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2013年第1期广东化工第40卷总第243期 · 105 · 高效液相色谱法测定果粒橙中维生素C的含量孙艳丽(菏泽学院化学化工系，山东菏泽 274015)[摘要]建立了反相高效液相色谱(HPLC)测定果粒橙中维生素C的测定方法。
采用LC-100PLUS液相色谱仪，Agilent TC-C18色谱柱(4.6×250 mm，5 μm)，以0.05 mol/L磷酸二氢钾∶甲醇=96∶4(V/V)作流动相，室温25 ℃，流速0.6 mL/min，检测波长288 nm。
维生素C浓度与峰面积在5~80 µg/mL的范围内呈现良好的线性关系，线性回归方程为y=11.2534x-17.0162(R=0.9989)。
相对标准偏差为1.40 %。
该测定方法操作简便、灵敏、准确、可靠，适用于多数饮料中维生素C含量的测定。
[关键词]高效液相色谱；果粒橙；维生素C[中图分类号]O652.1 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2013)01-0105-02Analysis of Vitamin C in Orange by HPLCSun Yanli(Department of Chemistry and Chemical Engineering, Heze University, Heze 274015, China)Abstract: A method has established for the detection of Vitamin C (Vc) in orange juice by high performance liquid chromatography (HPLC). The LC-100PLUS HPLC system with Agilent TC-C18 column (4.6×250 mm, 5 μm) was used. The samples were analyzed using 0.05 mol/L potassium dihydrogen phosphate: methanol (V:V=96:4) as mobile phase with the flow rate of 0.6 mL/min. The temperature of the column was room temperature and the detection wave length was 288 nm. The standard working curve of Vc and peak area had a good linear relation between the concentration from 5 µg/mL to 80 µg/mL. The linear equation was y=11.2534 x-17.0162and the related coefficient equaled to 0.9989. The relative standard deviation of this method was 1.40 %. This method proved to be a simple, rapid, exact and reliable way to determine the content of Vitamin C in most of the beverages.Keywords: high performance liquid chromatography (HPLC)；beverage；vitamin C (Vc)饮料中含有的维生素C具有很高的医用价值，它是一种水溶性活性物质，在人体新陈代谢过程中起着举足轻重的作用[1]。
高效液相色谱法测定果珍中维生素C 含量 金黎明 姜 波 郝 苗 (大连民族学院生命科学学院,大连 116600) (大连市产品质量监督检验所,大连 116021) 摘要 用0.1%的草酸作为流动相,高效液相色谱法测定了果珍中维生素C 的含量。
维生素C 的浓度c 在0～300μg /m L 范围内与色谱峰面积A 呈正比关系,线性相关系数为0.9993。
方法的回收率为96.2%～103.2%,测定结果的相对标准偏差为0.6%(n =8)。
利用高效液相色谱法测定果珍中的维生素C 的含量,具有试剂用量少、操作简单、结果准确等特点,采用弱酸性的草酸为流动相,避免了维生素C 的分解。
