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实验一畜、禽病理剖检的技术实验目的与意义：通过观模尸体剖检的全过程，初步掌握规范的畜、禽剖检操作技术和剖检方法，有利于提高综合分析病理变化的能力。
实验原理：观看畜、禽剖检后，可以进一步判断分析病理变化，进行病理诊断。
实验器材：实验教学录像及解剖器械（手术刀、手术剪、镊子、解剖刀、骨剪、锯等）。
实验内容步骤：（一）解剖器械的认识及使用方法（二）尸体剖检尸体剖检前外部检查辨认尸体变化（尸冷、尸僵、尸斑、血液凝固尸体自溶与尸体腐败），营养状态（胖、瘦、严重瘦弱），皮肤及皮下组织状，可视黏膜及天然孔状态。
尸体剖检顺序禽（鸡）的剖检术式：采用背位方式，剖检之前，用消毒水将绒毛浸湿，防止绒毛飞扬扩大传染。
尸体取背卧位，将头部、两肢固定于解剖板。
剪开胸腹部皮肤，打开体腔后，把肝、脾脏、腺胃、肌胃和肠管一起取出。
然后切去胸部肌肉，用骨剪剪去胸骨与肋骨的连接部，去掉胸骨，打开胸腔全部。
再用骨剪剪开喙角，打开口腔，将舌、食管、嗉囊从颈部剥离下来。
再用手术刀柄钝性分离肺脏，将肺、心脏和血管一起采出。
肾脏位于脊椎深凹处，应用钝性剥离方法取出。
鼻腔可用骨剪剪开，轻轻压迫鼻腔内容物。
脑的采出需将关节部皮肤剥离，用骨剪将颅骨、顶骨作环形剪开，将大、小脑采出。
反刍动物（羊）的剖检术式：采用左侧卧位方式，剥皮、切开腹腔之前先把右侧的前肢和后肢卸下来，从荐部向脐部前延切第一切线开腹腔，第二切线沿着肋骨弓向前到软骨，在肋骨与胸骨连接锯断，沿着肋软骨部位切断，再切开横隔膜，暴露了整个胸腔。
注意胸腹腔器官的位置。
在第四胃后部十二指肠的起始部做双结扎，在十二指肠后端和空肠相连的地方也做个双结扎，在结扎之间剪断肠管，找到直肠，做个单结扎，在远端剪断。
进行肠道摘离，胃剥离，剥离肝脏，摘除肾及肾上腺，用环切的办法摘除骨盆腔器官，胸腔器官和气管的器官一并摘除，脑部打开颅腔，把头部在枕寰切断。
然后分别进行器官的检查。
小猪的剖检术式：采用背位体式，背靠下，把四肢与躯干之间的关连系切开，使猪背部稳定靠在解剖台上。
动物取材：一、麻醉：处死前一天下午5点开始禁食不禁水（运动组在最后一次运动结束后24小时取材），于第二天上午8点，称重之后用1%戊巴比妥钠（35mg/kg）腹腔注射。
二、取血：心脏取血，低温离心，3500转/分，10分钟，分离血清，-20度保存，以备检测空腹血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯。
三、取材：1. 心脏：迅速取出心脏，在冰盐水中冲洗干净，滤纸吸去多余水分，记录心脏重量并拍照；1）冰冻切片：垂直于心脏左室长轴中点上下切取厚度为2-3mm左室截面，放入4%多聚甲醛中，固定一夜。
2）电镜：在左心室中部留取小块组织，以2.5%戊二醛固定10分钟；细切为1.0*1.0mm组织，再以2.5%戊二醛固定2小时；1%锇酸固定1小时；乙醇、丙酮梯度脱水；环氧树脂包埋；切片，观察，摄片。
3）其余心脏组织储存于-80度冰箱。
2.肾脏：1）快速取出左右肾，分离肾被膜并称重记录，于右肾上级肾皮质处取材3-5块，细切为1mm*1mm*1mm大小，放入电镜固定液中。
2）其余右肾三等分后装入EP管，存于-80度以备检测肾组织。
3）左肾沿最大冠状面切开，取背侧面放入4%多聚甲醛中固定，备行石蜡切片。
3. 肝脏：打开腹腔，充分暴露肝脏，肉眼观察肝脏颜色及大小，取出整个肝脏称取肝脏湿重。
1）肝脏右叶中部取约1cm的肝组织放入液氮做冰冻切片，进行脂肪染色；再取约1cm肝脏置于4%多聚甲醛中以备制成石蜡切片（将肝脏沿横轴剖开进行包埋）。
2）其余肝组织保存于-80度冰箱待用。
4. 胰腺：1）打开腹腔取出胰腺组织，将整个胰腺2/3切下，去除表面结缔组织放于4%多聚甲醛48小时，然后使用70%乙醇清洗并保存，用于HE染色。
2）其余1/3置于液氮内，保存于-80度冰箱待用。
5. 小肠：1）取肛门至回盲瓣的肠段，测量长度，取距回盲瓣处1cm近端结肠肠管及远端结肠1cm肠管；取盲肠上部空肠回肠，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋。
2）其余结肠组织液氮冷冻，-80度冻存。
