临床微生物检验技术进展 ppt课件

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临床微生物检验技术进展

an identification of E. coli is appropriate. If negative for these tests, Shigella should be suspected and an agglutination with Shigella antisera performed.
带补充数据库时可以鉴别新生隐球菌（
C.neoformans）和格特隐球菌（C.gattii）。
（6）在丝状真菌应用
丝状真菌的表型易变，其蛋白质谱可随生长条件及分析菌丝区域的不同而变化，目前的商业数据库少有涉及这些菌。De Carolis等人使用布鲁克Biotyper
系统开发了曲霉菌（Aspergillus species）、镰刀菌（Fusarium species）和毛霉菌（Mucorales）的数据
一、临床微生物病原体的快速诊断
虽然对“快速”的时间长短没有正式的定义，但是大多数人期望快速的系统能在4h内提供可用的结果。通常微生物的繁殖时间（通常是30min或更长时间）不允许那些依赖微生物生长与否的检测方法，在短时间内产生可检测的生化反应。为了克服这一问题，必然使用全新的底物，检测待测菌产生的酶或蛋白质，从而在1～4h内检测出应答反应。
Hale Waihona Puke （1）DNA靶向测序对于纯培养的微生物可以进行DNA序列的靶向测序。靶基因的保守区往往是PCR引物和 DNA测序引物退火结合的区域。可变区具有独特的核苷酸序列，从而实现基于测序的特定菌株属和种的鉴定。鉴定细菌最常用的靶序列是16S rRNA基因（16S rDNA）。
（2）电喷雾离子化质谱（ESI-MS）技术应用于PCR产物的分析
（1）在需氧/兼性厌氧的革兰阳性杆菌应用

《微生物检验技术》课件

食品中常见的微生物种类：细菌、霉菌、酵母菌等。
微生物在食品中的分布特点：食品的种类、加工方式、储存条件等对微生物的分布有显著影响。
微生物的来源：食品生产、加工、运输、储存等环节中可能引入
的微生物。
食品中微生物的检测方法与操作
01
02
03
04
传统检测方法
培养法、镜检法等。
现代检测技术
免疫分析法、PCR技术、生物传感器等。
消毒灭菌效果的监测
对医院环境、医疗器械等进行微生物学检测，评估消毒灭菌效果，确保医疗安全。
抗菌药物敏感性试验
通过抗菌药物敏感性试验，指导临床医生合理选用抗菌药物，降低耐药性的产生。
感染暴发调查
在发生医院感染暴发时，进行流行病学调查和溯源分析，查找感染源和传播途径，采取有
效控制措施。
疫苗的研究与开发
病原微生物的分离与鉴定
从患者体内分离出病原微生物，并进行鉴定，为疫苗的研制提供基础资料。
疫苗株的筛选
通过微生物检验技术对病原微生物进行筛选，选择适合作为疫苗株的菌株或病毒株。
疫苗制备过程的监控
在疫苗制备过程中，对原材料、半成品和成品进行质量检验和安全性评估，确保疫苗的安全性和有效性。
疫苗效果评价
微生物的生长与繁殖
微生物的生长
微生物生长是指微生物细胞数目的增加和质量的增加。其生长过程分为迟缓期、对数生长期、稳定期和衰亡期。
微生物的繁殖
微生物繁殖是微生物生长的必然结果，繁殖方式包括二分裂、出芽生殖、孢子生殖等。繁殖过程中，微生物的遗传物质会复制并传递给后代。
微生物的生理生化特性
微生物的代谢
利用微生物降解污染物，处理废水、废气等，降低环境污染。

临床微生物诊断学(课件)

Sample Collection and Handling in Microbiology Diagnostics
Learn about the proper techniques and considerations for sample collection, transportation, and storage in clinical microbiology diagnostics, ensuring accurate and reliable results.
Automated Microbiology Systems and Their Use in Clinical Diagnostics
Learn about the latest advancements in automated microbiology systems, such as MALDI-TOF mass spectrometry and automated antimicrobial susceptibility testing platforms, enhancing the efficiency and accuracy of clinical diagnostics.
Serological and Immunological Techniques in Microbiology Diagnostics
Explore the use of serological and immunological techniques, such as ELISA, agglutination assays, and immunoassays, in the diagnosis of infectious diseases and the detection of specific antibodies or antigens.

