胞角蛋白8 CK8CDK8分子量为52.5KD,主要标记非鳞状上皮,因此主要用于腺癌和导管癌的诊断,鳞癌一般不表达CK8。
有报道肝细胞癌主要表达CK8和CK18。
7.细胞角蛋白10 CK10CK10分子量为56.5KD。
主要标记上皮的基底上层和颗粒细胞层,同时CK10表达与细胞的分化程度呈正比,高分化者常阳性,主要用于鳞癌的诊断。
8.细胞角蛋白13 CK13CK13分子量为53KD。
标记所有的复层上皮,包括角化和非角化上皮。
主要用于高分化鳞状细胞癌的诊断。
9.细胞角蛋白18 CK18CK18分子量为45KD,属低分子量A型细胞角蛋白。
主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常为阴性。
主要用于腺癌的诊断。
10.细胞角蛋白19 CK19CK19分子量为40KD,分布于各种单层上皮包括腺上皮,主要用于腺癌的诊断。
肝细胞不表达CK19,因此可用于肝癌和转移性腺癌的鉴别。
免疫组化常用抗体标记物(一)上皮源性标记物1、一般性标记物(1) CK(角蛋白)CK亚型:CK5/6、CK7、CK8、CK10/13、CK18、CK19、CK20 (2) EMA(上皮膜抗原)2、特异性和(或)相对特异性上皮标记物(1)CEA(癌胚抗原,标记胃肠道癌、肺腺癌等)(2)CA242(肿瘤相关粘液抗原、标记胰腺癌、结、直肠癌等)(3)TG(甲状腺球蛋白,标记甲状腺癌)(4)PSA(前列腺特异性抗原,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(5)PSAP(前列腺特异性酸性磷酸酶,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(6)34βE12(高分子量细胞角蛋白,标记前列腺基底细胞)(7)AFP(甲胎蛋白,标记肝癌、内胚窦癌等)(8)Hepatocyte (标记肝细胞癌)(9)β-HCG(β绒毛膜促性腺激素,标记胎盘滋养叶细胞肿瘤、生殖细胞肿瘤)(10)CA125(卵巢癌抗原)(二)间叶源性标记物肌源性标记物1、 Desmin(Des,结蛋白)2、 Actin(肌动蛋白)3、 SMA(平滑肌肌动蛋白)4、 MSA (肌特异性肌动蛋白)5、 Myosin(肌球蛋白)6、 Myoglobin(MG,肌红蛋白)7、 Myogen (肌浆蛋白)8、 MyoD1(肌调节蛋白)(三)血管源性标记物1、 FVⅧRAg(第8因子相关抗原)2、 CD313、 CD344、 UEA-15、 BNH9(四)组织细胞源性标记物 1、 CD68/KP-1 2、 Lysozyme(溶菌酶) 3、α-AT(α1-抗胰蛋白酶) 4、α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶) 5、 Mac387(五)淋巴造血组织源性标记物1、全淋巴细胞(1)CD45/LCA(白细胞共同抗原)(2)TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)(3)CD30/ki-12、全B细胞(1) Igκ(2) Igλ(3) CD20/L26 (4) CD79α(5) BLA36(B淋巴细胞抗原)(6) Pax-5(B细胞系特异性激活蛋白)3、 B细胞亚型(1) CD10 (2) CD21(标记滤泡性树突状细胞)(3) CD23 (4) CD35(标记滤泡性树突状细胞)(5) CD384、全T细胞(1) CD3 (2) CD5 (3) CD43 (4) CD45RO/UCHL-15、 T细胞亚型(1) CD1α(2) CD4 (3) CD86、 NK细胞(1) CD56 (2)CD57/Leu-7 (3) CD16/Leu-117、粒细胞和单核细胞(1) CD11c/LeuM5 (2) CD15/LeuM5 (3) Lysozyme(溶菌酶)(4)α-AT(α1-抗胰蛋白酶)(5)α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶)(6) CD68 (7) S-100蛋白(8) Mac3878、其他(1) EMA(上皮细胞膜抗原)(2) CD99(尤因肉瘤标记物)(3) ALK-1(间变性淋巴瘤激酶)(4) HLA-DR (5) Bcl-2 (6) Bcl-6 (7) Bcl-10 (8) Ki-67 (9) CyclinD1(周期素D1)(10) CD25 (11) CD34.六)神经源性标记物1、S-1002、NSE(神经原特异性烯醇化酶)3、Leu-74、Neurofilament(NF,神经微细蛋白)5、GFAP(胶质纤维酸性蛋白)(七)神经内分泌源性标记物1、激素标记物(1)CA(儿茶酚胺)(2)5-HT(5-羟色胺)(3)垂体激素 GH(促生长素) PRL (催乳素)ACTH(促肾上腺皮质激素) TSH(促甲状腺素) FSH(促滤泡素) LH(促黄体素)(4)甲状腺 TG(甲状腺球蛋白) CT(降钙素)(5)甲状旁腺 PTH(甲状旁腺素)(6)胰岛 Insulin(胰岛素) Glucagon(胰高糖素) VIP(舒血管肠肽) PP(胰多肽)Someitostatin (生长抑素) Gastrin(胃泌素)2、非激素标记物(1)NSE(神经原特异性烯醇化酶)(2)CgA(嗜铬素A)(3)SY(突触素)3、激素受体(1)ER(雌激素受体)(2)AR(雄激素受体)(3)PR(孕激素受体)(八)细胞增殖标记物 1、PCNA(细胞增殖核抗原) 2、Ki-67 (九)黑色素标记物 1、S-100蛋白 2、HMB45 3、Melanoma(十)癌基因和(或)抑癌基因1、Bcl-22、C-erbB-23、P534、P16(多肿瘤抑制基因)5、nm23(十一)病原体标记物1、 Myocobacterium Bovis(分枝杆菌,抗卡介苗)2、 HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原)3、 HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原)4、 HPV(人乳头状瘤病毒)5、 HTLV-1(人类T细胞白血病病毒)。