关键词 维生素C 果珍 高效液相色谱 维生素C 是一种水溶性维生素,又被称为抗坏血酸,它是维持人体正常生理代谢的一种重要化合物,若严重缺乏会引起坏血病,维生素C 还可参与体内氧化还原反应,具有解毒作用。
近年的研究表明,维生素C 可预防癌症,具有抗氧化、抗衰老的作用,并对肝炎、肝硬化有疗效。
但是人体自身不能合成维生素C ,必须由食物中摄取,维生素C 广泛存在于新鲜水果、蔬菜中[1]。
维生素C 测定的方法一般有碘量法[2]、比色法[3]、荧光法[4]等,这些方法操作繁琐,近年来普遍采用高效液相色谱法测定维生素C[5,6]。
笔者利用高效液相色谱法,通过采用低浓度的草酸流动相,分析了果珍中的维生素C 含量,本方法所用试剂较少,操作简单,且通过采用弱酸性的草酸流动相,避免了维生素C 的分解,测定结果较为理想。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂 高效液相色谱仪:L C-10A 型,日本岛津公司; 二极管阵列检测器:S P D-M 10A 型,日本岛津公司; 高压输液泵:L C -10A 型,日本岛津公司; 自动进样器:S I L -10A 型,日本岛津公司; 维生素C 标准对照品:维生素C 含量99.7%。
中国医药上海化学试剂公司; 草酸:分析纯,沈阳医药有限公司; 甲醇:H P L C 级,使用前经0.45μm 滤膜过滤,美国T c d i a 公司; 草酸溶液:0.1%。
高效液相色谱法测定维生素C的含量【摘要】高效液相色谱法已经成为解决生命科学、医药学发展中各种难题的重要手段，在实验室中也广泛应用于物质的定性定量分析。
本实验中利用高效液相色谱法对维生素C进行定量分析，所采用的定量分析方法为外标法，通过做出标准溶液浓度与峰面积的标准曲线进而对样品中的维生素C进行定量检测。
【关键词】高效液相色谱法、维生素C、含量1、引言维生素 C（Vitamin C, Vc）又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。
Vc 在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。
人体内缺乏 Vc 时容易导致坏血病。
同时，由于 Vc 是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。
Vc 在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。
樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中 Vc 含量在 50-300 mg/100 g。
溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。
高效液相色谱法（High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在经典液相色谱法的基础上，于 60 年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法（High Pressure Liquid Chromatography，HPLC）。
HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。
其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。
有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代 HPLC 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。
高效液相色谱(HPLC)法测血清维生素C含量杨静;吴晓娜【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2007(022)005【摘要】目的建立更简便、快速、准确、灵敏的测定血清维生素C含量的方法,并对血清维生素C稳定性进行研究.方法血清样品经10%(v/v)偏磷酸溶液提取,旋涡混匀30 s,离心10 min(4 000 r/min,4℃)后,用带二极管阵列检测(DAD)的高效液相色谱(HPLC)仪对维生素C进行定性定量分析,流动相为100 mmnol/LKH2PO4,pH值为3.0,检测波长为243nm,流速为1 ml/min.用此方法测定不同处理和储存条件下的血清维生素C含量,比较其稳定性.