淋球菌检查ppt课件

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附：革兰氏染色法
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四 个步骤，具体操作方法是： （口诀1 1 半 半 ） 1）载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取 少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加 热以杀死菌种并使其粘附固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗，去掉浮色。
5)女性宫颈分泌物、咽和直肠标本在涂片中由 于杂菌较多，故推荐用培养法 6）分离培养应采用加抗生素的选择性培养基 7）氧化酶试剂应为新鲜配制（现用现配），在 棕色瓶中避光保存 8）氧化酶遇铁也会变成红色，接种环应为非铁 丝所制
考试模拟题：女性淋病取材培养
项目 项目分 内容及评分标准 于妇检床上取材，充分暴露外阴 用灭菌生理盐水清洗外阴 操作流程 70 用扩阴器暴露宫颈口，用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物， 另取一拭子插入宫颈口内1~2 cm，转动并停留10~20s后取 出。 标本取出后立即接种于培养基中，放入36℃培养箱培养。 24~48小时后观察。 1.涂片时不要用力涂擦，厚薄要合适。 注意事项 30 2.培养取材时拭子伸入宫颈的深度要足够，并停留一段时间。 3.取材后应立即接种。 总分 100 满分 10 15 20 15 10 10 10 10 得分

（3）对无性交史女性可采集阴道处分泌物。 （4）直肠取材时，应将棉拭子插入肛门 2~3cm。 （5）检查淋球菌咽炎时，应从扁桃体及扁桃体 窝取材
2）标本取出后立即接种于培养基中，目前常 用加入多粘菌素的血液琼脂或巧克力培养基 3）初次分离培养应使用5%~10%CO2浊缸， 培养温度36℃为宜，24~48小时后观察
4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。 5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色 30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革 兰氏阴性菌被褪色而呈无色。 6）用蕃红染液复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈 紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳 性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。
2.淋球菌培养 1）取材 （1）男性患者从尿道取材，用细小棉拭子伸入尿道 2~4cm，轻轻转动并停留10~20s后取出。 （2）女性患者在妇检床上取材，先用扩阴器暴露宫 颈口，用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物，另 取一拭子插入宫颈口内1~2 cm，转动并停留 10~20s后取出。
4）淋球菌在多粘菌素的血液琼脂上经24~48h 培养后，可形成圆形、凸起、湿润、光滑、 半透明或灰白色的菌落，边缘呈花瓣状，直 径0.5~1.0cm，用接种环触之有粘性，如继续 培养，菌落体积增大，表面粗糙，边缘皱缩。
3.淋球菌的鉴定 1)配制氧化酶试剂：0.5%~1%盐酸二甲基对苯 二铵水溶液； 2）将溶液滴加在可疑菌落上，观察颜色变化， 也可将试剂滴在一小张滤纸片上，然后挑取 可疑菌落与之接触，观察颜色变化。
3）菌落在接触氧化酶试剂15~20S出现红色， 保持30s以上，然后逐渐变成紫色，最后是黑 色，为氧化酶试验阳性，证实为淋球菌
【注意事项】 1）涂片时不要用力涂擦，厚薄要合适。 2）培养取材时拭子伸入尿道或宫颈的深度要足 够，并停留一段时间。 3）取材后应立即接种。 4）对症状不典型的男性患者取材，最好是 【禁忌证】 无 【并发症】 无

【用物准备】 无菌生理盐水、细小棉拭子、扩阴器、载 玻片 ,培养皿，氧化酶试剂等
【操作流程】 1. 分泌物的涂片检查（男性） 1）用灭菌生理盐水洗净尿道口。 2）戴无菌手套，用手指由阴茎根部向尿道口方向挤 出脓液，用棉签拭子蘸取脓液，涂于载玻片上，自 然干燥后加热固定。 3）革兰氏染色 4）显微镜下观察，在多形核白细胞内发现革兰氏阴 性双球菌可明确诊断。