免疫组织化学常用抗体标记谱系第一节上皮细胞标志1、细胞角蛋白Cytokeratin(CK)CK就是一种中间丝蛋白,就是上皮细胞及其肿瘤较特异标志物。
CK分子量为40~60KD,根据其分子量不同分为20余种,并粗略划分为高分子CK(HCK)与低分子CK(LCK)。
2、广谱细胞角蛋白PCKPCK标记所有单层上皮、复层上皮、移行上皮细胞,各种上皮细胞来源得良恶性肿瘤、滑膜瘤与间皮瘤等少部分间叶源性肿瘤亦可阳性。
3、高分子角蛋白HCKHCK主要标记复层鳞状上皮及鳞状细胞癌,HCK(34βE12)常用于标记前列腺基底细胞,观察基底细胞存在与否有助于前列腺癌得诊断。
4、低分子细胞角蛋白LCKLCK主要存在于单层上皮及腺上皮细胞,因此,LCK主要用于内脏腺上皮肿瘤得诊断与鉴别诊断。
5、细胞角蛋白7 CK 7CK7分子量为54KD。
主要标记腺上皮与移行上皮细胞,卵巢、肺与乳腺上皮为CK7阳性,而结肠、前列腺与胃肠道上皮为CD7阴性,因此可用于卵巢癌(CD7+)与结肠癌(CK7-)得鉴别。
6、细胞角蛋白8 CK8CDK8分子量为52、5KD,主要标记非鳞状上皮,因此主要用于腺癌与导管癌得诊断,鳞癌一般不表达CK8。
有报道肝细胞癌主要表达CK8与CK18。
7、细胞角蛋白10 CK10CK10分子量为56、5KD。
主要标记上皮得基底上层与颗粒细胞层,同时CK10表达与细胞得分化程度呈正比,高分化者常阳性,主要用于鳞癌得诊断。
8、细胞角蛋白13 CK13CK13分子量为53KD。
标记所有得复层上皮,包括角化与非角化上皮。
主要用于高分化鳞状细胞癌得诊断。
9、细胞角蛋白18 CK18CK18分子量为45KD,属低分子量A型细胞角蛋白。
主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常为阴性。
主要用于腺癌得诊断。
10、细胞角蛋白19 CK19CK19分子量为40KD,分布于各种单层上皮包括腺上皮,主要用于腺癌得诊断。
肝细胞不表达CK19,因此可用于肝癌与转移性腺癌得鉴别。
免疫构制化教时常使用抗体标记表记标帜谱系之阳早格格创做第一节上皮细胞标记1.细胞角蛋黑Cytokeratin(CK)CK是一种中间丝蛋黑,是上皮细胞及其肿瘤较特同标记物.CK分子量为40~60KD,根据其分子量分歧分为20余种,并大略区分为下分子CK(HCK)战矮分子CK (LCK).2.广谱细胞角蛋黑PCKPCK标记表记标帜所有单层上皮、复层上皮、移止上皮细胞,百般上皮细胞根源的良恶性肿瘤、滑膜瘤战间皮瘤等少部分间叶源性肿瘤亦可阳性.3.下分子角蛋黑HCKHCK主要标记表记标帜复层鳞状上皮及鳞状细胞癌,HCK(34βE12)时常使用于标记表记标帜前列腺基本相胞,瞅察基本相胞存留取可有帮于前列腺癌的诊疗.4.矮分子细胞角蛋黑LCKLCK主要存留于单层上皮及腺上皮细胞,果此,LCK主要用于内净腺上皮肿瘤的诊疗取鉴别诊疗.5.细胞角蛋黑7 CK 7CK7分子量为54KD.主要标记表记标帜腺上皮战移止上皮细胞,卵巢、肺战乳腺上皮为CK7阳性,而结肠、前列腺战胃肠讲上皮为CD7阳性,果此可用于卵巢癌(CD7+)战结肠癌(CK7-)的鉴别.6.细胞角蛋黑8 CK8CDK8分子量为52.5KD,主要标记表记标帜非鳞状上皮,果此主要用于腺癌战导管癌的诊疗,鳞癌普遍没有表黑CK8.有报导肝细胞癌主要表黑CK8战CK18.7.细胞角蛋黑10 CK10CK10分子量为56.5KD.主要标记表记标帜上皮的基底表层战颗粒细胞层,共时CK10表黑取细胞的瓦解程度呈正比,下瓦解者常阳性,主要用于鳞癌的诊疗.8.细胞角蛋黑13 CK13CK13分子量为53KD.标记表记标帜所有的复层上皮,包罗角化战非角化上皮.主要用于下瓦解鳞状细胞癌的诊疗. 9.细胞角蛋黑18 CK18CK18分子量为45KD,属矮分子量A型细胞角蛋黑.主要标记表记标帜百般单层上皮包罗腺上皮,而复层鳞状上皮常为阳性.主要用于腺癌的诊疗.10.细胞角蛋黑19 CK19CK19分子量为40KD,分散于百般单层上皮包罗腺上皮,主要用于腺癌的诊疗.肝细胞没有表黑CK19,果此可用于肝癌战变化性腺癌的鉴别.11.细胞角蛋黑20 CK20细胞角蛋黑20(CK20)分子量为46KD,主要标记表记标帜胃肠讲上皮、尿讲上皮战Merkel细胞.主要用于胃肠讲腺癌、卵巢粘液性肿瘤战Merkel细胞癌的诊疗.鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌战卵巢非粘液性肿瘤均没有表黑CK20.12.上皮膜抗本Epithelial membrane antigen, EMAEMA是一组糖蛋黑,广大分散正在百般仄常上皮细胞膜及其肿瘤细胞中,分散范畴取细胞角蛋黑相似,但是对于内净腺上皮的表黑劣于细胞角蛋黑.对于上皮源性肿瘤,更加是矮瓦解腺癌,最佳取细胞角蛋黑共同应用,可普及阳性率.13.上皮特同性抗本 Epithelial Specific Antigen,ESA,ESA为分子量40KD的细胞表面糖蛋黑,属较广谱的上皮细胞标记,大普遍上皮细胞为阳性反应,正在肿瘤细胞中,腺癌细胞表黑强于鳞癌细胞.ESA标记表记标帜谱系似EMA.14.前列腺特同抗本Prostate specific antigen,PSAPSA是由前列腺上皮细胞合成的一种糖蛋黑,暂时认为具备特同性的肿瘤标记表记标帜物之一.主要用于前列腺癌战变化性前列腺癌的诊疗,但是没有克没有及动做良、恶性前列腺徐病的鉴别诊疗,果为绝大普遍的前列腺删死上皮均呈阳性反应.15.前列腺酸性磷酸酶Prostate acide phosphatase,PSAPPSAP是由前列腺上皮细胞合成的一种磷酸酶.