临床检验主管技师 临床免疫学和免疫检验 第十九章 补体检测及应用
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第十九章补体检测及应用本章考点1.概述2.补体的活化途径3.有关补体测定的试验4.补体测定的应用补体是存在于人和脊椎动物正常新鲜血清及组织液中的一组具有酶样活性的球蛋白。
补体系统是补体加上其调节因子和相关膜蛋白共同组成一个反应系统,称为补体系统。
补体系统参与机体的抗感染及免疫调节,也可介导病理性反应,是体内重要的免疫系统和放大系统。
第一节补体系统的组成和性质一、命名根据l968年WH0命名委员会对补体系统进行了统一命名。
参与补体激活经典途径的固有成分按其被发现的先后顺序分别称Cl、C2、……C9。
Cl由Clq、Clr、Cls 三种亚单位组成;补体系统旁路激活途径及调节因子中另一些组分以英文大写字母表示,如B因子、D因子、P因子、H 因子等;补体调节成分多以其功能进行命名,如C1抑制物、C4结合蛋白、衰变加速因子等;补体活化后的裂解片段以该成分的符号后面加小写英文字母表示,如C3a、C3b等;具有酶活性的成分或复合物在其符号上划一横线表示,如、,灭活的补体片段在其符号前面加英文字母i表示,如iC3b等;对补体受体以其结合对象命名,如CLrR、C5Ar、对C3片段受体则用CRl、CR2……CR4表示。
二、分类构成补体系统包括30余种活性成分,按其性质和功能可以分为三大类:1.在体液中参与补体活化级联反应的各种固有成分;2.以可溶性形式或膜结合形式存在的各种补体调节蛋白;3.结合补体片段或调节补体生物效应的各种受体。
三、理化性质补体的大多数组分都是糖蛋白,且多属于β球蛋白,约占血清球蛋白总量的l0%;Clq,C8等为γ球蛋白;Cls,C9为α球蛋白。
正常血清中各组分的含量相差较大,C3含量最多,C2最低。
各种属动物间血中补体含量也不相同,豚鼠血清中含有丰富的补体,故实验室多采用豚鼠血作为补体来源。
补体性质不稳定,易受各种理化因素影响,如加热、机械振荡、酸碱、酒精等均可使其失活;在0℃~10℃下活性只保持3~4天,冷冻干燥可较长时间保持其活性;加热56℃30min可使血清中绝大部分补体组分丧失活性,称为灭活或灭能。
临床免疫学检验技术考试题库及答案1. 免疫监视功能低下时易发生()。
A.自身免疫病B.超敏反应C.肿瘤D.免疫缺陷病E.移植排斥反应答案C解析免疫系统的功能之一是对自身偶尔产生的有癌变倾向的细胞进行清除,此即免疫监视功能,免疫监视功能低下时易发生肿瘤。
2. 免疫自稳功能异常可发生()。
A.病毒持续感染B.肿瘤C.超敏反应D.自身免疫病E.免疫缺陷病答案D解析免疫系统的功能之一是对自身衰老的组织细胞进行清除,此即免疫自稳功能,免疫自稳功能异常可发生自身免疫病。
3. 既具有抗原加工提呈作用又具有杀菌作用的细胞是()。
A.树突状细胞B.巨噬细胞C.中性粒细胞D. B细胞E. T细胞答案B解析树突状细胞、巨噬细胞和B细胞都有抗原加工提呈作用,但只有巨噬细胞兼有吞噬杀菌作用。
4. 免疫应答过程不包括()。
A. T细胞在胸腺内分化成熟B. B细胞对抗原的特异性识别C.巨噬细胞对抗原的处理和提呈D. T细胞和B细胞的活化、增殖和分化E.效应细胞和效应分子的产生和作用答案A解析免疫应答过程指免疫系统针对抗原的反应过程,不包括免疫细胞的发育过程。
5. 关于外周免疫器官的叙述,不正确的是()。
A.包括淋巴结、脾和黏膜相关淋巴组织B.发生发育的时间晚于中枢免疫器官C.是免疫应答发生的场所D.是免疫细胞发生和成熟的场所E.是所有淋巴细胞定居的场所答案D解析免疫细胞发生和成熟的场所在中枢免疫器官,故D项不正确。
5. 在正常血清中,含量最高的补体成分是()。
A. C1B. C3C. C4D. C5E. C4Bp答案B解析在正常血清中含量最高的补体成分是C3。
7. 细胞因子不包括()。
A.单核因子B.淋巴因子C.生长因子D.抗体E.集落刺激因子答案D解析细胞因子是生物活性的小分子多肽,抗体不是。
8. 体内抗病毒、抗毒素、抗细菌最重要的抗体为()。
A. IgMB. IgAC. IgGD. IgEE. IgD答案C解析IgG是体内抗感染的最主要的抗体。
一、名词解释第1章概论1.免疫学:2.免疫分子:3.补体:4.临床免疫学:第2章抗原抗体反应5.抗原抗体反应:6.抗原抗体反应特异性7.可逆性8.比例性9.抗原抗体反应的等价带zoneofequivalence10.最适比optimalratio11.带现象zonephenomenon第3章免疫原和抗血清的制备12.免疫原immunogen13.半抗原14.免疫佐剂15.多克隆抗体polyclonal antibody, pcAb第5章凝集反应16.凝集反应17.直接凝集反应18.间接凝集反应19.明胶凝集试验第6章沉淀反应20.沉淀反应21.絮状沉淀试验22.免疫浊度测定23.凝胶内沉淀试验24.单项扩散试验25.双向扩散试验26.免疫电泳技术27.对流免疫电泳28.火箭免疫电泳29.免疫电泳30.免疫固定电泳第19章补体检测及应用31.补体32.免疫溶血法33.补体结合试验第22章感染性疾病与感染免疫检测34.感染第23章超敏反应性疾病及其免疫检测35.超敏反应36.Ⅰ型超敏反应37.Ⅱ型超敏反应38.Ⅲ型超敏反应39.Ⅳ型超敏反应第24章自身免疫性疾病及其免疫检测40.自身耐受41.自身免疫42.自身免疫病43.自身抗体44.抗核抗体第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测45.免疫增殖性疾病46.免疫球蛋白增殖病47.本周蛋白48.血清区带电泳49.免疫电泳50.免疫固定电泳第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验51.免疫缺陷病52.获得性免疫缺陷综合征第27章肿瘤免疫与免疫学检验53.肿瘤免疫学54.肿瘤抗原55.肿瘤标志物第28章移植免疫及其免疫检测56.移植57.主要组织相容性复合体58.移植排斥反应59.移植物抗宿主反应GVHR60.血清学分型法二、填空题;第1章概论1.推动现代生命科学前进的三架战车:分子生物学、免疫学、细胞生物学;2.免疫学的发展历史可分为三个时期:经验时期、免疫学科形成时期、现代免疫学时期;3.