土壤β- 葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(可见分光广度法)使用说明

土壤脂肪酶（S-LPS）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4046规格:50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体6mL×1瓶常温保存试剂三粉剂×1瓶2-8℃保存试剂四液体20mL×1瓶2-8℃保存标准品液体59.3μL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、标准品：临用前加入1.97mL甲苯，即100μmol/mL油酸。

用前注意解冻溶解。

用不完的试剂可以2-8℃保存一个月。

2、工作液的配制：将试剂三临用前加入20mL蒸馏水于沸水浴中溶解，2-8℃保存两周。

冷却至常温后加入5mL试剂二混合，高速震荡2次，每次3min，间隔5min。

可根据该比例现用现配。

产品说明：脂肪酶（LPS）又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。

该酶在土壤生物动力学中具有重要的作用。

LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。

Triglyceride+LPS Fatty Acid+GlycerolFatty Acid+Cu2+Copperoleate(Soap)（蓝色络合物）710nm 注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、震荡混匀器、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、研钵、甲苯（不可快递）、冰和蒸馏水、30-50目筛。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干，过30-50目筛。

二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至710nm，甲苯调零。

2、标准溶液的稀释：取50µL100µmol/mL油酸标准溶液，加入950µL甲苯，充分混匀，配制成5µmol/mL标准溶液待测，现用现配。

土壤纤维素酶（S-CL）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC0150规格：50T/24S产品说明：S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。

本产品采用3.5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

产品内容：试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1mL蒸馏水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。

标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。

自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。

2、加样表和测定步骤：对照管测定管标准管空白管风干土样（g）0.250.25-试剂一(μL)125125-煮沸15min（盖紧）振荡混匀，室温放置15min-第1页，共2页试剂二（μL）250250-试剂三（μL）10001000-蒸馏水（μL）250250-振荡混匀，40℃水浴糖化1h后，煮沸15min（盖紧，防止水分散失）,得糖化液糖化液(μL)5050-标准液(μL)--50蒸馏水(μL)50试剂四(μL)150150150150混匀，沸水浴中煮沸显色15min（盖紧，防止水分散失），冷却蒸馏水（μL）1050105010501050混匀，540nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，样品管计算ΔA=A测定管-A对照管标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值ΔA=A标准管-A空白管。

土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC0270规格：50T/24S产品内容：试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂一，沸水浴搅拌溶解后待用；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用；试剂四：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存；标准品：液体2mL×1支，0.2μmol/mL酪氨酸溶液，4℃保存。

产品说明：土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。

土壤中性蛋白酶在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

中性条件下，土壤中性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。

实验中所需仪器及设备：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL比色皿、蒸馏水、50目筛（或更小）。

样品处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

操作步驟：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。

2、样本测定：第1页，共2页试剂名称测定管对照管标准管空白管风干土样（g）0.10.1--试剂一（μL）100100--试剂二（μL）200----混匀后，37℃反应24h，期间振荡5-6次，使土样与反应液充分接触。

试剂三（μL）200200--试剂二（μL）-200--混匀，10000rpm室温离心10min，取上清液--上清液（μL）220220--标准液（μL）--220-蒸馏水（μL）---220试剂四（μL）650650650650试剂五（μL）130130130130混匀，40℃水浴10min，10000rpm室温离心10min，取上清液于680nm下读取各管吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。

货号：QS2620 规格：50管/24样β-木糖苷酶（β-xylosidase）测定试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。

另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。

测定原理：β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰，测定405nm光吸收增加速率，可计算β-木糖苷酶活性。

自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心20min，取上清待测。

2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

3.液体：直接检测。

β-木糖苷酶活性计算公式：标准曲线：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x为标准品浓度（μmol/mL），y为吸光值ΔA。

1、按蛋白浓度计算酶活定义：45℃，pH7.4时每毫克蛋白1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。

第1页，共2页β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷（V样×Cpr）÷T×1000= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr2、按样本质量计算：酶活定义：45℃，pH7.4时每克样品1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。

β-葡糖苷酶(纤二糖酶)测定方法-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1试验二β-葡萄糖苷酶(BG; EC3.2.1.21)活性测定新鲜土样比色法的原理：以对硝基苯-β-D-吡喃葡糖苷为基质，水解产生对硝基酚，比色测定（硝基酚比色法）。

1.配置溶液：（1）改进的通用缓冲溶液（MUB）贮备液：12.1g三羟甲基氨基甲烷（C4H11NO3即Tris）、11.6g马来酸（C4H4O4）、14g柠檬酸（C6H8O7）和6.3g硼酸（H3BO3）溶于500ml 1mol.L-1 NaOH溶液中，用去离子水稀释至1L，于4℃下贮存。

