Waters Empower色谱工作站操作教程(Thermo版)

WatersHPLC System Basic Teaching Material For Empower Software沃特斯高效能液相層析系統－資料處理軟體基礎操作指引美商沃特斯公司-台灣分公司Version Issue Date Author Comments1.0 Aug / 2003 Waters Taiwan Initial VersionContent一、電腦/層析軟體開機/開始操作畫面說明 (3)二、資料處理系統操作介面/畫面說明 (3)三、Project 之建立 (4)四、層析系統(Chromatographic system)之建立 (8)五、使用者(User)之建立 (11)六、實驗開始/ 儀器方法( Instrument Method )之建立 (13)七、數據處理方法( Processing Method )之建立 (16)八、報表列印說明 (24)一、電腦/層析軟體開機/開始操作畫面說明a.打開電腦電源開關，進入作業系統，連續按兩下”EMPOWER LOGING” 圖像。

b.輸入UserName(例如:System)、Password(例如:Manager)，按OK。

c.進入EMPOWER畫面( Pro 或Quick Start介面，可依使用者設定而不同)。

二、資料處理系統操作介面/畫面說明圖像功能描述Run Samples 開始樣品分析。

Browse Project Project 瀏覽、數據處理與列印。

Configure System 層析系統設定。

Process Data 數據處理。

Review Data 數據瀏覽、處理。

Print Data 報表列印。

三、PROJECT 之建立a.打開電腦電源開關，進入作業系統，連續按兩下”EMPOWER LOGING” 圖像。

b.輸入UserName以及Password，按OK。

c.進入EMPOWER Pro畫面，點選”Configure System”。

Waters-Empower软件操作规程一．启动和登录1．以下所述启动系统仪器：A.色谱仪器（直到所有内部校正和诊断程序完成后再启动下一仪器）。

B.连接到Empower系统的外围设备，如打印机。

C.工作站、主PC机、辅PC机或客户机。

2．要启动Empower软件，请选择开始→程序→Empower→Empower登录。

将显示“Empower登录”对话框。

3．输入用户名和密码。

（出厂设置的用户名为system，密码为manager）二．创建色谱系统1．开始创建系统前，应确保：A.每个色谱仪器都连接到busLAC/E卡、8端口串行卡、计算机COM端口或LAC/E采集器。

B.仪器标识有唯一性的仪器地址。

C.仪器已经启动，所有校正和诊断例行程序都已完成。

2．使用新色谱系统向导A.选择管理→创建新系统。

出现“新建色谱系统向导-输入类型”页面。

B.接受缺省设置（新建系统），然后单击下一步。

出现“选额服务器”页面。

C.选择与系统中仪器连接的采集服务器，然后单击下一步。

出现“选择系统”页面。

D.将系统仪器从“可用仪器”目录区移动到“新系统仪器”目录区，构建系统。

单击下一步。

出现“访问控制”页面。

E.此页用于确定用户和用户组对所创建的系统的访问级别。

确定相应的系统反问权，输入信息，然后单击下一步。

出现“选择名称”页面。

F.输入描述性的名称以及有关系统的任意注释。

接受在线缺省设置。

单击完成。

系统创建完毕。

G.将出现一条信息，表示系统已成功在线。

单击确定。

三．创建项目Empower软件对于项目的含义是方法、结果、自定义字段、视图筛选器和原始数据的集合，由用户定义。

如何创建项目：A.选择管理→创建新项目。

出现“新建项目向导-表空间”页面。

B.接受50MB的“表空间”缺省设置。

C.如果需要，可选中全面审计追踪支持复选框，以记录对项目元素所做的所有更改。

选择是否需要对“方法”、“结果”、“样品”和删除信息的更改进行注释。

D.单击下一步。

Waters Alliance高效液相色谱系统操作规程1仪器组成及开机1.1 仪器组成本系统由Waters 2695分离单元，Waters 2996 二极管阵列检测器，WatersEmpower 色谱工作站和打印机组成。

各部件均备有电源插头。

1.2 开机使用时，依次接通2695分离单元、检测器、打印机和计算机的电源。

2 配置2690分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱其机，可容纳120个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的住塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。

2.2 打开电源开关，接通2695分离单元，约20秒，仪器开始自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区显示时，仪器进入待命状态。

