QIAGEN 核酸提取仪
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QIAamp DNA Blood Mini Kit简介:QIAGEN公司出品的QIAamp DNA Blood Mini Kit适用于使用微型离心机或真空处理从全血、血浆、血清、血沉、淋巴细胞以及体液样品中提取总(基因、线粒体和病毒)DNA。
该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本,样品量可达200μl。
整套基因组的操作时间约为20–40分钟,一般可从200μl健康全血中获得4–12 μg DNA,洗脱体积可在50–200μl范围。
抽提原理:样品中的DNA可以特异性结合到QIAamp的硅胶膜上,通过两次洗涤可以将PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白完全去除,最后结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液进行洗脱收集。
开始前的注意事项:1. 所以的离心步骤需要在室温(15-25℃)进行2. 如果样品中含有的基因组当量少于10000,请添加载体DNA(carrier DNA)3. 200μl全血样品可以得到约3-12μgDNA开始前的准备工作:1. 将样品平衡到室温(15-25℃)2. 将水浴或是金属浴加热到56℃,以备第4步使用3. 将Buffer AE或蒸馏水平衡到室温,用于第11步的洗脱4. 确保Buffer AW1、AW2以及QIAGEN蛋白酶已经按照说明配置完毕5. 如果在Buffer AL中出现沉淀物,请在56℃孵育使其溶解操作步骤:以下为整个基因组提取操作的流程图,由于真空装置并非所有的实验室都配置,所以这里介绍的是离心法(流程图左侧)。
以下译介自QIAGEN官方出品的说明部分,黑粗体为实验操作的主体部分。
1. 吸取20μl QIAGEN蛋白酶(或者蛋白酶K)至1.5ml离心管的底部。
2. 加入200μl待提取基因组的样品至离心管中。
可以加入不超过200μl的全血、血浆、血清、血沉棕黄层,或者溶于200μl PBS中不超过5*106的淋巴细胞。
如果样品体积不足200μl,请使用PBS补足。
核酸提取仪工作原理
核酸提取仪的工作原理是通过配备了酶解剂和离心机的自动化设备,将样本中的细胞壁、细胞膜和细胞核等物质破坏并分离出细胞内的核酸分子。
具体步骤如下:
1. 样本制备:将待提取的样本(例如血液、组织等)进行初步处理,去除污染物和非核酸物质,获得纯净的细胞样本。
2. 细胞破坏:将样本中的细胞进行破碎,常见的方法包括冻融破碎、化学溶解、超声波破碎等。
这样可以使细胞壁、细胞膜和核酸相互分离。
3. 蛋白质去除:加入蛋白酶等酶解剂,用于降解和去除样本中的蛋白质。
这样可以使核酸从其他核酸结合蛋白中解离出来。
4. 细胞核分离:离心加速度可使细胞核沉淀到管底,与其他杂质分离开来。
离心过程可以根据不同细胞类型的大小和密度进行调整,以获得较高纯度的核酸。
5. 核酸沉淀:将离心分离后的上清液去除,留下纯化后的核酸沉淀。
加入适量的乙醇或异丙醇等溶剂,使核酸沉淀下来。
6. 核酸洗涤:将核酸沉淀用乙醇或异丙醇溶液进行洗涤,以去除残留的盐、酶和杂质。
7. 核酸溶解:使用适宜的缓冲液溶解核酸沉淀,获得纯净的核酸溶液。
核酸提取仪可以根据提取的核酸种类和实验需求,采用不同的自动化提取方法和试剂盒,但其基本原理大致相同。
通过自动化操作,能够提高提取效率、节省时间,并提供较高的核酸纯度,满足科研、诊断和实验室应用的需求。
核酸纯化提取仪工作原理
嘿,朋友们!今天咱们来聊聊那个神奇的核酸纯化提取仪的工作原理!这玩意儿就像是一个超级魔法师,能把复杂的核酸从各种物质中精准地变出来。
你想啊,就好比我们在一堆乱七八糟的杂物里找一颗特别的宝石。
核酸纯化提取仪就是那个厉害的“寻宝专家”!它先施展魔法,把样本放进去,然后就开始一步步地分离啦!