为保持机体内环境稳定,免疫系统的三大生理功能分别是:免疫防御、免疫自稳、免疫监视;4.免疫应答的过程主要分为:识别阶段、活化阶段、效应阶段5.免疫系统的组成包括三部分,分别是:免疫器官、免疫细胞、免疫分子;6.补体的三条激活途径分别是:经典途径、甘露糖结合凝集素途径、旁路途径;第2章抗原抗体反应7.在抗原抗体反应中,主要的结合力有:静电引力、范德华力、氢键、疏水作用力;8.在抗原抗体反应中,主要的特点有:特异性、可逆性、比例性、阶段性;第3章免疫原和抗血清的制备9.组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备过程中,常用的方法有:反复冻融法、超声破碎法、自溶法、酶处理法、表面活性剂处理法任写出二种均可得分;10.在免疫原和抗血清的制备过程中,可溶性抗原的纯化方法:超速离心法、选择性沉淀法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层析法等任写出二种均可得分;11.在免疫原和抗血清的制备过程中,纯化抗原的鉴定的内容主要有:蛋白含量测定、分子量测定、纯度鉴定、免疫活性鉴定;12.在免疫原和抗血清的制备过程中,抗血清的鉴定内容有:抗体特异性的鉴定、抗体效价的鉴定、抗体纯度的鉴定、抗体亲合力的鉴定;第5章凝集反应13.在凝集反应中,间接凝集反应的类型主要有:正向间接凝集反应、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应、协同凝集反应;14.抗球蛋白试验,又称Coombs试验,是检测抗红细胞不完全抗体的一种方法;第6章沉淀反应15.免疫电泳技术类型主要包括:对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、免疫固定电泳;第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.在外周血单个核细胞分离实验中,对分离介质的基本要求有:对细胞无毒、基本等渗、不溶于血浆或分离物质、有一定密度;17.在淋巴细胞分离过程中,其中的单核细胞去除方法有:贴壁黏附法、吸附柱过滤法、磁铁吸引法、Percoll分层液法; 第15章免疫细胞功能检测技术18.在免疫细胞功能检测技术方面,针对T细胞功能检测方法有:T细胞增殖试验、 T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验、体内试验;第19章补体检测及应用第22章感染性疾病与感染免疫检测19.目前公认的肝炎病毒至少有5种:甲型肝炎病毒HAV、乙型肝炎病毒HBV、丙型肝炎病毒HCV、丁型肝炎病毒HDV、戊型肝炎病毒HEV;20.在乙肝病毒检测的过程中,主要检测的五项指标有:HBsAg、抗HBs、抗HBc、HBeAg、抗HBe;21.在先天性感染中,临床上将以上4种病原菌称为“TORCH”,为产前检查的重点项目,分别是:弓形体、巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒;第23章超敏反应性疾病及其免疫检测22.根据免疫反应的速度和组织损伤的机制不同,将超敏反应分为四种类型,分别是:第 I 型速发型超敏反应、第II 型细胞毒或溶细胞型超敏反应、第III型免疫复合物型超敏反应、第IV 型延缓型或迟发型超敏反应;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测23.在抗核抗体ANA检测方法中,常见的ANA荧光图形有:周边型核膜性、均质性、斑点性、核仁型、着丝点型;第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测24.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有:多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、重链病、轻链病、良性单克隆免疫球蛋白病;25.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有:血清区带电泳、免疫电泳、免疫固定电泳、血清免疫球蛋白定量、本周蛋白的检测;第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验26.在免疫缺陷性疾病中,常见的免疫缺陷病一般特征包括:反复感染、恶性肿瘤、伴发自身免疫病、遗传倾向、多系统病变;27.在免疫缺陷性疾病中,原发性免疫缺陷性疾病主要有:原发性B细胞缺陷病、原发性T细胞缺陷病、原发性联合免疫缺陷病、原发性吞噬细胞缺陷病、原发性补体系统缺陷病;28.在免疫缺陷性疾病中,继发性免疫缺陷性疾病主要有:继发性T细胞功能缺陷、继发性低丙球蛋白血症、继发性吞噬细胞功能缺陷、继发性补体缺陷;第27章肿瘤免疫与免疫学检验29.在常见肿瘤标志物中,胚胎抗原类肿瘤标志物主要有:甲胎蛋白、癌胚抗原;30.在常见肿瘤标志物中,酶类肿瘤标志物主要有:前列腺特异性抗原PSA 、神经元特异性烯醇化酶NSE、α-L-岩藻糖苷酶测定AFU;31.在常见肿瘤标志物中,激素类肿瘤标志物主要有:人绒毛膜促性腺激素 hCG、降钙素calcitonin, CT;32.在常见肿瘤标志物中,蛋白质类肿瘤标志物主要有:β2-微球蛋白β2M 、铁蛋白;第28章移植免疫及其免疫检测33.在移植免疫实验中,排斥反应类型主要包括四种,分别是:超急性排斥反应、急性排斥反应、慢性排斥反应、移植物抗宿主反应GVHR;34.常见的组织或器官移植有:肾脏移植、肝脏移植、心脏移植与心肺联合移植、骨髓与其他来源的干细胞移植;三、单项选择题1.免疫应答是一个复杂的连续过程,依次分为哪几个阶段AA. 识别阶段、活化阶段、效应阶段B. 效应阶段、识别阶段、活化阶段C. 活化阶段、效应阶段、识别阶段D. 活化阶段、识别阶段、效应阶段2.抗原抗体反应形成明显沉淀物的最佳条件为CA. 抗体略多于抗原B. 抗原略多于抗体C. 抗原抗体比例合适D. 抗体显着多于抗原3.用已知抗原或抗体检测相应的抗体或抗原,是根据抗原抗体反应的AA. 特异性B. 比例性C. 可逆性D. 阶段性4.