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食品卫生微生物检验实验室操作要求食品微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。
一、无菌操作要求1. 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。
2.进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。
3. 接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。
4.进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。
5.从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。
6.接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
7.接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。
8. 吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。
二、无菌间使用要求1.无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7m2的小窗，以备进入无菌间后传递物品。
2.无菌间内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。
3.无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。
4.处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。
实验一玻璃器皿的准备、常用仪器的使用及培养基的制备[实验目的]1、系统掌握玻璃器皿的准备方法及常用仪器的使用。
2、掌握一般培养基制备的原则和要求，熟悉一般培养基制备的过程。
[实验原理]一、玻璃器皿的无害处理：1、新购置的玻璃器皿因含有游离碱，一般在2%的盐酸溶液中浸泡数小时后再用清水洗净，也可在洗衣粉水中煮30-60min，取出用清水洗净。
2、常用玻璃器皿洗涤时可用鬃刷蘸取洗衣粉刷洗，然后用自来水冲洗干净。
3、带油污玻璃器皿先将倒空的玻璃器皿用10%的氢氧化钠浸泡半小时或放在5%的苏打液内煮两次，去掉油污，再用洗衣粉和热水刷洗。
4、带菌玻璃器皿经121℃高压蒸汽灭菌20min后，趁热倒去内容物，再用洗衣粉水刷洗干净，以水在内壁均匀分布成一薄层而不出现水珠为油垢除尽的标准。
经以上处理的玻璃器皿，可满足一般实验用。
少数实验对玻璃器皿清洁度要求较高，除用上述方法外，还应先用2%的HCl溶液浸泡数10min，再用自来水冲洗，蒸馏水淋洗2-3次。
有的尚需超纯水淋洗然后烘干备用。
二、玻璃器皿的包扎：吸管、平皿、瓶口等的包扎。
三、玻璃器皿的灭菌：分为两种，高压蒸汽灭菌法和干热灭菌法。
高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌中应用最为广泛的一种方法。
其原理是依据在一个密闭的高压蒸汽灭菌器中，水的沸点随水蒸汽压的增加而上升，加压是为了提高水蒸汽的温度。
把待灭菌物品放在灭菌器内，当灭菌器内压力为0.1MPa时，温度可达到121℃，一般维持20min，即可杀死一切微生物的营养体及其孢子。
一般的培养基、玻璃器皿、金属用具、实验服、传染性标本等均可用这种方法有效灭菌。
灭菌的温度及时间视灭菌物品中的微生物种类及数量而定。
干热灭菌法也叫热空气灭菌法。