结果在上述色谱条件下,血清中维生素C能得到良好分离,该方法的日内变异系数和日间变异系数分别为0.42%和2.11%;回收率范围为82%～88.5%;维生素C的最低检测限为0.05 μg/ml.在对血清维生素C稳定性的研究中,发现血清维生素C在放置过程中很容易被氧化降解,其偏磷酸提取液相对稳定,但在5 d后含量也开始明显下降,到第44 d后血清和提取液中维生素C含量均几乎完全消失.结论建立了高速、高效、高灵敏度的测定血清维生素C含量的HPLC法;血清维生素C在保存过程中极不稳定,获得样品后应立即测定,当无条件立即分析样品时,也应将样品用偏磷酸提取,并将提取液冷冻保存在-70℃,5 d以内分析完毕.【总页数】4页(P44-47)【作者】杨静;吴晓娜【作者单位】四川省人民医院检验科,成都,610041;四川省人民医院检验科,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】Q503;R917【相关文献】1.HPLC法测患者血清万古霉素和去甲万古霉素浓度 [J], 刘斌;童彤2.高效液相色谱法测血清中25-羟维生素D3 [J], 刘怡欣;赛娜;赵世晶;李紫薇;黄国伟3.反相高效液相色谱法安培检测器快速测定人血清中维生素C含量 [J], 卓海通;高允生4.高效液相色谱法测急性淋巴细胞白血病患儿血清甲氨蝶呤浓度 [J], 曹娟;欧阳伶;吴巧志;涂琼;熊友健5.用高效液相色谱(HPLC)法测定血清维生素C含量 [J], 吴晓娜;黄承钰;孙爱民;杨咏涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定维生素C片中Vc含量２００８年第６期分析仪器３７高效液相色谱法测定维生素Ｃ片中Ｖｃ含量陈再洁郑建明王智（江苏天瑞信息技术有限公司，苏州，２１５３００）擒要目的：建立维生索Ｃ片中ｖｃ的高效液相色谱测定法（ＨＰＬＣ）。
方法：以甲醇一０．０１５ｍｏｌ／Ｌ醋酸钠（体积比５：９５）为流动相ｔ用ＥｘｆｏｒｍｍａＣｌ８柱（４．６×２５０ｒａｍ，５弘ｍ）进行分离，于波长２５４ｎｍ处检测。
结果：线性范围为３７．６～６０１．６ｎｇ（ｒ＝０．９９９９，ｎ＝７），平均回收率为９９．５１％。
ＲＳＤ为０．５３％（ｎ＝９）。
结论：用该方法测定ｖｃ含量，结果稳定，重现性好，可操作性强，适于维生素Ｃ片的质量控制。
关键词维生素Ｃ片ｖｃＨＰＬＣ１前言维生素Ｃ片为维生素类非处方药品，由维生素Ｃ、淀粉、糊精、羟丙纤维素、亚硫酸氢钠、柠檬酸、硬脂酸镁等组成，用于预防坏血病，日常Ｖ。
的补充，Ｖ。
缺乏症的治疗，是家庭常备药。
国内用ＨＰＬＣ法测定药品‘１引、水果‘“、饮料‘５｜、食品‘６１和蔬菜‘７］中Ｖ。
含量的研究较多，但对维生素Ｃ片中Ｖｃ的含量测定尚未见报道，目前我国药典规定［ａ］用碘液滴定法测定ｖｃ含量。
但通过大量的实验数据表明，用碘滴定法测定Ｖ。
含量波动较大。
分析其原因可能有：１）供试品溶液中可能存在的还原剂消耗碘液而造成误差；２）人为影响因素，如颜色的判断，操作速度的快慢等；３）淀粉指示剂需现用现配，操作繁琐，且滴定用的三氧化二砷为剧毒试剂，存在一定的安全隐患。
为此，本文提出用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定维生素Ｃ片中Ｖ。
含量。
实验表明，ＨＰＬＣ法简便，快速，准确，灵敏度高，适应性好，回收率高。
２实验部分２．１仪器ＬＣ３１０高效液相色谱仪（包括ＬＣ—Ｐ１００高压恒流泵、ＬＣ—ＵＶｌｏｏ紫外检测器、ＬＣ—Ｃ０１００柱温箱、ＬＣ—ＷＳ３１０液相色谱工作站），为江苏天瑞公司产品，电子天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司），超声波清洗器（张家港神科超声电子有限公司），紫外分光光度计（上海精密仪器仪表有限公司）。
番石榴中VC的高效液相色谱分析
番石榴中VC的高效液相色谱分析
采用高效液相色谱法,以0.1%的磷酸作为流动相,采用三种不同的提取液(3%的偏磷酸、3%的偏磷酸+8%乙酸、0.1%的草酸)对番石榴不同的果实部位的VC(L-抗坏血酸)含量进行了测定,结果表明:3%的`偏磷酸+8%乙酸作为浸提液效果最好,对于三次取样的结果相对标准偏差最低(RSD=1.6%),回收率最高为98.5%;3%的偏磷酸提取效果次之;0.1%的草酸溶液提取效果最差,RSD=28.4%,回收率也很低(72.5%).此外,不同部位的番石榴果肉VC含量也不一致,以靠近果皮的果肉含量最高,其次为果心,中部果肉含量最低.
