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培养基培养基(medium或culturemedium)是一种人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合养料。
因此任何培养基都应具备微生物所需要的六大营养要素，且其间的比例是合适的。
任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌，否则很快引起杂菌丛生，并破坏其固有成分和性质。
一、选用和设计培养基的原则和方法在微生物学研究和生产实践中，配制合适的培养基是一项最基本的工作。
但是，许多工作不但要求我们去选用一种现成的培养基，而且还经常要求亲自去设计一种更合适的培养基，这就要求人们除了熟悉微生物的营养知识和规律外，还要有一套科学的设计培养基所应遵循的基本原则和方法。
不巧的是，在一般的书籍中，这方面的内容不易找到。
为此，这里根据自己的体会，提出了四个原则和四种方法，以作为总结这类工作的一个尝试。
(一)四个原则1．目的明确在设计新培养基前，首先要明确配制该培养基的目的，例如，要培养何菌？获何产物？用于实验室作科学研究还是用于大规模的发酵生产？作生产中的“种子”，还是用于发酵？等等。
如果某培养基将用于实验室研究，则一般不必过多地计较其成本。
但必须明确对该培养基是作一般培养用，还是作精细的生理、代谢或遗传等研究用。
如属前者，可尽量按天然培养基的要求来设计，如系后者，则主要应考虑设计一种组合培养基(即“合成培养基”，详后)。
拟培养的微生物对象也十分重要。
不同大类的微生物，对培养基中碳源与氮源间的比例、pH的高低、渗透压的大小、生长因子的有无以及特殊成分的添加等都要作相应的考虑。
如果某培养基将用于大规模的发酵生产上，则用作“种子”的培养基，一般其营养成分宜丰富些，尤其氮源的含量应较高(即C/N比低)；相反，如拟用作大量生产代谢产物的发酵培养基，则从总体来说，它的氮源含量宜比“种子”培养基稍低(即C/N比高)。
除了对不同类型的微生物应考虑其特定条件外，在设计发酵培养基时，还应特别考虑到生产的代谢产物是主流代谢产物，或是次生代谢产物。
微生物检验技术一、判断题（将判断结果填入括号中，正确的填“√”，错误的填“×”）：1.微生物可分为细菌、放线菌、霉菌和酵母菌四大类。
（×）2.具有荚膜的肺炎双球菌其毒力强。
（√）3.食用前将食品充分加热可以防止一些食物中毒的发生。
（√）4.细菌在不同生长条件下，形态可能有变化。
（√）5.根据细菌所含DNA的不同，可以将细菌分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌两大类。
（×）6.所有细菌仅需20~30分钟即可繁殖一代。
（×）7.菌落是指一群在固体培养基表面繁殖形成肉眼可见的集团。
（×）8.大肠杆菌是食品和饮用水卫生检验的指示菌，（×）9.真菌进化程度高于细菌，所以真菌为多细胞的微生物。
（×）10.在微生物中，只有霉菌才能以菌丝体的形式进行生长。
（×）11.酵母菌是一种多细胞的微生物。
（×）12.霉菌主要是通过产生各种有性孢子进行繁殖的。
（×）13.在固体培养基上生长时，霉菌的菌落较大，比较湿润粘稠，不透明，呈现或紧或松的蜘蛛网状、绒毛状或棉絮状。
（×）14.霉菌往往在干燥的环境中大量生长繁殖，有较强的陆生型。
（×）15.微生物营养物质中氮源的功能是：提供氮素和能量来源。
（×）16.微生物吸收营养物质，单纯扩散是利用浓度差，从浓度低的向浓度高的进行扩散。
（×）17.任何微生物培养基中均需含有碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分等五种营养物质。
（×）18.微生物在生命活动中需要的能量主要是通过生物氧化而获得。
（√）19.微生物的分解代谢就是将复杂的大分子物质降解成小分子的可溶性物质。
（√）20.微生物的酶具有特殊的催化能力。
可以在发酵工艺上利用任何一种酶来进行生产。
（×）21.细菌生长达到稳定期，菌体生长速度等于零，细菌停止生长。
（×）22.不断加温可以增加细菌的生物化学反应速率和细菌的生长速度。
常见微生物培养基培养基Medium是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐包括微量元素以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素。
按所用原料不同可分为两类应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的称为天然培养基应用化学药品配成并标明成分的称为合成培养基或综合培养基。
化学试剂中的培养基大多为合成培养基。
由于液体培养基不易长期保管现在均改制成粉末。
培养基由于配制的原料不同使用要求不同而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后易被细菌污染或分解变质因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基如组织培养基较长时间的贮存必须放在2~6。
C的冰箱内。
常见培养基有1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克氯化钠0.5克琼脂 1.5克水100毫升在烧杯内加水100毫升放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠用蜡笔在烧杯外作上记号后放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后加入琼脂不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,分装在各个试管里加棉花塞用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心除去脂肪和血管250克用刀细细剁成肉末后加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号煮沸转用文火炖2小时。
过滤滤出的肉末干燥处理滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心灭菌备用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解然后分别加入其他组分搅拌使溶解后分装灭菌备用。
2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基高氏培养基可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升先把淀粉放在烧杯里用5毫升水调成糊状后倒入95毫升水搅匀后加入其他药品使它溶解。
1、营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7.6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。
