分子生物学(打印)
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分子生物学题库(含参考答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、电脑显示和打印出的 DNA 碱基序列图谱中不出现的颜色:A、紫B、蓝C、绿D、黄E、红正确答案:A2、点突变引起的血友病 A 的分子诊断方法不包括A、PCR-SSCPB、PCR-RFLPC、PCR-VNTRD、PCR-STRE、长距离 PCR正确答案:E3、巢式 PCR 错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式 PCR 可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和 (或) 量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案:E4、有下列哪项指征者应进行产前诊断A、夫妇之一有致畸因素接触史的B、习惯性流产的孕妇C、夫妇之一有染色体畸变的D、35 岁以上高龄的E、以上都是正确答案:E5、描述随机扩增多态性 DNA 技术不正确的是 ( )A、引物序列随机B、有多条引物C、电泳分离产物D、需要限制性内切酶酶切E、反应基因组多态性正确答案:D6、绝大多数β-地中海贫血系由位于第 11 号染色体上的β-珠蛋白基因中的基因突变所致,下列方法中不能用于分子生物学检验的技术是A、PCR-ASOB、PCR-RDBC、基因芯片D、多重 PCRE、MOEA-PCR正确答案:D7、关于测序策略的叙述正确的是A、应该具有最大重叠、最小数量的测序反应B、最小的目的DNA 片段 (如<1kb) ,可以使用引物步移法C、最小的目的DNA 片段 (如<1kb) ,可以使用随机克隆法D、大片段未知序列DNA 测序,可以直接测序E、大规模基因组计划,可以使用多个测序策略正确答案:E8、在人类基因组中,编码序列占的比例为A、5%B、1.5%C、21%D、3%E、23%正确答案:B9、PCR 反应体系的描述错误的是A、模板B、一条引物C、dNTPD、DNA 聚合酶E、缓冲液正确答案:B10、Tm 值主要取决于核酸分子的A、A-T 含量B、G-C 含量C、A-C 含量D、T-G 含量E、C-T 含量正确答案:B11、结构基因突变不包括A、基因扩增B、基因点突变C、基因表达异常D、基因缺失E、基因重排正确答案:C12、由于突变使编码密码子形成终止密码,此突变为:A、无义突变B、移码突变C、终止密码突变D、同义突变E、错义突变正确答案:A13、关于肺炎支原体的实验室检测,正确的是A、体外培养生长缓慢但阳性率很高B、免疫学方法检测的假阳性率较低C、体外培养在支原体感染的早期诊断上具有重要意义D、利用分子生物学方法可以进行流行病学调查和耐药基因分析E、PCR 技术可检测到极微量的 DNA,但特异性不高正确答案:D14、最早发现与 mtDNA 突变有关的疾病是A、肿瘤B、Leber 遗传性视神经病C、糖尿病D、耳聋E、MELAS 综合征正确答案:B15、关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案:E16、关于SYBR Green Ⅰ 的描述,不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案:D17、转录依赖扩增系统的描述错误的是A、以 RNA 为模板B、首先由靶 RNA 合成 DNA 拷贝C、再由DNA 转录生成大量 RNA 拷贝D、产物为 DNAE、为等温扩增正确答案:D18、目前已知感染人类最小的 DNA 病毒 ( )A、HIVB、HPVC、HBVD、HAVE、HCV正确答案:C19、核酸分子杂交的基础是A、碱基互补配对B、甲基化C、磷酸化D、抗原抗体结合E、配体受体结合正确答案:A20、基因芯片技术在移植配型中有着越来越广泛的应用,也具有其他技术不能比拟的优点,以下不属于基因芯片技术特点的是A、观察判断直观B、自动化程度高C、微缩化D、操作繁琐E、高通量正确答案:D21、关于 NC 膜下列描述不正确的是A、能吸附单链 DNAB、能吸附单链 RNAC、依赖于高盐浓度结合靶分子D、对小分子 DNA 片段 (<200bp) 结合力强E、易脆正确答案:D22、线粒体糖尿病属于A、新发现的第 5 种糖尿病B、特殊类型糖尿病C、妊娠期糖尿病D、1 型糖尿病E、2 型糖尿病正确答案:B23、一般来说核酸杂交的温度低于其 Tm 值多少度A、15~25℃B、40~50℃C、5~10℃D、10~15℃E、30~40℃正确答案:A24、K-ras 基因最常见的激活方式是A、染色体重排B、插入突变C、点突变D、缺失突变E、基因扩增正确答案:C25、检测目标是 RNA 的技术是:A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案:C26、以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案:B27、关于 HPV 各亚型遗传物质的描述正确的是A、有的是脱氧核糖核酸,有的是核糖核酸B、都是核糖核酸C、同时存在脱氧核糖核酸和核糖核酸D、都是脱氧核糖核酸E、脱氧核糖核酸与核糖核酸可交替互换正确答案:D28、PCR 技术扩增 DNA,不需要的条件是 ( )A、目的基因B、引物C、四种脱氧核苷酸D、DNA 聚合酶E、mRNA正确答案:E29、延伸的温度通常为A、55℃B、95℃C、25℃D、37℃E、72℃正确答案:E30、下列密码子中,终止密码子是 ( )A、UUAB、UGAC、UGUD、UAUE、UGG正确答案:B31、影响DNA 分离纯化效果的是A、材料新鲜,低温保存B、加核酸酶抑制剂C、剧烈震荡D、除净蛋白质E、除净多糖正确答案:C32、丙型肝炎病毒基因组高变区位于A、E1 区B、C 区C、NS3 区D、NS4 区E、NS1/E2 区正确答案:E33、为封闭非特异性杂交位点,可在预杂交液中加入A、ssDNAB、1 ×SSCC、10×SSCD、5×TBECE、50×TAE正确答案:A34、导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、沙眼衣原体B、鼠衣原体C、豚鼠衣原体D、鹦鹉热衣原体E、肺炎衣原体正确答案:A35、DNA 