仄常前列腺构制,删死的前列腺构制战前列腺癌均表黑有PSAP.主要用于前列腺癌战变化性前列腺癌的诊疗,但是没有克没有及动做良、恶性前列腺徐病的鉴别诊疗.16.甲状腺球蛋黑 Thyroglobuli,TGTG是甲状腺滤泡上皮细胞合成的一种糖蛋黑,对于甲状腺滤泡上皮细胞战甲状腺上皮性肿瘤具备较下特同性,时常使用于百般甲状腺癌战变化性腺癌的诊疗取鉴别诊疗. 17.肝细胞抗本HPCHPC是肝细胞较特同标记表记标帜物,阳性颗粒定位于肝细胞浆.主要标记表记标帜肝细胞及肝细胞爆收战良恶性肿瘤、非肝细胞无接叉反应.18.HCG-βHCG是由胎盘合体滋养层细胞爆收的一种糖蛋黑激素,主要用于胎盘滋养细胞战死殖细胞肿瘤如葡萄胎、绒癌的诊疗以及某些神经内分泌肿瘤的钻研.第两节硬构制标记表记标帜2.波形蛋黑Vimentin波形蛋黑主要分散于间叶细胞及其起源的肿瘤构制、上皮细胞及其肿瘤普遍没有含此蛋黑.时常使用于间叶根源的恶性肿瘤如间皮瘤、滑膜肉瘤、脑膜瘤等诊疗,对于癌取肉瘤、恶乌取癌、胸腺瘤取淋巴瘤、已瓦解癌取小细胞间叶肿瘤的鉴别诊疗具备要害参照意思.3.结蛋黑DesminDesmin为肌细胞的中间丝蛋黑,仄常分散于仄滑肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞战肌上皮细胞.上述细胞根源的良恶性肿瘤desmin阳性反应.主要用于子宫、皮肤战胃肠讲仄滑肌肿瘤,横纹肌肿瘤战肌上皮肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.4. 肌动蛋黑(广谱)ActinMSA是一种具备中断本领的微丝蛋黑,广大分散于险些所有的肌型细胞中.5.Actin(HHF35)是一种广谱的肌动蛋黑,主要表黑于骨骼肌、仄滑肌、心肌战肌上皮细胞,肌源性肿瘤包罗仄滑肌瘤,仄滑肌肉瘤战横纹肌肉瘤以及肌上皮肿瘤等均可呈阳性反应.6.肌动蛋黑(横纹肌)Sarcomeric Actin横纹肌肌动蛋黑是一种具备中断本领的微丝蛋黑,主要分散于骨骼肌战心肌细胞中.用于百般典型的横纹肌肿瘤的诊疗,亦可标记表记标帜具备横纹肌细胞瓦解肿瘤.7.肌安排蛋黑MyoD1MyoD1是横纹肌肿瘤的一种标记表记标帜.主要用于横纹肌肉瘤的诊疗,阳性颗粒位于细胞核.少量非肌源性构制包罗腺上皮、神经母细胞瘤、尤文氏肉瘤、腺胞状硬构制肉瘤可睹胞浆阳性.8.肌黑蛋黑MyoglobinMyoglobin是骨骼肌肌浆中的一种肌黑蛋黑,有较下的构制特同性.但是对于肿瘤的敏感性较好.主要用于横纹肌肿瘤的诊疗取鉴别诊疗.少量恶性中胚叶混同瘤,睾丸畸胎瘤、肾母细胞瘤中肌母细胞亦可睹阳性表黑.9.肌球蛋黑(骨骼肌)Myosin(Skeletal)骨骼肌肌球蛋黑可分为I型肌纤维(缓中断肌纤维)战II 型肌纤维(快中断肌纤维),主要用于横纹肌肿瘤或者含有横纹肌身分的肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.10.MyogeninMyogenin为肌细胞死成素,是横纹肌及其肿瘤较特同标记表记标帜物,取MyoD1有一定互补效率.Myogenin对于某些去瓦解的横纹肌肉瘤标记表记标帜较理念,免疫表型为胞核型.11.肌动蛋黑(仄滑肌)Smooth muscle ActinSMA是一种标记表记标帜仄滑肌的肌动蛋黑,主用于检测血管仄滑肌,仄滑肌瘤战仄滑肌肉瘤、肌上皮细胞战肌上皮瘤等.正在推断良恶性乳腺病变时,根据肌上皮细胞阳性取可战分散,可动做一个要害的参照指标.12.肌球蛋黑(仄滑肌)Myosin(Smooth muscle)仄滑肌肌球蛋黑主要用于标记表记标帜血管战内净仄滑肌细胞以及肌上皮细胞,被认为是仄滑肌较为特同战稳当的标记表记标帜,有帮于间叶肿瘤的诊疗战分类,亦可用于乳腺肌上皮细胞的检测,有帮于本位癌战浸润癌的辨别.13.Caldesmon它是一种取肌动蛋黑战本肌球蛋黑分离的钙结蛋黑,具备安排仄滑肌中断的功能,将其动做仄滑肌标记,用于良恶性仄滑肌肿瘤的诊疗取钻研.14.Calponin是一种肌动蛋黑分离蛋黑,具备压制仄滑肌细胞中断功能,主要分散于仄滑肌细胞战肌上皮,对于仄滑肌肿瘤、肌上皮肿瘤诊疗蓄意思,亦可用于乳腺肌上皮隐现,推断乳腺良恶性.15.第八果子相闭抗本Factor Ⅷ-related Antigne(FⅧ-RAg)FⅧ-RAg是一种糖蛋黑,广大存留于血管内皮、肝窦、脾窦内皮以及淋巴管内皮细胞、是血管内皮及其内皮源性良恶性肿瘤的特同性标记表记标帜.主要用于血管源性良性肿瘤战血管肉瘤的诊疗.少量附睾、子宫战输卵管的腺癌样瘤亦可表黑.良性血管内皮肿瘤阳性表黑强于恶性血管内皮肿瘤.血管中皮及其肿瘤细胞没有表黑FⅧ.16.内皮细胞标记表记标帜CD31CD31是一种要害的血管内皮细胞标记.主要用于良恶性血管源性肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.亦可用于百般肿瘤间量中血管死成的钻研.血管中皮细胞及其肿瘤细胞没有表黑.17.内皮细胞标记表记标帜CD34CD34主要标记表记标帜骨髓搞细胞战内皮细胞.时常使用于良恶性血管源性肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.亦可用于百般肿瘤间量中血管死成的钻研.暂时CD34也是胃肠间量瘤较理念的标记物.18.溶菌酶Lysozyme(Muramidase)Lysozyme取AACT均为构制细胞及其肿瘤的标记表记标帜物.主要用于构制细胞瘤、恶纤组、恶性构制细胞删死症战构制细胞恶性淋巴瘤等诊疗,由于其特同性没有强,应取AACT、CD68等共同应用,以普及其准确性.19.α1抗糜蛋黑酶A1ACTA1ACT是一种蛋黑酶,为巨噬细胞,构制细胞的标记表记标帜,肝细胞战星形胶量细胞阳性表黑,由于该抗体缺累特同性,暂时主要用于纤维构制细胞源性肿瘤的诊疗取鉴别诊疗.20.