它用一些特别的方法,比如像一个细心的工匠一样,把样本中的杂质一点点地剔除掉。
这过程就好像是筛沙子,把细沙留下,把大的石子筛出去。
然后呢,通过一系列神奇的操作,核酸就被单独拎出来啦!
咱就说啊,如果没有这个核酸纯化提取仪,那我们要想得到纯净的核酸得多难呀!就好像没有指南针在茫茫大海中航行一样。
它的存在可太重要啦,难道不是吗?
再想想看,医生和科学家们要研究病毒、疾病什么的,没它可不行!没有它提取出准确的核酸,怎么能搞清楚那些神秘的病菌呢?就好比战士上战场没有好武器,那能打赢吗?
总之啊,这核酸纯化提取仪绝对是个了不起的发明!它让我们在探索生命奥秘的道路上越走越远,越走越顺!它就是我们的好帮手,让我们能更清楚地了解这个世界的微小之处。
所以说啊,我们真得好好感谢它呢!
我的观点就是:核酸纯化提取仪是现代科学研究和医疗领域中不可或缺的重要工具,它的作用至关重要!为我们打开了探索生命奥秘的大门!。
核算提取仪北京贝尔生物工程有限公司PCR室一.核酸提取技术随着近年来分子生物学技术的高速发展,核酸扩增,核酸杂交将成为进行病原菌微生物检测,物种鉴定,物种起源、多样性评估及其亲缘关系、系统计划等常用研究手段之一。
这样的分子检测和分子诊断技术在人体健康体检、视频法医等领域中具有至关重要的作用。
而在所有的现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从样品中快速有效的分离提取所需的基因组核酸,并且大规模高质量的提取核酸分子也成为了一个挑战。
自1869年人类首次发现核酸分为脱氧核当核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),核酸的提取方法包括各种实验材料和试剂都一直在进行着改进,柠檬酸钠、RNase、SDS、硫氰酸胍等先后应用于核酸的提取。
现今核酸的提取方法中主要有一些传统的方法比如CTAB法、Trizol法、氯化锂法、以及一些新兴的方法比如旋转离心柱提取法、玻璃粉吸附法、二氧化硅基质法、阴离子交换法、纳米磁珠提取法。
总的来讲,不管采用什么样的方式方法进行核酸的提取以及纯化,主要可以分为以下三步:第一步为利用物理或化学的方式促进细胞破裂,使细胞中的核酸释放出来。
第二步是初步的将核酸与细胞内部的蛋白质、多糖、脂类分离。
新兴的方法比如旋转离心柱提取法是利用特定的载体,将释放的核酸吸附在特定的载体上,这种载体有且仅对于核酸具有较强的亲和力和吸附力。
第三步则是将核酸进行最后的洗脱与富集。
虽然具有相通的原理,对比传统的核酸提取法与新兴的核酸提取法,传统的核酸提取技术中包含的沉淀和离心等操作需要用到大量的生物样本,而且传统提取步骤较为繁杂,费时长,效率低下,很难实现自动化以及规模化,大部分方法涉及到有机试剂的使用,对于操作人员具有潜在的威胁,其应用的范围受到了明显的局限。
因此,随着时间的推移,传统的从液相系统中分离提取核酸的方式逐步的被以固相吸附物载体为基础的新方法所取代。