自动化测序技术中,不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案:B36、决定 PCR 反应特异性和PCR 长度的物质是( )A、引物B、模板C、dNTPD、Mg2+E、DMSO正确答案:A37、下列不是影响DNA 复性因素的是A、DNA 浓度B、DNA 的分子量C、温度D、碱基组成E、DNA 的来源正确答案:E38、下列不是目前用于 O157:H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案:E39、下列叙述哪项是错误的( )A、原核生物基因组具有操纵子结构B、原核生物结构基因是断裂基因C、原核生物基因组中含有插入序列D、原核生物基因组中含有重复序列E、原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNA 正确答案:B40、指导合成蛋白质的结构基因大多数为:A、中度重复序列B、散在核原件C、单拷贝序列D、高度重复序列E、回文序列正确答案:C41、双链 DNA 的 Tm 值主要与下列哪项有关 ( )A、A-T 含量B、G-T 含量C、A-G 含量D、T-G 含量E、C-G 含量正确答案:E42、第三代测序技术测定人全基因组的目标:A、30 分钟的测序时间及 5 万美元的测序价格B、3 小时的测序时间及 5 千美元的测序价格C、3 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格D、3 小时的测序时间及 5 万美元的测序价格E、30 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格正确答案:C43、阳性质控品失控的原因不包括A、提取的核酸残留有抑制物B、扩增仪孔间温度不一致C、Taq 酶失活D、扩增产物污染E、核酸提取试剂失效正确答案:D44、关于 DNA 芯片描述不正确的是A、探针为已知序列B、有序地高密度地固定于支持物上C、理论基础是核酸杂交D、可研究基因序列E、不能研究基因功能正确答案:E45、下列关于 real-time PCR 引物设计的原则中,不正确的是A、两条引物的Tm 值相差尽量大B、G+C 的含量应在 45%~55%之间C、尽量避免引物二聚体的出现D、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L 之间E、引物过长可能提高退火温度正确答案:A46、Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案:A47、变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案:E48、纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8,可使比值升高的是:A、蛋白质B、酚C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案:C49、人类可遗传的变异中最简单、最常见的一种是 ( )A、RFLPB、VNTRC、STRD、SNPE、CNV正确答案:D50、关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案:B51、判断 HBV 复制及传染性的直接指标是检测A、HBV DNA 多聚酶活力B、HBsAgC、HBV DNAD、HBeAgE、HBcAg正确答案:C52、病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA 和蛋白质C、DNA 或 RNAD、RNA 和 DNAE、DNA 和蛋白质正确答案:C53、单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、携带者诊断B、产前诊断C、症状前诊断D、耐药基因检测E、携带者筛查正确答案:B54、mtDNA 突变不会导致A、综合征型耳聋B、非综合征型耳聋C、神经性耳聋D、药物性耳聋E、氨基糖苷类抗生素耳毒性正确答案:C55、关于真菌,以下描述正确的是A、真菌种类繁多,其中大多数对人类有害B、浅部真菌感染对治疗有顽固性,对机体的影响相对较小C、近年真菌病的发病率有明显下降趋势D、病原性真菌根据其入侵组织部位深浅的不同分为浅部真菌和内部真菌E、真菌感染对人体的危害不大正确答案:B56、利用DNA 芯片检测基因的表达情况,杂交条件应选( )A、高盐浓度、低温和长时间B、低盐浓度、低温和长时间C、高盐浓度、高温和长时间D、高盐浓度、低温和短时间E、高盐浓度、高温和短时间正确答案:A57、下列叙述不正确的是A、F 质粒的主要特征是带有耐药性基因B、R 质粒又称抗药性质粒C、Col质粒可产生大肠杆菌素D、F 质粒是一种游离基因E、F 和ColE1 质粒可以在同一菌株内稳定共存正确答案:A58、有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域,通常不被转录D、形式为 (CA) n/ (TG) n、 (AG) n、 (CAG) n 等E、又称为可变数目串联重复序列 (VNTR)正确答案:D59、以 SDA 技术检测结核杆菌时扩增靶点是A、SDAB、IS6110 和 18SrRNAC、IS6110 和 5SrRNAD、IS6110 和 16SrRNAE、IS6110 和 15SrRNA正确答案:D60、下列不属于血友病 B 间接诊断方法的是A、PCR-RFLPB、PCR-SSCPC、双脱氧指纹图谱D、毛细管电泳E、变性高效液相色谱正确答案:D61、关于支原体的描述错误的是A、支原体是一类在无生命培养基中能独立生长繁殖的最小原核细胞微生物B、支原体有一个环状双链 DNAC、以二分裂方式进行繁殖D、其分裂与 DNA 复制同步E、解脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体均可引起泌尿生殖道感染正确答案:D62、关于 PCR 反应引物的描述,不正确的是A、引物的长度在 