弗氏不完全佐剂的组成包括 BA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗5.沉淀反应中的钩状效应是因为BA. 抗体过量B. 抗原过量C. pH浓度过高D. pH浓度过低6.细胞活力测定常用的简便方法是BA. 伊红染色B. 台盼蓝染色C. HE染色D. 美蓝染色7.正常人外周血T淋巴细胞转化率为CA. <40%B. 40%~50%C. 60%~80%D. 80%8.在CH50试验中,溶血程度和补体含量之间的关系为 BA. 直线B. S形曲线C. 抛物线D. 正态分布曲线9.正常血清中,补体含量最高的是CA. C1B. C2C. C3D. C410.发生III型超敏反应性疾病的始动环节是 BA. 大分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜B. 中等大小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜C. 小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜D. 补体激活11.用免疫荧光法检测ANA有多种核型,不正确的是DA. 周边型B. 均质型C. 斑点型或颗粒型D. 原生质型12.血清中检测到M蛋白不提示下列疾病DA. 多发性骨髓瘤B. 巨球蛋白血症C. 重链病或轻链病D. 肾病13.本-周蛋白的本质是BA. 尿中微球蛋白B. 尿中游离的免疫球蛋白轻链C. 尿中游离的白蛋白D. 尿中游离的管型物14.多发性骨髓瘤属于哪种细胞异常CA. T细胞B. B细胞C. 浆细胞D. 单核细胞15.血清中免疫球蛋白含量缺乏,一般应考虑何种病 CA. 轻链病B. 重链病C. 免疫缺陷病D. 免疫增殖病16.切除胸腺的新生动物的淋巴结中缺乏何种细胞 BA. B淋巴细胞B. T淋巴细胞C. 粒细胞D. 巨噬细胞17.沉淀反应中抗体过量的现象称为AA. 前带B. 后带C. 等价带D. 带现象18.弗氏完全佐剂的组成包括AA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗19.直接Coombs试验检测的抗体是AA. 结合在红细胞表面的IgGB. 游离的IgGC. 结合在红细胞表面的IgMD. 游离的IgM20.单项扩散试验出现双环的沉淀线是因为DA. 两种抗原B. 两种抗体C. 抗体为多克隆抗体D. 抗原为性质相同的两个组分扩散率不同21.Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为CA. 单个核细胞、血小板和血浆、粒细胞、红细胞B. 血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞C. 血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞D. 血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞22.淋巴细胞转化为淋巴母细胞后,其形态学特征为BA. 细胞大小由大变小B. 出现核仁1~4个C. 胞浆内空泡逐渐消失D. 细胞伪足消失23.溶血空斑试验用于检测下列何种细胞的功能BA. T细胞B. B细胞C. NK细胞D. 吞噬细胞24.Boyden小室常用于测定 BA. 白细胞吞噬功能B. 中性粒细胞趋化功能C. 白细胞杀伤功能D. 淋巴细胞抑制功能25.在溶血反应中检测试剂中,加入少量钙、镁离子的目的是CA. 使反应液保持等渗B. 抑制补体的活性C. 有助于补体激活D. 维持反应液的pH值26.乙型肝炎感染后最早出现的病毒标志物是AA. HBsAgB. HBeAgC. HBcAgD. 抗-HBs27.新生儿溶血症发生的条件是CA. 母亲Rh+、胎儿Rh+B. 母亲Rh+、胎儿Rh-C. 母亲Rh-、胎儿Rh+D. 母亲Rh-、胎儿Rh-28.造成系统性红斑狼疮病人免疫损伤的主要机制是 CA. I超敏反应B. II超敏反应C. III超敏反应D. IV超敏反应29.人类MHC位于第几对染色体上 CA. 第12对染色体短臂B. 第12对染色体长臂C. 第6对染色体短臂D. 第6对染色体长臂30.HLA交叉配型的目的是 BA. 检测供者血清有无抗受者HLA抗体B. 检测受者血清有无抗供者HLA抗体C. 检测供者淋巴细胞表面的HLA抗原D. 检测受者淋巴细胞表面的HLA抗原四、简答题第1章概论1.T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞的主要功能分别是什么2.在临床免疫学与免疫检验中,现代免疫学检验技术包括哪些方法第2章抗原抗体反应3.抗原抗体反应有哪些影响因素4.什么是标记免疫技术标记免疫技术按检测现象可分为哪些类型第3章免疫原和抗血清的制备5.常用的细胞破碎方法有哪些6.连接半抗原的载体有哪些制备半抗原性免疫原的方法有哪些7.免疫佐剂有哪些种类其作用机制是什么8.动物采血有哪些方法9.抗血清的鉴定包括哪些内容第5章凝集反应10.什么叫直接凝集反应什么叫间接凝集反应它们之间有何不同11.叙述抗球蛋白试验的类型、特点以及临床应用第6章沉淀反应12.单向扩散试验的概念和应用13.平板法双向免疫扩散试验的概念和应用14.免疫固定电泳的概念及临床应用15.抗原性质分析出现哪三种结果现象结果解释第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.外周血单个核细胞分离,其分离介质的基本要求是什么17.外周血单个核细胞悬液富含淋巴细胞,但又混杂有单核细胞、红细胞和血小板,请问去除单核细胞的方法有哪些第15章免疫细胞功能检测技术18.T细胞功能检测内容有哪些19.B细胞功能检测内容有哪些20.NK细胞活性测定方法有哪些21.在检测T细胞的功能时,可选择T细胞增殖试验,请回答其基本原理第19章补体检测及应用22.在补体总活性测定中,一般采用CH50测定法,请说明其基本原理;23.在单个补体成分的测定中,一般采用免疫溶血法,请简述其概念及原理;24.请简述补体结合试验的概念、实验原理及结果解释第22章感染性疾病与感染免疫检测25.请列出目前公认的肝炎病毒种类26.乙型肝炎的诊断标志物主要检测指标有哪些27.在临床中,乙肝病毒检测常见的指标俗称:两对半有哪些28.