4种中草药提取物对水霉的体外抑菌试验

中药提取组合物(胶囊)对念珠菌及曲霉的体外抗菌实验【摘要】目的探讨中药提取组合物(桂皮油、藿香油)胶囊对致病性念珠菌、曲霉的体外抗菌活性。

方法应用试管药基法，测定中药提取组合物胶囊对念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)的最小抑菌浓度(MIC)。

结果中药提取组合物MIC范围为白念珠菌(桂皮油0.06～0.52 mg/ml、藿香油0.03～0.26 mg/ml)、热带念珠菌(桂皮油0.13～1.03 mg/ml、藿香油0.06～0.52 mg/ml)、克柔氏念珠菌(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、烟曲霉(桂皮油0.13～0.52 mg/ml、藿香油0.06～0.26 mg/ml)、黄曲霉(桂皮油0.26～0.52 mg/ml、藿香油0.13～0.26 mg/ml)。

结论中药提取组合物胶囊对致病性念珠菌(白念、热带、克柔氏)曲霉(烟曲、黄曲)体外均有很强的抗菌活性，为开发中药治疗侵袭性真菌病提供理论依据。

【关键词】桂皮油; 藿香油; 念珠菌; 曲霉; 体外抗菌实验近年来，原发性或继发性深部真菌感染发病率迅速上升，尤其是一些严重性消耗性疾病如恶性肿瘤、血液病、肺部感染、实体器官移植等是其死亡的主要因素之一。

由于现今临床使用的药物多系化学合成如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、卡泊芬净、两性霉素等，虽然治疗深部真菌感染发挥着重要的作用，但长期使用这类药物，副作用较大，价格昂贵，因此，寻找和开发抗致病性深部真菌的中药制剂，是祖国医药研究的方向。

为此，对中药提取组合物胶囊进行体外抗真菌活性实验，为治疗深部真菌感染提供理论基础。

1 材料1.1 药物来源香桂胶囊由河北医科大学制药厂研制，批号0801-03，其内含物由中药提取物(桂皮油、藿香油)组成。

氟康唑胶囊由德国辉瑞制药有限公司提供，批号7073402。

1.2 菌种临床分离株来自河北医科大学第二医院皮肤科真菌室，均为致病性深部真菌(痰标本直接镜检可见大量菌丝及芽生孢子，培养有念珠菌生长，经鉴定为白念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌。

100种中草药对溶藻弧菌的体外抑菌实验陈辉;张其中【摘要】为筛选有效控制水产养殖动物弧菌病的中草药,本研究采用琼脂扩散法测定100种常见中草药提取液对溶藻弧菌的抑制作用.采用t检验对其中24种有明显抑菌效果的药液pH值调至中性前后的抑菌效果进行分析比较,结果表明它们的抑菌效果下降极显著(p＜0.01).采用双倍试管稀释法测定7种中草药在pH值调至中性后的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果表明,在药液pH值调至中性后,五倍子、公丁香和石榴皮能够有效抑杀溶藻弧菌.五倍子的MIC和MBC值均为7.813 mg/mL;石榴皮的MIC和MBC值均为15.625 mg/mL;公丁香的MIC和MBC值均为125mg/mL;黄连、黄精和大黄的MIC和MBC值均为500 mg/mL;五味子的MIC和MBC均为1 000mg/mL.%The inhibitory effects of 100 Chinese herbal medicines on Vibrio alginolyticus were tested with disc diffusion method and 24 herbs showed the antibacteria effects. However, the antibacterial effect dropped down very significantly (p<0.01) when the extract solution pH values of the herbs were regulated to about 7.0 from acid primary medicine solutions. The tube dilution method was used to measure the minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) of seven Chinese herbal medicines which were able to inhibit the growth of V. alginolyticus. The results showed that Rhus chinensis, Flos caiyophylli and Punica granatum had inhibitory and bactericidal effects against V. alginolyticus when the extract solution pH values were regulated to approximate 7.0, and the MIC and MBC were 7.813 mg/mL for R. cbinensis, 15.625 mg/mL for P. granatum, 125 mg/mLfor F. caryophylli, 500 mg/mL for Coptis chinensis, Polygonatum sibiricum and Rheum officinale, and 1 000 mg/mL for Schisandra chinensis, respectively.【期刊名称】《中国预防兽医学报》【年(卷),期】2012(034)006【总页数】4页(P452-455)【关键词】溶藻弧菌;中草药;抑菌试验【作者】陈辉;张其中【作者单位】暨南大学水生生物研究所热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心/广东省高校水体富营养化与赤潮防治重点实验室,广东广州510632;暨南大学水生生物研究所热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心/广东省高校水体富营养化与赤潮防治重点实验室,广东广州510632【正文语种】中文【中图分类】S852.61溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus）为海水养殖动物的常见致病菌，具有较强的致病性，能够引起海水鱼类、虾类、贝类的大量死亡[1]。