20~30bpB、引物自身或引物之间不应存在互补序列,防止产生二聚体和发夹结构C、引物中 G+C 的含量占 45%~55%D、引物的3’端可以带有生物素、荧光或酶切位点等作为标记E、两条引物的Tm 值应该尽量相近正确答案:D63、关于逆转录 PCR 的描述,不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外,还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案:E64、以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是 ( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基正确答案:A65、逆转录 PCR 扩增最终产物的特异性由A、随机引物决定B、oligo-d (T) 决定C、PCR 扩增的特异引物决定D、扩增效率决定E、逆转录酶决定正确答案:C66、有关 SNP 位点的描述,不正确的是A、生物芯片技术可提高 SNP 位点的检测准确性B、单个 SNP 位点信息量大,具广泛的应用前景C、在整个基因组中大概有 300 万个 SNP 位点D、被称为第三代 DNA 遗传标志E、SNP 位点是单个核苷酸的变异正确答案:A67、下列不属于单基因遗传病产前诊断常用方法的是A、巢式 PCRB、全基因组扩增C、多重 PCRD、Western blotE、PCR-SSCP正确答案:D68、Sanger 双脱氧链终止法使用的链终止物是A、α-35S-dNTPB、dNTPC、ddNTPD、α-32P-dNTPE、NTP正确答案:C69、标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、杂交B、复性C、变性D、复杂性E、探针正确答案:E70、关于 mtDNA 复制特点的描述正确的是A、线粒体密码子与核基因密码子相同B、mtDNA 以 D-环复制为主要模式,与核 DNA 复制同步C、mtDNA 两条链的复制是同步的D、mtDNA 为自主性复制,不受核内基因控制E、参与 mtDNA 复制所需的酶、调控因子等由核 DNA 编码正确答案:E71、Northern 印迹杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、检测靶分子是 RNAD、用于基因定位分析E、用于阳性菌落的筛选正确答案:C72、线粒体基因组与核基因组之间,下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录,之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍,影响细胞呼吸、氧化功能,进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制,但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立,但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ,相互影响,相互协调正确答案:A73、基因芯片技术的优点不包括A、高通量B、操作简单C、芯片检测稳定性高D、观察结果直观E、微缩化正确答案:C74、基因多态性连锁分析中,第一、二、三代遗传标记分别是A、RFLP、SSCP、STRB、RFLP、SNP、STRC、RFLP、STR、SNPD、VNTR、SSCP、SNPE、VNTR、STR、RFLP正确答案:C75、PCR 反应必需的成分是A、BSAB、DTTC、Tween20D、明胶E、Mg2+正确答案:E76、SYBR Green Ⅰ技术常要求扩增片段不大于A、50bpB、100bpC、200bpD、300bpE、400bp正确答案:D77、任意引物 PCR 的特点描述错误的是A、需预知靶基因的核苷酸序列B、通过随机引物与模板序列随机互补C、扩增后可直接得到靶基因的多态性指纹图谱D、可用于基因组 DNA 图谱构建E、可用于临床致病菌的流行病学检测、分型正确答案:A78、下列说法错误的是A、用于 RNA 检测的样本短期可保存在-20℃B、用于 PCR 检测的样本可用肝素作为抗凝剂C、如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D、外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E、用于核酸提取的痰液标本应加入 1mol/L NaOH 初步处理正确答案:B79、以下哪种酶可用于 PCR 反应 ( )A、KlenowB、HindⅢC、Taq DNA 聚合酶D、RNaseE、Dnase正确答案:C80、相对于第一代测序技术,新一代测序技术不具有的优点:A、模板不需要克隆B、高通量C、并行D、较长的测序读长E、一次运行可产生海量的高质量数据正确答案:D81、下列几种 DNA 分子的碱基组成比例,哪一种的Tm 值最高 ( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案:A82、某基因位点正常时表达为精氨酸,突变后为组氨酸,这种突变方式为:A、同义突变B、移码突变C、错义突变D、无义突变E、动态突变正确答案:C83、聚合酶链式反应是一种A、体外特异转录 RNA 的过程B、体外翻译蛋白质的过程C、体外特异转录 DNA 的过程D、体外特异复制 DNA 的过程E、体内特异复制 DNA 的过程正确答案:C84、最能直接反映生命现象的是:A、蛋白质组B、基因组C、mRNA 水平D、糖类E、脂类正确答案:A85、下列哪种病毒在复制过程中可产生 RNA-DNA 杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案:A86、丙型肝炎病毒的核酸类型 ( )A、双链 RNAB、单链正链 RNAC、双链环状 DNAD、单链 DNAE、单链负链 RNA正确答案:B87、关于 p53 基因说法不正确的是A、属于抑癌基因B、在进化过程中高度保守C、编码蛋白为转录因子p53 蛋白,与调控细胞生长周期、调节细胞转化、DNA 