间皮细胞 Mesothelial cell(MCA)MCA为间皮细胞标记表记标帜,仄常间皮细胞战间皮瘤阳性表黑,阳性颗粒定位于细胞膜,多为薄膜型,某些腺癌亦可胞浆阳性,MCA主要用于间皮瘤的诊疗.21.钙分离蛋黑 Calretinin(CR)CR是一种钙分离蛋黑,是间皮细胞及其肿瘤较理念的标记,正在上皮性间皮瘤的诊疗中,敏感性可达100%,特同性约为50%,也可用于神经系统徐病的钻研.第三节神经构制标记1.胶量纤维酸性蛋黑Glial Fibrillary Acidic protein(GFAP)GFAP为中间丝蛋黑之一,主要用于星形胶量瘤包罗星形细胞瘤、星形母细胞瘤、混同性胶量瘤、多形性胶量母细胞瘤、普遍室管膜瘤等中枢神经系统肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.唾液腺肌上皮细胞及其肌上皮细胞瘤亦可阳性反应. 2.神经纤维细丝蛋黑Neurofilament(NF)NF是神经元特同性中间丝蛋黑,由三个分歧分子量(68、160战200KD)的亚单位形成的多散体,以分歧的比率分散于中枢中周神经元以及肿瘤中,其阳性睹于节细胞神经瘤,副节瘤、小脑或者中周神经母细胞瘤,肾上腺嗜铬细胞瘤,亦有帮于某些神经内分泌肿瘤的诊疗.3.NestinNestin是一种新的中间丝蛋黑,正在神经上皮搞细胞中极为歉富,正在本初神经中胚层肿瘤(PNET),星形胶量细胞瘤常呈阳性反应,故正在那些肿瘤的诊疗及钻研中具备要害意思.4.S-100 ProteinS-100是一种可溶性酸性蛋黑.有3种亚型,即S-100a、S-100r、S-100β.S-100主要存留神经构制、垂体、颈动脉体、肾上腺髓量、唾液腺、少量间叶构制.主要用于神经鞘瘤、恶乌、脂肪肉瘤及硬骨肿瘤等的诊疗取鉴别诊疗.亦可用于乳腺肌上皮标记表记标帜,推断乳腺肿瘤的良恶性. 5.嗜铬素A Chromogranin A(CgA)CgA是人类肾上腺髓量中含量最下的一种可溶性酸性蛋黑,广大存留于神经元及其神经内分泌细胞战肿瘤细胞中.主要用于神经内分泌肿瘤如垂体肿瘤、胰岛细胞瘤、嗜铬细胞瘤、甲状腺髓样癌、类癌等的诊疗.6.突触素Synaptophysin(SY)SY是一种糖蛋黑,存留于神经元突触前囊泡膜上,肾上腺髓量细胞战神经内分泌细胞的胞浆内,主要用嗜铬细胞瘤、节细胞神经瘤、副节瘤以及APUD系统肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.7.神经元特同性烯醇化酶Neuron specific endolase(NSE)NSE是r-r型烯醇化共工酶,主要分散于神经元战一些神经内分泌细胞中.主要用于神经内分泌肿瘤的辅帮诊疗. 但是由于NSE的特同性好,果此一些仄常仄滑肌细胞、肌上皮细胞战淋巴细胞等均有阳性表黑.正在诊疗免疫组化处事中,NSE没有克没有及动做单独的诊疗性标记表记标帜,应取其余相映的标记表记标帜物共同应用,以普及其诊疗准确性.8.髓磷脂碱性蛋黑Myelin basic protein(MBP)MBP是髓鞘结构蛋黑的主要身分.主要用于少突胶量细胞、施万细胞等脑神经系统徐病以及相映肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.第四节神经内分泌细胞标记1.神经垂体蛋黑Neurophysin(Nph)Nph是垂体后叶分泌的一种激素,主要用于垂体肿瘤的功能性分类战燕麦细胞瘤的诊疗以及中枢神经系统徐病的钻研.2.催乳素Prolactin(PRL)PRL是由垂体前叶嗜酸性细胞分泌的一种激素,主要用于垂体腺瘤的功能性分类战少量具备同位分泌的内分泌肿瘤的钻研.3.死少激素Growth hormone(hGH)hGH是一种垂体前叶合成的一种蛋黑量激素.主要用于垂体肿瘤的分类战神经内分泌肿瘤的钻研.4.促肾上腺皮量激素Adrenocoriticotropin (ACTH)ACTH是由垂体前叶细胞分泌一种多肽激素,主要用于垂体肿瘤的功能性分类以及本收性战变化性垂体肿瘤的鉴别诊疗.亦可用于检测部分神经内分泌肿瘤如嗜铬细胞瘤战类癌等的激素细胞分散.5.甲状腺刺激激素Thyroid simulating hormone(TSH)TSH是垂体细胞分泌的一种激素,能刺激甲状腺死少战甲状腺素的分泌.主要用于垂体肿瘤的功能性分类.6.滤泡刺激激素FSHFSH是垂体分泌一种激素,能督促卵泡的老练战雌激素分泌,主要用于垂体腺瘤的功能性分类.7.促黄体死成激素Luteinizing hormone(LH)LH是一种垂体前叶合成的一种蛋黑量激素.主要用于垂体肿瘤的分类战多收性神经内分泌肿瘤的钻研.8.胰多肽Pancreatic polypeptide(PP)PP是由胰岛细胞分泌的一种激素.主要用于胰岛细胞瘤的功能性分类战多收性内分泌肿瘤的辅帮诊疗.9.胰岛素InsulinInsulin是由胰岛β细胞分泌的一种激素.主要用于胰岛细胞瘤的功能性分类战多收性内分泌肿瘤的辅帮诊疗.10.死少抑素Somatostatin死少抑素是胰岛D细胞的一种多肽激素,主要用于胰岛细胞瘤的功能分类战消化讲内分泌细胞其及肿瘤的钻研. 11.胰下血糖素Glucagon胰下血糖素是胰岛α细胞合成战分泌的一种激素.主要用于胰岛细胞瘤的功能性分类战胰下血糖素瘤的诊疗.12.甲状腺激素落钙素Calcitonin(CT)CT是由甲状腺细胞分泌,主要用于C细胞删死战甲状腺髓样癌的诊疗,亦可用于其余典型的神经内分泌肿瘤的钻研.13.甲状旁腺激素Parathyroid Hormone(PH)PH是甲状旁腺细胞分泌的一种激素.仄常甲状旁腺细胞阳性表黑,甲状腺滤泡上皮阳性表黑,时常使用于甲状旁腺肿瘤的诊疗取鉴别诊疗.14.胎盘催乳素Placental lactogen(hPL)hPL是胎盘合体滋养层细胞合成的一种多肽激素.主要用于绒癌、睾丸癌、乳腺癌战卵巢癌及恶性畸胎瘤的诊疗,少量具备同位性激素分泌的肿瘤如肺癌的钻研.15.血浑素SerotoninSerotonin亦称5-羟色胺(5-HT),主要用于神经内分泌系统的APUD肿瘤的诊疗取钻研.16.