实验室通常使用恒温控制的电热鼓风干燥箱作为干热灭菌器。
此法常用于空的玻璃器皿、金属器具和其他耐高温的物品（如陶瓷培养皿盖、石蜡油、碳酸钙）的灭菌。
其优点是灭菌器皿保持干燥。
但带有胶皮、塑料的物品、液体及固体培养基不能用此法。
（生物科技行业）食品查验技术 (微生物部分 )教课设计教课设计纸讲课时间第一教课周讲课节数 3 课时教课目标：认识食品卫生标准的内容；认识食品微生物查验的意义；掌握食品微生物查验的范围；掌握食品卫生标准中的微生物指标；认识食品微生物查验方法的新进展；掌握常用玻璃器清洗方法和灭菌方法认识和掌握微生物查验常用的仪器及使用注意事项讲课章节：第一章食品中的微生物及其查验第二章食品微生物查验的基本条件与设施第三章培育基和实验基本操作技术：第一节培育基重点与难点：重点食品微生物查验的范围，食品卫生标准中的微生物指标。
微生物查验常用仪器的使用方法，常用玻璃器清洗方法和灭菌技术。
难点如何正确使用微生物查验所用的仪器，如何利用所学知识建设食品微生物查验新方法的掌握和应用。
讲课内容：第一章食品中的微生物及其查验1 、食品卫生标准的内容2 、食品微生物查验的意义3 、食品微生物查验的范围4、食品卫生标准中的微生物指标5、食品微生物查验方法的新进展第二章食品微生物查验常用仪器、玻璃器皿、消毒与灭菌方法一、常用仪器及其使用显微镜；冰箱；超净工作台、杀菌锅；离心计；水浴锅、培育箱；烘箱或干燥箱；匀质器二、常用玻璃仪器及器具三、玻璃器皿的冲洗和灭菌(一 )、新购的玻璃器皿(二 )、用过的玻璃器皿（三）、玻璃器械的灭菌第一节培育基一、培育基中的主要成分及其作用（一）、营养物质（二）、水作业： 1、食品的卫生标准内容包含哪些？2、对食品进行微生物查验拥有何意义？3、食品微生物查验的范围包含哪些？4、食品卫生标准中的微生物指标有哪些？(1)如何正确使用超净台 ?(2)简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法(3)在微生物实验室中如何配置培育箱,使用中要注意哪些问题 ?(4)如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器械进行灭菌?(5)在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题 ?(6)如何进行玻璃器皿的冲洗和灭菌?教课方法：面授课后剖析：教课设计纸讲课时间第二教课周讲课节数 3 课时教课目标：认识培育基的主要构成、作用和培育基的分类；掌握培育基的制备技术；掌握无菌技术的观点、要求；掌握微生物的接种与分别技术；认识微生物的培育方法；认识微生物生长现象的察看及记录；掌握细菌生化试验观点，生化试验的原理、试验方法和试验结果的察看记录。
食品实验室管理制度1.为确保食品添加剂检验工作的公正与客观，检验人员必须要有高度的责任感、严谨的科学态度和严肃认真的工作态度；要做到细心、耐心和专心；还要具有熟练，正确的操作技能及良好的科学作风、清洁的卫生习惯。
2.检验操作时，必须严格执行法定标准、企业标准，并严格按标准操作程序进行操作。
其质量不符合规定标准的均不得岀厂、不得销售、不得使用。
3.实验室应保持安静、整洁、和谐、规范、科学的工作环境。
4.对一些关键的计量标准容具(如天平、量瓶、移液管、滴定管等)及其他分析仪器，必须经校验后，方可使用。
5.检验使用后的器具，应按规定及时清洗。
检验用剩的试剂，不得倒回原瓶，以免污染，而影响检验数据。
6.在使用和操作各种仪器前，必须理解和熟悉各种仪器原理及使用操作程序，并对仪器进行必要的检查，使用完毕后应做好对仪器的清洗，必须保持仪器的完好，并认真做好仪器使用记录。
7.为保证检验数据的可靠，准确，仪器应定期进行校验（一般仪器均规定为每年一次），并做好校验台帐。