什么叫先天性感染常见的病原菌“TORCH”只要只的是哪些病毒第23章超敏反应性疾病及其免疫检测29.试比较Ⅰ~Ⅳ型超敏反应特点30.使用青霉素可能引起哪些类型超敏反应简述其发病机制; 答:青霉素临床应用时有可能引起的超敏反应类型有:I、II、III、IV型;1I 型超敏反应:指青霉素过敏性休克,其发病机制是青霉素本身并无免疫原性,其降解产物为半抗原,与体内蛋白质结合而产生免疫原性,刺激机体产生特异性IgE,使机体处于致敏状态;当机体再次使用青霉素时,可发生过敏性休克;2II 型超敏反应:指青霉素过敏性血细胞减少症,其发病机制是青霉素降解产物能与血细胞膜蛋白或血浆蛋白结合获得免疫原性,从而刺激机体产生抗体;这种抗体与和药物结合的红细胞、粒细胞和血小板作用,引起药物性溶血性贫血、粒细胞减少症和血小板减少性紫癜;3III型超敏反应:指使用大剂量青霉素等药物可引起类似血清病样的反应,其发病机制是因为患者体内已产生特异性抗体,而大剂量药物尚未完全排除,两者结合形成中等大小免疫复合物所致;4IV型超敏反应:指青霉素引起的接触性皮炎,其发病机制是青霉素小分子半抗原与体内蛋白质结合成完全抗原,使T细胞致敏;当机体再次接触青霉素时,可发生接触性皮炎;31.血清病与血清过敏性休克分属哪型超敏反应比较发病机制;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测32.自身免疫病都具有哪些共同特性33.什么叫自身抗体,其主要特点有哪些第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测34.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有哪些35.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有哪些第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验36.请列出免疫缺陷病的一般特征37.原发性免疫缺陷性疾病有哪些38.继发性免疫缺陷病有哪些39.什么叫获得性免疫缺陷综合征其临床特点及典型特征是什么第27章肿瘤免疫与免疫学检验40.什么叫肿瘤抗原,其产生的可能机制有哪些41.什么叫肿瘤标志物,理想的肿瘤标志物具有哪些特性第28章移植免疫及其免疫检测42.什么叫移植排斥反应,根据排斥反应发生的时间、免疫损伤机制和组织病理改变,如何进行分类43.常见的组织或器官移植有哪些44.排斥反应的免疫监测包括哪些方面。
临床医学检验技师初级(师)临床免疫学及检验(补体检测及应用)-试卷2(总分:58.00,做题时间:90分钟)一、 A1型题(总题数:24,分数:48.00)1.下列选项中,哪项不是替代途径的激活物(分数:2.00)A.内毒素B.纤溶酶√C.IgA聚合物D.Igc4E.某些蛋白水解酶解析:解析:替代途径的激活物主要是细胞壁成分,如内毒素、某些蛋白水解酶、IgG4、IgA聚合物等。
2.一般情况下补体结合试验只是用来检测(分数:2.00)A.总补体活性B.溶血性疾病的不完全抗体C.红细胞的脆性D.待测抗原或抗体√E.溶血素滴度解析:解析:补体结合试验是经典途径的抗原抗体反应之一,是用免疫溶血机制作为指示系统,来检测另一反应系统的抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原)的试验。
3.Raji细胞技术检测非抗原特异性CIC是由于(分数:2.00)A.Raji细胞表面Fc受体可与Ig结合的性质B.Raji细胞表面有大量补体受体,这些补体受体与结合补体的循环免疫复合物结合√C.Raji细胞可作为指示系统表现溶血现象D.Raji细胞培养容易,性能稳定E.操作简便解析:解析:Raji细胞是从Burkin淋巴瘤患者分离的一种B细胞株,表面有大量C1q、C3b和C3d受体,但无表面免疫球蛋白;因此Raji细胞能与带有补体的免疫复合物结合。
先在塑料管中加入一定量的Raji,再加入待检血清,充分作用后离心洗涤;最后加入荧光素标记的抗入IgG,洗涤后细胞表面显现荧光为试验阳性;但荧光法只能做定性检测。
或加入同位素标记的抗入IgG,离心洗涤后检测沉淀细胞的放射活性;以热聚合IgG做参考标准,可绘制出CIC含量与放射活性的标准曲线,从而求得待测标本中CIC的含量。
Raji细胞法敏感性高、特异性强、方法简单、不受DNA与内毒素的影响;但Raji细胞表面还有Fc受体,因此被检血清中的游离IgG通过Fc段与Raji细胞结合,造成假阳性。
在待检标本中有抗淋巴细胞抗体时也可导致假阳性。
临床医学检验临床免疫技术:补体检测及应用要点背记三1、单选C5a具有的生物学活性是OA.促C3转化酶形成B.趋化作用C.参与膜攻击单位的形成D.调理作用E.促CT酯酶形成正确答案:B2、单选体液(江南博哥)补体抑制因子是OA.ClqB.IgGlC.I1.-2D.H因子E.B因子正确答案:D参考解析:H因子可以促进C3b的裂解。
3、单选MB1.激活途径发生在OA.感染刚刚形成B.抗体产生之后C.脂多糖的激活D.感染早期的急性期反应E.感染恢复期正确答案:D参考解析:补体的甘露聚糖结合凝集素途径,简称MBl途径。
此途径开始于急性期蛋白与病原体的结合,而不是抗原抗体复合物形成。
考点:补体系统的活化4、单选补体成分灭活的标准温度和时间是OA.0℃,24hB.4℃,2hC.37℃,30minD.56℃,30minE.100o C,15min正确答案:D参考解析:补体性质不稳定,易受各种理化因素影响,如加热、机械振荡、酸碱、乙醇等均可使其失活;在0~10°C下活性只保持3~4d,冷冻干燥可较长时间保持其活性;加热至56°C30min可使血清中绝大部分补体组分丧失活性,称为灭活或灭能。
考点:补体的理化性质5、单选C5a的生物学活性是()A.参与膜攻击单位的形成B.趋化作用C.促C3转化酶形成D.调理作用E.促CT酯酶形成正确答案:B6、单选下列补体成分中参与吞噬调理作用的是()A.ClqB.ClC.C3b+C4bD.C5E.Clγ正确答案:C参考解析:单核巨噬细胞及中性粒细胞表面有C3b、C4b受体,能与带有补体成分的免疫复合物结合,促进对免疫复合物的吞噬作用。