复制及诱导细胞凋亡有关D、可单独作为乳腺癌预后的分子标志E、定位于人染色体 17q13 上正确答案:E88、不能作为 PCR 模板的是A、DNAB、RNAC、质粒 DNAD、蛋白质E、cDNA正确答案:D89、关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH 只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH 的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案:A90、检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案:D91、单细胞基因扩增一般采用下列何种技术增加检测的敏感性和特异性A、巢式 PCRB、多重 PCRC、PCR-RFLPD、等位基因特异性 PCRE、PCR-SSCP正确答案:A92、构成完整的病毒颗粒的成分是A、糖蛋白B、蛋白质与核酸C、核酸D、结构蛋白E、蛋白质正确答案:B93、TaqMan 探针技术要求扩增片段应在A、250~300bpB、50~150bpC、150~200bpD、200~250bpE、300~350bp正确答案:B94、产前诊断临床应用尚不广泛,原因不包括A、单个细胞的遗传诊断困难B、诊断的准确性受到多种制约C、需要生殖医学与遗传学技术的结合D、已明确母亲为携带者的婴儿E、诊断技术不成熟正确答案:E95、关于 TaqMan 探针技术的描述,不正确的是A、R 基团与Q 基团相距较远,淬灭不彻底,本底较高B、易受到Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析,减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案:C96、下面关于线粒体的描述不正确的是A、是真核细胞重要的细胞器B、线粒体的主要功能是氧化产能C、是细胞的能量工厂D、半寿期是 10 天左右,其数量和体积保存不变E、线粒体中存在基因,线粒体基因突变会导致疾病的发生正确答案:D97、关于特定突变位点探针的设计说法正确的是A、长度为 N 个碱基的突变区需要 2N 个探针B、检测变化点应该位于探针的中心C、检测变化点应该位于探针的两端D、探针设计时不需要知道待测样品中靶基因的精确细节E、采用等长移位设计法正确答案:B98、在人类基因组 DNA 序列中,DNA 甲基化主要发生在A、腺嘌呤的 N-6 位B、胞嘧啶的 N-4 位C、鸟嘌呤的 N-7 位D、胞嘧啶的 C-5 位E、鸟嘌呤的 C-5 位正确答案:D99、质粒的主要成分是A、多糖B、蛋白质C、氨基酸衍生物D、DNA 分子E、脂类正确答案:D100、HIV 最易发生变异的部位是A、核衣壳蛋白B、刺突蛋白C、逆转录酶D、包膜蛋白E、内膜蛋白正确答案:B。
1.医学分子生物学:应用分子生物学的技术和手段,结合现代医学技术,从分子水平研究人体正常状态和疾病状态下生命活动及其规律2.基因(gene) 是一段携带功能产物〔多肽,蛋白质,tRNA和rRNA和某些小分子RNA〕信息的DNA片段,是控制某种性状的的遗传单位。
3.密码子偏爱〔codon bias 〕:指在不同物种的基因中经常为某种氨基酸编码的只是其中的一个密码子。
4.基因的剪接位点〔splice sites〕:一般有特定的序列特征,计算机程序利用这种序列特征可预测将近50%的外显子及20%的完整基因。
5.C值佯谬〔C value paradox〕:生物体的进化程度与基因组大小之间不完全成比例的现象。
N值佯谬〔N value paradox〕:基因组中基因数目与生物进化程度或复杂程度的不对称性6.基因组〔genome〕:是指一个细胞或生物体的一套完整的单倍体遗传物质.〔〕7.基因家族(genefamily):指核苷酸序列或编码产物的构造具有一定同源性的一些基因。
〔04〕8.基因超家族〔gene superfamily〕:构造上具有一定的相似性,但功能不一定相似,且进化上的亲缘关系较远。
如免疫球蛋白基因超家族、丝氨酸蛋白酶基因超家族等〔05〕9.基因组学(genomics):开展和应用基因作图、DNA测序、基因定位等新技术以及计算机程序,分析生命体〔包括人类〕全部基因组构造及功能10.微卫星DNA〔microsatellite DNA〕:或称简短串连重复,由2~6个核苷酸的重复顺序组成,如(CA)n、(GA)n、(TA)n,n为15~30具有多态性,卫星长度常小于100bp,大量分布每条染色体11.小卫星DNA〔minisatellite DNA〕:由6~12个核酸的重复顺序组成,位于染色体端粒及其附近,长度数十~数千bp12.大卫星DNA〔macrosatellite DNA〕:即经典的卫星DNA,由数十个核苷酸的重复单位构成,主要存在于异染色区和着丝粒。
Cht2 基因、基因组和基因组学1.基因gene:是指携带有遗传信息的DNA或RNA序列,也成为遗传因子,是控制性状的基本遗传单位。
2.基因组genome:是指一个细胞内的全部遗传信息。
基因组DNA中包括编码序列和大量非编码序列。
3.基因组学genomics:是一门对生命有机体全基因组进行序列分析和功能研究的新兴学科。
4.基因的几种特殊形式:跳跃基因;重复基因;断裂基因;重叠基因。
5.跳跃基因jumping gene:可在DNA分子间进行转移的DNA片段,也成为转座远见。
6.重复基因:指在同一基因组中存在2个或者2个以上拷贝的基因,一般来源于基因组内的不等交换,反转录插入及大规模的染色体重复。
7.断裂基因split gene:指基因的编码序列在DNA分子上是不连续排列的,而是被不编码的序列所隔开。
8.重叠基因overlapping gene:是指两个或者两个以上的基因共有一段DNA序列,也即同一DNA序列可以得到不同的mRNA,从而编码多种具有部分重叠序列的蛋白质的基因。
9.基因重叠的方式:一个基因完全在另一个基因里面;几个基因部分重叠;两个基因之间只有一个碱基重叠。
10.假基因pseudogene:是指与某些有功能的基因结构相似,但不能表达有功能的基因产物的某些基因。
假基因与有功能基因同源,原来可能有功能,但由于缺失、倒位突变,使这一基因区失活,成为无功能的基因。
