氯仿甲醇法提取

磷脂脂肪酸（PLFA）是一种生物标志物，可以用于指示土壤微生物群落的结构和功能。

PLFA 测定方法通常包括以下步骤：
1. 样品采集：采集土壤样品，并将其保存在适当的条件下。

2. 提取：使用适当的有机溶剂（如氯仿、甲醇等）从土壤样品中提取磷脂脂肪酸。

3. 净化：使用硅胶柱或其他适当的方法对提取物进行净化，以去除杂质。

4. 分离：使用气相色谱或液相色谱等技术对磷脂脂肪酸进行分离。

5. 鉴定：使用质谱或其他适当的技术对分离出的磷脂脂肪酸进行鉴定。

6. 数据分析：对鉴定出的磷脂脂肪酸进行数据分析，以确定土壤微生物群落的结构和功能。

需要注意的是，PLFA 测定方法的具体步骤可能因不同的实验条件和设备而有所不同。

因此，在进行 PLFA 测定之前，需要仔细阅读相关的实验手册和文献，并根据实际情况进行适当的调整。

中药化学成分预实验实验报告
一、实验目的
通过对中药化学成分的预实验，初步了解中药中所含有的化学成分，为后续的分离和鉴定工作提供依据。

二、实验材料
1. 中药样品（例如：丹参、黄连、甘草等）
2. 实验试剂：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、甲醇、氯仿等
3. 实验仪器：索氏提取器、薄层色谱板、紫外灯、试管、滴管等
三、实验步骤与观察
1. 索氏提取法：采用索氏提取器，以乙醇作为溶剂，提取中药样品中的脂溶性成分。