医学检验微生物ppt课件完整版x

个人防护措施及注意事项说明
实验服与护目镜
进入实验室需穿着实验服，佩戴合适的护目镜，防止试剂飞溅或粉尘刺激。
手套与口罩
根据实验需要选择合适的手套和口罩，避免皮肤接触有害试剂或吸入有害气体。
实验操作规范
规范实验操作，避免产生气溶胶或飞溅物，减少交叉污染的风险。
实验废弃物处理及环保要求讲解
废弃物分类处理
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目录
• 微生物学基础 • 医学微生物学概述 • 常见病原微生物介绍 • 微生物检验技术与方法 • 临床标本中常见病原微生物检测实例分析 • 实验室安全与防护措施
01 微生物学基础
微生物定义与分类
微生物定义
微生物是一类形体微小、结构简单、必须借助光学显微镜或电子显微镜才能看到的微小生物。
微生物生长与繁殖
01
微生物营养
微生物从外界环境中摄取和利用营养物质的过程称为营养。微生物营养
类型有光能自养型、光能异养型、化能自养型和化能异养型四类。
02 03
微生物生长
微生物在适宜的环境条件下，通过摄取营养物质、合成细胞物质、增加细胞数量的过程称为生长。生长曲线可分为迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。
通过对微生物基因组进行测序和分析，了解其基因组成和功能，为微生物的鉴定和分型提供准确
依据。
基因芯片技术
将大量特异性基因探针固定在芯片上，通过与待测微生物DNA杂
交来鉴定其种类和型别。
宏基因组学技术
通过对环境中所有微生物的基因组进行高通量测序和分析，了解微生物群落的组成和功能，为环境微生物检测和生态学研究提供
尿液标本中常见病原微生物检测实例分析
尿常规检查

临床微生物检验与临床ppt课件

“何时采血进行血培养，无特殊时间要求。”
整理版课件
24
你认为对吗？为了提高病人血培养的阳性率，最好的抽血时间是：
A.发热开始时 B.寒战开始时 C.发热最高峰时 D.寒战结束时 E.预计寒战发热前
整理版课件
25
细菌浓度
0
血培养采血时机
30 时间 (分钟)
整理版课件
体温 60
26
答案：采集血培养样本的最佳时间
以条件致病菌为主：很多低致病、弱毒的细菌，在外环境、人体体表以及与外界相通的腔道中广泛存在的细菌，引起感染甚至造成严重后果的现象日益增多。
病原菌的种类更为广泛：包括需氧菌、厌氧菌、苛氧菌、分枝杆菌和真菌等。
整理版课件
3
现代感染性疾病的新特点
细菌的耐药性不断增强：同一种细菌对抗生素的耐药性可以完全不同，甚至出现同时耐多种抗生素的“多重耐药”细菌，往往使临床医师的“经验性”治疗或所谓的常规治疗根本无效。
临床医生最不能接受的问题:阳性率低
整理版课件
10
国内微生物标本的采集目前存在的问题：
标本送检率低从全国来看，抗感染治疗前，送检相关标本可能只占应送标本的一半左右，与抗菌药物应用率之高形成鲜明的反差。一些医师在经验性治疗受挫后方送标本，此时已失去阳性培养的机会。
标本有缺陷正确收集各种临床标本，关注特检标本采样与送检的方法和条件，是完成病原学诊断的先决条件。
800 beds 600个标本/天 150 瓶/天 3套瓶/24小时 (1个需氧瓶+1个厌氧瓶=1套) 10-30株需氧或兼性厌氧菌/天, 2株厌氧菌/月 7台
21
————关于血培养指征
“只有在发热时，才需要进行血培养。”