（2）pH值6.0的MUB缓冲溶液：在继续搅拌下，在200ml MUB贮备液中分别滴加0.1 mol.L-1 HcL或0.1mol.L-1 NaOH至溶液pH值为6.0，去离子水稀释定容至1L（3）4-Nitrophenyl-beta-D-glucopyranoside对硝基酚-β-D-吡喃葡糖苷（PNPG）溶液[C12H15NO8=25mmol.mol-1]：0.377g PNPG溶于40ml MUB溶液（pH为6.0）中，用相同pH值的缓冲液稀释至50ml，于4℃下贮存。

301.25（4）Cacl2溶液（0.5mol.L-1）：取无水Cacl2 55.49g加入1L的容量瓶中配置（5）Tris缓冲液[c（C4H11NO3）=0.1mol.L-1，pH值12.0]：12.2 g三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶于800ml去离子水，用0.5mol.L-1NaOH调节pH至12.0，去离子水稀释至1L（6）标准对硝基苯酚溶液：溶解0.500g 对硝基酚于400ml 双去离子水中，定容到500mL，保存于4度，用时再稀释10倍。

稀释后为100ug.ml-1。

（一般需1000ppm）2.试验过程(1)取1g新鲜土样(<2mm)于100ml三角瓶中，加0.25ml甲苯, 通风橱10min后，4ml pH为6.0的MUB溶液和1mm PNPG溶液，盖上瓶盖，充分混匀，在37℃培养1h。

土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：UPLC-MS-4040规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶（自备）常温保存试剂二液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体18mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂五A粉剂×2瓶2-8℃保存试剂五B液体55mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯。

2、试剂三：悬浊液，使用前摇匀。

3、试剂四为饱和溶液，低温（2-8℃）取出可能会有晶体析出，加热使其溶解即可。

4、试剂五：临用前取1瓶加入25mL试剂五B，充分溶解，现配现用。

用不完的试剂2-8℃可以保存4周。

5、标准液：5mg N-乙酰氨基葡萄糖。

临用前加入1mL试剂二配制成5mg/mL的标准溶液，即5000μg/mL的标准溶液，2-8℃可以保存4周。

产品说明：几丁质来源非常丰富，是自然界中仅次于纤维素的第二大类生物高聚物，由于其分解非常缓慢而大量堆积容易造成环境严重污染。

几丁质酶是影响土壤中氮矿化的一种重要的酶，其分解几丁质控制着氮循环的关键步骤。

几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖与碱共热产生的中间化合物可进一步与对二甲氨基苯甲醛反应产生显色物质，该显色物质在585nm处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。

Chitin Chitinase N-Acetyl Glucosamine OH-Glucose OxazolineGlucose Oxazoline+P-Dimethylaminobenzaldehyde H+585nm 注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

可见分光光度法土壤中性磷酸酶（S-NP）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：UPLC-MS-4050规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体21mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体11mL×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×2支2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入50mL蒸馏水充分溶解，2-8℃保存8周；2、试剂四：临用前取1支加入576μL无水乙醇（自备），24μL蒸馏水充分溶解。

试剂变褐色后不能再使用，2-8℃可保存2周；3、标准品：0.5μmol/mL苯酚标准液。

产品说明：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。

土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-NP活性。

Phenyl Disodium Phosphate S-NP Phenol+Na2HPO4Phenol+2,6-Dibromobenzoquinone Chlorimide Alkaline Conditions Indoxyl(660nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水、乙醇、30~50目筛和甲苯（不允许快递）。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比可以例参考文献）1.新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

货号：QS2612 规格：50管/24样α-葡萄糖苷酶（α-Glucosidase,α-GC）试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖，不仅与细胞壁的松弛或加固有关，而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。

测定原理：α-GC分解对-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。

试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

，第1页，共2页测定管需设一个对照管。

α-GC活力计算：标准条件下测定的回归方程为y =0.00543x -0.0027；x为标准品浓度（nmol/mL），y为吸光值。

货号：QS2935 规格：50管/24样土壤β-葡萄糖苷酶（Solid-β-Glucosidase，S-β-GC）试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：S-β-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

测定原理：S-β-GC 能够催化对-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在 400nm 有特征光吸收。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：甲苯5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）试剂二：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 6mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；试剂三：液体25mL×1 瓶，4℃保存；试剂四：液体50mL×1 瓶，4℃保存；样品处理：新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

混匀，37℃振荡反应 1h 后，立即90℃水浴 5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却充分混匀，室温静置 2min 后，400nm 处蒸馏水调零，测定吸光值 A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。

每个测定管设一个对照管。

第1页，共2页S-β-GC 活力计算：标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0032x -0.0027；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。