2.3 溶剂管理的准备（下述的为操作面板键，为屏幕键）2.3.1 流动相脱气按Menu/Status,进入“Status(1)”屏幕，游标选“Degasser”，按Enter,显示选项屏幕，游标下移选“on”,按Enter。

2.3.2 启动溶剂管理系统2.3.2.1 干启动在“Status(1)”屏幕下，按Direct Function，游标选“Dry Prime”，按Enter，显示“Dry Prime”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如Open A，游标选“Duration”，按数字键输入5分钟，按continue，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并冲满流动相。

2.3.2.2 湿启动在“Status(1)”屏幕下，游标选“composition”中欲使用的流动相，输入100％，按Direct Function，游标选“Wet Prime”，按Enter，显示“Wet Prime”屏幕，输入7.5毫升/分和6分钟，按OK，待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。

2.3.2.3 平衡真空脱气机在“Status(1)”屏幕下，游标选“composition”，输入流动相的组成，按Enter，再用游标选“Degasser”中的“Normal”，按Enter，按DirectFunction，游标选“Wet Prime”，输入0.000毫升/分和10分种，按OK。

Empower色谱工作站的操作一、方法组的概念分析方法的内涵包括以下几个要素：1、仪器方法——》最基本的色谱条件，及仪器硬件各单元的参数―――》2、处理方法——》对数据进行定性定量的处理，包含了各种积分参数（峰宽、斜率阀值、最小峰面积和最小峰高等等）、分析的方式（面积归一法、外标法和内标法等等）、标准品组分及含量表、校正曲线等等。

3、报告方法——》报告输出所采用的格式4、导出方法——》数据导出的方式以上四种方法综合起来才能称作为一个完整的试验分析方法，我们把这4种方法统一为一个组，就称方法组二、项目的概念在Empower工作站里，我们的各种数据是时由我们为了把要做的具有某一特性的试验工作规范性的管理起来，就此为其建立一个相对应的项目进行管理。

在这个项目里包括了和此项试验工作相关的所有方法、参数、数据、结果等等信息，也即有关的方法组、样品组、数据结果、各数据间的关系等等三、Empower色谱工作站的数据采集操作步骤启动Empower －－》输入帐户名（System）和密码（Manager）－－》1、配置系统－－》建立或设置项目、仪器系统察看节点上仪器的连接状况数据的备份（导出）和恢复（导入）2、运行样品选择项目和仪器系统－－》确定－－》选择打开或建立仪器方法和方法组－－》选择仪器方法并检查各单元参数（若重新修改过则要及时保存）－－》监视器或设置将仪器方法传到仪器，察看基线情况3、待基线平直、系统平衡后，即可单击4、随后等到系统空闲后，设定采集的参数——样品名、功能、样品体积、运行时间，最后单击四、Empower 数据处理方法的建立1．样品组→修改（改变）样品Alter Sample →（含）量Amount →组分Components →全部样品All Sample2．输入各标准样组分名、浓度值及单位→确定Enter→保存Save →关闭3．通道Channels →选择最低浓度标准品→查看Review4．处理方法向导Processing Method Wizard5．设置峰宽、阀值（斜率）、积分范围、最小面积和最小峰高等参数选择各组分名（含量和单位不填）、校正类型（即是外标法还是内标法）保存处理方法(建议取名为“▲▲▲处理方法”以便以后调用)→完成→关闭窗口6．通道Channels →选择标准品，再选要分析的样品→处理Processing →使用指定的处理方法：▲▲▲处理方法→清除校正→如何处理：校正并定量→确定7．到此，带有校正曲线的处理方法就建立起来了。

