【CN110055188A】一株产抑菌肽的多粘类芽孢杆菌XW4及其分离筛选和应用【专利】

一株生防芽孢杆菌的分离与鉴定作者：广泽宇来源：《乡村科技》 2018年第11期植物病害一直在农业生产中有较大影响，化学防治是控制植物病害的有效方法，其具有见效快、杀菌谱广、成本低、使用简便等优点［1］，但长期大量使用化学农药致使病原菌产生了耐受性，并且农药对人、畜和环境都有一定的危害。

随着近年来人们对食品安全及环境污染问题关注度的提高，一些化学杀菌剂在许多发达国家和地区已被严格限制使用［2］。

生物防治技术是一种无残留无污染、不杀伤天敌、不会产生抗药性［3］、有利于人畜安全及环境保护的无公害环保技术，有利于提高经济、社会、生态效益，有广阔的发展前景［4］。

因此，生物防治尤其是微生物防治在将来可能替代化学药剂成为一个环保安全的选择［5］。

本研究旨在从植物根际土壤中分离筛选对植物病原微生物具有生防作用的芽孢杆菌，对其进行鉴定。

分离筛选出高效生防的芽孢杆菌，为以后拮抗型生物肥料以及生物农药的生产提供高效的菌种，同时为菌种的工业化发酵生产提供科学的试验数据。

1 材料和方法1.1 试验材料1.1.1 供试植物病原菌株。

立枯丝核菌Rhizoctoniasolani、葫芦科刺盘孢Colletotrichum lagenarium、灰葡萄孢（Botrytis cinerea）、玉蜀黍离蠕孢（Bipolaris maydis）、链格孢（Alternaria Nees）、尖孢镰刀（Fusarium oxysporum）、腐皮壳霉（Fusarium solani）、交链孢霉（Alternariasp.），试验室保藏。

1.1.2 主要试剂NA。

固体培养基、NB液体培养基、马铃薯葡萄糖培养基（PDA）、FastDNA? SPIN Kit forSoil DNA试剂盒，Trans 2K Plus Ⅱ DNA Marker、6×DNALoading B uffer、Agarose、50×TBE。

1.1.3 仪器设备。

步法農划律2019年第60卷第9期文献著录格式：徐燕尔，丁鹏辉，陈明路.一株解淀粉芽抱杆菌抑菌成分的分离与抑菌特性[J]•浙江农业科学，2019,60(9)：1516-1520.DOI：10.16178/j.issn.0528-9017.20190908一株解淀粉芽抱杆菌抑菌成分的分离与抑菌特性徐燕尔，丁鹏辉，陈明路(浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江临安31300)摘要：以马藻、金鱼藻等水藻为材料，分离得到24株芽抱杆菌，从中筛选得到1株对金黄色葡萄球菌有较强抑菌作用的解淀粉芽抱杆菌，该菌的抑菌成分主要集中在培养液的酸沉组分中+通过硅胶柱层析对酸沉组分进行初步分离，100%甲醇洗脱组分对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强+理化特性分析结果表明，该菌抑菌组分热稳定性高，对蛋白酶不敏感，pH对其抑菌活性无明显影响。

关键词：生物防治；金黄色葡萄球菌；解淀粉芽抱杆菌；抑菌成分中图分类号：TQ465.92文献标志码：A文章编号：0528-9017(2019)09-1516-04微生物污染作为生活中的常见污染问题对人类的生活产生了极大影响，它不但会导致食品腐败变收稿日期：2019-06-25基金项目：浙江农林大学创新创业项目(2013200039)作者简介：徐燕尔(1997—)，女，浙江湖州人，学士，研究方向为食品微生物，E-mail：522217978@qq.gm。

笋根腐病是引起芦笋连作障碍的重要原因，芦笋根腐病病原为镰刀菌，是一种土壤习居真菌，易在土壤中累积+在设施栽培中，由于环境条件适宜，更易累积+芦笋是引进作物，芦笋根腐病的主要病原是尖抱镰刀菌石刁柏专化型[2-，芦笋根腐病菌可能由引种进入我国；根据对笋区长期的实践经验，20世纪90年代前，芦笋根腐病很少见，此后渐多，现已成为一种常见的芦笋病害+3.2蚕沙对设施连作土壤改良和对芦笋根腐病的防病作用本研究表明，蚕沙有较强的抑制芦笋根腐病菌生长和产抱作用，可能是蚕沙中含有的异槲皮苷、芦丁、紫云英苷等黄酮类和生物碱类等物质具有抑菌作用有关[7-+蚕沙是一种安全、优质的有机肥，在很多作物上都有应用[%-。