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项[取材内容]大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。
[试剂及药品]戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液[器材]备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐[取材动物]大鼠[取材步骤]1. 取材前夜禁食，自由饮水。
2. 小鼠称重，按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。
3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴，另外三个手指抓住大鼠的颈部，使大鼠头部向向下。
这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
右手持注射器，从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入，动作轻柔，缓慢注射。
注射完药物后，缓缓拔出针头，手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩，促进麻醉药物的吸收，掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。
4.将小鼠四肢固定于解剖台上，暴露小鼠整个胸部和腹部，修剪去腹部毛发，75%酒精消毒。
5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突，向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织，暴露腹壁浅肌层。
沿白线钝性分离腹壁肌肉，剪开腹膜，暴露腹腔，将肝脏向上翻起，显露肝门。
6.门静脉血采集：将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉，抽取门静脉血2ml，无创血管夹夹闭门静脉止血。
将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜，4℃离心，3000-3500/min，10分钟，吸出上清液，分装，-80摄氏度保存备用。
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项[取材内容]大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。
[试剂及药品]戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液[器材]备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐[取材动物]大鼠[取材步骤]1. 取材前夜禁食，自由饮水。
2. 小鼠称重，按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。
3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴，另外三个手指抓住大鼠的颈部，使大鼠头部向向下。
这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
右手持注射器，从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入，动作轻柔，缓慢注射。
注射完药物后，缓缓拔出针头，手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩，促进麻醉药物的吸收，掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。
4.将小鼠四肢固定于解剖台上，暴露小鼠整个胸部和腹部，修剪去腹部毛发，75%酒精消毒。
5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突，向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织，暴露腹壁浅肌层。