第一部分：仪器准备1. 确保waters超高效液相色谱仪处于正常工作状态，检查仪器是否连接电源，是否有故障指示灯显示。

2. 打开色谱仪软件，检查仪器参数设置是否符合实验要求，包括流速、温度、检测波长等。

3. 准备所需的色谱柱、色谱柱连接器、进样器以及其他实验所需的耗材。

第二部分：样品准备1. 准备实验所需的样品，确保样品已经滤过或者处理过以去除杂质。

2. 根据实验要求，将样品溶解在适当的溶剂中，并进行稀释或者稀释。

第三部分：超高效液相色谱仪操作步骤1. 开始操作前，先进行系统平衡。

具体操作步骤为：将色谱柱连接至色谱柱连接器上，然后连接至色谱仪，用洗脱液平衡色谱柱。

2. 设置色谱仪的操作参数，包括流速、温度、检测波长等。

3. 进行样品进样，具体操作步骤为：将进样器连接至色谱仪，将稀释好的样品注入进样器中，设置好进样量。

4. 开始进行实验，监控色谱图谱的变化，记录实验数据。

5. 实验结束后，对色谱柱和色谱仪进行清洗和维护，确保仪器干净、整洁。

第四部分：数据处理和分析1. 对实验获得的数据进行处理和分析，比对标准曲线，计算样品中所含物质的浓度或者纯度。

2. 对实验结果进行统计分析，进行数据呈现，如绘制色谱图谱、制作数据统计图表等。

3. 通过数据处理和分析，得出实验结论，对实验结果进行解释和讨论。

第五部分：实验安全及注意事项1. 在操作过程中，注意个人安全，避免发生化学品溅泼或者接触有害物质。

2. 操作过程中需严格按照实验要求和操作规程进行，如有疑问请及时向实验指导老师或专业人士请教。

3. 实验结束后，及时清理实验台面和仪器设备，妥善存放试剂和耗材。

通过以上步骤的操作，可以保证在使用waters超高效液相色谱仪进行实验时，能够得到准确、可靠的实验结果，为科研工作和学术研究提供有力支持。

第六部分：精密控制与调试1. 在进行实验操作前，要确保色谱仪的各项参数已经精确调试完毕。

这包括流速、温度、压力、检测波长等参数的精准控制。

仪器方法和方法组
创建一种仪器方法
创建一个方法组
添加仪器方法至方法组
在下一步开始前保持起始条件不变
11
凹线
7-10直线型（默认值）6凸线
2-5即刻达到规定条件1效应
曲线编号
您可从导航栏轻松进入“仪器方法编辑器”。

仪器方法定义如何从色谱系统中采集数据。

如果该系统受Empower控制，则该仪器方法也对如何控制该系统进行定义。

工作区中包含用以表示色谱系统各仪器的图标。

您可用一种仪器方法对系统进行平衡。

您必须使用一个方法组进行数据采集。

数据采集
将要学习如何:
—如何进样检测单个样品
—创建样品组方法
—编辑样品组方法
在运行样品的界面我们可以:
—控制仪器, 改变仪器参数以及保存仪器方法.
—监视基线以及查看实时谱图.
—加载样品(单进样和样品组进样).
—从单进样和样品组进样来采集数据.
用样品组向导建立一个新的样品组.
在开始运行一个样品组以后，可以最小化运行窗口并运行Empower 其他的功能.。

WatersEmpower色谱工作站操作教程（Thermo版）
EMP控制Thermo LC_U300简单操作流程
测试样品Caffeine,A路单通道，纯甲醇流动相，流速1.0，柱温35，UV检测波长273 1.点开仪器编辑向导；设置柱温箱温度，“Temperature”处填写35
2.“Active Columns”保持默认设置
3.“Use Temperature Control”保持默认设置
4.“Gradient Type”选择等度“Isocratic”，流速“Column Flow”填写1.0
5．“Sampler Options”保持默认设置
6.“Acquisition Options”界面勾选“Pump_Pressure”“UV”确认采集通道；“Acquisition Time”填写样品运行采集时间
7.“Pump_Pressure Option”保持默认设置
8.“UV Options”勾选第一行；“AcqOn”“AcqOff”填写样品运行采集时间，与步骤6中一致；“Wavel”填写检测波长；点击“Finish”完成方法创建
9.点击仪器方法编辑器右上角“Check”
10.确认仪器方法编辑成功无错误
11.保存仪器方法
12.选择编辑好的进样盘类型，不同颜色通过“R”“G”“B”来区分
13.编辑进样序列表，“Run Time”填写参数与步骤6和步骤8一致；点击运行样品。

浙江省制药工程重点实验室超高效液相色谱仪安全操作规程一、自检开主机和二极管阵列检测器（PAD），仪器进入自检阶段，自检完成后打开Empower软件。

二、配置系统管理数据（相当于新建文件夹），鼠标右键选新建，设定项目名（设定后将出现在运行样品中）。

三、运行样品在采集数据项目栏中选定项目（即将此次实验数据选择存放位置）→确定左栏可以设置有关样品的信息（样品名，功能，方法组，样品瓶，进样体积，运行时间）右栏出图，左下栏给出仪器信息，最下栏显示仪器状态。