仪器维修后，应使系统适用性符合规定或经校验后方可进行测定。
8.易燃，易爆，腐蚀，剧毒，贵重药品等试剂，必须严加管理。
个别毒品试剂，贵重物品必须按专人，专柜，双人双锁管理。
9.凡使用有毒，挥发性试剂时，必须在毒气柜内进行操作。
使用易燃，易爆的试剂时，必须严加小心。
对检验用过的一般废溶剂应倒入废液桶内，对一些特殊的废溶剂，如酸，碱，氧化剂等，应作酸碱和氧化还原处理后，再倒入废液桶内。
10.检验完毕及时清理现场，保持整洁。
检验数据应如实的直接填写在原始记录中，不得记在其他地方。
检验原始记录必须按规定记录，字迹清晰，计算正确。
11.对调换岗位的检验人员和新进的检验人员，必须进行新岗位培训和实习。
新岗位培训和实习期为1〜6个月左右（根据岗位的难易程度而定），并有专人带教。
培训和实习期满，经操作考核后，方可正式独立上岗操作。
12.各实验室要定期清扫，保持实验室地面与台面的清洁整齐。
实验室常用仪器操作在科学研究和实验中，仪器是不可或缺的工具之一。
它们能够帮助科学家进行精确测量、收集数据并验证实验结果。
本文将重点介绍实验室中常用的仪器以及其操作方法。
一、显微镜显微镜是一种使用光学原理观察微小物体的仪器。
操作显微镜时，首先要调整光源以确保适当的照明。
然后，将待观察的样品放置在显微镜的玻璃载物台上，并通过旋转物镜调节样品与物镜的距离。
随后，用调焦轮调整目镜使图像清晰可见。
最后，使用显微镜的移物台或横平竖直调节样品位置，以便观察到样品的不同区域。
二、天平天平是用来测量物体质量的仪器。
使用天平时，首先要确保天平在水平位置上，并将容器放置在称盘上。
将所需物体放置在容器中，等待数秒以稳定读数。
然后，调节天平上的校准旋钮，直到指示器指针或显示屏上的数字显示为零。
最后，读取天平上的质量读数，并记录。
三、pH计pH计是一种用于测量溶液酸碱度的仪器。
在使用pH计之前，需要用干净的水清洗电极，并将其放入要测试的溶液中。
等待电极的读数稳定后，记录pH计上显示的数值。
在使用完毕后，将电极从溶液中取出，并再次用清水清洗干净。
四、离心机离心机是一种用于分离物质混合物的仪器。
在使用离心机之前，首先确定离心机的转速和离心时间。
将待分离的混合物倒入离心管中，并确保每个离心管中的混合物具有相同的体积和质量。
将离心管放入离心机的样品架上，并关闭离心机的盖子。
设置离心机的参数，并启动离心过程。
离心完成后，小心取出离心管，并将上清液和沉淀物分离。
五、分光光度计分光光度计是一种用于测量溶液吸光度的仪器。
使用分光光度计时，首先要设置所需的波长，并进行零点校准。
将待测试的样品放入光度计的样品室中，并关闭盖子。
读取显示屏上的吸光度数值，并记录。
通过以上示例，我们可以看到在实验室中，仪器的正确操作是实验成功的关键。
操作仪器时，应仔细阅读和遵守仪器操作手册，并按照安全操作规程进行操作。
此外，及时维护和保养仪器也是十分重要的，以确保仪器的准确性和可靠性。
各检验项目所需仪器、器具、试剂一、物料取样SOP仪器：洁净采样车器具：取样器（固体：探子、不锈钢勺、镊子、铗子；液体：药用移液管、烧杯、勺子、粘度大液体用玻璃棒）、品盛装容器（烧杯、广口瓶、具塞锥形瓶、塑料袋、自封袋）、辅助工具（手套、剪刀、纸、笔、不干胶标签、酒精棉签等）二、工艺用水取样SOP取样工具：洁净的具塞锥形瓶（卫检取样用灭菌具塞锥形瓶、消毒酒精棉球）三、滴定液与标准液配制SOP仪器与用具：十万分之一电子分析天平、恒温干燥箱、滴定管、移液管、容量瓶1、硫酸滴定液【分析纯硫酸、基准无水碳酸钠、甲基红-溴甲酚绿指示剂】2、盐酸滴定液【分析纯盐酸、基准无水碳酸钠、甲基红-溴甲酚绿、玛瑙研钵、具盖磁坩埚】3、氢氧化钠滴定液【分析纯氢氧化钠、基准邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