促胃液素Gastrin促胃液素是一种多肽激素,主要用于胃泌素瘤战G细胞删死症的诊疗以及部分神经内分泌肿瘤的检测.第五节淋巴细胞标记表记标帜1.CD3 T细胞CD3对于早期T细胞有较下特同性,但是敏感性偏偏矮,对于B细胞没有表黑.主要用于T细胞淋巴瘤的诊疗.CD3为齐T细胞,基于其特同性较下,而敏感性较矮,故正在应用时应取其余T细胞标记表记标帜共同应用.2.CD4 T细胞主要分散正在辅帮T细胞/诱导细胞.仄常淋巴构制中,CD4的表黑数量明隐多于CD8, 其比率约为4:1.主要用于皮肤T细胞淋巴瘤战菌样霉菌病以及对于T细胞亚群的检测.3.CD5套细胞淋巴瘤标记表记标帜(Mantle cell lymphoma marker)CD5主要分散正在胸腺细胞(95%)战中周血的淋巴细胞(72%).仄常淋凑趣中,CD5主要分散正在T细胞区.主要用于T细胞黑血病,T细胞淋巴瘤的辅帮诊疗.Mantle细胞淋巴瘤时常为CD5阳性表黑,而滤泡核心性淋巴瘤常为阳性.4.CD8 T细胞CD8主要分散正在压制T细胞/毒性T细胞.仄常淋巴构制中,CD8的表黑率明隐少于CD4,主要动做T细胞亚型的钻研,战某些T细胞淋巴瘤的亚型分类.5. CD15粒细胞相闭抗本CD15主要分散正在粒细胞(95%),包罗中性战嗜酸性黑细胞.CD15常表黑于霍奇金氏病中R-S细胞.部分腺上皮细胞癌亦可表黑CD15.主要用于霍奇金淋巴瘤战少量大细胞性淋巴瘤的诊疗.6.CD20 B细胞CD20主要分散正在B细胞、前B细胞后期战浆细胞之前的B细胞,普遍没有取T细胞呈接叉反应.对于B细胞淋巴瘤战慢缓性淋巴细胞黑血病等有较佳的细胞特同性,果此正在恶性淋巴瘤更加是T或者B细胞淋巴瘤的分类上,CD20是最时常使用的B细胞标记表记标帜.7.CD30/Ki-1 AntigenCD30主要标记表记标帜活化T战B淋巴细胞,R-S细胞战部分淋巴滤泡间区细胞.主要用于检测霍奇金淋巴瘤中的R-S细胞战没有典型R-S 细胞,故认为是霍奇金淋巴瘤的一个特同性标记表记标帜.暂时认为CD30亦是间变型大细胞淋巴瘤的诊疗性标记表记标帜.8.CD43 T细胞CD43主要标记表记标帜T细胞,颗粒细胞,部分单核细胞战B细胞.该标记表记标帜物虽然敏感性较下,但是特同性没有强,应取其余T细胞标记表记标帜如CD3或者CD45.RO共同检测,用于T细胞淋巴瘤的辅帮诊疗.9.CD45黑细胞共共抗本LCALCA为黑细胞共共抗本,是制血细胞的特同性标记表记标帜,主要分散正在T、B细胞、单核细胞、粒细胞战前体细胞表面.普遍没有存留于非制血构制中,果此是辨别淋巴瘤,黑血病取非制血构制肿瘤的一个良佳的标记表记标帜物.10.CD45RB B细胞CD45RB主要标记表记标帜B细胞(80%)战少量T细胞(10%).常取其余B细胞标记表记标帜如CD20或者CD45RA共同检测,用于B细胞淋巴瘤的辅帮诊疗.11.CD45RO T细胞CD45RO主要标记表记标帜T细胞(80%)战少量B细胞(10%).常取其余T细胞标记表记标帜如CD3或者CD43共同检测,用于T细胞淋巴瘤的辅帮诊疗.12.CD56CD56为神经细胞粘附分子,主要分散于大普遍神经中胚层根源的细胞战构制中,那些细胞根源的肿瘤可呈阳性表黑,时常使用于星形细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌肿瘤等肿瘤钻研,NK细胞淋巴瘤呈阳性.13.CD57CD57为自然杀伤细胞(NK细胞)标记表记标帜,或者称Leu-7,NK细胞淋巴瘤常阳性反应,某些神经内分泌细胞瘤亦呈阳性表黑,CD57主要用于NK细胞肿瘤战神经内分泌肿瘤的诊疗取钻研.14.CD68CD68为骨髓战百般构制中的巨噬细胞,包罗肝净的枯可氏细胞,时常使用于粒细胞性黑血病、百般单核构制细胞根源的肿瘤,包罗恶性纤维构制细胞瘤的诊疗.15.B细胞CDw75CDw75主要标记表记标帜死收核心B细胞(75%)战少量T细胞(5~10%).常取其余B细胞标记表记标帜如CD20或者CD45RA共同检测,用于B细胞淋巴瘤的辅帮诊疗.16.B细胞CD79αCD79α主要标记表记标帜B细胞,T细胞没有表黑,主要用于B细胞黑血病、B细胞淋巴瘤战部分骨髓瘤的辅帮诊疗.第六节肿瘤相闭抗本1.甲胎蛋黑AFPAFP是由胚胎卵黄囊细胞,胚胎肝细胞战胎女肠讲细胞合成的一种糖蛋黑.主要用于本收性或者变化性肝细胞癌、肝样胃癌战性腺或者性腺中某些死殖细胞肿瘤(如内胚窦瘤)的诊疗战鉴别诊疗.2.癌胚抗本CEACEA是一种胚胎性癌抗本,仄常存留胎女消化讲上皮构制,胰腺战肝净中.CEA广大存留百般上皮性肿瘤,更加是胃肠讲恶性肿瘤,CEA分散阳性典型取肿瘤的恶性度有闭.CEA取EMA一般可动做上皮性恶性肿瘤的要害标记表记标帜.3.乳腺癌抗本CA15-3CD15-3是一种粘液样糖蛋黑,主要用于乳腺癌的钻研,对于诊疗变化性乳腺癌有参照价格.亦可用于其余恶性肿瘤如肺癌、卵巢癌等的钻研,少量良性乳腺肿瘤战卵巢肿瘤亦可表黑,但是正在免疫组化染色阳性分散上有所分歧,应注意瞅察推断.4.消化讲癌抗本CA19-9CA19-9是一种肿瘤相闭的糖类抗本.主要用于消化讲恶性肿瘤的钻研,包罗胰腺癌、胆管癌、胃癌战结曲肠癌,其中以胰腺癌阳性最下,果此认为是胰腺癌诊疗的一种较佳的标记表记标帜.5.癌相闭粘液抗本CD50主要用于百般上皮源性癌包罗胃肠讲癌、胰腺癌、胆囊癌、卵巢癌、子宫癌、肺癌战乳腺癌等的钻研.6.卵巢癌抗本CA125CA125是一种糖蛋黑,是卵巢浆液性腺癌的要害标记表记标帜.对于浆液性囊腺癌战粘液性囊腺癌的鉴别诊疗有参照价格,亦可用于其余恶性肿瘤的钻研如乳腺癌、胰腺癌、肝癌战胃肠讲癌等.7.肿瘤相闭粘液抗本CA242CA242是一种唾液酸化的鞘糖脂抗本,主要用于胰腺癌、结曲肠癌战其余部位腺癌的钻研.仄常构制奇有CA242阳性表黑如结肠柱状上皮战杯状细胞、胆管战胰导管上皮等.8.乌素A Melan-AMelan-A亦称T细胞1识别的乌色素瘤抗本(Melanoma Antigen Recognized by T cells 1,MART-1).