沿白线钝性分离腹壁肌肉，剪开腹膜，暴露腹腔，将肝脏向上翻起，显露肝门。
6.门静脉血采集：将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉，抽取门静脉血2ml，无创血管夹夹闭门静脉止血。
将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜，4℃离心，3000-3500/min，10分钟，吸出上清液，分装，-80摄氏度保存备用。
第1篇一、实验目的1. 熟悉动物内脏的结构和功能。
2. 掌握动物内脏标本的制作方法。
3. 通过观察动物内脏标本，加深对动物解剖学知识的理解。
二、实验原理动物内脏标本的制作是通过对动物内脏进行解剖、清洗、固定、染色等步骤，使其保持原有的形态和结构，便于观察和研究。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：小白鼠（或其他实验动物）、解剖刀、剪刀、镊子、解剖板、解剖针、生理盐水、福尔马林、酒精、石蜡、切片机、显微镜等。
2. 实验仪器：解剖显微镜、显微镜、投影仪、数码相机等。
四、实验步骤1. 解剖小白鼠：在解剖显微镜下，沿小白鼠腹中线切开皮肤，分离肌肉，暴露内脏器官。
2. 清洗内脏：用生理盐水清洗内脏，去除血液和杂质。
3. 固定内脏：将清洗干净的内脏放入福尔马林溶液中浸泡24小时，使内脏固定。
4. 染色：取出固定的内脏，用苏木精-伊红染色液染色，使内脏结构更加清晰。
5. 切片：将染色后的内脏进行切片，切片厚度为5-10微米。
6. 观察：在显微镜下观察切片，观察内脏器官的形态、结构、功能等。
五、实验结果与分析1. 心脏：心脏由心肌构成，分为四个腔室：左心房、左心室、右心房、右心室。
心脏是血液循环的动力器官，负责将血液泵送到全身各个部位。
2. 肺：肺由肺泡和支气管组成，是呼吸系统的主要器官，负责氧气的吸入和二氧化碳的排出。
3. 肝脏：肝脏是人体最大的实质性器官，具有代谢、解毒、储存、分泌等功能。
4. 胃：胃是消化系统的重要器官，负责储存和消化食物。
5. 肠道：肠道是消化系统的主要器官，负责吸收营养和水分，排出废物。
六、实验讨论1. 通过本次实验，我们了解了动物内脏的结构和功能，加深了对动物解剖学知识的理解。
2. 在实验过程中，我们掌握了动物内脏标本的制作方法，为后续的学习和研究奠定了基础。
3. 实验过程中，需要注意以下几点：- 操作要轻柔，避免内脏器官损伤。
- 清洗内脏时要彻底，去除血液和杂质。
- 固定内脏时要充分，确保内脏保持原有形态。
名称：生物样品的采集及实验动物的解剖和脏器系数测定标准操作规程(SOP)关键词：生物样品的采集实验动物解剖脏器系数测定目的：在药物毒理学研究中，常常需要收集实验动物的血液、尿液或其它体液进行常规检查或生化分析，因此，正确采集实验动物的生物材料是药物毒理学最基本和最重要的操作技术。
对实验动物进行大体解剖检查是药物毒理实验的常规观察项目，简便易行并能提供重要资料。
测定动物死后器官湿重和含水量是常用的指标之一，可以从大体标本大概地估计内脏器官病变的程度，特别适用于某些可致内脏水肿、实质细胞肿胀、间质纤维组织增生或脏器萎缩等药物的研究。
组织匀浆的制备以及在匀浆技术的基础上发展起来的亚细胞结构分离技术，也是药物毒理实验的重要技术之一。
学习和掌握药物毒理学试验中常用的生物材料的采集方法；实验动物的处死方法、大体解剖检查、脏器系数和含水量的测定以及组织匀浆的制备；了解病理切片常规收集样本的部位和方法。
主体内容（一）血液的采集1、大鼠与小鼠的采血方法：①鼠尾采血：当所需血量很少时采用本法。
固定动物并露出鼠尾，将尾部浸入45~50℃温水中数分钟，使尾静脉充血，擦干，再用酒精棉球擦试消毒。
剪掉尾尖（约0.2~0.3cm），拭去第一滴血。
然后用血色素吸管定量吸取尾血，或将尾血直接滴入容器内。
采血完毕用干棉球压迫止血。
亦可不剪尾，用7~8号注射针头连上注射器直接刺破尾静脉采血。
②眼眶静脉丛采血：当需用中等量的血液，而又避免动物死亡时采用本法。