单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC 活力（μmol/d /g 土样）＝(ΔA+0.0027) ÷0.0032×V 反总÷W÷T =138.7×(ΔA+0.0027) T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：9.25×10-4 L；W：样本质量，0.05g第2页，共2页。

N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC4290规格:50T/24S产品简介：N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.52，N-acetyl-β-D-glucosidase,NAG）广泛分布于各种组织中，是一种细胞内溶体酶，测定NAG活性可用于肾小管间质性肾炎、尿路感染、糖尿病肾病综合症、高血压肾病、肾移植后的排异反应和肾病综合症的早期诊断NAG分解N-β-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定400nm下吸光度的变化来计算NAG活性。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管。

产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水溶解备用；可-20℃分装保存，避免反复冻融，-20℃可保存2周；试剂三：液体60mL×1瓶，4℃保存；标准品：液体1mL×1支，5μmol/mL的对硝基苯酚溶液，4℃保存。

临用前用蒸馏水将标准品稀释8倍得0.625μmol/mL的标准溶液。

操作步骤：一、粗酶液的提取：1、组织：按照组织质量（g）:提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。

15000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。

2、细菌、真菌：按照细胞数量104个：提取液体积（ml）500~1000:1的比例，建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）然后15000g，4℃，离心10min，取上清置冰上待测。

3、血清（浆）等液体：直接测定。

二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

BC0160 -- 第 1 页，共 3 页土壤β-葡萄糖苷酶（S-β-GC ）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC0160规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体5 mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶-20℃保存试剂三液体40 mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体80 mL×1瓶2-8℃保存标准液液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯；2、试剂二：临用前取1瓶加入10 mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂建议-20℃分装保存4周；3、标准液：5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液；4、标准液的准备：取100 μL 标准液，加入到400 μL 试剂三中，得到1 mmol/L 标准液（即1000 μmol/L ），再用蒸馏水十倍稀释到100 μmol/L 。

产品简介：S-β-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

S-β-GC 能够催化对-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，产物略显黄色，在400nm 有特征光吸收。

P-Nitrophenyl-β-D P-nitrophenol (400nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、30-50目筛、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37 度烘箱风干，过30~50目筛。

二、测定步骤1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至400nm ，蒸馏水调零。

可见分光光度法土壤多酚氧化酶（S-PPO）活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4002规格:50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一粉剂×2瓶2-8℃保存试剂二液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体100mL×1瓶（自备）2-8℃保存标准液液体10mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前取1瓶加入15mL蒸馏水，用不完的试剂2-8℃保存2周；2、试剂三：自备乙醚；3、标准液：重铬酸钾溶液（5mmol/L），相当于0.2mg/mL紫色没食子素溶液。

产品说明：S-PPO主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素，完成土壤芳香族化合物循环，用于土壤环境修复。

S-PPO能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素，后者在430nm有特征光吸收。

Pyrogallol S-PPO Purple gallate(430nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、乙醚（不允许快递）、30~50目筛、0.5mol/L HCl溶液、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

二、测定步骤1、可见分光光度计预热30min以上，调节波长至430nm，试剂三调零。

2、标准液稀释：用0.5mol/L HCl溶液将标准液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0mg/mL。

试验中需标准品1000µL。

β-葡萄糖苷酶试剂盒使用说明分光光度法50管/24样货号：G8830-100产品简介：β-GC（EC3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。

从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。

β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10mL双蒸水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。

试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。

操作步骤：一、样品的前处理：1.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。

15000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

2.加样表试剂名称（μL）对照管测定管试剂一400试剂二500500样本100100迅速混匀，放入37℃准确水浴30min后，立即放入沸水浴中煮沸5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变）试剂一400充分混匀，8000g，4℃，离心5min，取上清液上清液500500试剂三10001000充分混匀，室温静置2min后，用对照管调零，400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。

土壤纤维素酶（Solid—cellulase，S—CL）活性测定试剂盒说明书土壤纤维素酶（Solidcellulase，SCL）活性测定试剂盒说明书微量法100管/48样注意：正式测定前务必取23个预期差别较大的样本做猜测定测定意义：SCL重要来源于土壤微生物，SCL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是重要的碳源营养物质。

测定原理：采用蒽酮比色法测定SCL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

需自备的仪器和用品：酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸（不允许快递）和蒸馏水。

试剂的构成和配制：试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保管；（自备）试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保管；试剂三：液体40mL×1瓶，4℃保管；试剂四：粉剂×1瓶，4℃保管；临用前加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。

样品处理：新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30～50目筛。

加样表和测定步骤：对照管测定管风干土样（g）0.050.05试剂一（μL）5050振荡混匀15min试剂二（μL ）90试剂三（μL ）370370蒸馏水（μL ）1809037℃振荡反应3h后，90℃水浴15min（盖紧，防止水分散失），冷却后8000g 25℃离心10min，取上清，得糖化液糖化液（μL）140140试剂四（μL）260260混匀，90℃水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，测620nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管A对照管。