步骤：创建方法组→选择仪器方法（新建→编辑仪器方法，包括主机和选定的检测器的参数的设置→设置好选另存为保存此仪器方法→关闭）此时上述编辑的仪器方法出现在列表中→下一步→出现“缺省方法项”对话框，点下一步→出现“命名方法组”，设置方法名（与刚才的仪器方法名相同）对话框→完成。

返回“运行样品”对话框，选方法组和仪器方法。

选定好仪器方法后即可监视基线，基线稳定后→中断按钮→仪器空闲后→点运行按钮，出现运行样品组对话框，设置好后点运行。

（运行过程中可以点中断按钮，也可在编辑下拉菜单中选“改变正在测试的样品”）→运行完后点文件中的“退出”。

四、数据处理点开“浏览项目”，选定要要浏览的项目，确定后进入的界面中有如下内容：样品组、进样、通道、方法、结果组、结果等。

“通道”里存的是原始的数据，这些数据要经过处理后才能得到“结果”，有结果才能打印报告。

PDA数据处理点“通道”→双击要处理的原始数据（点查看图标）→进入查看主窗口（此时点窗口中的工具栏可以看到等高图或3D图）→提取光谱图，找到最大吸收波长→提取色谱图→点“处理方法向导”图标→新建处理方法→用建立的处理方法处理→点“方法组”图标，选好后点“文件”下的“另存为”→“方法组”，设定即可。

至此选好处理方法。

注意事项：每隔24至48小时制备一次新鲜的水溶性流动相；样品进样前要用0.2µm的滤膜过滤以充分去除颗粒杂质；如果所使用的流动相中含有缓冲盐，用10倍柱体积的95%乙腈水溶液冲洗柱子；1。

1目的规范Waters高效液相色谱仪使用操作。

2适用范围Waters高效液相色谱仪的使用操作。

3责任者质管部QC检验人员。

4内容4.1 系统进入4.1.1 依次开UPS电源、检测器、泵、打印机、电脑主机电源。

4.1.2 电脑进入自检，自检完成后，进入“ Program Ma nager ”窗口。

4.1.3 在“ Program Man ager” 窗口，双击“ Mille nn ium ”图标，进入相应窗口。

4.1.4 在“Millennium ”窗口，双击“ Session Manage” 图标，进入“ Millennium V2.10 ”窗口，进行内存自检。

4.1.5 内存自检完成后，进入“Millennium Login —Version2.10 ”窗口，在“User Name 输入“system”，在“Password”输入“manager”，按“ Login ” 进入“Millinniam Versi on 2.10 —Sessi on Man age—User System” 窗口，双击所选“ Project ”图标，即进入“ Project ”窗口。

4.2 进样4.2.1 在“ Project ”窗口下，按“ Tools ”图标群中“ Quickset ”图标进入“System-open” 窗口，选择“ PCM-410”。

4.2.2 按“OK加以确认，该窗口自动退出，进入自检。

4.2.3 自检完毕，进入“ Quick Set”窗口，按“ Mode'选择“ Quick Start ”进入“ Method Set ”窗口，选择“ Using Exiting Method ”自动进入“ Quick Set Acquisition ”窗口，按“ Set Up Instrument ”，进入仪器安装状态。

4.2.4 安装完毕，按“ Can cel”，退出“ Quick Set Acquisiti on ”窗口，在样品登记表上填写样品名、类别、进样体积、运行时间。

Agilent LC方法设定1.此选项卡中需要设定流速及流动相比例。

2.此选项卡中输入进样体积，一般设定为与样品表中的进样体积相同，如需要洗针勾选enable needle wash，并在Location中选择洗针小瓶的位置。

3.此选项卡中需要设定柱温，在temperature中left中选择带摄氏度的选项，并输入温度，right中选择combined即可。

4.VWD此选项卡在wavelength中设定波长，peakwidth中输入合适的采集率。

DAD检测器中signals输入需要的检测波长其余默认，或根据客户方法选择。

如需采集光谱图spectrum中store选择all，range from中选择波长范围，setp 输入波长每次变化的步进，请他默认即可。