左手拇指及食指紧紧握住大鼠或小鼠颈部，压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血，但用力要恰当，防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦部以45°角刺入，刺入深度小鼠约2～3mm, 大鼠4～5mm。
若遇阻力稍后退调整角度后再刺入，如穿刺适当，血液能自然流入毛细管内。
得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，拔出毛细管，用干棉球压迫止血。
③断头采血：当需用较大量的血液，而又不需继续保存动物生命时采用本法。
动物组织标本制作技术及注意事项动物组织标本制作技术第一章：取材及固定一、动物致死法1、麻醉法第二章可将浸有乙醚或氯仿的棉球连同小动物一起密封于钟罩或有盖玻璃瓶内进行麻醉；也可用4%戊巴比妥作静脉注射，剂量按动物体重1ml/kg；或用20%氨基甲酸乙脂作腹腔注射，剂量一般按动物体重5ml/kg。
2、空气栓塞法如家兔可用50ml注射器将空气由耳静脉推入，使动物很快死亡。
3、击头法如大、小鼠，可用重物击头后部或将其头后部猛撞桌沿，最好一击而死。
4、断头法青蛙、小鼠等小动物，可用剪刀剪去其头部，较大动物如兔子等，可用斧头迅速砍头致死。
5、股动脉放血法动物经吸入乙醚或氯仿稍麻醉后，立即切开股动脉放血。
注意：上述各法，应根据制片需要选用，如空气栓塞法不宜用作血管注射标本的制作；乙醚麻醉对丘脑下神经部分泌物染色标本不利；股动脉放血法有利于肠系膜铺片的制作。
二、取材注意事项1、材料新鲜最好是动物心脏还在跳动时取材，立即投入固定液内，脏器的上皮组织最易变质，应争取在死后半小时内处理完毕。
2、组织块力求小而薄组织块的厚度以不超过5毫米为宜，较理想的厚度为2毫米左右，主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。
3、勿使组织块受挤压切取组织块时刀剪要锋利，不要来回挫动，夹取组织时切勿猛压，取材时组织块可稍大，以便固定后修块。
4、尽量保持组织的原有形态新鲜组织经固定后，或多或少产生收缩现象，为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
5、要熟悉取材部位要能准确的按解剖部位取材，如胰腺，一般取胰岛较多的胰腺尾部；肺应取有细支气管及带有软骨片的小支气管部。
6、动物品种的选择如观察肥大细胞，以大、小鼠皮下组织及肠系膜、大网膜铺片为佳，欲观察运动终板，可用小鼠的肋间肌等。
7、选好组织块的切面熟悉某些器官组织成分安排，然后决定其切面的走向；如一长管状器官以横切面较好。
8、保持材料的清洁组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用生理盐水冲洗，然后再入固定液，但要注意防止组织损伤。
常见脏器组织（47种）取材参考标准一、消化系统：1. 唾液腺：标本类型、肿瘤大小、部位、形状、单发或多发；囊性或实性，有无包膜，边界是否清楚。
唾液腺内及周边淋巴结情况。
取材：肿瘤1～4块或更多，包括肿瘤中心、包膜和肿瘤边缘以及手术切缘。
三级以上医院在取材前，提倡对大体标本照像。
2. 食管癌：切除的食管长度及周径，管壁有无水肿或粘连。
肿大淋巴结的位置及大小、硬度及数目。
沿肿瘤对侧纵行切开，肿瘤的形状及大小、深度、距上下切缘的距离。
取材：肿瘤上、下交界处，上下切缘或断端各取1块，或沿长轴通过肿瘤全径取出大片组织，再分成数段标明取材。
全部淋巴结分别取材。
三级以上医院在取材前，提倡对大体标本照像。
3. 胃溃疡及胃癌：手术类型，大弯及小弯长度，肿大淋巴结的部位、大小、硬度及数目，病变处相应浆膜面有何变化。
一般沿大弯剪开，观察病变大小、深度，边缘及周围变化。
如为癌瘤，何种类型，与上下切缘的距离。
取材：病变及其交界处胃壁全层的胃组织（尽量侧重于小弯，并注意沿长轴切取组织块），上、下切缘组织及肿大淋巴结分别取材（注明组别）。
三级以上医院在取材前，提倡对大体标本照像。
4. 阑尾：长度，最大直径，表面有无充血、出血、穿孔等，一般于近、中、远三段各取1个组织块，远端1块，在靠近尖端沿阑尾的纵轴切开，平行取材，以免遗漏类癌等。
已被剖开者，沿纵轴取组织块。
如检查时不能发现病变所在，须多做断面，仔细寻找病变部位并取组织块。