二、磁珠核酸提取法20世纪90年代,磁珠提取核酸的方法是为了适应现代分子生物学检测实验高通量、高灵敏度、自动化的操作需要所打造的方法。
全自动核酸提取仪技术参数嘿,大家好!今天咱们来聊聊全自动核酸提取仪,这可是个了不起的玩意儿哦!说到核酸提取,可能有的人就开始挠头了,核酸是什么?提取干嘛?别担心,今天我就带你们轻松了解这个神奇的小机器。
全自动核酸提取仪就像厨房里的搅拌机,能把原材料变成你想要的东西。
想象一下,咱们在实验室里,需要从样本中提取DNA或者RNA,传统的方法那可真是麻烦得很,手动操作还得小心翼翼,搞得像是在玩高难度的魔方。
可是,有了这个全自动的小家伙,整个过程简直就像开了挂!它能把繁琐的步骤统统自动化,让科研人员省时省力,心情也跟着好起来。
这仪器的技术参数,别说,还真是让人眼前一亮。
它的提取效率高得惊人,样本处理量大,像流水线一样,一下子就能搞定好多样本。
操作界面友好得很,像是在玩游戏一样,轻轻一点,仪器就乖乖开始工作。
它不仅速度快,而且提取的结果也特别纯净,基本上可以说是高质量的保证。
要知道,在科学研究中,质量可是一条命啊,差一点都不行。
这仪器的体积也挺小巧的,放在实验室里简直不占地方,关键是颜值也不低,简直就是实验室的“高颜值”代表。
它有各种模式可以选择,适应不同的实验需求。
简直是科研工作者的好帮手。
嘿,有时候我都想,它是不是有自己的小情绪,感觉它在帮我们加油,努力工作呢!说到安全性,大家可能会担心这些高科技的东西会不会出错。
放心吧,这个全自动核酸提取仪可是经过多重测试的,稳定性杠杠的。
就像你信任的老朋友一样,虽然长得比较复杂,但绝对不会给你添麻烦。
而且它的清洗和维护也很简单,简直不费吹灰之力。
真心觉得,这机器就像是个勤劳的小蜜蜂,工作再忙也不怕。
当然了,使用全自动核酸提取仪的好处可不仅仅是提取效率高、操作简单。
它还能减少人为操作带来的误差,这在科研领域可是个大大的加分项。
大家都知道,科研就是一个对数据精益求精的过程,哪怕是一点小差错,都可能影响整个实验的结果。
有了这台仪器,简直就像是为科研保驾护航,心里踏实多了。
五种核酸提取仪的比较 Document number:NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
五种核酸自动提取仪的比较
百泰克仪器如何避免样品交叉污染
1、百泰克仪器的设计使每个样本在提取过程中有独立的空间,整个过程中,带有DNA的磁棒只
在规定的6个孔移动,不经过其他样本的上空,所以不会产生滴液污染。
百泰克仪器相对于其他仪器的优势
1、百泰克仪器相对于其他仪器有明显的优势,从上述对比表格中很清楚的得出结论,最明显的优势是我们的仪器不管对于任何样本都可以提取,不会受样本类型的影响,不会产生吸附柱堵住,移液器枪头堵住导致裂解不好等影响,纯度和得率高于对方一筹。
五种核酸自动提取仪的比较
百泰克仪器如何避免样品交叉污染
1、百泰克仪器的设计使每个样本在提取过程中有独立的空间,整个过程中,带有DNA的磁棒只在规定的6个孔移动,不经过其他样本的上空,所以不会
产生滴液污染.