一株产抗菌活性物质解淀粉芽孢杆菌的筛选及鉴定杨胜远;韦锦;李云;姚虹;黄月丹【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2010(031)021【摘要】从菜园土壤中分离筛选到1株产广谱抗菌活性物质的菌株K6,其抗菌活性物质对藤黄微球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、酿酒酵母、匍枝根霉和白色念珠菌均有抑制作用,其中对革兰氏阳性菌的抑菌作用最强,对霉菌的抑制作用相对较弱.通过形态特征、16SrDNA序列分析和系统发育分析,菌株K6与B.amyloliquefaciens位于同一簇群,同源性达99%,将其初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌.【总页数】5页(P208-212)【作者】杨胜远;韦锦;李云;姚虹;黄月丹【作者单位】韩山师范学院生物系,广东,潮州,521041;韩山师范学院图书馆,广东,潮州,521041;韩山师范学院生物系,广东,潮州,521041;韩山师范学院生物系,广东,潮州,521041;韩山师范学院生物系,广东,潮州,521041【正文语种】中文【中图分类】Q939【相关文献】1.一株抗木霉菌解淀粉芽孢杆菌的筛选与鉴定 [J], 努尔孜亚;管建华;贾培松;魏鹏;罗影;贾文捷;郝敬喆2.一株高产淀粉酶枯草芽孢杆菌的筛选、鉴定及产酶条件的优化 [J], 陈相达;戴慧慧;刘燕;李圆圆;翁丛丛;茹波;曾爱兵3.一株抗烟草赤星病解淀粉芽孢杆菌的筛选及鉴定 [J], 司世飞;宋莉莎;任静;刘仁祥;李忠4.一株具有拮抗作用的解淀粉芽孢杆菌的筛选、鉴定及生物学特性研究 [J], 蒋凯丽; 周新丽; 高海燕5.一株具有产IAA能力的解淀粉芽孢杆菌的分离鉴定及功能评价 [J], 陈迪;芮凯;曾涛;田威;马瑞;谢圣华;罗诗彤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一株产生广谱抗菌物质地衣芽孢杆菌的筛选与鉴定
高兆建;樊陈;陈尚龙;巫友华
【期刊名称】《徐州工程学院学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2012(027)002
【摘要】采用异步培养法，从土壤样品中筛选到一株产抗菌物质活性较强的菌株
F69．结合菌落形态、生理生化指标和16SrDNA序列分析对菌株F69进行菌种鉴定．菌株F69在系统发育上属于芽孢杆菌属，它和地衣芽胞杆菌菌株的16SrDNA 序列相似性最高为99％，该菌株被鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）．菌株F69可作为抗菌物质产生菌进行进一步深入研究．【总页数】5页(P40-44)
【作者】高兆建;樊陈;陈尚龙;巫友华
【作者单位】徐州工程学院,江苏徐州221008;徐州工程学院,江苏徐州221008;徐
州工程学院,江苏徐州221008;徐州工程学院,江苏徐州221008
【正文语种】中文
【中图分类】Q93-331
【相关文献】
1.广谱抗菌芽孢杆菌的筛选及其抗酵母物质的纯化和鉴定 [J], 石举然;别小妹;吕凤霞;陆兆新
2.一株絮凝剂产生菌死谷芽孢杆菌Z11的筛选和鉴定 [J], 张晓飞;于茹;曲杰;宋峰;李正华;孙云龙;韩国红;李刻秦;师晓喆;胡加超;董淑敏;王铮;赵哲
3.一株高产α-淀粉酶的地衣芽孢杆菌的筛选及鉴定 [J], 亓秀晔;刘乃芝;郭杨丽;徐
海燕;程福亮;谷巍
4.一株广谱抗菌甲基营养型芽孢杆菌的筛选及其产抗菌脂肽的鉴定 [J], 杨艳宇;冀倩倩;孙建东;王健伟;齐洪庆;刘影;简凡杰;李成
5.产广谱抗菌物质芽孢杆菌的筛选与鉴定 [J], 彭研;陈蕾蕾;裘纪莹;杨革
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