临床微生物学检验标本课件

2020/11/14
46
常见病原体
20
◈真菌血症
病原体：真菌特点：
☆多数伴有细菌感染 ☆主要发生于菌群失调患者 ☆常可播散累及肝、肺、和心内膜等
2020/11/14
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脑脊液
采集方法
◈ 腰椎穿刺术 ◈ 小脑延髓池穿刺术 ◈ 脑室穿刺术
2020/11/14
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采集量：1～3ml 送检要求
☆置无菌管内立即送检，不超过1h。 ☆特殊培养保温送检或床旁接种。
物的培养基 ◈ 间歇性寒战或发热：寒战或发热高峰到来之前
0.5～1h、寒战或发热后1h采血
2020/11/14
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特殊的全身性和局部感染患者采血培养建议
♦ 可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎，应在不同部位采集2～3份血标本。
♦ 不明原因发热，先采集2～3份血标本，24～36h后估计体温升高之前再采集2份以上。
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◈ 烧伤创面感染最常见G-杆菌感染（如铜绿假单胞菌）
◈ 急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌感染导致
◈ 慢性化脓性骨关节炎、慢性骨髓炎常由结核分枝杆菌感染引起
2020/11/14
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痰液
标本采集
➢ 采集指征：有下列指征时，应采集痰标本
◈咳嗽、咳痰
乙型脑炎病毒
新型隐球菌
柯萨奇病毒A
白色假丝酵母菌
柯萨奇病毒B
钩端螺旋体
脊髓灰质炎病毒
新肠道病毒68～71
狂犬病毒
2020/11/14
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临床意义
➢ 正常人脑脊液无菌 ➢ 病原体通过血脑屏障进入中枢神经系统引起

临床微生物学检验-PPT课件

（一）医院感染标本的采集和运送的基本原则

发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，二、三级医院微生物标本送检率不应低于70%。尽量在抗菌药物使用之前采集标本。标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。标本采集后应立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。
标本送检方法 --血液与骨髓
① 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。 ② 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养基前，应过火消毒针头，最新资料显示更换针头容易造成新的污染。血培养瓶应在避光室温中保存，不必置冰箱保贮。 ③ 每次采血量成人5-10ml，婴幼儿l-5ml，培养基与血液之比以 10：1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。为提高阳性率，我们一般要求成人采血不少于8 ml，儿童不少于3 ml，婴儿1-2 ml。
三、分析前的质量控制
分析前质量控制是我国目前临床实验室诊断质量保证中较为薄弱的环节，严重影响临床微生物学实验室对感染样本中致病菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体监控，也影响临床诊断，合理选用抗菌药物，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈率，而且对预测或及时发现医院感染的暴发流行、杜绝感染蔓延、研究医院感染的发病机制和环节、制定有效的医院感染控制措施等，均具有十分重要的意义。严格实施正确的微生物标本送检和检验方法，是做与
脓液
① 无菌生理盐水擦洗病灶表面后用棉拭子取病灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。 ② 对未渍破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检：也可于切开排脓时用无菌棉拭子采样。

临床微生物检验

2024/1/30
22
实验室安全与防护措施
2024/1/30
实验室安全
遵守实验室安全规定，注意防火、防爆、防毒、防电击等安全事项。
防护措施
采取必要的防护措施，如穿戴防护服、戴防护眼镜和手套等，避免实验过程中可能产生的危害。同时，对实验废弃物进行妥善处理，防止对环境造成污染。
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06 临床微生物检验的临床应用与意义
及时送检
样本采集后应及时送检，避免长时间存放导致微生物死亡或繁殖。
9
样本的处理与制备
01
02
03
04
前处理
根据不同类型的样本进行相应的前处理，如稀释、过滤、离
心等。
制备涂片
将处理后的样本制备成涂片，以便进行显微镜观察。
培养基接种
将样本接种到适当的培养基上，进行微生物培养。
质量控制
在样本处理过程中应进行质量控制，确保结果的准确性和可
临床微生物检验
2024/1/30
1
目录
2024/1/30
• 微生物检验概述 • 临床微生物检验的样本采集与处理 • 临床微生物检验的常用技术 • 临床微生物检验的常见病原菌与检测 • 临床微生物检验的质量控制与实验室管理 • 临床微生物检验的临床应用与意义
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01 微生物检验概述
2024/1/30
靠性。
2024/1/30
10
03 临床微生物检验的常用技术
2024/1/30
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显微镜技术
光学显微镜
用于观察细菌、真菌等微生物的形态、大小、排列和染色特性。
2024/1/30
电子显微镜
提供更高分辨率的图像，用于研究微生物的超微结构。