技术四种中草药对致病菌的抑菌作用测试文丨深圳市太丰东方海洋生物科技有限公司林炎权王康林先李秀娟广东海洋大学深圳研究院鲁义善程俊弧菌是海洋环境中最常见的细菌类群之一，广泛分布于近岸及河口海水、海洋生物的体表及肠道中，是海水、原生动物、鱼类等海洋生物的正常优势菌群。

弧菌病已成为世界性的问题，其宿主范围极广，包括养殖和野生鱼类。

据权威报道，弧菌病已侵染48种海水鱼类。

本研究筛选了4种中草药分别对4种弧 菌（溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、创伤弧菌）进行体外抑菌实验，为使用中草药有效控制水产养殖动物弧菌病奠定基础。

结果 表明，在药液pH值调至中性后，五倍子和石榴皮能有效抑杀四种弧菌。

一、材料与方法1.实验菌株和药物溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、创伤弧菌菌种由广东海洋大学深圳研究院赠送，中草药购自正规途径。

四种中草药分别为蓼科中的大黄（根茎）、黄连（根茎）、漆树科种的五倍子（虫瘻）、石榴科的石榴（果皮）。

2. 培养基蛋白腺5g,牛肉膏3g,酵母粉lg,氯化钠20g,加超纯水至1L,调pH至7.2-7.4,高温高压灭菌。

固体培养基为每lOOmL液体 培养基加入1.5g琼脂粉。

3.菌液制备分别将4种弧菌接种于液体培养基中. 28七震荡（200r/min）培养6~8h,采用平板计数法计数，用液体培养基稀释菌液至1x106efu/mL,于4七保存备用。

4.中草药药液的制备4种中草药干燥粉碎后各取20g,用400mL蒸憎水室温浸泡4h后煎煮，沸水煎煮40min左右，冷却，4层纱布过滤药液，药渣再用400mL蒸僧水同前法煎煮1次，冷却，4层纱布过滤药液，合并两次滤液，加热浓缩至20mL,使其终浓度为lg/m L o于保存备用。

5.药物体外抑菌实验采用琼脂扩散法测定了4种常见中草药对4种海洋鱼类致病弧菌的抑制作用。

根据 抑菌作用测定的结果，选取有抑菌作用的中草药药液，测定原液pH值，并将原液pH值调至7.0左右，测定调pH后药液的抑菌作用。

30种中草药提取物对多子水霉体外抑制作用研究及厚朴抗水霉活性成分初步分析水霉(Saprolegnia)是水霉病(Saprolegniasis)的主要病原菌之一。

几乎所有淡水水产动物均易感染,.对水产养殖业影响巨大。

孔雀石绿一度被认为是防治水霉病的特效药,后来发现其随食物链进入人体会造成肝细胞癌变。

随着孔雀石绿的禁用,水霉病重新成为危害养殖业健康发展的一大难题。

目前养殖生产中常用抗生素、食盐、甲醛等药物预防和治疗水霉病,但均存在防治效果不佳,或不适宜大水面养殖用药等问题。

中草药因其来源广、成本低廉、不易产生耐药性等优点为广大科研人员所青睐。

目前在水产临床用药上使用中草药治疗水霉病还较少。

开展抗水霉中草药的筛选及主要成分的研究不仅有利于解决水霉病有效药物缺乏的临床问题,而且有利于增加我国药物种类储备及降低水产食品安全风险。

本研究通过查阅文献从中搜集整理出了三十种可以抑制水霉等真菌的中草药。

采用提取、浓缩等技术,通过测定其抗水霉活性,筛选出了对水霉有较好抑制效果的中草药。

利用系统溶剂法测定厚朴不同溶剂部位抗水霉活性,并利用不同检测方法对活性最高的提取部位进行了初步分析。

1.通过马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)培养,并经多次纯化后,从感染霉菌的草鱼体表分离到一株致病霉菌CCF1301,制作水浸片,显微镜下观察其形态学表现,进行形态学初步鉴定。