纪帅奇，乌日娜，张淘崴，等. 高产抗菌脂肽芽孢杆菌的分离鉴定筛选及发酵工艺优化[J]. 食品工业科技，2024，45（4）：101−108.doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023040051JI Shuaiqi, WU Rina, ZHANG Taowei, et al. Isolation, Identification, Screening and Fermentation Process Optimization of Bacillus Producing High Antimicrobial Lipopeptide[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(4): 101−108. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023040051· 生物工程 ·高产抗菌脂肽芽孢杆菌的分离鉴定筛选及发酵工艺优化纪帅奇1,2，乌日娜1,2,3，张淘崴2,3，娄梦雪1,3，贺凯茹2,3，张　妍1,2，武俊瑞1,2,3,*（1.沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳 110866；2.辽宁省食品发酵技术工程研究中心，辽宁沈阳 110866；3.沈阳市微生物发酵技术创新重点实验室，辽宁沈阳 110866）摘　要：为了筛选出高产抗菌脂肽的芽孢杆菌并确定其最佳发酵工艺条件，研究从传统发酵豆酱中分离和鉴定产抗菌脂肽芽孢杆菌菌株，通过正交试验研究了发酵接种量、发酵填液量、发酵时间、发酵温度等发酵条件对芽孢杆菌脂肽产量的影响。

结果表明，从9份东北传统发酵豆酱中分离筛选得到27株芽孢杆菌，经16S rDNA 鉴定，其中6株芽孢杆菌具有合成脂肽的基因sfp 、fenB 和ituA 。

通过单位菌体脂肽产量和抑菌效果测定发现，贝莱斯芽孢杆菌SN-20和解淀粉芽孢杆菌SN-46表现优异，单位菌体脂肽产量达106和72 mg ，且对革兰氏阳性和阴性指示菌均有较强的抑菌效果。

专利名称：一种产抗菌肽多黏性芽孢杆菌及其生产方法和应用专利类型：发明专利
发明人：陆克文,宋士良,郑云峰
申请号：CN201310315467.0
申请日：20130724
公开号：CN103361295A
公开日：
20131023
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本申请提供了一种能够产抗菌肽的多黏类芽孢杆菌及其生产方法以及应用，选用芽孢杆菌偏爱的遗传密码子，并设计合成所述抗菌肽基因；在所述抗菌肽基因末端引入保护抗菌肽稳定性的氨基酸，然后重组到多黏类芽孢杆菌中；筛选后得到目的菌株。

所得菌株产抗菌肽稳定、并高效表达，同时通过基因修饰后，使天然桑蚕抗菌肽中的正电荷数量大大增加，增强了其抗菌活性。

经效价检测每毫升发酵液的效价在2000U/ml-20000U/ml。

申请人：上海邦成生物科技有限公司
地址：200030 上海市徐汇区罗秀路108号2楼
国籍：CN
代理机构：上海申新律师事务所
代理人：竺路玲
更多信息请下载全文后查看。

专利名称：一种枯草杆菌抗菌脂肽的生产方法及其在仔猪饲料中的应用
专利类型：发明专利
发明人：陆兆新,王恬,吕凤霞,别小妹,都海明,赵海珍
申请号：CN201010576515.8
申请日：20101207
公开号：CN102094054A
公开日：
20110615
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种枯草芽孢杆菌抗菌脂肽的生产方法及其在仔猪饲料中的应用，属于饲料添加剂和生物技术领域。

枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)fmbJ种子培养基扩大培养后，2~5%接种，28～35℃，5000L发酵罐液体深层发酵30～48h，然后提取，喷雾干燥生产抗菌脂肽产品。

这种抗菌脂肽按照4000IU/kg添加至仔猪基础日料中，提高了饲料利用率，并对促进仔猪生长发育、预防仔猪腹泻和提高仔猪免疫力均有较好的效果。

本发明菌株枯草芽孢杆菌为安全的微生物，其抗菌产物安全性高。

另外与目前仔猪饲料中使用的黄霉素相比，具有更好的效果，对取代饲料抗生素添加和保障食品安全具有重要意义。

申请人：南京农业大学
地址：210095 江苏省南京市卫岗1号
国籍：CN
代理机构：南京经纬专利商标代理有限公司
代理人：张素卿
更多信息请下载全文后查看。