示液、聚乙烯塑料瓶（塞中有2孔，孔内各插入玻璃管1支，1管与钠石灰管相连，1管供吸出本液使用）、玛瑙研钵，称量瓶】4、硝酸银滴定液【硝酸银、基准氯化钠、碳酸钙、糊精、荧光黄指示液、具玻璃塞的棕色玻瓶】5、硫代硫酸钠滴定液【分析纯硫代硫酸钠、无水碳酸钠、基准重铬酸钾、碘化钾、淀粉指示液、碘瓶】6、乙二胺四醋酸二钠滴定液【乙二胺四醋酸二钠、基准氧化锌、0.025%甲基红的乙醇、氨试液、氨-氯化铵缓冲液（PH10.0）、铬黑T、玻璃塞瓶】7、高锰酸钾滴定液【分析纯高锰酸钾、基准草酸钠、硫酸、垂熔玻璃滤器、玻璃塞棕色玻瓶】8、碘滴定液【分析纯碘、基准三氧化二砷、碘化钾、盐酸、氢氧化钠滴定液(1mol/L) 、硫酸滴定液(0.5mol/L)、碳酸氢钠、甲基橙指示液、淀粉指示液、垂熔玻璃滤器、棕色细口瓶、玻璃塞的棕色玻瓶】9、高氯酸滴定液【无水冰醋酸、醋酐、高氯酸(70%～72%)、基准邻苯二甲酸氢钾、结晶紫指示液、棕色玻瓶】四、微生物检查SOP仪器及设备：恒温培养箱、生化培养箱、恒温水浴锅、电冰箱、超净工作台、生物显微镜、放大镜、电热恒温干燥箱、电热压力消毒器、药物天平。
食品检验中常用玻璃器皿及仪器的使用1、常用玻璃器皿的使用⑴容量瓶容量瓶是细颈梨形平底玻璃瓶，由无色或棕色玻璃制成。
带有磨口玻璃塞，颈上有一刻度线。
容量瓶均为量入式，颈上应标有“In”字样。
准确度级别分为A级和B级，国家规定的容量允差见下表：下述方法规定弯月面：调节液面使刻度线的上边缘与弯月面的最低点水平相切，视线应在同一水平面。
容量瓶的主要用途是配制准确浓度的溶液或定量地稀释溶液。
它常和移液管配合使用，可把配成溶液的某种物质分成若干等份。
使用容量瓶时应注意以下几点：①检查瓶口是否漏水：加水至刻度线，盖上瓶塞，颠倒10次（每次颠倒过程中要停留在倒置状态10秒）以后不应有水渗出（可用滤纸片检查）；将瓶塞旋转180°再检查一次。
合格后用皮筋或塑料绳将瓶塞和瓶颈上端拴在一起，以防摔碎或与其他瓶塞混淆。
②用铬酸洗液清洗内壁，然后用自来水和纯水洗净。
③用固体物质配制溶液时，应先在烧杯中将固体物质完全溶解，然后再转移至容量瓶中；转移时要使溶液沿搅拌棒流入瓶中，烧杯中的溶液倒尽后，烧杯不要离开搅拌棒，而应在烧杯扶正的同时使杯嘴沿搅拌棒上提1~2cm，随后使烧杯离开搅拌棒，这样可避免杯嘴与搅拌棒之间的溶液流到烧杯的外面。
再用少量水（或其他溶剂）刷洗烧杯3~4次，每次用洗瓶或滴管冲洗杯壁和搅拌棒，按同样的方法移入瓶中。
当溶液达到2/3容量时，应将容量瓶沿水平方向轻轻摆动几周以使溶液初步混匀。
加水至距离刻度线约1cm处，等待1~2min，用滴管从距刻度线以上1cm以内的一点沿颈壁缓缓加水至弯液面最低点与刻度线上边缘水平相切，随机盖紧瓶塞，左手捏住瓶颈上端，食指压住瓶塞，右手三指托住瓶底，将容量瓶颠倒15次以上，每次颠倒时都应使瓶内气泡升到顶部，倒置时应水平摇动几周，如此重复操作，可使瓶内溶液充分混匀。
右手托瓶时，应尽量减小与瓶身的接触面积，以避免体温对溶液的影响。
100mL以下的容量瓶，可不用右手托底，只用一只手抓住瓶颈及瓶塞进行颠倒和摇动即可。
④对容量瓶材料有腐蚀作用的溶液，尤其是碱性溶液，不能在容量瓶中长久贮存，配好后应转移到其他干燥容器中密闭存放。
⑵比重计比重计由玻璃外壳制成，头部呈球形或圆锥形，里面灌有铅珠、水银或其他重金属；中部是胖肚空腔；尾部又称“计杆”，呈细长形，里面附有刻度标记。
比重计刻度的刻制是利用各种不同相对密度的液体，制成不同刻度的比重计，是根据阿基米德原理刻制的。
比重计常用的种类有普通比重计、波美比重计、糖度比重计和酒精比重计四类。
普通比重计：20℃纯水的1.000，分轻表和重表两类。
轻表用于测定相对密度小于1.000的液体，重表用于测定相对密度大于1.000的液体。