微生物检验与临床石屏ppt演示课件

• 革兰染色 • 降钙素元(PCT) • 1-3-β-D葡聚糖试验(G)试验和GM试验
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临床希望第一时间知道的信息 • 感染或非感染 • 细菌感染或非细菌感染 • 因为上述感染治疗方法不同
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PCT的临床价值
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6.血液在需氧瓶和厌氧瓶中分配
建议常规情况下，一份血培养应包括：1个需氧瓶和1 个厌氧瓶（1次穿刺）
当采血量不能满足推荐的采血量时，应首先满足需氧瓶的需要。
注意：对于仅用需氧瓶的实验室来讲，每次采血必须注入2个需氧瓶中以确保足够量的采血量。
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7.采血时机？
细菌通常在寒战和发烧前1小时入血，此时为采血培养标本进行病原培养的最佳时机
（一）对主要目标细菌耐药率超过30%的抗菌药物，应及时将预警信息通报本机构医务人员。
（二）对主要目标细菌耐药率超过40%的抗菌药物，应慎重经验用药
（三）对主要目标细菌耐药率超过50%的抗菌药物，应参照药敏试验结果选用。
（四）对主要目标细菌耐药率超过75%的抗菌药物，应暂停该类抗菌药物的临床应用，根据追踪细菌耐药监测结果，再决定是否恢复其临床应用。
9
抗生素使用与细菌耐药变化
1. 早在抗生素应用以前有些细菌就具有抗药基因 2. 早在人工合成的抗生素使用之前，细菌就与自然
界中的一些天然抗菌成分以及其他微生物产生的抗菌物质广泛接触而获得了耐药基因.（如放线菌代谢产物、天然植物、中草药等）
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抗生素使用与细菌耐药变化
1. 细菌耐药属于一种自然现象，是微生物进化的结果
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中国某三甲医院微生物送检标本分布（3200床位）（40,000标本/年）