7、单选以下哪项与补体结合试验无关OA.抗原B.抗体C.补体D.溶血素E酶正确答案:E参考解析:补体结合试验有5种成分参与反应,分属三个系统:反应系统(抗原与抗体)、指示系统(绵羊红细胞与溶血素)、补体系统(补体)。
8、单选补体活化替代途径开始于OA.C1的活化B.C2的活化C.C3的活化D.C4的活化E.C5的活化正确答案:C参考解析:补体活化替代途径又称旁路途径,它与经典途径的不同之处主要是越过Cl、C4和C2,直接激活C3,然后完成C5〜C9的过程。
2017 第十九章补体检测及应用一、A11、总补体活性测定试验的原理属于A、溶血反应B、凝集反应C、沉淀反应D、补体结合反应E、中和反应2、不属于血清学反应的是A、凝集反应B、溶血反应C、溶菌反应D、补体结合反应E、Ⅳ型变态反应3、检测总补体活性,采用50%溶血试验是因为()。
A、50%溶血试验比100%溶血试验简单B、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更敏感C、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点可节约时间D、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更为节省成本E、50%溶血作为终点好判断4、以免疫黏附作用清除免疫复合物的补体活性片段是()。
A、C3aB、C2aC、C3bD、C5bE、Clq5、在总补体活性测定时,所测定的是()。
A、红细胞与补体结合的能力B、补体溶解红细胞的活性C、补体溶解致敏红细胞的活性D、溶血素与补体结合的能力E、特异性抗体与红细胞结合的能力6、在经典激活途径中,补体识别的亚单位是()。
A、C1B、C2C、C3D、CAE、C97、补体受体4(CR4)是哪一种受体()。
A、C4bB、C4aC、iC3bD、C5aE、C1q8、关于补体旁路激活途径的叙述,错误的是()。
A、激活物质是细胞壁成分B、从C3激活开始C、发挥效应比经典途径早D、亦有激活效应的扩大E、旁路途径在感染后期发挥作用9、补体结合试验的指示系统包括()。
A、特异性抗体和补体B、特异性抗原和补体C、红细胞和溶血素D、加热灭活的病人血清E、特异性抗原和抗体10、补体结合试验的叙述,下列哪项是错误的()。
A、新鲜豚鼠血清作为补体B、补体、SRBC和溶血素应预先定量C、出现溶血反应即为反应阴性D、不出现溶血反应即为反应阳性E、待测定系统中的抗原与抗体相对应,形成复合物激活补体,出现溶血11、以下哪项与补体结合试验无关()。
A、抗原B、抗体C、补体D、溶血素E、酶12、补体结合试验结果阴性时出现()。
A、血凝B、血凝抑制C、溶血D、不溶血E、沉淀13、可抑制MAC形成的补体膜调节因子是()。
临床免疫学和免疫检验补体检测及应用练习题一、A11、总补体活性测定试验的原理属于A、溶血反应B、凝集反应C、沉淀反应D、补体结合反应E、中和反应2、不属于血清学反应的是A、凝集反应B、溶血反应C、溶菌反应D、补体结合反应E、Ⅳ型变态反应3、检测总补体活性,采用50%溶血试验是因为()。
A、50%溶血试验比100%溶血试验简单B、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更敏感C、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点可节约时间D、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更为节省成本E、50%溶血作为终点好判断4、以免疫黏附作用清除免疫复合物的补体活性片段是()。
A、C3aB、C2aC、C3bD、C5bE、Clq5、在总补体活性测定时,所测定的是()。
A、红细胞与补体结合的能力B、补体溶解红细胞的活性C、补体溶解致敏红细胞的活性D、溶血素与补体结合的能力E、特异性抗体与红细胞结合的能力6、在经典激活途径中,补体识别的亚单位是()。
A、C1B、C2C、C3D、CAE、C97、补体受体4(CR4)是哪一种受体()。
A、C4bB、C4aC、iC3bD、C5aE、C1q8、关于补体旁路激活途径的叙述,错误的是()。
A、激活物质是细胞壁成分B、从C3激活开始C、发挥效应比经典途径早D、亦有激活效应的扩大E、旁路途径在感染后期发挥作用9、补体结合试验的指示系统包括()。
A、特异性抗体和补体B、特异性抗原和补体C、红细胞和溶血素D、加热灭活的病人血清E、特异性抗原和抗体10、补体结合试验的叙述,下列哪项是错误的()。
A、新鲜豚鼠血清作为补体B、补体、SRBC和溶血素应预先定量C、出现溶血反应即为反应阴性D、不出现溶血反应即为反应阳性E、待测定系统中的抗原与抗体相对应,形成复合物激活补体,出现溶血11、以下哪项与补体结合试验无关()。
A、抗原B、抗体C、补体D、溶血素E、酶12、补体结合试验结果阴性时出现()。
临床医学检验技师初级(师)临床免疫学及检验(补体检测及应用)-试卷2(总分:58.00,做题时间:90分钟)一、 A1型题(总题数:24,分数:48.00)1.下列选项中,哪项不是替代途径的激活物(分数:2.00)A.内毒素B.纤溶酶√C.IgA聚合物D.Igc4E.某些蛋白水解酶解析:解析:替代途径的激活物主要是细胞壁成分,如内毒素、某些蛋白水解酶、IgG4、IgA聚合物等。
2.一般情况下补体结合试验只是用来检测(分数:2.00)A.总补体活性B.溶血性疾病的不完全抗体C.红细胞的脆性D.待测抗原或抗体√E.溶血素滴度解析:解析:补体结合试验是经典途径的抗原抗体反应之一,是用免疫溶血机制作为指示系统,来检测另一反应系统的抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原)的试验。
3.Raji细胞技术检测非抗原特异性CIC是由于(分数:2.00)A.Raji细胞表面Fc受体可与Ig结合的性质B.Raji细胞表面有大量补体受体,这些补体受体与结合补体的循环免疫复合物结合√C.Raji细胞可作为指示系统表现溶血现象D.Raji细胞培养容易,性能稳定E.操作简便解析:解析:Raji细胞是从Burkin淋巴瘤患者分离的一种B细胞株,表面有大量C1q、C3b和C3d受体,但无表面免疫球蛋白;因此Raji细胞能与带有补体的免疫复合物结合。