百泰克仪器相对于其他仪器的优势
1、百泰克仪器相对于其他仪器有明显的优势,从上述对比表格中很清楚的得出结论,最明显的优势是我们的仪器不管对于任何样本都可以提取,不会受样本类型的影响,不会产生吸附柱堵住,移液器枪头堵住导致裂解不好等影响,纯度和得率高于对方一筹。
中国医疗核酸检测行业自动化进程及国内外核酸自动提取仪常见品牌浅析国内在核酸检测方面的自动化进程尚且远远落后于美国日本等国,很多医院仍然在进行手动提取检测的模式。
因为大多数核酸检测的目的基因是HBV、HCV、HIV等传染性病毒,这种检测方法大大增加了一线操作人员的感染风险,且工作效率低下,无法完成大量样本的快速检测。
目前国内医疗资源紧张,很多病人都反映在医院看病难,速度慢,等待时间长,价格贵等等。
这和我国医疗机构的自动化进程普遍较低也有关系。
试想,一个熟练的核酸提取及检测人员每次仅能进行20~30个样本的提取检测,每次提取需要1~2个小时,面对数以千记的需要检测的病人,想要完成检验,要么需要很长的时间,要想缩短时间,就要大量增加人手,显然就会增加医疗成本。
要解决这些问题,推动国内医疗检测行业的自动化进程是非常有必要的。
要推进核酸检测类别的自动化进程,就需要引入自动化仪器,目前国内外很多仪器厂商都致力于生产开发改进核酸自动提取仪。
国外主流品牌有以下几个:贝克曼库尔特SPRI-TE作为小型化的自动提取,提供高质量,高效率,可重复的磁珠核酸提取,专门为小实验室设计。
Vidiera NsP则更倾向于血站,CDC,大型医院实验室等大客户。
贝克曼库尔特是提供和QIAGEN签约的extraction reagents,而且提取的核酸可以同LightCycler,* Cobas* Taqman* or 96-well Thermowell Plate等联用去做定量检测的结果。
产品性能:SPRI-TE自动化处理1-10个样品即开即用的试剂UV去除污染Vidiera NsP全自动样品提取96 样本提取需要2.5小时阳性样本追踪预制样本提取和用户定义样本提取雅培雅培m2000系统是由雅培加拿大公司研发成功的,旨在用于医学诊断实验室样品的自动提取,可以和m2000 rt联用。
目前可以应用的检测有RT HIV-1, RT HBV, RT HCV 和RT CT/NG。
核酸提取仪使用方法说明书一、产品简介核酸提取仪是一种专门用于从生物样本中提取DNA或RNA的设备。
其高效且精确的工作原理,使得核酸提取仪被广泛应用于医疗、科研和生物工程等领域。
本说明书将详细介绍核酸提取仪的使用方法,以确保用户能正确、便捷地操作设备。
二、设备准备1. 核酸提取仪主机:核酸提取仪主体,负责样品的加热、混匀等操作。
2. 样品离心管:用于放置待提取的生物样品,确保样品不会外溢。
3. 试剂盒与试剂:核酸提取试剂盒和相关试剂,根据样品种类和提取目的选择合适的试剂。
4. 塑料吸头:用于吸取试剂和转移样品,注意选择适配于核酸提取仪的吸头。
5. 密封膜:用于封闭样品离心管,防止样品的挥发和污染。
三、操作步骤1. 样品处理(1) 预处理样品:根据样品类型,选择适当的方法进行细胞破碎、去除蛋白质等前处理步骤。
(2) 取出样品:使用无菌技术,将经过前处理的样品装入样品离心管。
注意每个样品对应一个独立的管子。
(3) 加入试剂:按照试剂盒说明书中的要求,将相应试剂加入样品离心管中。
避免交叉污染和试剂损失。
(4) 封闭样品离心管:使用密封膜将样品离心管严密封闭,确保样品在提取过程中不会受到污染。
2. 设备操作(1) 打开核酸提取仪主机:按下电源开关,待仪器启动并进入工作状态后,进入下一步操作。
(2) 设置提取参数:根据试剂盒说明书的要求,在主机界面上设置适当的提取参数,如时间、温度等。
(3) 安装样品离心管:将装有样品和试剂的离心管放入核酸提取仪的样品槽中,注意管子的位置和方向。
(4) 启动提取程序:在主机界面上选择相应的提取程序,并点击启动按钮,开始自动提取过程。