作者：刘胜辉臧小平魏长宾 LIU Sheng-hui ZANG Xiao-ping WI Chang-bin 作者单位：中国热带农科院南亚热带作物研究所,广东,湛江,524091 刊名：食品科学ISTIC PKU 英文刊名：FOOD SCIENCE 年，卷(期)： 2007 28(4) 分类号： O657.72 关键词：番石榴 VC 高效液相色谱。
高效液相色谱法测定食品中的Vc含量【实验目的】（1）掌握高效液相色谱法操作方法和分析方法；（2）掌握V C高效液相分离定量的方法。
【实验原理】维生素C是一种水溶性维生素。
Vc在果蔬中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。
樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中Vc含量在50-300 mg/100 g。
本实验对食品中的Vc提取后，采用高效液相色谱进行分析，以Vc标准系列溶液的色谱峰面积对其浓度做校准曲线，根据样品中Vc的峰面积，由校准曲线计算其浓度。
【仪器试剂】1. 仪器Waters高效液相色谱仪；Waters 1525泵； Waters 2487双通道紫外检测器； Breeze色谱系统管理工作站, 色谱柱: Symetry- C 18柱( 10cm ×4.6mm, 5μm)；进样器。
【仪器试剂】1. 仪器柱 (250高效液相色谱仪：；色谱柱：依利特或Phenomenex C18mm×4.6 mm, I.D.5 μm)；进样针。
2. 试剂甲醇（色谱纯），草酸，维生素C等均为分析纯；实验用水为超纯水。
3. 色谱条件高效液相色谱的条件为：0．1％ (体积分数)的草酸水液为流动相，流速为1 mL／min，检测波长254nm，进样量20μL，柱温25℃。
【实验步骤】（1）按泵、柱温箱、检测器、工作站的顺序开启液相色谱仪，设定方法参数。
（2）用甲醇冲洗泵后，用流动相平衡系统。
（3）样品准备：萃取液过滤后用1 mol/L乙酸溶液定容至100mL，制成供试品溶液。
（3）定性分析：分别取20 μL Vc标准工作溶液和待测样品溶液，进HPLC分析。
根据保留时间定性分析蔬果中的Vc。
（4）校准曲线绘制：以Vc色谱峰面积对浓度作图，绘制校准曲线。
（全班只要定容一组）（5） 定量分析：供试品溶液经0.45 μm微孔滤膜过滤后进行HPLC分析。
平行测定2次，记录其Vc的色谱峰面积，根据校准曲线计算蔬果样品中Vc的含量，结果以mg/100 g表示。
水果中维生素C含量的测定及比较一、本文概述维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种对人体至关重要的水溶性维生素。
它在增强免疫系统、促进铁的吸收、抗氧化以及维持皮肤健康等方面发挥着重要作用。
水果作为人们日常饮食中维生素C的主要来源，其含量的测定与比较对于了解各种水果的营养价值、指导合理膳食具有重要意义。
本文旨在通过科学的方法测定和比较不同水果中维生素C的含量。
我们将选取市场上常见的多种水果，包括柑橘类、浆果类、核果类等不同种类，采用高效液相色谱法（HPLC）或2,6-二氯酚靛酚滴定法等化学分析技术，精确测定每种水果中维生素C的含量。
我们还将对测定结果进行详细的数据分析和比较，以揭示不同水果之间维生素C含量的差异和分布规律。
通过本文的研究，我们期望能够为消费者提供一份全面、准确的水果维生素C含量参考表，帮助他们在日常生活中更加科学、合理地选择水果，以满足身体对维生素C的需求。
本文也将为农业生产者和食品加工业者提供有关水果营养价值的重要信息，有助于优化种植和加工策略，提高水果产品的市场竞争力。
二、材料与方法选择了五种常见水果作为实验对象，包括苹果、橙子、猕猴桃、草莓和柠檬。
这些水果因其含有丰富的维生素C而广受欢迎。
所有水果均购自当地超市，选择新鲜且无病虫害的果实。
实验所需的试剂包括2,6-二氯酚靛酚（DCP）溶液、磷酸缓冲液（pH=0）以及去离子水。
2,6-二氯酚靛酚溶液用于滴定测定维生素C 的含量，磷酸缓冲液用于维持实验过程中的pH稳定。
实验过程中使用的仪器包括分析天平、滴定管、研钵、容量瓶、离心机以及紫外可见分光光度计。
分析天平用于精确称量水果样品，滴定管用于滴定操作，研钵用于将水果样品研磨成匀浆，容量瓶用于配制试剂和样品溶液，离心机用于分离水果样品中的固体和液体成分，紫外可见分光光度计用于测定吸光度值。
将每种水果洗净、去皮、去核后，切成小块并混合均匀。
取适量样品放入研钵中，加入少量去离子水，研磨成匀浆。
高效液相色谱法测定不同品种番木瓜果实中维生素C含量作者：谢轶苏冰霞周鹏来源：《热带农业科学》2016年第02期摘要通过优化实验条件，使用高效液相色谱法对海南省种植范围较广的几种番木瓜（中白、大青、小青）维生素C（Vc）含量进行测定。
选取3个番木瓜品种成熟果实，通过HPLC 方法测定Vc的标准溶液线性、精密度、回收率等，并比较该法与国标方法的重复性。
结果显示，获得线性回归方程y=35.41x-4.16（r=0.999），Vc在 60～300 μg/mL 的浓度范围线性关系良好，方法回收率为98.56%～103.21%，精密度RSD为0.69%；测得中白、大青、小青果肉Vc含量分别为49.12、43.38、46.31 mg/hg。