同时挑取纯化后的水霉菌丝,提取基因组DNA,利用霉菌鉴定试剂盒扩增其26SrDNAD1/D2基因和ITS基因,送测序公司进一步测序。

将获得的序列提交NCBI,利用其Blast工具进行同源性比对,同时利用Mega5.1软件进行发育树分析。

结合形态学分析结果对分离株进行综合鉴定。

结果发现：本次采集到的丝状真菌菌丝呈管状、透明、无横隔、分支较少、无性生殖过程形成棍棒状孢子囊并产生游动孢子、有性生殖过程产生球形藏卵器,依据真菌鉴定手册对水霉属真菌的描述并结合上述特征将该分离株初步划归为水霉属；利用水霉鉴定试剂盒对分离株26S rDNA D1/D2基因和ITS基因扩增,分别得到一条800bp左右的基因片段,送公司测序后发现26S rDNA D1/D2基因和ITS基因大小分别为839bp和798bp,将该序列提交NCBI,获得序列号分别为KJ577573和KF871196。

几种蒲公英成分的提取及体外抑菌效果试验侯京玲;周霄楠;赵兴华;钟秀会【摘要】研究蒲公英不同成分的抑菌效果,通过水提、醇提、超声波提取法等提取蒲公英多糖、蒲公英黄酮、蒲公英酚酸,并利用平板打孔法研究各提取物对沙门菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果.结果表明,蒲公英多糖对这5种菌均未见抑制效果.蒲公英黄酮对痢疾杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用,对沙门菌未见抑菌性.蒲公英酚酸对以上5种菌均显示抑制作用.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2016(052)012【总页数】3页(P53-55)【关键词】蒲公英多糖;蒲公英黄酮;蒲公英酚酸;抑菌作用【作者】侯京玲;周霄楠;赵兴华;钟秀会【作者单位】河北农业大学动物医学院,河北保定071001;河北农业大学动物医学院,河北保定071001;河北农业大学动物医学院,河北保定071001;河北农业大学动物医学院,河北保定071001【正文语种】中文【中图分类】R285.5畜禽养殖生产中抗生素广泛应用。

但是，大量应用抗生素可使畜禽体内的微生物产生耐药性，同时造成畜产品中抗生素药物残留，影响动物源性食品安全。

因此，在养殖过程中减少抗生素的使用势在必行，农业部最近表示，为提升消费者对畜牧产品的信赖，拟计划全面禁止在动物饲料中添加抗生素。

并于2015年制订了抗生素治理5年规划。

许多研究都在致力于寻找抗生素的替代品。

中药一直为保障畜牧健康养殖发挥着巨大作用，且中药没有化学药物的耐药性等弊端，因此受到许多学者的重视。

蒲公英作为清热解毒类药物被许多学者所关注。

蒲公英味苦、甘，性寒，具清热解毒，消肿散结，利尿通淋之功效。

用于疔疮肿毒、乳痈、瘰疬、目赤、咽痛、肺痈、肠痈、湿热黄疸、热淋涩痛。

医学研究表明，蒲公英具有广谱抑菌作用，对革兰阳性和革兰阴性菌、皮肤真菌、螺旋体均有不同程度的抑制作用，且不易产生耐药性。

对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌等具有较强的杀灭作用，对幽门螺杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌、沙门菌等临床常见感染菌也有不同程度的抑制作用[1]。

中药奇蒿提取物体外抗菌活性的实验研究谭蔚锋;王靖;邢新;秦路平【摘要】目的研究中药奇蒿80%乙醇粗提取物及其石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物对临床常见菌种的抗菌活性.方法对中药奇蒿进行系统性分离提取,以80%乙醇粗提取物和石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物进行体外药敏实验,序贯使用纸片扩散法和常量肉汤稀释法,选用临床常见的致病菌株,包括金黄色葡萄球菌(标准型ATCC25923)、大肠埃希氏菌(标准型ATCC25922)、铜绿假单胞菌(标准型 ATCC27853)、无乳链球菌(临床型)、粪肠球菌(临床型)、福氏志贺菌(临床型)和痢疾志贺菌(临床型).结果奇蒿80%乙醇粗提取物对痢疾志贺菌的最小杀菌浓度(MBC)为25 mg/ml;奇蒿氯仿提取物对大肠埃希氏菌的MBC为6.25 mg/ml,对金黄色葡萄球菌的MBC为12.5 mg/ml;奇蒿乙酸乙酯提取物对福氏志贺菌、痢疾志贺菌、无乳链球菌的MBC均为6.25 mg/ml,对金黄色葡萄球菌的MBC为12.5 mg/ml;奇蒿正丁醇提取物对无乳链球菌的MBC为12.5 mg/ml,对痢疾志贺菌的MBC为25 mg/ml;石油醚提取物未对测试的细菌表现出明显的抗菌活性.结论奇蒿不同提取物对临床多种致病菌表现出了良好的杀菌作用,在抗感染治疗领域具有较好的开发和应用前景,其有效单体及杀菌机制有待进一步研究发现.【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2010(028)002【总页数】4页(P101-104)【关键词】奇蒿;提取物;体外抗菌实验;最小杀菌浓度【作者】谭蔚锋;王靖;邢新;秦路平【作者单位】第二军医大学,东方肝胆外科医院胆道一科,上海,200433;第二军医大学,第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学,第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学,药学院生药教研室,上海,200433【正文语种】中文【中图分类】R285菊科艾属植物奇蒿Artemisia anomala S. Moore 的地上干燥部分，又名南刘寄奴、金寄奴、六月霜(浙江、江西)、野马兰头(浙江)、九牛草(湖南)、苦速婆/苦婆菜(福建)、六月雪/六月霜(安徽、江西、湖南)、大叶蒿、铁杆茵陈(江苏)，其性味辛、苦、平。