先在塑料管中加入一定量的Raji,再加入待检血清,充分作用后离心洗涤;最后加入荧光素标记的抗入IgG,洗涤后细胞表面显现荧光为试验阳性;但荧光法只能做定性检测。
或加入同位素标记的抗入IgG,离心洗涤后检测沉淀细胞的放射活性;以热聚合IgG做参考标准,可绘制出CIC含量与放射活性的标准曲线,从而求得待测标本中CIC的含量。
Raji细胞法敏感性高、特异性强、方法简单、不受DNA与内毒素的影响;但Raji细胞表面还有Fc受体,因此被检血清中的游离IgG通过Fc段与Raji细胞结合,造成假阳性。
在待检标本中有抗淋巴细胞抗体时也可导致假阳性。
临床医学检验技师初级(师)临床免疫学及检验(补体检测及应用)模拟试卷1(题后含答案及解析)题型有:1. A1型题1.溶血反应主要是用来检测A.总补体活性B.溶血性疾病的不完全抗体C.红细胞的脆性D.待测抗原或抗体E.溶血素滴度正确答案:A解析:溶血法主要是根据抗原与其特异性抗体结合后可激活补体的经典途径,导致细胞溶解。
知识模块:补体检测及应用2.正常血清中哪种补体含量最高A.C1B.C2C.C3D.C4E.C9正确答案:C解析:正常血清中补体各组分含量相差较大。
其中C3含量最高。
知识模块:补体检测及应用3.下列关于补体理化特性的说法,正确的是A.补体性质稳定B.不易受各种理化因素的影响C.酒精不可破坏补体D.56℃加热30分钟可灭活补体E.标本应置于4℃保存正确答案:D解析:补体性质不稳定,易受各种理化因素的影响,加热、紫外线照射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均可破坏补体。
在一10℃活性保持3~4天,冷冻干燥可较长时间保持其活性,56℃加热30分钟灭活,故补体活性检测应尽快进行。
标本应置于一20℃保存。
知识模块:补体检测及应用4.以下补体为γ球蛋白的是A.C2B.C3C.C5D.C8E.C9正确答案:D解析:补体大多为糖蛋白,属于B球蛋白,C1q、C8等为γ球蛋白,C1s、C9为α球蛋白。
知识模块:补体检测及应用5.补体结合实验结果阴性时出现A.血凝B.血凝抑制C.溶血D.不溶血E.不出现沉淀正确答案:C解析:如果指示系统显示溶血,则说明补体结合试验第一阶段中并没有把补体消耗掉,即结果阴性。
知识模块:补体检测及应用6.补体活化替代途径开始于A.C1的活化B.C2的活化C.C3的活化D.C4的活化E.C567正确答案:C解析:补体活化替代途径直接从C3的活化开始。
知识模块:补体检测及应用7.在总补体活性测定时,所测定的是A.红细胞与补体结合的能力B.补体溶解红细胞的活性C.补体溶解致敏红细胞的活性D.溶血素与补体结合能力E.特异性抗体与红细胞结合的能力正确答案:C 涉及知识点:补体检测及应用8.识别抗原抗体复合物的补体是A.C1qB.C1rC.C1sD.C2E.C1qrs正确答案:E解析:识别抗原抗体复合物的补体是C1qrs。
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第十九章补体检测及应用(附答案解析)一、X型题1、以下关于总补体活性测定的说法,错误的是()。
A、特异性抗体与红细胞结合后激活补体B、红细胞表面形成跨膜小孔C、水分渗入红细胞引起肿胀D、补体的溶血程度与补体的活性有关E、补体的溶血程度与补体的活性呈直线关系2、补体总活性测定试验常用来作为终点指标的是()。
A、10%溶血B、20%溶血C、40%溶血D、50%溶血E、100%溶血二、A1型题1、总补体活性测定试验的原理属于()。
A、溶血反应B、凝集反应C、沉淀反应D、补体结合反应E、中和反应2、不属于血清学反应的是()。
A、凝集反应B、溶血反应C、溶菌反应D、补体结合反应E、Ⅳ型变态反应3、以下关于补体叙述正确的是()。
A、具有溶解细胞、促进吞噬的作用,但无炎性介质效应B、是一组具有酶促反应活性的脂类物质C、实验室多采用豚鼠血作为补体来源D、对热稳定E、在血清中C1含量为最高4、补体结合试验结果阴性时出现()。
A、血凝B、血凝抑制C、溶血D、不溶血E、A+C5、能够激活补体替代途径的免疫球蛋白是()。
A、IgG2B、IgMC、IgG3D、IgA聚合物E、IgG16、补体活化的MBL途径的激活物,下列物质应除外的是()。
A、细菌内毒素B、CERC、CRP和CERD、CRPE、甘露聚糖7、补体活化的旁路途径激活过程中,与下列哪项作用无关()。
A、过敏毒素产生B、膜攻击复合物形成C、C3裂解为C3a和C3bD、C4裂解为C4a和C4bE、C5裂解为C5a和C5b8、在总补体活性测定时,所测定的是()。
A、红细胞与补体结合的能力B、补体溶解红细胞的活性C、补体溶解致敏红细胞的活性D、溶血素与补体结合能力E、特异性抗体与红细胞结合的能力9、下列关于补体活化的经典激活途径的描述,错误的是()。
A、主要激活物是抗原抗体复合物B、C1q分子必须与Ig结合后才能激活后续的补体成分C、C4是C1的底物,C4b很不稳定,D、激活顺序为C123456789E、分为识别和活化两个阶段10、HLA-Ⅲ类基因区包括以下哪些位点()。
临床检验免疫主管 (19)临床医学检验主管技师考试辅导《临床免疫学和免疫检验》第九章补体检测及应用补体是一组存在于人和脊椎动物血清中具有酶样活性.不耐热的糖蛋白。
补体不是单一成分,其在功能效应上是以连续反应程序进行的,故又称补体系统。
补体的存在与抗原性异物的刺激无关,在正常人血清中,其含量相对稳定,但在某些疾病发生时,补体的含量及其活性可发生改变。
第一节概述一.补体成分的含量与理化特性(一)补体成分的含量补体大多为糖蛋白,属于β球蛋白,C1q.C8等为γ球蛋白,C1s.C9为α球蛋白。
正常血清中补体各组分含量相差较大,其中C3含量最高。
补体活化后的裂解片段以该成分的符号后加小写英文字母表示,通常a为小片段,b为大片段,但C2a为大片段,C2b为小片段。
体内合成补体成分的部位和细胞有多种,以肝脏.脾脏.小肠等组织和巨噬细胞.上皮细胞.血小板等细胞为主。
(二)补体的理化特性补体的性质不稳定,易受各种理化因素的影响,加热.紫外线照射.机械振荡.酸碱和酒精等因素均可破坏补体。
在-10℃活性保持3~4天,冷冻干燥可较长时间保持其活性,加热56℃30分钟灭活(灭能),故补体活性检测应尽快进行。
标本保存应置于-20℃以下。