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布鲁克系统可能难以区分缓症链球菌(S. mitis)、口腔链球菌(S. oralis)与肺炎链球菌(S. pneumoniae) ；而
VITEK MS系统则可以克服这一局限。尽管MALDITOF MS在种群水平上能够可靠地鉴别草绿色链球菌
(viridans group streptococci)，但它可能无法区分一些密切相关的种。其它链球菌，如乳链球菌(S. canis) 、停乳链球菌停乳亚种(S.dysgalactiae)、化脓性链球菌(S. pyogenes)和S.infantarius、马肠链球菌(S. equinus)和S.lutetiensis等，彼此可能无法很好地区分
the Andromas SAS (Paris, France).
The former two instruments are available in the USA and received clearance from the Food and Drug Administration (FDA) for certain groups of microorganisms.
临床微生物检验技术进展
虽然对“快速”的时间长短没有正式的定义，但是大多数人期望快速的系统能在4h内提供可用的结果。通常微生物的繁殖时间（通常是30min或更长时间）不允许那些依赖微生物生长与否的检测方法，在短时间内产生可检测的生化反应。为了克服这一问题，必然使用全新的底物，检测待测菌产生的酶或蛋白质，从而在1～4h内检测出应答反应。
（4）在厌氧菌应用
MALDI-TOFal等报道使用布鲁克v3.3和生物梅里埃v1 系统/v1.1数据库对274株常规分离厌氧菌（多
属于Bacteroides fragilis）的鉴定准确率分别
为89%和100%。
（5）在酵母菌应用
MALDI-TOF MS可以鉴定酵母菌，且性能优于一些传统的表型鉴定系统。它可以鉴别都柏林假丝酵母菌
(C. dubliniensis)和白假丝酵母菌(C.albicans)；皱折假丝酵母菌(C.rugosa)和近邹褶假丝酵母菌 (C.pararugosa)；挪威假丝酵母菌(C.norvegensis)、克柔假丝酵母菌(C.krusei)和平常假丝酵母菌（ C.inconspicua、）；近平滑假丝酵母菌 (C.parapsilosis)、 C.orthopsilosis 和C.metapsilosis；
开来。
（3）在需氧/兼性厌氧的革兰阴性杆菌应用阴沟肠杆菌复合体植生拉乌尔菌、解鸟氨酸拉乌尔菌巴策尔弓形杆菌弯曲杆菌种小肠结肠炎耶尔森菌二氧化碳嗜纤维菌洋葱伯克霍尔德菌气单胞菌 HACEK菌群
沙门菌属内鉴定通常是不可行的，但是它可区分
Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhi和其它S. enterica serovars。
MALDI-TOF MS对葡萄球菌（Staphylococci ）、β-溶血性链球菌(b-hemolytic streptococci、气球菌(Aerococci和肠球菌 (Enterococci)的整体鉴定性能都是极佳的。而对一些α-溶血性链球菌(a-hemolytic streptococci)有困难。
（1）在需氧/兼性厌氧的革兰阳性杆菌应用
棒杆菌属菌可准确鉴定。
MALDITOF MS可以鉴定分枝杆菌，这种检测需要特殊处理以杀灭待测菌（出于安全等考虑）、打散细胞聚集团块以及裂解细胞外壁（envelopes）等。MALDITOF MS应该能够鉴定大多数临床相关的分枝杆菌菌种。
（2）在需氧/兼性厌氧的革兰阳性球菌应用
带补充数据库时可以鉴别新生隐球菌（
C.neoformans）和格特隐球菌（C.gattii）。
（6）在丝状真菌应用
丝状真菌的表型易变，其蛋白质谱可随生长条件及分析菌丝区域的不同而变化，目前的商业数据库少有涉及这些菌。De Carolis等人使用布鲁克Biotyper
系统开发了曲霉菌（Aspergillus species）、镰刀菌（Fusarium species）和毛霉菌（Mucorales）的数据
库，并用于94株菌的鉴定，其种水平的正确率高达 97% 。 Iriart等人利用VITEK MS v1系统/v1.1数据库和直接上板测试操作，成功鉴定了44株曲霉菌中的 82%的菌（包括数据库中存在的所有菌株）。
（7）临床标本的直接检测血液感染尿液感染
2、细菌、病毒及其它病原体基因型快速诊断
（1）DNA靶向测序
对于纯培养的微生物可以进行DNA序列的靶向测序。靶基因的保守区往往是PCR引物和 DNA测序引物退火结合的区域。可变区具有独特的核苷酸序列，从而实现基于测序的特定菌株属和种的鉴定。鉴定细菌最常用的靶序列是16S rRNA基因（16S rDNA）。
an identification of E. coli is appropriate. If negative for these tests, Shigella should be suspected and an agglutination with Shigella antisera performed.
Shigella and E. coli are so closely related that Shigella
is not identified by MALDI-TOF MS. To differentiate, colonies should be examined for lactose fermentation,motility and a spot indole. If positive
（一）细菌与真菌的快速诊断 1、质谱技术传统的形态学检测技术经典的利用酶学的生化反应技术
生化反应编码技术碳指纹技术质谱技术（MALDI-TOF MS）
Bruker Daltonik,microflex Biotyper (Billerica, MA, USA)
bioMerieux Vitek MS (Durham, NC, USA)