波美比重计：以波美度（Baume，°Be）表示，分轻表和重表两类。
其刻度有三种标度。
①合理标度：15℃纯水的波美度为0°Be。
a轻表:10°Be=相对密度为0.9351的液体的对应的液位。
°Be=（145÷d）－145b重表：66°Be=相对密度为1.824的浓H2SO4对应的液位。
°Be=145－（145÷d）②美国标度：15.56℃纯水的波美度为0°Be。
a轻表:°Be=（144.3÷d）－144.3b重表：°Be=144.3－（144.3÷d）③荷兰标度：12.5℃纯水的波美度为0°Be。
a轻表:°Be=（144÷d）－144b重表：°Be=144－（144÷d）式中d—视密度。
糖度比重计：又称锤度比重计，以勃力克斯(Brixscale,Bx)表示，20℃蒸馏水的波美度为0°Be。
它的刻度表示纯蔗糖的质量百分比。
刻度范围为0~100%。
酒精比重计：是用来测定酒精溶液浓度的一种比重计，它的刻度直接表示溶液内乙醇的体积分数。
其规定温度为20℃，读数范围有：0～50%、50%～100%两种。
⑶称量瓶称量瓶是带有磨口塞的玻璃小瓶，用于在分析天平上精确称量基准物质或样品。
其规格以外径和瓶高来表示，分为扁形和高形两种，具体见下表。
扁形用于测定水分或在烘箱中烘烤基准物，高形用于称量易吸湿的样品。
在称量时应盖紧磨口塞，以防止瓶内试样与空气中的水分接触。
使用移液管时应注意以下几点：①用铬酸洗液将其洗净，使其内壁及下端的外壁均不挂水珠。
用滤纸片将流液口内外残留的水擦掉。
②移取溶液之前，先用欲移取的溶液刷洗三次。
刷洗方法是：吸入溶液至刚入膨大部分，立即用右手食指按住管口（尽量勿使溶液回流，以免稀释），将管横过来，用两手的拇指及食指分别拿住移液管的两端，转动移液管并使溶液布满全管内壁，当溶液流至距上口2～3cm时，将管直立，使溶液由流液口放出，弃去。
两指依次靠拢中指），将移液管插入容量瓶内液面以下1～2cm深度。
不要插入太深，以免外壁粘带溶液过多；也不要插入太浅，以免溶液下降时吸空。
左手拿吸耳球，排除空气后紧按在移液管口上，借吸力使液面慢慢上升，移液管应随容量瓶中液面的下降而下降。
当管中液面上升至刻度线以上时，迅速用右手食指堵住管口，用滤纸擦去管尖外部的溶液，将移液管的流液口靠着容量瓶颈的内壁，左手拿容量瓶，并使其倾斜约30°。
稍松手指，用拇指及中指轻轻捻转管身，使液面缓慢下降，直到调定零点。
按紧食指，使溶液不再流出，将移液管移入准备接受溶液的容器中，仍使其流液口接触倾斜的器壁。
松开食指，使溶液自由地沿壁流下，待下降的液面静止后，再等待15s，然后拿出移液管。
注意：在调整零点和排放溶液过程中，移液管都要保持垂直，其流液口要接触倾斜的器壁，（不要接触下面的溶液）并保持不动，等待15s，流液口内残留的溶液绝对不可用外力使其被震出或吹出，移液管用完后应放在管架上，不要随便放在实验台上，尤其要防止管颈下端被沾污。
⑸吸量管吸量管是分度吸量管的简称，它是带有分度的量出式量器，用于移取非固定量的溶液。
吸量管容量的准确度级别分为A级和B级，其产品大致分为以下三类：①规定等待时间15s的吸量管，这类吸量管的容量准确度均为A级。
其形成为完全流出式，零点在上。
它的任一分度线的容量定义为：在20℃时，从零线排放到该分度线所流出水的体积（mL）。
当液面降至该分度线以上几毫米时，应按紧管口停止排液15s，再将液面调到该分度线。
在量取吸量管的全容量溶液时，排液过程中水流不应受到限制，液面降至流液口处静止时，应等待15s，再从受液容器中移走吸量管。
②不规定等待时间的吸量管，这类产品分为A级和B级，有三种形式：a、完全流出式：零位在上。
b、不完全流出式：零位在上。
c、完全流出式：全容量在上，这种吸量管可以从欲量取体积的分度线调节零点。
不规定等待时间，即一旦确定液面已静止，吸量管即可与接受容器脱离接触。