20种水产养殖常用中草药体外抑菌试验研究作者：周冬仁罗毅志等来源：《现代农业科技》2013年第03期摘要采用试管倍比稀释法，选择大黄、黄芪、黄芩等20种中草药对淡水养殖常见2种主要致病菌进行体外抑菌试验，测定其最低抑菌浓度（MIC）。

试验结果表明，大黄、黄芩、穿心莲、连翘、贯众的抑菌效果最好，从而为研制水产用的中草药方剂提供理论依据。

关键词中草药；水产养殖；抑菌试验；最低抑菌浓度中图分类号 S948 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）03-0303-01我国水产养殖模式大部分属于高密度养殖，高密度养殖有较高的投资回报，但是容易大规模暴发病害，在实际生产中为了防治病害，大量使用化学药品及抗菌药物，进而给水产品质量带来隐患。

目前，利用我国传统中草药防治水产病害、减少抗生素使用量及提高免疫力成为兽医药理学研究热点之一[1-3]。

课题组根据2010年出版的兽药国家标准汇编中中药部分的内容结合实际应用，挑选出大黄、鱼腥草、黄芪等多种中草药进行抑菌效果测定，为增加抗菌中草药种类和制剂研发提供科学依据[4]。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌株。

试验菌株共有3株，分别为：标准株嗜水气单胞菌嗜水亚种菌株（购于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmcc1.0927）；嗜水气单胞菌（从湖州地区患病甲鱼中分离得到）；爱德华氏菌。

后2组菌株由浙江省淡水水产研究所实验室分离鉴定[5]。

1.1.2 供试药物。

供试大黄、黄芪、黄芩、甘草、穿心莲、金银花、虎杖、大青叶、鱼腥草、板蓝根、柴胡、川楝子、黄柏、地锦草、五倍子、茵陈、连翘、陈皮、贯众、苦参，购于湖州开心人大药房。

1.1.3 培养基。

营养肉汤培养基购于杭州天和生物制剂公司，121 ℃灭菌15 min备用。

1.2 试验方法1.2.1 药液提取。

水提法，取各种单味中药50 g，粉碎后加超纯水300 mL，温室浸泡过夜，煎30 min，纱布过滤药液，重复3次，最后将过滤液蒸馏浓缩至药液内含原药1 g/mL。

4种中草药提取物对水霉的体外抑菌试验Abstract：The inhibition effects of 4 kinds of Chinese herb medicines，such as Nutgall，Rhizoma Coptidis，Radix scutellariae and Dark plum，on Saprolegia zoospore and mycelium in vitro were studied. The results showed that all the extracts of 4 kinds of Chinese herb medicines had inhibitory action on both Saprolegia mycelial growth and zoospore germination in different degree. Furthermore，the results also show that the ethyl acetate extract of radix scutellariae had the most significant inhibition. It presented a 83% fungistatic rate at a concentration of 0.1mg/mL and could be killed the Saprolegia mycelium above 0.5mg/mL. The activity of 80% of the Saprolegia zoospore could be significantly inhibited by ethanol and ethyl acetate extraction of radix scutellariae when the application concentration at 0.4mg/mL.水霉病是淡水动物的常见病害之一，其病原水霉（Saprolegnia）隶属于茸鞭生物界（Stramenopila）、卵菌纲（Oomycetes）、水霉目（Saprolegniales）、水霉科（Sprolegniaceae）[1]。