3. 结果分析(1) 导出提取结果:核酸提取仪完成后,将提取得到的DNA或RNA导出至指定位置,以备后续实验。
(2) 样品纯度检测:使用分光光度计或荧光定量仪等设备,检测提取得到的核酸样品的纯度和浓度。
(3) 结果解读:根据实验要求和研究目的,对提取结果进行综合分析,在相关研究中广泛应用。
QIAcube技术参数1、主要用途:1)可从动物,植物组织,全血中的白细胞组分及以下法医特殊检材中纯化总DNA(基因组DNA和线粒体DNA):表面和口腔拭子,FTA和Guthrie,体液斑,口香糖,烟蒂,指甲和毛发,纸质材料,小体积血液或唾液,组织,激光显微切割标本,骨头和牙齿,性侵犯样品等;*2)可对性侵犯混合样本进行精子细胞和女性上皮成分全自动化差异洗涤,得到单一男性组分;3)可对STR产物进行净化,达到纯化和浓缩STR产物的目的,进而大幅度提高毛细管电泳步骤中检测的信噪比。
2、工件条件:温度:18-28℃,湿度:15-75%,电压:220-240V。
3、技术指标:1、*基于硅胶膜离心法的全自动样品制备装置。
可实现样品裂解、裂解液转移、离心柱清洗、洗脱液回收等实验步骤的全自动操作,无需人工介入;2、无需专用的自动化试剂盒,只需普通手工试剂盒即可实现自动化;3、*有专门应用于法医领域的体液和血液、法医案件、FTA及Guthrie卡、表面及口腔拭子等检材纯化程序;4、*有专门针对性侵犯混合斑检材的全自动化处理程序,无需手工进行女性成分洗涤去除工作;5、每次可对1-12个样品进行纯化,样品数目可按需设置;6、内置控制系统,无需电脑;7、程序的选择和设置通过触摸屏完成;8、*配备自动裂解模块,具有加热和震荡功能,最高加热温70℃,兼容圆底离心管和锥形底离心管;9、配备自动离心模块,离心机安全盖可自动开合;10、配备自动液体转移机械臂,可使用一次性带滤芯枪头进行液体转移;配备离心柱转移机械臂,可对离心柱进行夹放、旋转、丢弃操作;11、*配备光学感应器和超声液面探测器,能够自动感应检查样品数目、移液枪头数目、移液枪头类型、离心管数目及摆放状态、试剂液面高度等,防止人为摆放错误;12、预装有各种应用的纯化程序,并可通过网络免费下载不断开发的新程序,使用USB接口导入仪器中,并可根据客户要求订制程序;13、带有安全保护门,全封闭运行,防止样品污染及保护人身安全;14、维护简单,内置向导型维护程序,方便用户自行操作。
核酸提取仪的主要步骤及方法
核酸提取仪是一种专门用于从生物样本中提取核酸(DNA或RNA)的设备。
其主要步骤包括以下几个方面:
1. 样本处理:将待提取的生物样本(如血液、组织、细胞等)进行预处理。
具体步骤可能包括细胞裂解、组织破碎、蛋白质酶解等,以释放出核酸。
2. 细胞溶解:将样本中的细胞壁、细胞膜等部位溶解,使得核酸能够释放出来。
3. 蛋白质酶解:加入相应的酶,将样本中的蛋白质降解,使得核酸得以纯化。
4. 脱色:使用酒精或其他溶剂,去除样本中的色素和杂质。
5. 沉淀:向样本中加入盐溶液或酒精,以沉淀核酸。
沉淀后可以通过离心进行分离。
6. 洗涤:对沉淀得到的核酸进行洗涤,去除残留的盐和其他杂质。
7. 重溶:加入合适的缓冲液,将沉淀的核酸进行重溶。
核酸提取仪主要有以下几种方法:
1. 酚/氯仿法:通过酚和氯仿的混合液,将核酸从样本中提取
出来。
这种方法提取的核酸纯度较高,但操作繁琐。
2. 硅基法:通过硅胶膜、硅胶微球等硅基材料,将核酸从样本中吸附出来。
这种方法提取的核酸适用于分子生物学实验。
3. 磁珠法:通过磁性颗粒,将核酸从样本中吸附出来。
这种方法提取的核酸操作简单、快速,并且可以自动化操作。
4. 离心柱法:通过离心柱中的纤维素膜、硅胶膜等,将核酸从样本中进行分离。
这种方法提取的核酸纯度较高,操作相对简单。
以上是核酸提取仪的主要步骤及方法,具体操作应根据不同的提取仪器和实验需求而定。