二.补体的活化途径1.经典途径是以抗原-抗体复合物结合C1q启动激活的途径,最早被人们所认识,故又称第一途径或传统途径,是抗体介导的体液免疫应答的主要效应方式。
2.MBL途径是甘露聚糖结合凝集素(MBL)结合至细菌启动的途径。
其诱导物或激活剂是机体的炎症反应急性期时相性蛋白产生的MBL和C反应蛋白等,后者与病原体结合而启动绕过C1的MBL途径。
3.旁路途径是通过微生物表面等膜性物质,从C3开始,由B 因子.D因子参与激活过程,也称第二途径.旁路途径。
这种激活方式不依赖于特异性抗体的形成,在感染早期可为机体提供有效的防御机制。
第二节补体总活性测定已应用于科研和临床的方法包括:基于经典途径的CP-CH50和应用于C3旁路检测的AP-CH50。
临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)讲义第⼗九章补体检测及应⽤第⼗九章补体检测及应⽤第⼀节概述补体是⼀组存在于⼈和脊椎动物⾎清、组织液或某些细胞膜上的具有酶样活性、不耐热的糖蛋⽩。
⼀、补体成分的含量与理化特性(⼀)补体成分的含量:补体⼤多为糖蛋⽩,属于β球蛋⽩,C1q、C8等为γ球蛋⽩,C1s、C9为α球蛋⽩。
C3含量最⾼。
(⼆)补体的理化特性:补体的性质不稳定,易受各种理化因素的影响,加热、紫外线照射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均可破坏补体。
在-10℃活性保持3~4天,冷冻⼲燥可较长时间保持其活性,加热56℃30分钟灭活(灭能),故补体活性检测应尽快进⾏。
标本保存应置于-20℃以下。
体内合成补体成分以肝脏、脾脏、⼩肠等组织和巨噬细胞、上⽪细胞、⾎⼩板等细胞为主。
⼆、补体的活化途径1.经典途径:以抗原-抗体复合物结合C1q启动激活,是抗体介导的体液免疫应答的主要效应⽅式。
2.MBL途径:是⽢露聚糖结合凝集素(MBL)结合⾄细菌启动的途径。
其诱导物或激活剂是机体的炎症反应急性期时相性蛋⽩产⽣的MBL和C反应蛋⽩等,后者与病原体结合⽽启动绕过C1的MBL途径。
3.旁路途径:是通过微⽣物表⾯等膜性物质,从C3开始,由B因⼦、D因⼦参与激活过程,也称第⼆途径、旁路途径。
这种激活⽅式不依赖于特异性抗体的形成,在感染早期可为机体提供有效的防御机制。
在机体抗感染过程中,⾸先活化和发挥作⽤的补体途径,是不依赖抗体的旁路途径和MBL途径。
⽽在特异性抗体产⽣时,经典途径⽅可发挥作⽤。
第⼆节补体总活性测定⾎清补体总活性的测定,是对激活后补体最终效应的检测⽅法,可借此反映补体的整体功能。
以红细胞的溶解为指⽰,以50%溶⾎为判断终点,故称CH50。
包括:基于经典途径的CP-CH50和应⽤于C3旁路检测的AP-CH50。
CP-CH50是临床常规进⾏的补体总活性检测项⽬。
通常述及的CH50系指CP-CH50。
⼀、CH50测定法的原理特异性抗体与红细胞结合后可激活补体,导致溶⾎。
第十九章补体检测及应用第一节概述补体是一组存在于人和脊椎动物血清、组织液或某些细胞膜上的具有酶样活性、不耐热的糖蛋白。
一、补体成分的含量与理化特性(一)补体成分的含量:补体大多为糖蛋白,属于β球蛋白,C1q、C8等为γ球蛋白,C1s、C9为α球蛋白。
C3含量最高。
(二)补体的理化特性:补体的性质不稳定,易受各种理化因素的影响,加热、紫外线照射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均可破坏补体。
在-10℃活性保持3~4天,冷冻干燥可较长时间保持其活性,加热56℃30分钟灭活(灭能),故补体活性检测应尽快进行。
标本保存应置于-20℃以下。
体内合成补体成分以肝脏、脾脏、小肠等组织和巨噬细胞、上皮细胞、血小板等细胞为主。
二、补体的活化途径1.经典途径:以抗原-抗体复合物结合C1q启动激活,是抗体介导的体液免疫应答的主要效应方式。
2.MBL途径:是甘露聚糖结合凝集素(MBL)结合至细菌启动的途径。
其诱导物或激活剂是机体的炎症反应急性期时相性蛋白产生的MBL和C反应蛋白等,后者与病原体结合而启动绕过C1的MBL途径。
3.旁路途径:是通过微生物表面等膜性物质,从C3开始,由B因子、D因子参与激活过程,也称第二途径、旁路途径。
这种激活方式不依赖于特异性抗体的形成,在感染早期可为机体提供有效的防御机制。
在机体抗感染过程中,首先活化和发挥作用的补体途径,是不依赖抗体的旁路途径和MBL途径。
而在特异性抗体产生时,经典途径方可发挥作用。
第二节补体总活性测定血清补体总活性的测定,是对激活后补体最终效应的检测方法,可借此反映补体的整体功能。
以红细胞的溶解为指示,以50%溶血为判断终点,故称CH50。
包括:基于经典途径的CP-CH50和应用于C3旁路检测的AP-CH50。
CP-CH50是临床常规进行的补体总活性检测项目。
通常述及的CH50系指CP-CH50。
一、CH50测定法的原理特异性抗体与红细胞结合后可激活补体,导致溶血。
补体溶血程度与补体的活性相关,但非直线关系。
S形曲线。
以溶血百分率为纵坐标,相应血清量为横坐标。
S形曲线在30%~70%之间几乎呈直线,即曲线此阶段对补体量的变化非常敏感。
因此,实验常以50%溶血作为终点指标,它比100%溶血更为敏感,这一方法称为补体50%溶血实验,即CH50。
二、CH50测定方法1.红细胞浓度的调整2.溶血素滴定3.稀释缓冲液:磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验。
4.50%溶血标准管:做CH50试验时,应同时配制50%溶血标准管。
5.50%溶血总补体值的计算三、方法评价与临床意义该法主要检测的是补体经典途径的溶血活性,所得结果反映补体C1~C9等9种成分的综合水平。
如果CH50测定值过低或者完全无活性,应考虑补体缺陷;可再通过C4、C2、C3和C5等单个补体成分的检测,区别是否因某一成分缺乏所致,以便做出确切的实验室诊断。
严重肝病或营养不良时,由于蛋白合成障碍,引起血清补体水平的下降。
而系统性红斑狼疮、类风湿关节炎和强直性脊柱炎等自身免疫病患者,疾病活动期补体活化过度,血清补体因消耗增加而水平下降;病情稳定后补体水平又反应性增高。
因此,补体检测常可用于自身免疫病的诊断,也可作为某些疾病活动期的参考指标。