观察提取液的颜色和质地，记录提取液中可能存在的成分。

2. 溶剂萃取法：将中药样品分别用石油醚、乙酸乙酯、氯仿进行萃取，观察不同溶剂萃取后得到的萃取液的颜色和质地，初步判断各萃取液中所含有的化学成分。

3. 薄层色谱法：将中药样品进行薄层色谱分离，在紫外灯下观察斑点的颜色和位置，初步确定样品中可能存在的化合物。

四、实验结果与讨论
根据实验观察和记录，初步确定中药样品中可能含有的化学成分。

例如，丹参可能含有丹参酮类化合物，黄连可能含有小檗碱类化合物，甘草可能含有甘草甜素等。

讨论这些成分的生理活性及其在中药中的作用。

五、实验结论
通过本次预实验，初步了解了中药中所含有的化学成分，为后续的分离和鉴定工作提供了依据。

在实验过程中，应进一步优化实验条件和方法，提高分离和鉴定的准确性和可靠性。

食品分析与检测试题及答案一、填空题(计 30 分，每小题 2 分)1、采样遵循的原则是( ) 。

2、肉制品新鲜度常用检验方法有( ) 、( ) 、( ) 、( ) 。

3、采样一般分三个步骤进行，分别得到的样品为( ) 。

4、分析柑橘类果实及其制品时，用( ) 酸表示， K=0.064， K 是换算为主要酸的系数，即指( ) 。

5、用工业酒精配制白酒的鉴别主要检测对象是( ) 。

6、已知测定蔗糖溶液的糖锤度为 35.8oBx，则该糖液的重量百分浓度为( ) 。

7、食品分析的方法有哪些( )？8、对于颜色深的食品，测定其酸度的方法有( ) 。

9、对于含磷脂较多的鱼、贝、肉、蛋等，测定其脂肪含量可采用的方法是( ) 。

10 、测定痕量水分的食品中的水分含量的方法是( ) 。

11、在测定磷酸盐含量比较高的食品的灰分时，为了使灰化完全，可采取的措施有( ) 。

12、食品中的总酸度是指( ) 。

13、食品感官分析按照应用目的可分为( )按照方法的性质可分为( ) 。

14、食品分析的一般程序为( ) 。

15、快速测定蛋白质的方法名称有( ) 。

二、是非题(计 10 分，每小题 1 分)1 、测定所有食品中的脂肪含量时都可以用索氏抽提法。

( )2、在测定冰淇淋膨胀率时，加入乙醚的体积为 2.0ml，滴加蒸馏水的体积为 22.0ml，则冰淇淋膨胀率为 92.3% 。

( )3 、测定脂溶性维生素一般在酸性条件下进行前处理。

( ) 4、测定食品中的钾、钠含量时，可用原子发射光谱法测定。

( ) 5 、有效酸度是指食品中所有酸性成分的总量。

( )6 、测定含磷脂的结合态脂类的样品中的脂肪含量用巴布科克法。

( )7 、用高效液相色谱法测定食品中的糖精时，根据色谱图以保留时间定性，以峰高、峰面积定量。

( )8 、用原子吸收分光光度法可以测定矿物元素的含量。

( )9、VB2 在一定条件下，产生荧光，在 525nm 波长下可以测定其荧光值，从而可以在 525nm 波长下测定食品中 VB2 的含量。

Folch法提取脂质
1.组织称重。

2.剪碎组织，按照1g组织加入20ml溶剂比例加入氯仿和甲醇（2:1）
混合溶液。

混匀15-20min后1500-2000r/min离心5min收集溶液。

3.溶液加入0.2体积的水（20ml溶液加4ml水）或0.9%NaCl溶液清
洗，涡旋几秒钟，以2000rpm离心10min得到两相液面。

吸取上清液，用于分析检测神经节苷脂类或小的极性分子。

如果有必要（为移除标记分子），用甲醇和水（1:1）清洗两相液交界面1至2次，注意不要冲洗到下层液体内。

4.收集的下层液即氯仿层含有脂质，用N2吹干氯仿即得脂质。

文献采用正相液相色谱法和大气压化学电离质谱分析测定神经酰胺时说按Folch法，以氯仿和甲醇（2:1,1:1,1:2）三个不同比例来提取脂质，每种混合溶液提取2小时。

Bligh和Dyer的方法（也是我们之前用的方法）
1.皮肤组织称重,胰酶37℃消化1h，用镊子分离表皮和真皮，弃去
真皮。

2.剪碎表皮组织，加入
3.75ml氯仿和甲醇（1:2）混合溶液。

匀浆
15min。

加氯仿1.25ml，混匀30s。

再加水1.25ml，混匀30s。

3.1500r/min离心15min，吸取下层氯仿层，收集在棕色小瓶中，N2
挥干溶剂，即得总脂质。

注：
本次试验Forch法取两只正常组的雌雄鼠制备两个样，B&D法也是取两只正常组的雌雄鼠制备两个样。

预先准备好需要的溶剂、移液管、棕色小瓶和离心管（离心管最好用玻璃的）。

三萜的检测方法
1、实验原理：
食品中三萜类物质经氯仿萃取后在香草醛-浓硫酸的作用下，生成橙色物质，其颜色深浅与三萜含量成正比。

2、试剂与材料
香草醛、氯仿、甲醇、浓硫酸均为分析纯试剂；
硫酸溶液：在100ml量筒中取水28ml，加浓硫酸至100ml，按硫酸稀释方法，小心进行。

香草醛溶液：香草醛8g加甲醇溶解定溶至100ml。

3、标准物质
齐墩果酸SIGMA 纯度≥97％
4、仪器
水浴锅、分光光度计
5、绘制标准曲线：
标准溶液：精密量取齐墩果酸标准品10mg，以氯仿定溶至100ml。

标准曲线：吸取标准溶液0.0，0.10，0.20，0.50, 1.00，1.50ml加热挥去溶剂，加入香草醛0.5ml，硫酸溶液5ml混匀后，于60度水浴中保温30分钟。

取出后冰水放置15分钟,于1cm比色皿中，以标准液0.0管为参比调节零点,于波长550±2nm处测定吸光值，求直线回归方程。

6、样品处理
固体样品：精密吸取样品0.2000-0.5000g，加氯仿约25.0ml，超声1小时，
冷却后，用氯仿定溶25.0m1，过滤：滤液备用。

液体样品直接用氯仿萃取，取氯仿层备用。

7，测定
精密移取样品制备液0.1-1.0m1于玻璃试管中，加热挥发掉溶剂加入香草醛0.5ml，硫酸溶液5.0ml混匀后，于60度水浴中保温30分钟。

于lcm色皿中，以试剂空白液为参比调节零点，于波长550±2nm处测定吸光值，按下列公式计算.
8、计算公式
cv1
W（%）= ————
mv2。

第四章名词解释：感官检验食品的感官检验，是根据人的感觉器官对食品的各种质量特征的“感觉”，如：味觉、嗅觉、听觉、视觉等；用语言、文字、符号或数据进行记录，再运用统计学的方法进行统计分析，从而得出结论，对食品的色、香、味、形、质地、口感等各项指标做出评价的方法。