上皮细胞、淋巴细胞、胶量细胞战间叶根源的肿瘤细胞普遍没有表黑Melan-A.主要用于恶性乌色素瘤战陪随乌色素细胞瓦解的肿瘤的诊疗战鉴别诊疗.9.乌色素瘤MelanomaHMB45是乌色素瘤相闭抗本,存留于皮肤的接界痣战蓝痣细胞中.主要用于恶性乌色素瘤(没有管有可色素细胞)以及硬构制透明细胞肉瘤的诊疗战鉴别诊疗.正在恶性乌色素瘤取上皮性癌的鉴别诊疗时,前者常为HMB45、S100战(或者)Vimentin阳性,细胞角蛋黑(CK)阳性,而后者则好同.10.Metallothionein(MT)MT是一种矮分子量的沉金属分离蛋黑,取铜战锌有很强的亲战力,并取肿瘤细胞的耐药战凋亡有闭.主要用于乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝癌战睾丸癌等百般癌症的钻研.11.粘糖蛋黑2 Muc-2 Glycoprotein粘糖蛋黑2是一种分子量为52KD的蛋黑.正在仄常构制中,主要分散正在小肠腺上皮、延腺上皮战乳腺上皮,其余部位上皮没有表黑.主要用于结肠癌战胃癌的钻研.12.胎盘碱性鳞酸酶Placental alkaline phosphatase(PLAP)PLAP主要用于睾丸死殖细胞肿瘤如细本细胞瘤战卵巢无性细胞瘤的诊疗.13.胃粘液Mucin 5AC/Gastric mucin胃粘液亦称Mucin 5AC主要分散于仄常胃上皮战胚胎结肠粘膜,而成人结肠粘膜没有表黑.主要用于胃癌、结肠癌以及百般肠化死的钻研.14.肿瘤相闭糖蛋黑Tumor associated glycoprotein(TAG-72) TAG-72是一种分子量为大于1000KD的粘液蛋黑,除分泌腺上皮中,其余仄常上皮普遍没有表黑.主要用于结肠癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌战肺癌的钻研.亦可用于肺癌(TAG-72+)战恶性间皮瘤(TAG-72-)的鉴别诊疗.15.胚胎性癌Embryonal Carcinoma仄常睾丸战卵巢为阳性,卵巢战睾丸的胚胎性癌强阳性,而其余死殖细胞肿瘤,如细本细胞瘤战绒毛膜上皮癌阳性.卵黄囊肿瘤战恶性畸胎瘤的腺癌身分阳性表黑.主要用于鉴别诊疗胚胎性癌战其余典型的死殖细胞肿瘤.。
病理诊断中常用101种免疫组化抗体及其表达(下)51、E-cadherin阳性部位:细胞浆,膜对照:乳腺导管癌E-cadherin属于上皮细胞钙离子依赖的黏附分子家族,其功能的降低,丧失可导致细胞连接的破坏,与肿瘤细胞的浸润和转移相关。
在癌中E-cadherin的表达与肿瘤分化程度成反比。
其表达的缺失与许多癌的进展相关。
52、EMA阳性部位:细胞浆/膜对照:阑尾EMA广泛分布于各种上皮细胞及其来源的肿瘤。
此抗体可以标记大部分正常上皮及上皮源性的肿瘤;在间皮瘤中常为胞浆着色;浆细胞、各种已受T细胞活化的外周血B细胞及一些间充质(脊素和神经周围纤维母细胞)也为阳性;淋巴瘤中T细胞丰富的B细胞淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤及其变异型、95%的大细胞间变型、单核样的B 细胞淋巴瘤以及18%的T细胞淋巴瘤阳性表达;还可在一些骨髓瘤、60%的结节性淋巴细胞为主霍奇金淋巴瘤、滑膜肉瘤、上皮样肉瘤等肿瘤中阳性表达。
EMA常用于间皮反应和间皮瘤的鉴别(间皮瘤中的膜染色更强);间皮瘤和腺癌的鉴别(前者细胞膜着色);基底细胞、鳞状细胞与皮肤基底细胞癌的鉴别;淋巴结ALK阳性的大细胞间变型淋巴瘤向其他淋巴瘤类型的鉴别。
53、ESA阳性部位:细胞膜对照:阑尾ESA表达于单层上皮和多种肿瘤细胞的基底层细胞表面。
主要用于鉴别肿瘤是否为上皮源性,特别是有助于转移的上皮源性恶性肿瘤的鉴别诊断。
目前也有报道认为ESA可以作为鉴别腺癌和间皮瘤的一个指标。
54、F VIII阳性部位:细胞浆对照:阑尾用于鉴别血管肿瘤,但是敏感性不高。
高级别的血管肉瘤只有10%~15%的病倒阳性。
更常用于良性血管瘤和血管内皮瘤的鉴别。
55、Galectin-3阳性部位:细胞浆对照:间变性大细胞淋巴瘤Galectin-3主要同类细胞间的黏附有关,同时Galectin-3在间变性大细胞淋巴瘤表达,而各种类型的霍奇金淋巴瘤及R-S细胞均不表达。
可用于肿瘤细胞黏附和转移方面的研究及间变性大细胞淋巴瘤的标记。
病理常用免疫组化
病理常用免疫组化,即免疫组织化学技术,是病理科经常采用的一种检查方法。
它基于免疫学的基本原理,即抗原与抗体的特异性结合,利用已知的、带有能与显色剂结合基团的抗体,检测未知肿瘤细胞内的抗原,从而对疾病进行诊断、鉴别诊断以及进一步的病理分型。
免疫组化在病理诊断中发挥着重要作用,特别是在肿瘤的诊断和鉴别诊断方面。
由于肿瘤组织形态各异,传统的HE染色技术在某些情况下难以做出明确的形态学诊断。
而免疫组化技术通过标记抗体的显色剂,可以对组织细胞内的抗原进行定位、定性和相对定量的研究,从而提高诊断的准确率。
特别是对于低分化或未分化的肿瘤,免疫组化的诊断准确率可以达到50%~75%。
除了肿瘤的诊断和鉴别诊断,免疫组化在临床应用方面还有以下作用:
确定转移性恶性肿瘤的原发部位,有助于临床治疗方案的制定。
对软组织肿瘤进行进一步的病理分型,因为软组织肿瘤种类繁多,组织形态相似,有时难以区分其组织来源。
发现微小转移灶,有助于临床治疗方案的确定和患者预后的判断。
为临床提供治疗方案的选择,例如乳腺癌激素受体(ER、PR)的检测在指导临床治疗方面已起到了重要的作用。
综上所述,免疫组化技术是病理科实验室最重要的技术之一,为病理科医师做出精准诊断提供了有力支持。
以上内容仅供参考,如需了解更多关于免疫组化的信息,建议查阅相关书籍或咨询专业医师。
病理科免疫组化指标
免疫组化指标可以包括各种抗体标记的蛋白质,例如细胞周期调控蛋白(如Ki-67)、肿瘤抑制基因产物(如p53)、肿瘤标志物(如HER2)、细胞表面标记物(如CD20、CD3等)等。