每个测定管设一个对照管。

SCL活力计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为y = 5.018x 0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。

单位的定义：每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

SCL活力（mg/d/g）＝（ΔA+0.0462）÷5.018×V反总÷W÷T =19.1×（ΔA+0.0462）T：反应时间，3h=1/8d； V反总：反应体系总体积：0.6mL；W：样本质量，0.05g。

土壤淀粉酶（S-AL）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC1920规格：50T/24S产品内容：试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加入5mL蒸馏水，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌或震荡至粉剂溶解。

试剂三：液体65mL×1瓶，4℃保存。

标准品：粉剂×1支。

10mg麦芽糖，4℃保存。

临用前加入1.38mL蒸馏水配制成20μmol/mL的储备液。

产品说明：淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一类酶的总称。

土壤中的淀粉酶主要来自于微生物，是一种重要的酶制剂，广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。

淀粉酶水解淀粉产生还原糖，可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质，在540nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。

需自备的仪器和用品：天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、甲苯。

操作步骤:一、样品处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

二、测定步骤：1.分光光度计预热30min，波长调至540nm。

蒸馏水调零。

2.将20μmol/mL的麦芽糖储备液用蒸馏水稀释为1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL的标准溶液备用。

3.测定步骤：试剂名称测定管对照管标准管空白管土样(g)0.10.1--甲苯（μL）2020--蒸馏水（μL）-200--试剂一（μL）200200--试剂二（μL）200---充分震荡混匀，37℃水浴或37℃恒温箱培养24h，之后--12000rpm，常温离心10min，取上清。

上清液（μL）300300--蒸馏水（μL）---300标准溶液（μL）--300-试剂三（μL）700700700700充分混匀，沸水浴10min，至冰上冷却，于1mL玻璃比色皿中测定540nm处的吸光值，分别记为A对照管、A测定管、A标准管和A空白管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。

土壤β-葡萄糖苷酶测定方法土壤里的β - 葡萄糖苷酶可重要啦，就像土壤里的小工匠呢。

那咋测定它呢？有一种方法是比色法哦。

先得采集土壤样本，这就像去给土壤宝宝做个小体检，要取到有代表性的土样。

把土样拿回来之后呢，要做一些前期处理。

把土样里的杂质去掉一部分，就像给土壤洗个小澡，让它清清爽爽的。

然后要把土壤里的β - 葡萄糖苷酶和特定的底物放在一起反应。

这个底物就像是给酶准备的小点心，酶一看到就会开始工作啦。

在这个反应过程中呢，会产生一些有颜色变化的东西。

这时候就可以用比色计来检测啦，就像看这个反应后的小溶液颜色有多深，颜色越深呢，就说明β - 葡萄糖苷酶的活性可能越高哦。

还有一种荧光法呢。

这个就更有趣啦。

同样要先处理土壤样本，让它处于适合检测的状态。

然后加入特殊的荧光底物。

这个底物可神奇啦，当β - 葡萄糖苷酶和它反应的时候，就会产生荧光信号。

就像在土壤里放了个小信号灯，我们可以用专门的仪器去捕捉这个荧光信号的强弱。

信号强呢，就表示酶的活性比较厉害啦。

不管是比色法还是荧光法呢，在做这些测定的时候呀，都要注意一些小细节。

比如说反应的温度和时间得控制好。

就像烤小蛋糕一样，时间长了或者温度不对了，蛋糕就不好吃啦，检测结果也会不准确呢。

而且在准备试剂的时候，要特别小心，得按照要求来准确配置。

要是试剂配错了，那就像做菜的时候盐放成了糖，整个测定就乱套啦。

另外呢，为了保证测定结果的准确性，最好多做几次平行实验。

这就像是多找几个小伙伴来验证同一件事一样，大家都得出差不多的结果，那这个结果就比较靠谱啦。

土壤β - 葡萄糖苷酶的测定虽然有点小复杂，但是只要按照正确的方法一步一步来，就像走在一条有趣的小路上，总能到达准确测定的目的地呢。

β葡萄糖苷酶(β-glu)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T1.2IU/L –42IU/L使用目的：本试剂盒用于测定土壤样本中β葡萄糖苷酶(β-glu)的活性。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中β葡萄糖苷酶(β-glu)水平。

用纯化的β葡萄糖苷酶(β-glu)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入β葡萄糖苷酶(β-glu)，再与HRP标记的β葡萄糖苷酶(β-glu)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的β葡萄糖苷酶(β-glu)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中β葡萄糖苷酶(β-glu)活性浓度。

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。