用途：作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7.6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升，轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。
用途：1. 一般棉拭子均接种此培养基2.尿液，脓液3.分离细菌标本用。
3、基础培养基（肉膏汤BB）成份：蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7.6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。
用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管2,作普通琼脂斜面。
4、血液培养基（大管肉汤培养基）成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕）1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。
用途：作血，骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）成份：蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25（22）克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7.4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0.5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟），冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。
（高压以后方可再加乳糖）用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。
6、罗文斯坦培养基成份：磷酸二氢钾 2.4克硫酸镁0.24克枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克纯甘油（丙三醇）12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤）2%孔雀绿水溶液20毫升制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿）。
常见微生物培养基1. 肉汤培养基（Nutrient Broth）：这是一种常用的基础培养基，适用于多种微生物的生长。
它含有牛肉浸膏、酵母提取物和蛋白胨等成分，提供了丰富的氮源、维生素和生长因子。
2. 肉汤琼脂（Nutrient Agar）：在肉汤培养基的基础上添加琼脂，使其成为固体培养基。
这种培养基常用于分离和鉴定微生物，因为固体培养基可以形成单个菌落，便于观察和计数。
3. 血琼脂（Blood Agar）：在肉汤琼脂中加入5%的脱纤维羊血或马血。
这种培养基对于需要氧气和营养丰富的环境的微生物（如链球菌和肺炎球菌）特别有效。
4. 麦康凯琼脂（MacConkey Agar）：这是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道杆菌。
它含有胆盐和结晶紫，可以抑制革兰氏阳性菌的生长，同时促进革兰氏阴性菌的生长。
5. 沙保罗琼脂（Sabouraud Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有葡萄糖、蛋白胨和琼脂。
它还含有抗生素氯霉素，可以抑制细菌的生长。
6. 鲁哥氏碘液（Lugol's Iodine）：这是一种用于检测细菌的染色剂，通常与革兰氏染色法一起使用。
它可以帮助区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有马铃薯提取物和葡萄糖。
它为真菌提供了丰富的碳水化合物和氮源。
8. 三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar）：这是一种用于鉴定肠道杆菌的培养基，含有乳糖、蔗糖和葡萄糖。
通过观察细菌在培养基上的生长情况和产酸情况，可以区分不同的肠道杆菌。
9. 革兰氏染色法（Gram Stain）：这是一种用于区分细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的颜色，可以区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
10. 荧光染色法（Fluorescent Stain）：这是一种用于检测细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的荧光颜色，可以区分不同的细菌种类。
微生物检验技术一、判断题（将判断结果填入括号中，正确的填“√”，错误的填“×”）：1.微生物可分为细菌、放线菌、霉菌和酵母菌四大类。
（×）2.具有荚膜的肺炎双球菌其毒力强。
（√）3.食用前将食品充分加热可以防止一些食物中毒的发生。
（√）4.细菌在不同生长条件下，形态可能有变化。
（√）5.根据细菌所含DNA的不同，可以将细菌分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌两大类。
（×）6.所有细菌仅需20~30分钟即可繁殖一代。
（×）7.菌落是指一群在固体培养基表面繁殖形成肉眼可见的集团。
（×）8.大肠杆菌是食品和饮用水卫生检验的指示菌，（×）9.真菌进化程度高于细菌，所以真菌为多细胞的微生物。
（×）10.在微生物中，只有霉菌才能以菌丝体的形式进行生长。
（×）11.酵母菌是一种多细胞的微生物。
（×）12.霉菌主要是通过产生各种有性孢子进行繁殖的。
（×）13.在固体培养基上生长时，霉菌的菌落较大，比较湿润粘稠，不透明，呈现或紧或松的蜘蛛网状、绒毛状或棉絮状。
（×）14.霉菌往往在干燥的环境中大量生长繁殖，有较强的陆生型。
（×）15.微生物营养物质中氮源的功能是：提供氮素和能量来源。
（×）16.微生物吸收营养物质，单纯扩散是利用浓度差，从浓度低的向浓度高的进行扩散。
（×）17.任何微生物培养基中均需含有碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分等五种营养物质。
（×）18.微生物在生命活动中需要的能量主要是通过生物氧化而获得。
（√）19.微生物的分解代谢就是将复杂的大分子物质降解成小分子的可溶性物质。
（√）20.微生物的酶具有特殊的催化能力。
可以在发酵工艺上利用任何一种酶来进行生产。
（×）21.细菌生长达到稳定期，菌体生长速度等于零，细菌停止生长。
（×）22.不断加温可以增加细菌的生物化学反应速率和细菌的生长速度。