③快流速和吹出式吸量管，这类吸量管的容量准确度均为B级。
不规定等待时间，其形式为完全流出式，有零位在上和零位在下两种。
快流速的产品上标示“快”字，吹出式产品上标示“吹”字。
使用吹出式吸量管的全容量时，液面降至流液口静止后随机将最后一滴残留液一次吹出。
这两种吸量管流速快、准确度低，适于仪器分析实验中添加试剂，一般不用它加标准溶液。
a、由于吸量管的容量精度低于移液管，所以在移取2mL以上的固定量溶液时，应尽可能使用移液管。
b、使用吸量管时，尽量在最高刻度线处调整零点。
c、吸量管的种类较多，要根据所做实验的具体情况，参照上表中的数据，合理地选用吸量管。
⑹滴定管滴定管分酸式和碱式两种。
酸式滴定管用一玻璃活塞控制液体的流出；碱式滴定管用一段橡胶管里的玻璃珠进行控制，以代替玻璃活塞。
碱性溶液应装在碱式滴定管中，其他溶液都使用酸式滴定管。
滴定管的使用方法如下：①检漏：使用滴定管前应检查其是否漏水，活塞转动是否灵活。
若酸式滴定管漏水或活塞转动不灵，就应给活塞重新涂凡士林；若碱式滴定管漏水，则需要更换橡胶管或换个稍大的玻璃珠。
涂凡士林的方法：将滴定管平放，取出活塞，用滤纸条将活塞和塞槽擦干净，在活塞粗的一端和塞槽小口端，全圈均匀地涂上一薄层凡士林。
为了避免凡士林堵住塞孔，油层要尽量薄，尤其是小孔附近；将活塞插入槽时，活塞孔要与滴定管平行。
转动活塞，直至活塞与塞槽接触的地方呈透明状态，即表明凡士林已均匀。
②洗涤：根据滴定管的沾污情况，采用相应的洗涤方法将它洗净，为了使滴定管中溶液的浓度与原来相同，最后还应该用滴定用的溶液润洗三次（每次溶液用量约为滴定管容积的1/5），润洗液由滴定管下端排出。
③装液：将溶液加入滴定管时，要注意使下端出口管也充满溶液，特别是碱式滴定管，它下端的橡胶管内的气泡不易被察觉，这样，就会造成读数误差，如果是酸式滴定管，可迅速地旋转活塞，让溶液急骤流出以带走气泡；如果是碱式滴定管，向上弯曲橡胶管，使玻璃尖嘴斜向上方，向一边挤动玻璃珠，使溶液从尖嘴喷出，气泡便随之除去。
排除气泡后，继续加入溶液到刻度“0”以上，放出多余的溶液，调整液面在“0.00”刻度处。
④读数：常用滴定管的容量为50mL，它的刻度分为50大格，每一大格又分为10小格，所以每一大格为1mL，每一小格为0.1mL。
读数应读到小数点后两位。
注入或放出溶液后应稍等片刻，待附着在内壁的溶液完全流下后再读数。
读数时，滴定管必须保持垂直状态，视线必须与液面在同一水平面。
对于无色或浅色溶液，读弯月面实线最低点的刻度。
为了便于观察和读数，可在滴定管后衬一张读数卡，读数卡是一张黑纸或中间涂有一黑长方形（约3cm×1.5cm）的白纸。
读数时，将读数卡放在滴定管后，使黑色部分在弯月面下约1cm处，则弯月面反射成黑色，读取此黑色弯月面最低点的刻度即可。
若滴定管背后有一条蓝线（或蓝带），无色溶液就形成了两个弯月面，并且相交于蓝线的中线上，读溶液、碘水等，弯月面不易看清，则读液面的数时就读此交点的刻度。
对于深色溶液如KMnO4最高点。
滴定时，最好每次都从0.00mL开始，这样读数方便，且可以消除由于滴定管上下粗细不均匀而带来的误差。
⑤滴定：使用酸式滴定管时，必须用左手的拇指、食指及中指控制活塞，旋转活塞的同时稍稍向左扣住，这样可避免把活塞顶松而漏液；使用碱式滴定管时，应该用左手的拇指及食指在玻璃珠所在部位稍偏上处，轻轻地往一边挤压橡胶管，使橡胶管与玻璃珠之间形成一条缝隙，溶液即可流出，要能掌握手指用力的轻重来控制缝隙的大小，从而控制溶液的流出速度。
滴定时，将滴定管垂直地夹在滴定管架上，下端伸入锥形瓶口约1cm。
左手按上述方法操作滴定管，右手的拇指、食指和中指拿住锥形瓶的瓶颈，沿同一方向旋转锥形瓶，使溶液混合均匀，不要前后、左右摇动。
开始滴定时，无明显变化，溶液流出的速度可以快一些，但必须是成滴而不是成股流下。