三级以上医院在取材前，提倡对大体标本照像。
5. 肠梗阻：部分肠管的长度，肠系膜多少及变化，梗阻部位、长度、直径及表面变化（颜色、水肿、充血、出血）；沿病变血管剖开，做多个横断面，观察血管壁是否变厚，寻找栓塞起止部位；肠粘膜有无溃疡。
取材：病变最显著处及肠段的上下切缘各取1块，病变血管各切1块。
三级以上医院在取材前，提倡对大体标本照像。
6. 肠套叠：注意套叠部位及套叠关系，如系回盲部，寻找阑尾；肠壁是否增厚及变硬，以手指放入小肠为引导，沿肠系膜剪开，寻找有无原发病变（在套入部位的最前端寻找有无肿瘤、溃疡等变化）。
掌握动物尸检、脏器标掌握动物尸检、脏器标本采集及检查的方法。
通过对实验动物进行病理解剖观察，分析死亡原因，对实验结果进行判定等。
动物尸检的基本原则是尽可能保持各脏器之间的原有状态，以便对病变部位与其他脏器之间进行正确分析。
【器械】手术刀、剪刀、镊子、纱布、托盘等。
【内容】一、尸体的外部检查尸体的外部检查包括品种、年龄、毛色、营养状态、皮肤、可视粘膜和尸体变化等。
1(营养状态根据肌肉和皮下脂肪的蓄积，被毛的光泽整洁程度来判断。
2(可视粘膜及天然孔的检查检查眼结膜、鼻腔、口腔、肛门和生殖器等粘膜，着重注意有无贫血、淤血、出血、黄疽、溃疡和外伤等。
检查各天然孔的开闭状态、有五分泌物、排泄物及其性状等。
3(皮肤及全身性水肿发生情况的检查注意检查皮肤有无外伤、皮肤病等，皮下(尤其是腹部下)是否有水肿等。
4(尸僵动物死后，尸体发生僵硬的状态称为僵尸。
尸僵通常于死后1.5-6天开始发生，10-20天最明显，24-48天开始缓解。
尸僵从头部开始，然后从颈部、前肢、身躯到后肢逐渐地发生，检查尸僵是否发生，可根据下凳骨的可动性和四肢能否曲伸来判断。
5(尸冷动物死亡，体内产热停止，尸体温度逐渐下降。
温度下降的快慢，与外界环境的温度有密切关系。
尸体的温度降到与周围环境的温度相等，就不再下降。
尸冷是判断动物死亡时间的一个依据。
但是，患某些传染病时，动物死亡后的一段时间内体温可能升高。
例如，患破伤风的动物，死亡后尸温可升高到42?以上。
6(尸腐尸体经一定时间后，由于肠内腐败菌繁殖，发生腐败分解，产生气体，故尸体的腹部膨大，肠管呈强度膨胀，血液带有泡沫，各组织器官，特别是与肠管接触的器官呈污绿色，放出恶臭气体，动物死后应尽早地剖检，以免尸体腐败后影响检查结果。
要防止把死后的腐败变化误认为是生前的病理变化。
二、尸体内脏器官采集技术实验动物剖检，一般取背卧位。
对患有传染病的实验动物通常不剥皮。
一般先切断肩胛骨内侧和髋关节周围肌肉，使四肢摊开(仅以部分皮肤与躯体相连)然后沿腹中线由剑状软骨到肛门切开腹壁，再沿左右最后肋骨切开腹壁到脊柱部。
病理技术讨论：第一篇-取材病理第一步：取材篇做过动物实验的老师们都知道病理实验是这个动物实验中必不可少的一个重要环节，因为我们可以通过病理手段来观察动物用药情况，从而判断实验是否成功，那么对于如此关键的实验，我们实验过程必定要小心避免操作失误，下面我们就来细细说一下取材时需要我们留意的一些注意事项。
①正确切取病变部位，根据部位决定横切或者纵切，确保组织最大面能够暴露出来，如小鼠肾脏一左一右，一个需要横切一个需要纵切；图片来源于纽迈科技宣传图②下刀果断，不可来回磨锯组织，以免造成组织损伤；图片来源于武汉大学第一临床学院宣传图③过硬的组织取下后不可直接进行后续脱水上机处理，应用配制好的脱钙液进行一晚上的脱钙处理，使组织变得较为柔软易切动再进行脱水上机处理，如组织过硬，则无法进行切片，也会损伤切片机和造成不必要的刀片浪费；图片来源于实验搜狐④过小的组织和宫颈绒毛应使用包埋纸包起来，避免组织从包埋盒的缝隙中遗漏；组织较为透明可滴加少量伊红上色，以免包埋时忽略掉该组织；图片来源于百度⑤取材时出现组织卷曲应用镊子小心地压平捋直，确保可包埋到组织最大面。
图片来源于北京大学首钢医院宣传图以上就是取材过程中一些需要注意的地方，如果各位老师还有什么觉得需要补充的可以在下方留言交流，下周将会继续更新病理实验注意事项第二篇—脱水篇，我们不见不散哦！产品介绍1光影细胞致力于打造一款全国产的全自动数字玻片扫描仪2背靠一支实力强大的清华团队。
3拥有S型轨迹面阵扫描技术，扫描速度≤35s。
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END。