11.多基因家族multigene family:是指由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因。
12.反向重复序列:是指两个相同顺序的互补拷贝在同一DNA链上的反向排列。
13.多顺反子mRNA(polycistronie mRNA):病毒基因组DNA序列中功能相关的蛋白质的基因或rRNA的基因往往从集在基因组的一个或几个特定的部位,形成一个功能单位或转录单元,它们可被一起转录成多个mRNA分子。
14.C值:一个生物体单倍体基因组DNA的总量。
一. 名词解释1. C值及C值反常反应:所谓C值,通常是指一种生物单倍体基因组DNAの总量。
真核细胞基因の最大特点是它含有大量の重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质の非功能DNA所隔开,这就是C值反常现象。
2. 半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开分为两股单链,各自为模板按碱基互补规律,合成与模板互补の子链。
子代细胞のDNA,一股从亲本完全接受过来,另一股则完全从新合成。
两个子细胞のDNA碱基序列一致。
3. 复制叉:复制中のDNA分子,末复制の部分是秦代双螺旋,而复制好の部分是分开の,由两个子代双螺旋组成,复制正在进行の部分呈丫状叫做复制叉。
4. 冈崎片段:在DNA复制过程中,后滞链の合成先按5’-3’合成若干不连续の小片段,然后再连接成完整の链。
这些小片段最早由冈崎发现。
5. 单链DNA结合蛋白:结合单链DNAの蛋白,在复制中维持模板处于单链状态并保护单链完整。
6. 半不连续复制:前导链连续复制而随从链不连续复制,就是复制の半不连续性。
7. 引发体:复制の起始含有解螺旋酶.DNA C蛋白.引物酶和DNA复制起始区域の复合结构称为引发体。
8. DNA损伤:在复制过程中发生のDNA突变体称为DNA损伤。
9. AP位点:能识别受损核酸位点の糖苷水解酶,它能特异性切除受损核苷酸上のN-B 糖苷键,在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶の位点,统称为AP位点。
10. 转座子:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移の基本单位。
11. 端粒酶:在真核生物复制终止后,催化染色体端粒延伸の酶。
由端粒酶RNA端粒酶协同蛋白,端粒酶逆转录酶等几部分组成。
12. 基因突变:基因结构改变而引起の遗传信息の改变,从分子水平上来看,突变就是DNA碱基序列の改变。
13. 错义突变:由于碱基对の取代,使原来可以翻译某种氨基酸の密码子变成了另外一种氨基酸密码子の突变。
14. 无义突变:在蛋白质の结构基因中,一个核苷酸の改变可能使代表某个氨基酸の密码子变成终止密码子,使蛋白质合成提前终止,合成无功能の或无意义の多肽,这种突变称为无义突变。
分子生物学综合大实验实验报告外源基因SOC1的扩增和重组载体的构建与筛选班级姓名学号实验目的通过PCR技术克隆外援基因SOC1的目的片段。
通过质粒提取,酶切和连接技术,把SOC1基因重组进TA克隆载体并完成筛选。
实验用品材料:植物叶片,TA克隆载体试剂:DNA提取液(1L)TE缓冲液;琼脂糖;核酸染料;;DNAmarker;6×上样缓冲液(0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、30%甘油)、DNA聚合酶、dNTP、上下游引物器材:研钵,恒温水浴,离心机,离心管,PCR仪、生化培养箱、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统,去离子水、超净工作台,低温台式离心机,分光光度计,水浴锅,高压灭菌锅,酒精灯等。
实验原理通过配制DNA提取液,利用研磨法获得DNA模板,然后采用PCR技术扩增基SOC1基因获得目的片段,然后通过酶切和连接方法把SOC1基因连接到TA载体上。
大肠杆菌感受态细胞中加入质粒,则质粒DNA与Ca2+形成的复合物粘附于细胞表面,经过42℃短暂的热激处理后,DNA与Ca2+形成的复合物进入大肠杆菌细胞,在不含抗生素的培养基中短暂培养,使转入大肠杆菌质粒上的抗生素抗性基因表达,在含相应抗生素的选择培养基上可将转化菌(含质粒)与未转化细菌分开,转化细菌经过不断分裂增殖形成菌落,而未转化的细菌则不能。
并通过氨苄抗性筛选获得重组子实验方法步骤1、植物基因组DNA的小量提取(1)剪取新鲜幼嫩的植物叶片1~2片于1.5 mL离心管中.(2)先加入少量的DNA提取液100 μL,用研磨棒充分研磨尽量避免提取液溅出。
(3)再加入600 μL的DNA提取液,使DNA提取液的总体积为700 μL,上下颠倒混合均匀。
(4)放入高速离心机4 ℃条件下12 000 rpm离心15 min。
(5)取上层水相,移入标有相应序号的新的离心管中,加入600 μL的异丙醇(与加入DNA 提取液的总体积相同),上下颠倒混匀。
细胞分子生物学研究一、细胞与分子生物学基础细胞是生命的基本单位,是构成生物体系的最基础结构,也是生命活动的基本场所。
分子生物学是研究生物大分子结构、功能及其相互作用的学科,是研究生命活动的基础。
细胞与分子生物学互相依存,相辅相成,对于研究各种生物现象都有着至关重要的意义。
1、细胞结构与功能细胞由细胞膜、细胞质、细胞核组成,内含多种细胞器,如线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等。
细胞膜是维持细胞结构和细胞内外环境稳定的重要组成部分,负责物质的运输和信号传导。
细胞质包括细胞内所有物质,进行各种代谢反应,提供能量和基础物质。
细胞核储存着遗传信息,指导细胞分裂、重建和调节。
2、生物大分子结构与功能生物大分子是指生物体系中的高分子有机物,包括蛋白质、核酸、多糖、脂质等。
蛋白质是生物体系中最重要的生物大分子之一,是构成生物体系中所有功能分子的基础,具有最广泛的功能。
核酸是构成生物体系中基因遗传物质的基础,以DNA和RNA为主要代表,负责储存、传递和表达遗传信息。