这些指标的表达情况可以帮助病理医生进行肿瘤类型的鉴别诊断,评估肿瘤的侵袭性和预后,指导个体化治疗方案的制定等。
在临床实践中,病理科免疫组化指标的选择需根据具体病例的临床特征和病理学表现来确定。
不同类型的肿瘤可能需要检测不同的免疫组化指标,而且在不同的病理诊断和治疗指导中也有不同的应用价值。
总的来说,病理科免疫组化指标在肿瘤病理诊断和个体化治疗中扮演着重要的角色,为临床医生提供了重要的辅助诊断和治疗决策依据。
随着科学技术的不断发展,相信在未来免疫组化指标会在病理学领域发挥越来越重要的作用。
免疫组织化学常用抗体标记谱系第一节上皮细胞标志1.细胞角蛋白Cytokeratin(CK)CK就是一种中间丝蛋白,就是上皮细胞及其肿瘤较特异标志物。
CK分子量为40~60KD,根据其分子量不同分为20余种,并粗略划分为高分子CK(HCK)与低分子CK(LCK)。
2.广谱细胞角蛋白PCKPCK标记所有单层上皮、复层上皮、移行上皮细胞,各种上皮细胞来源得良恶性肿瘤、滑膜瘤与间皮瘤等少部分间叶源性肿瘤亦可阳性、3。
高分子角蛋白HCKHCK主要标记复层鳞状上皮及鳞状细胞癌,HCK(34βE12)常用于标记前列腺基底细胞,观察基底细胞存在与否有助于前列腺癌得诊断。
4、低分子细胞角蛋白LCKLCK主要存在于单层上皮及腺上皮细胞,因此,LCK主要用于内脏腺上皮肿瘤得诊断与鉴别诊断。
5。
细胞角蛋白7 CK 7CK7分子量为54KD。
主要标记腺上皮与移行上皮细胞,卵巢、肺与乳腺上皮为CK7阳性,而结肠、前列腺与胃肠道上皮为CD7阴性,因此可用于卵巢癌(CD7+)与结肠癌(CK7—)得鉴别。
6。
细胞角蛋白8 CK8CDK8分子量为52、5KD,主要标记非鳞状上皮,因此主要用于腺癌与导管癌得诊断,鳞癌一般不表达CK8。
有报道肝细胞癌主要表达CK8与CK18、7、细胞角蛋白10 CK10CK10分子量为56。
5KD、主要标记上皮得基底上层与颗粒细胞层,同时CK10表达与细胞得分化程度呈正比,高分化者常阳性,主要用于鳞癌得诊断。
8。
细胞角蛋白13 CK13CK13分子量为53KD。
标记所有得复层上皮,包括角化与非角化上皮。
主要用于高分化鳞状细胞癌得诊断、9、细胞角蛋白18 CK18CK18分子量为45KD,属低分子量A型细胞角蛋白。
主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常为阴性。
主要用于腺癌得诊断。
10、细胞角蛋白19 CK19CK19分子量为40KD,分布于各种单层上皮包括腺上皮,主要用于腺癌得诊断。
肝细胞不表达CK19,因此可用于肝癌与转移性腺癌得鉴别。
11。
细胞角蛋白20 CK20细胞角蛋白20(CK20)分子量为46KD,主要标记胃肠道上皮、尿道上皮与Merkel细胞、主要用于胃肠道腺癌、卵巢粘液性肿瘤与Merkel细胞癌得诊断。
鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌与卵巢非粘液性肿瘤均不表达CK20。
12。
上皮膜抗原Epithelial membrane antigen, EMA EMA就是一组糖蛋白,广泛分布在各种正常上皮细胞膜及其肿瘤细胞中,分布范围与细胞角蛋白相似,但对内脏腺上皮得表达优于细胞角蛋白。
对上皮源性肿瘤,尤其就是低分化腺癌,最好与细胞角蛋白联合应用,可提高阳性率、13.上皮特异性抗原Epithelial Specific Antigen,ESA,ESA为分子量40KD得细胞表面糖蛋白,属较广谱得上皮细胞标志,大多数上皮细胞为阳性反应,在肿瘤细胞中,腺癌细胞表达强于鳞癌细胞。
ESA标记谱系似EMA。
14、前列腺特异抗原Prostatespecific antigen,PSAPSA就是由前列腺上皮细胞合成得一种糖蛋白,目前认为具有特异性得肿瘤标记物之一、主要用于前列腺癌与转移性前列腺癌得诊断,但不能作为良、恶性前列腺疾病得鉴别诊断,因为绝大多数得前列腺增生上皮均呈阳性反应。
15.前列腺酸性磷酸酶Prostate acide phosphatase,PSAP PSAP就是由前列腺上皮细胞合成得一种磷酸酶。
正常前列腺组织,增生得前列腺组织与前列腺癌均表达有PSAP、主要用于前列腺癌与转移性前列腺癌得诊断,但不能作为良、恶性前列腺疾病得鉴别诊断。
16。
甲状腺球蛋白Thyroglobuli,TGTG就是甲状腺滤泡上皮细胞合成得一种糖蛋白,对甲状腺滤泡上皮细胞与甲状腺上皮性肿瘤具有较高特异性,常用于各种甲状腺癌与转移性腺癌得诊断与鉴别诊断、17。
肝细胞抗原HPCHPC就是肝细胞较特异标记物,阳性颗粒定位于肝细胞浆。
主要标记肝细胞及肝细胞发生与良恶性肿瘤、非肝细胞无交叉反应、18.HCG-βHCG就是由胎盘合体滋养层细胞产生得一种糖蛋白激素,主要用于胎盘滋养细胞与生殖细胞肿瘤如葡萄胎、绒癌得诊断以及某些神经内分泌肿瘤得研究、第二节ﻭ软组织标记2.波形蛋白Vimentin波形蛋白主要分布于间叶细胞及其起源得肿瘤组织、上皮细胞及其肿瘤一般不含此蛋白。
常用于间叶来源得恶性肿瘤如间皮瘤、滑膜肉瘤、脑膜瘤等诊断,对癌与肉瘤、恶黑与癌、胸腺瘤与淋巴瘤、未分化癌与小细胞间叶肿瘤得鉴别诊断具有重要参考意义、3.结蛋白DesminDesmin为肌细胞得中间丝蛋白,正常分布于平滑肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞与肌上皮细胞。
上述细胞来源得良恶性肿瘤desmin阳性反应、主要用于子宫、皮肤与胃肠道平滑肌肿瘤,横纹肌肿瘤与肌上皮肿瘤得诊断与鉴别诊断。
4、肌动蛋白(广谱)ActinMSA就是一种具有收缩能力得微丝蛋白,广泛分布于几乎所有得肌型细胞中、5、Actin(HHF35)就是一种广谱得肌动蛋白,主要表达于骨骼肌、平滑肌、心肌与肌上皮细胞,肌源性肿瘤包括平滑肌瘤,平滑肌肉瘤与横纹肌肉瘤以及肌上皮肿瘤等均可呈阳性反应。