食品化学分析指食品卫生分析过程中所用的各种化学分析方法。

分为定性和定量两部分。

滴定分析法:用滴定剂滴定被测组分至定量反应完全为止，根据滴定剂的浓度和消耗的体积及与被测物的化学计量关系，计算被测组分含量的分析方法。

光吸收曲线将不同波长的光透过某一固定浓度和厚度的有色溶液，测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度（即吸光度），然后以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，可得一曲线。

这曲线描述了物质对不同波长的吸收能力，称吸收曲线分配系数组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。

在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度（单位：g / mL）比，称为分配系数食品微生物检验就是应用微生物学的理论与方法，研究外界环境和食品中微生物的种类、数量、性质、活动规律及其对人和动物健康的影响。

精密度^指多次平行测定结果相互接近的程度。

它代表测定方法的稳定性和重现性。

精密度的高低用偏差来衡量。

准确度指测定值与真实值的接近程度。

反映测定结果的可靠性。

问答题1、感官检验的意义是什么可对食品的可接受性做出判断，可判断食品的质量及变化情况。

感官检验在食品生产中的原材料和成品的质量控制、食品的贮藏和保鲜、新产品开发、市场调查等方面具有重要的意义和作用。

2、折光度法的原理是什么利用光的反射定律和折射定律，可通过测定液体中光线的折光度来测定一些物质的含量。

通过测定液态食品的折射率.可以鉴别食品的组成，确定食品的浓度，判断食品的纯净程度及品质。

3、旋光法的原理是什么旋光法：应用旋光仪测量旋光性物质的旋光度以确定其含量的分析方法。

旋光度和比旋光度是旋光性物质的主要物理性质。

食品检验工（中级）模拟试卷18(题后含答案及解析) 题型有：1. 简答题 2. 判断题请判断下列各题正误。

3. 单项选择题1．氯仿-甲醇提取法的注意事项正确答案：1)提取结束后先用玻璃过滤器过滤，再用溶剂洗涤烧瓶，每次用5 mL洗3次，然后用30mL洗涤残渣及滤器，洗涤残渣时可用玻璃棒一边搅拌试样残渣，一边用溶剂洗涤。

2)回收溶剂也可利用索氏抽提器，提脂瓶需事先恒重后，再把提取液移入提脂瓶。

3)溶剂回收残留物应具有一定流动性，不能完全干涸，否则脂类难以溶解于石油醚而使测定值偏低。

故最好在残留有适量水分时停止蒸发。

4)在用石油醚萃取时，应先加石油醚再加无水硫酸钠，以免影响脂肪的溶解。

涉及知识点：肉蛋及其制品的检验2．酸水解法的注意事项正确答案：1)放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管，否则超过回流弯管以上部分样品中的脂肪不能提尽造成误差。

2)提取时水浴温度不可过高，回流速度控制在每5～6min回流一次为宜。

3)在抽提时，冷却管上端最好连接一个氯化钙管，这不仅可防止空气中水分的进入，还可避免抽提剂的挥发。

若无此装置，可松松地塞一团干燥的脱脂棉球。

4)浸出物在烘箱内干燥时间不能过长，因为极不饱和脂肪酸会受热氧化而增加质量。

5)抽提瓶干燥时，瓶口应侧倒放置，使挥发物易与空气形成对流，干燥较快。

涉及知识点：肉蛋及其制品的检验3．指示剂滴定法的注意事项正确答案：1)蒸馏时，应首先打开排气口，待烧瓶中的水加热沸腾2min、排除冷空气、保持蒸馏装置稳定后，关闭排气口进行蒸馏。

2)蒸馏结束时，也应先打开排气口，然后关闭热源。

以防止蒸馏瓶造成真空，致使溶液倒吸。

3)食醋样品蒸馏时间一般为20min左右，收集蒸出液约180mL，至少不少于150mL 或不多于200mL。

4)因挥发酸在蒸馏收集时可能存在的损失，以及指示剂滴定法也存在误差，仲裁检验应以酸度计法为准。

涉及知识点：调味品、酱腌制品的检验4．对于同一种物质，使用不同的光源，测得的折光率相同。