二、细胞分子生物学实验技术细胞分子生物学是基于细胞与分子生物学的研究,需要掌握各种先进实验技术进行图像分析、功能分析和定量分析。
1、PCR技术PCR技术是一种基于DNA的重复扩增的技术,能够从样品中扩增出一个特定的DNA片段,是研究遗传改变、定位基因、DNA 指纹鉴定等方面必须掌握的核心技术。
2、蛋白质分析技术蛋白质分析技术是研究蛋白质结构、功能、表达等方面的一系列技术,包括蛋白质电泳、蛋白质质谱学等。
3、细胞培养技术细胞培养技术是研究细胞生物学的基本技术,相应的培养条件、培养基的选择、细胞培养操作等都是影响实验结果的重要因素。
三、细胞分子生物学研究进展近年来,随着技术的不断发展,细胞分子生物学研究蓬勃发展,涌现出大量的前沿研究成果。
1、基因组学与遗传学随着基因测序技术的不断提高,基因组学和遗传学研究得到迅速发展,为遗传病的诊断和治疗提供了重要的理论基础。
分子生物学名词解释题1. DNA超螺旋结构:DNA本身的卷曲,一般是DNA双螺旋的弯曲、欠旋(负超螺旋)或过旋(正超螺旋)的结果。
2. DNA Cloning:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝。
3. Operon:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA 为多顺反子。
4. 内含子(intron):一段DNA片段,它能够被转录但通过将其连段的序列(外显子)剪接在一起而被去除出转录物。
5. 冈崎片段(Okazaki fragment):在非连续复制中产生的1000—2000bp短片段,随后被剪接成完整的共价链。
6.Domains and motifs :在蛋白质三级结构内的独立折叠单元。
结构域通常都是几个超二级结构单元的组合;在蛋白质中,特别是球蛋白中,经常可以看到由若干相邻的二组合体。
7. Alternative splicing(可变剪接):依靠使用剪接接合点的改变,从单一RNA转录物中得到不同的剪接本。
8.Reporter genes(报告基因):是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因。
9. The PCR cycle :10.Restriction mapping :DNA上能够被很多不同限制酶切割的位点的线性排列。
11.Multiple cloning sites :12.DNA libraries :13.Proteomics:14.Replicon :基因中DNA复制的单位,包括复制原点。
15. semi-conservative replication:通过亲本双螺旋DNA的两链分开,将每一链作为模板合成新的互补链的复制方式。
16 gene knock-out17 molecular hybridization:18restriction fragment length polymorphism(限性片段长度多态性):指限制性内切核酸酶所能识别的位点上的遗传差异,这些差别引起相关限制性内切核酸酶切割产生不同长度片段。
名词解释操纵子:是原核生物基因的一个基本转录单位,由编码序列及上游的调控序列组成。
编码序列通常包括几个功能相关的结构基因,调控序列有启动序列(启动子)、操纵序列(操纵基因)及其他调节序列构成。
顺式作用元件:是真核基因变大调控转录过程的特殊DNA序列,于转录因子结合而起作用,通常包括启动子、增强子、沉默子等。
反式作用元件:与其他基因的顺式作用元件结合,调节基因转录活性的蛋白质因子,根据功能不同分为基因转录因子和特异性转录因子。
启动子:位于结构基因上游、与RNA聚合酶识别、结合的特异DNA序列,与基因转录起始有关。
同源重组:是指发生在同源序列见得重组,它通过链的断裂和再连接,在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链的交换。
又称基因重组。
DNA克隆:指在体外对DNA分子按照既定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入适当细胞内,使其在细胞扩增和繁殖,从而获得该DNA分子大量拷贝的过程称为分子克隆,又叫基因克隆或重组DNA技术。
基因工程:在体外将目的基因和载体DNA按照既定的目的基因进行人工重组,并将重组体导入宿主细胞,经过无性繁殖和表达得到所需核酸、蛋白质、生物新品种。
包括转基因动物、植物、基因工程生产药物、基因诊断和基因治疗等。
限制性核酸内切酶:指一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶,绝大多数是从原核细胞中提取的,可分为三类,其中Ⅱ型是分子克隆中最常用的工具酶。
pBR322:是研究最早、最清楚的质粒,其全部顺序为4363bp,含有一个复制原点、一个Amp r 和Tet r标记,有限制酶酶切位点,可供外源性基因插入,利用这种遗传标记,有利于筛选出重组转化菌。
gDNA文库:即基因组DNA文库,是指存在于转化菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。
它涵盖了基因组全部基因信息。
cDNA文库:是细胞总mRNA的克隆,文库只包含表达蛋白质或多肽的基因。
感受态细胞:用适当的理化方法处理受体菌后,使宿主细胞处于最适摄取和容忍重组体的状态,此时的宿主细胞即称为感受态细胞。
分子生物学重点一、名词解释:1、冈崎片段:是在DNA半不连续复制中产生的长度为1000—2000个碱基的短的DNA片段,能被连接形成一条完整的DNA链。
2、Ts循环:退出的EF-Tu.GDP在EF-Ts因子的协助下,再生为EF-Tu.GTP,又可生成下一个三元复合因子。
3、重组DNA技术:又称基因工程,将不同的DNA片段(如某个基因或基因的一部分)按照预先的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状的技术。
4、穿梭质粒:一个质粒含有两种宿主细胞的复制起点,可在两种细胞中复制和存在,谓之穿梭质粒。
5、锌指结构:锌指结构家族蛋白大体可分为锌指、锌钮和锌簇结构,大约由30个氨基酸残基构成的蛋白质超二级结构,其中两个Cys(半胱氨酸)和两个His与锌离子结合形成四面体锌指结构参与DNA的合成6、螺旋—转折—螺旋结构:这一类蛋白质分子中有至少两个a螺旋,中间由短侧连氨基酸残基形成“转折”,近羧基端的a螺旋中氨基酸残基的替换会影响该蛋白质在DNA双螺旋大沟中的结合。