6。
肌动蛋白(横纹肌)Sarcomeric Actin横纹肌肌动蛋白就是一种具有收缩能力得微丝蛋白,主要分布于骨骼肌与心肌细胞中。
用于各种类型得横纹肌肿瘤得诊断,亦可标记具有横纹肌细胞分化肿瘤。
7.肌调节蛋白MyoD1MyoD1就是横纹肌肿瘤得一种标记。
主要用于横纹肌肉瘤得诊断,阳性颗粒位于细胞核。
少数非肌源性组织包括腺上皮、神经母细胞瘤、尤文氏肉瘤、腺胞状软组织肉瘤可见胞浆阳性、8、肌红蛋白MyoglobinMyoglobin就是骨骼肌肌浆中得一种肌红蛋白,有较高得组织特异性。
但对肿瘤得敏感性较差。
主要用于横纹肌肿瘤得诊断与鉴别诊断、少数恶性中胚叶混合瘤,睾丸畸胎瘤、肾母细胞瘤中肌母细胞亦可见阳性表达、9.肌球蛋白(骨骼肌)Myosin(Skeletal)骨骼肌肌球蛋白可分为I型肌纤维(慢收缩肌纤维)与II型肌纤维(快收缩肌纤维),主要用于横纹肌肿瘤或含有横纹肌成分得肿瘤得诊断与鉴别诊断。
10、MyogeninMyogenin为肌细胞生成素,就是横纹肌及其肿瘤较特异标记物,与MyoD1有一定互补作用、Myogenin对某些去分化得横纹肌肉瘤标记较理想,免疫表型为胞核型。
11。
肌动蛋白(平滑肌)Smooth muscle ActinSMA就是一种标记平滑肌得肌动蛋白,主用于检测血管平滑肌,平滑肌瘤与平滑肌肉瘤、肌上皮细胞与肌上皮瘤等。
在判断良恶性乳腺病变时,根据肌上皮细胞阳性与否与分布,可作为一个重要得参考指标、12。
肌球蛋白(平滑肌)Myosin(Smooth muscle)平滑肌肌球蛋白主要用于标记血管与内脏平滑肌细胞以及肌上皮细胞,被认为就是平滑肌较为特异与可靠得标记,有助于间叶肿瘤得诊断与分类,亦可用于乳腺肌上皮细胞得检测,有助于原位癌与浸润癌得区别。
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Caldesmon它就是一种与肌动蛋白与原肌球蛋白结合得钙结蛋白,具有调节平滑肌收缩得功能,将其作为平滑肌标志,用于良恶性平滑肌肿瘤得诊断与研究。
14、Calponin就是一种肌动蛋白结合蛋白,具有抑制平滑肌细胞收缩功能,主要分布于平滑肌细胞与肌上皮,对平滑肌肿瘤、肌上皮肿瘤诊断有意义,亦可用于乳腺肌上皮显示,判断乳腺良恶性。
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第八因子相关抗原Factor Ⅷ—relatedAntigne(FⅧ-RAg) FⅧ-RAg就是一种糖蛋白,广泛存在于血管内皮、肝窦、脾窦内皮以及淋巴管内皮细胞、就是血管内皮及其内皮源性良恶性肿瘤得特异性标记。
主要用于血管源性良性肿瘤与血管肉瘤得诊断。
少数附睾、子宫与输卵管得腺癌样瘤亦可表达、良性血管内皮肿瘤阳性表达强于恶性血管内皮肿瘤、血管外皮及其肿瘤细胞不表达FⅧ。
16.内皮细胞标记CD31CD31就是一种重要得血管内皮细胞标志。
主要用于良恶性血管源性肿瘤得诊断与鉴别诊断。
亦可用于各种肿瘤间质中血管生成得研究。
血管外皮细胞及其肿瘤细胞不表达。
17、内皮细胞标记CD34CD34主要标记骨髓干细胞与内皮细胞。
常用于良恶性血管源性肿瘤得诊断与鉴别诊断。
亦可用于各种肿瘤间质中血管生成得研究。
目前CD34也就是胃肠间质瘤较理想得标志物。
18、溶菌酶Lysozyme(Muramidase)Lysozyme与AACT均为组织细胞及其肿瘤得标记物。
主要用于组织细胞瘤、恶纤组、恶性组织细胞增生症与组织细胞恶性淋巴瘤等诊断,由于其特异性不强,应与AACT、CD68等联合应用,以提高其准确性。
19、α1抗糜蛋白酶A1ACTA1ACT就是一种蛋白酶,为巨噬细胞,组织细胞得标记,肝细胞与星形胶质细胞阳性表达,由于该抗体缺乏特异性,目前主要用于纤维组织细胞源性肿瘤得诊断与鉴别诊断。
20、间皮细胞 Mesothelial cell(MCA)MCA为间皮细胞标记,正常间皮细胞与间皮瘤阳性表达,阳性颗粒定位于细胞膜,多为薄膜型,某些腺癌亦可胞浆阳性,MCA主要用于间皮瘤得诊断、21、钙结合蛋白Calretinin(CR)CR就是一种钙结合蛋白,就是间皮细胞及其肿瘤较理想得标志,在上皮性间皮瘤得诊断中,敏感性可达100%,特异性约为50%,也可用于神经系统疾病得研究。
第三节神经组织标志1、胶质纤维酸性蛋白Glial Fibrillary Acidic protein(GFAP) GFAP为中间丝蛋白之一,主要用于星形胶质瘤包括星形细胞瘤、星形母细胞瘤、混合性胶质瘤、多形性胶质母细胞瘤、多数室管膜瘤等中枢神经系统肿瘤得诊断与鉴别诊断。
唾液腺肌上皮细胞及其肌上皮细胞瘤亦可阳性反应。
2.神经纤维细丝蛋白Neurofilament(NF)NF就是神经元特异性中间丝蛋白,由三个不同分子量(68、160与200KD)得亚单位构成得多聚体,以不同得比例分布于中枢外周神经元以及肿瘤中,其阳性见于节细胞神经瘤,副节瘤、小脑或外周神经母细胞瘤,肾上腺嗜铬细胞瘤,亦有助于某些神经内分泌肿瘤得诊断。
3、NestinNestin就是一种新得中间丝蛋白,在神经上皮干细胞中极为丰富,在原始神经外胚层肿瘤(PNET),星形胶质细胞瘤常呈阳性反应,故在这些肿瘤得诊断及研究中具有重要意义。
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S—100 ProteinS-100就是一种可溶性酸性蛋白。
有3种亚型,即S-100a、S-100r、S-100β。
S-100主要存在神经组织、垂体、颈动脉体、肾上腺髓质、唾液腺、少数间叶组织。
主要用于神经鞘瘤、恶黑、脂肪肉瘤及软骨肿瘤等得诊断与鉴别诊断。
亦可用于乳腺肌上皮标记,判断乳腺肿瘤得良恶性。
5。
嗜铬素A Chromogranin A(CgA)CgA就是人类肾上腺髓质中含量最高得一种可溶性酸性蛋白,广泛存在于神经元及其神经内分泌细胞与肿瘤细胞中。