在细菌感染,特别是革兰阴性细菌感染时,常因补体旁路途径的活化而引起血清补体水平的过度降低;而心肌梗死、甲状腺炎、大叶性肺炎、糖尿病、妊娠等情况下,血清补体水平常见升高。
第三节单个补体成分的测定C3、C4、C1q、B因子和C1酯酶抑制物等,常被作为单个补体成分的检测指标。
常用免疫溶血法检测单个补体成分的活性;基于抗原抗体反应的血清学法(免疫化学法)测定其含量。
目前应用自动化免疫散射比浊法可准确测定体液中C3、C4等多个单一的补体成分。
一、免疫溶血法该方法中抗原为SRBC,抗体为兔或马抗SRBC的抗体(IgG、IgM型),即溶血素。
试验中有两组补体参与,一组缺少待测成分的试剂(R试剂)。
加入致敏SRBC(检测经典途径补体成分用)或兔红细胞RRBC (检测替代途径补体成分用)后,不发生溶血。
另一组为待测血清中的补体,当加入待测血清,补体成分齐全,产生溶血。
溶血程度与待测补体成分活性有关,仍以50%溶血为终点。
该法不是检测某补体成分的具体含量,而是检测其活性。
二、免疫化学法分为单向免疫扩散、火箭免疫电泳、透射比浊法和散射比浊法。
后两种方法可通过仪器对补体的C3、C4、B因子等单个成分进行自动化测定。
待测血清标本中的C3、C4成分,经适当稀释后与相应抗体反应形成复合物,反应介质中的PEG可使该复合物沉淀,仪器对复合物产生的光散射或透射信号进行自动检测,并换算成所测成分的浓度单位。
该法是借助补体的抗原性和与相应抗体反应的前带原理建立的补体单个成分定量检测法。
利用前带原理必须以过量的抗补体抗体保证准确测定的质量。
其简单、特异、重复性好、自动化程度高。
自动免疫比浊法可反映所测补体成分的绝对量,并能进行标准化流程管理与质量控制,是目前国内外临床免疫检测中的主要检测方法。
第四节补体结合试验(CFT)将免疫溶血作为指示系统,用以检测另一反应系统中抗原或抗体。
该方法并非用于补体的检测,而是利用补体的溶细胞作用进行各种物理状态的抗原抗体测定。
一、试验原理包括:①反应系统:已知抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原);②补体系统;③指示系统:SRBC与相应溶血素预先结合,成为致敏绵羊红细胞。
反应分两步进行。
首先反应系统与补体作用;第二步:指示系统利用剩余补体反应。
如反应系统中有抗体或抗原,则形成免疫复合物而固定和消耗补体,使后加入的SRBC-抗SRBS指示系统无多余补体可利用,则无溶血反应发生,反之亦然。
不溶血为补体结合试验阳性。
二、试验方法(一)试剂的准备1.抗原或抗体2.补体:采用豚鼠血清为补体。
3.待测标本:及时分离血清用于检测或-20℃保存备用。
试验前,应先将血清56℃加热30分钟(或60℃3分钟)以灭活补体。
血清标本遇有抗补体现象时,可作下列处理:①加热灭活时提高12℃;②-20℃冻融后离心去沉淀;③以3mmol/L盐酸处理;④加入少量补体后再行灭活;⑤以白陶土处理;⑥通入CO2;⑦以小白鼠肝粉处理;⑧用含10%新鲜鸡蛋清的生理盐水稀释血清。
(二)正式试验:小量法较为常用。
三、方法评价补体结合试验是一经典的免疫技术,具有灵敏度高、可检测的抗原或抗体范围广泛等优点。
该方法无需特殊设备,结果容易观察,试验条件要求不高,一般医院均具备开展的条件。
第五节补体受体的测定C3是各活化途径的交汇点,且含量最多,故C3受体为测定的重点。
第六节补体测定的应用1.业已开展或曾经应用的病原体检测用于诊断梅毒螺旋体感染的华氏反应(已淘汰)。
2.应用于补体含量和活性检测反映总补体活性的AP-CH50和AP-H50试验。
3.用于检测补体单个成分及其裂解产物(Clq、C3SP、C3、C4、B因子等)和补体受体的溶血试验、免疫化学试验和免疫荧光技术等。
4.与补体含量和活性相关的疾病主要包括:(1)免疫相关性疾病(2)与补体有关的遗传性疾病(3)高补体血症:偶见于感染恢复期和某些恶性肿瘤患者,如C2、C3、C4的升高。
急性病毒性肝炎、心肌梗死、糖尿病甚至正常妊娠时,也可观察到补体值的增高。
(4)补体含量显著降低的疾病:继发性补体降低常见于下列情况:①消耗增多,如SLE、冷球蛋白血症、自身免疫性溶血性贫血、类风湿关节炎、移植排斥反应等,此时因免疫复合物形成,消耗补体;②补体的大量丢失,主要见于大面积烧伤患者、失血及肾脏病患者;③补体合成不足,常见于肝脏疾病患者或营养不良的患者。
此外,细菌(特别是G-)感染时,常因补体替代途径的活化使补体水平暂时降低。
类风湿性关节炎的血清补体变化情况是A.疾病活动期补体水平下降,病情稳定期补体水平恢复正常B.疾病活动期补体水平下降,病情稳定期补体水平升高C.疾病活动期补体水平升高,病情稳定期补体水平恢复正常D.疾病活动期补体水平升高,病情稳定期补体水平下降E.整个疾病过程中补体水平均下降『正确答案』B『答案解析』系统性红斑狼疮、类风湿关节炎和强直性脊柱炎等自身免疫病患者,疾病活动期补体活化过度,血清补体因消耗增加而水平下降;病情稳定后补体水平又反应性增高。
补体总活性测定采用A.凝集法B.沉淀法C.溶血法D.电泳法E.标记法『正确答案』C『答案解析』补体总活性测定常采用的是CH50试验。
补体结合试验的指示系统是A.特异性抗体和补体B.特异性抗原和补体C.红细胞和溶血素D.加热灭活的患者血清E.补体和溶血素『正确答案』C『答案解析』补体结合试验试验原理:包括①反应系统:已知抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原);②补体系统;③指示系统:SRBC与相应溶血素预先结合,成为致敏绵羊红细胞。
下列物质中,不参与溶血反应的是A.羊红细胞B.抗红细胞抗体C.补体D.溶血素E.抗补体抗体『正确答案』E『答案解析』免疫溶血法中抗原为SRBC,抗体为兔或马抗SRBC的抗体(IgG、IgM型),即溶血素。
试验中有两组补体参与,一组缺少待测成分的试剂(R试剂)。
加入致敏SRBC(检测经典途径补体成分用)或兔红细胞RRBC(检测替代途径补体成分用)后,不发生溶血。
另一组为待测血清中的补体,当加入待测血清,补体成分齐全,产生溶血。
溶血程度与待测补体成分活性有关,仍以50%溶血为终点。
不是补体结合试验优点的是A.灵敏度高B.特异性强C.应用面广D.易于普及E.参与反应的成分多『正确答案』E『答案解析』补体结合试验参与反应的成分只包括抗原(抗体)、补体和致敏红细胞。