7、SD序列:存在于原核生物起始密码子AUG上游7—12个核苷酸处的一种4—7个核苷酸的保守片段,它与16S rRNA 3’端反向互补,所以可将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
8、RNA干扰(RNAi):是利用双链小RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内靶基因表达,使细胞出现靶基因确实表型的方法。
9、PCR:聚合酶链反应,一种在体外(试管、切片…)扩增核酸的技术10、基因芯片:在一微小基片的表面集成大量DNA分子探针,能够在同一时间内平行分析大量的基因,进行大信息量的筛选与检测分析。
(指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的D NA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后对杂交信号的监测分析,即可获得样品的遗传信息。
)11、复制子:单独复制的一个DNA单元被称为一个复制子,它是一个可移动的单位,一个复制子在任何一个细胞周期只复制一次。
基因突变:又叫点突变,是指在某一基因位点内发生化学性质的变化,是碱基的数目、性质或序列的改变。
DNA变性:是指双链DNA的氢键断裂,最后完全变成单链DNA的过程。
DNA复性:是指热变性的DNA缓慢冷却,单链DNA恢复成双链的过程。
染色质:在细胞分裂间期,由DNA、组蛋白、非组蛋白、及少量RNA组成的线状复合结构,是间期遗传物质的一种存在形式。
DNA转座:或称为移位,是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。
转座子:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。
复合式转座子:是一类带有某些抗药性基因的转座子,其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。
复制子:DNA分子上一个独立自主的复制单位.分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
RNA的剪接:是将内含子切割下来而将外显子连接起来形成成熟RNA分子的过程。
RNA的编辑:是指转录后的RNA在编辑区发生碱基突变、丢失和添加。
分子生物学的研究范围包括以下四个部分:1.DNA重组技术2.基因表达调控研究3.生物大分子的结构功能研究4.基因组、功能基因组与生物信息学研究。
增强子:能强化转录起始的序列称增强子或强化子。
hnRNA:即核不均一RNA,是RNA的前体,经过5’端加帽和3’端加上Poly(A)的尾巴,再经过RNA的剪接,最后形成成熟的RNA的过程。
密码子:mRNA上每三个核苷酸翻译成蛋白质多肽上的一个氨基酸,这三个核苷酸就称为密码子,也叫三联密码子。
性质:简并性,普遍性和特殊性,摆动性,连续性。
PCR原理:是从复杂的DNA混合物种选择性复制每种DNA 或RNA序列的方法,或者说是一种选择性体外扩增DNA 或RNA 的方法。
分子杂交:指亲缘关系相近来源不同DNA单链或DNA单链与RNA单链之间通过碱基互补形成杂交分子的过程Southern 杂交:DNA/DNA 之间的杂交,即将DNA电泳后,转印到固体支持物上,再用探针进行检测的方法分子标记:指反映物种个体之间或种群间基因组中某种差异的特征DNA片段。
(直接反映基因组间DNA之间差异原核生物启动子:指能被RNA聚合酶识别,结合并启动转录的一段DNA序列。
基因表达调控主要表现在信号转导研究、转录因子研究及RNA剪接三个方面。
DNA的三个重要性质:1、变异性2、稳定性3多样性突变的分子机理:碱基的转换和颠换、碱基的缺失、碱基的插入、转座子和反转座子的插入。
染色体包括DNA和蛋白质两大部分。
原核生物转座子的类型:IS序列(末端具有倒置重复序列),复合式转座子,TnA家族(无IS序列)。
转座可被分为复制性和非复制性两大类。
转座的遗传学效应主要有以下几个方面:1、转座起插入突变2、转座产生新的基因3、转座产生的染色体畸变4、转座引起生物进化。
复制子的区别:原核生物只有一个复制子,而真核生物有多个复制子。
DNA复制的过程: 1、DNA改变双螺旋构象,解链酶解开双链,在单链DNA结合蛋白和DNA聚合酶III的共同作用下合成先导链,方向与复制叉推进的方向一致。
在滞后链上,当复制叉进一步打开时,RNA引物才能与DNA单链相结合,2、滞后链合成时产生冈崎片段,3、复制叉继续前进,DNA引物酶合成新的RNA引物,与DNA单链相结合准备引发合成新的冈崎片段。
DNA复制体系的构成:DNA摸板、RNA引物、mg离子、四种脱氧核苷酸、DNA聚合酶、DNA连接酶等。
我们把与mRNA序列相同的那条DNA链成为编码链或称有意义链把另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA 链摸板链或称反义链。
在原核生物中RNA聚合酶的组成:2αββ'ω(核心酶)2αββ'ωσ(全酶)RNA聚合酶Ⅱ的结构:帽子位点(转录起始位点),TATA 框(决定转录的方向),CAAT框(决定转录的效率及频率),GC框。
真核生物转录后加工的过程包括:5’端加帽,3’端加尾,RNA的剪接,RNA的编辑。
5’端帽子有三种:M7GPPPX为帽,M7GPPPXm为帽,M7GPPPXmYm为帽。
原核生物与真核生物mRNA的比较:原核生物半衰期短,5’端无帽子结构,3’端无尾巴或只有一小段尾巴,多以多顺反子形式存在。
真核生物5’有帽子结构,3’有尾巴,多以单顺反子形式存在。
tRNA四环为:反密码子环,TψC环,D环和可变环。
蛋白质合成的过程:氨基酸的活化,翻译的起始,肽链的延伸及终止,蛋白质前体的加工和折叠。
原核生物的翻译过程1大小亚基分离2小亚基通过SD序列与mRNA摸板结合3fmet—tRNAfmet与mRNA的起始密码子配对4大小亚基结合,GTP水解,释放起始因子。
蛋白质合成的生物大分子有:核糖体,mRNA,tRNA,20种氨基酸,各种酶、蛋白质和生物大分子。
核酸制备的步骤:a、破碎细胞b 提取c 纯化PCR包括三个基本步骤:A.变性:目的双链DNA 片段94℃左右下解链;B.退火: 两种寡核苷酸引物在适当温度(50 ℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;C.延伸(Extension): 在Taq DNA 聚合酶合成DNA 的最适温度下,以目的DNA 为模板进行合成。
由这三个基本步骤组成一轮循环,理论上每一轮循环将使目的DNA 扩增一倍,这些经合成产生的DNA 又可作为下一轮循环的模板,所以经25-35 轮循环就可使DNA 扩增达106 倍PCR反应体系的组成:引物,4种三磷酸脱氧核苷酸,mg 离子,模板,DNA聚合酶,反应缓冲液琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA 片段的标准方法。
限制性酶识别顺序和酶切位点1)识别4-8个相连的核苷酸2)富含G、C3)对称性—双对称如Eco RI 5’-G A A T T C-3’3’-C T T A A G-5’4)切点大多在识别顺序内5)酶切后产生两个末端,结构是5’-Pi和3’-OH限制性内切酶两个基本特点:1)能够在中间划一个对称轴,两侧的序列两两对称互补配对;2)两条互补链的5`-3`的序列组成相同,即将一条链旋转180度,则两条链重叠。
分子杂交分类:根据采用的方法和杂交的场所可分:A溶液杂交 B.滤膜杂交:可分为Southern 杂交(DNA),Northern杂交(RNA),Western杂交(protein)。
RFLP定义:限制性片段长度多态性,是指当用限制性内切酶处理不同生物的DNA时,所产生的大分子片段长度不同,这种差异就称RFLP。
RFLP分析的一般步骤:DNA提取、限制性内切酶处理、电泳、Southern 杂交、探针检测片段多样性。
RFLP的应用:构建遗传图普、建立系统发育关系等RAPD定义:称随机扩增DNA多态性,用随机引物扩增DNA,扩增产物通过凝胶电泳分离,染色,显示扩增产物DNA片段的多态性。
AFLP定义:称扩增酶切片段多态性,用限制性内切酶对基因组DNA进行酶切,然后对限制性酶切片段进行扩增,从而揭示DNA片段的多态性。
AFLP操作步骤:a.用限制性内切酶处理基因组DNA,得到酶切片段 b.在这些酶切片段的两端加上寡聚核苷酸接头c.根据接头设计引物,并在引物上加1-3个选择性核苷酸,进行随机扩增d.电泳分析结果核酸序列分析方法:Maxam-Gilbert DNA化学降解法(Maxam 和Gilbert,1977) ;Sanger双脱氧链终止法(Sanger和Coulson1977);杂交测序法,质谱法,单分子测序法,原子探针显微镜测序法,流式细胞仪测序法,大规模平行实测法、DNA 芯片法。
Sanger双脱氧链终止法原理:Sanger双脱氧链终止法,利用DNA聚合酶,以单链DNA为模板,以5’端放射性元素标记的寡聚核苷酸为引物,新的互补DNA链的生成时,引入双脱氧核苷酸(ddNTP)作为链的终止剂,在4组独立的酶反应体系中,DNA链终止于不同位置的A、T、G、C 碱基,这样就得到一系列不同长度的核苷酸链,把它们进行电泳分离后,用放射自显影技术将分离结果显示出来,DNA链的序列就能从4个寡聚核苷酸图普中读出。
基因工程:利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离感兴趣的基因,或是用人工合成的方法获取基因,然后经过一系列切割,加工修饰,连接反应形成重组DNA分子,再将其转入适当的受体细胞,以期获得基因表达的过程。
人们为了达到遗传分析或改造物种的目的而进行的任何种内和种间的基因操作。
目的基因的获得:1)化学合成法:DNA序列已知或蛋白质已知2)直接从基因中分离:限制性内切酶处理,又称鸟枪法3)以mRNA为模板合成cDNA4)PCR:对序列已知的DNA片段扩增。
载体的选择和构建:载体的选择要满足下列要求:1)具有自主复制能力2)具有单切点限制酶的种类越多越好3)具有检测的遗传标志,便于筛选4)载体分子量要小,可以在受体内多拷贝存在,便于提取和纯化A至少有一个复制起点,因而至少可在一种生物体中自主复制。
B至少应有一个克隆位点,以供外源DNA插入。
C至少应有一个遗传标记基因,以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞。
D具有较小的分子量和较高的拷贝数。
基因表达:就是基因转录及翻译的过程。
在一定调节机制控制下,大多数基因经历基因激活、转录及翻译等过程,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子,但并非所有基因表达过程都产生蛋白质, tRNA、rRNA编码基因转录合成RNA的过程也属于基因表达。
原核生物基因表达调控的多层次性:DNA复制水平的调控,转录水平的调控,转录后水平的调控,翻译水平的调控,翻译后水平的调控操纵子:原核生物基因表达和调控的单位。
原核生物操纵子特点:1.操纵子由结构基因,启动基因,操纵基因,调节基因组成2同一操纵子中结构基因所产生的多种蛋白由同一mRNA编码3.被同一mRNA编码产生的蛋白的产量不同,如在乳糖操纵子中三种酶的产量比约1:0.5:0.2。
4.许多蛋白质合成并不适应外界环境的变化。
真核基因组结构特点:1.真核基因组结构庞大(3×109bp)2.单顺反子3.含有大量重复序列4.基因不连续性(内含子、外显子)5.非编码区较多(多于编码序列(9:1))真核生物转录水平的调控:最重要;顺式作用元件;反式作用因子;转录起始的调控顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。
影响自身基因表达活性的DNA序列;非编码序列;分启动子.增强子.沉默子;启动子:TATA盒,上游启动子元件,CAAT盒;GC序列沉默子:负性调节元件,起阻遏作用。
反式作用因子:为DNA结合蛋白,核内蛋白,可使邻近基因开放(正调控)或关闭(负调控)反式作用因子结构域模式:锌指结构;同源结构域:螺旋-回折-螺旋;亮氨酸拉链结构螺旋-环-螺旋;碱性α螺旋。
多层次调控:。