HPLC法结果重现性RSD为0.68%；2，6-二氯靛酚滴定法结果重现性RSD为5.45%，表明HPLC法是检测番木瓜等深颜色水果Vc含量可靠的方法。
关键词番木瓜；维生素C ；高效液相色谱分类号 S668.2 Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2016.02.010An Optimized HPLC Method for AnalyzingVc Content in Different Breeds of PapayaXIE Yi1，2） SU Bingxia1，2） ZHOU Peng1，2）（1 Analysis & Testing Center， CATAS，Haikou，Hainan 571101；2 Hainan Provincial Key Laboratory of Quality and Safety for Tropical Fruits and Vegetables，Haikou， Hainan 571101）Abstract In order to develop an optimal method for isolating and analyzing Vc in breeds of papaya which were widely planted. extracting solution，chromatographic conditions were improved and optimized on the basis of former reported High Performance Liquid Chromatography（HPLC）methods. The results showed that The calibration curves of Vc was in good linearity over the ranges of 60～300 μg/mL（r=0.999）， and the average recovery rates was 100.75% （RSD=0.69%）. The content of Vc in "Zhongbai"，"Daqing"， "Xiaoqing" is 49.12， 43.38， 46.31 mg/100 g. The method of HPLC is better in repeatability（RSD=0.68%） than 2，6-dichlorindophenol titration （RSD=5.45%）. Therefore HPLC could be used for the determination of Vc in papaya and other fruits which had high level of Vc.Keywords papaya ； Vc ； HPLC维生素C是维持人体生理机能的重要营养素，是人体需求量最大而又自身无法合成，必须从外界摄取的一类维生素。
研究表明，Vc还具有抗癌、抗氧化作用[2-3]。
番木瓜中维生素C 的含量是苹果的20～30倍[1]，半个中等大小的番木瓜足以供成人整天所需的维生素C。
因此，准确测定番木瓜中Vc含量，对番木瓜资源的开发利用有十分重要的意义。
传统的紫外分光光度分析法[4]、碘量法[5]、2，4-二硝基苯肼比较法[6]等存在操作繁琐、费时、结果不准确等问题，常用的国标方法（2，6-二氯靛酚滴定法）对深色水果突变终点显色不明显，造成结果误差大等问题。
用高效液相色谱法测定水果中 Vc 含量已较为常见[7-9]。
本研究采用HPLC方法检测3种番木瓜Vc含量，并用2，6-二氯靛酚滴定法对该法的结果重现性进行比对，建立了较为快速准确的测定番木瓜Vc含量的方法。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 主要仪器METTLER TOLEDO 电子天平；Waters alliance e 2695液相色谱仪；Waters XBridge C18色谱柱。
1.1.2 试剂Vc 标准品（分析纯含量>99.0%，上海生工生物工程公司）；草酸、偏磷酸（MPA）均为分析纯；水为去离子水；2，6-二氯靛酚钠、白陶土（上海华蓝化学科技有限公司）；新鲜番木瓜（基地采样）。
1.2 方法1.2.1 Vc标准溶液制备精确称取Vc对照品100 mg于 50 mL 棕色容量瓶中，用0.1% 草酸流动相定容，配成 2 000 μg/mL 的对照品溶液，待用。
1.2.2 供试品溶液的制备将各品种番木瓜去皮、去籽，分别取50 g果肉，加50 mL 2%草酸浸提剂，迅速研磨成匀浆，用布氏漏斗过滤后置于100 mL容量瓶中，定容，最后用0.45 μm滤膜过滤，即得供试品溶液。
2，6-二氯靛酚滴定法制样参见国家标准[1]。
1.2.3 色谱条件HPLC色谱柱：Waters XBridge C18（5 μm，4.6 mm×250 mm）；流动相：0.1% 草酸溶液；流速：1 mL/min；柱温：30℃；紫外检测器检测波长：254 nm；进样量：20 μL。
1.2.4 线性关系测定分别准确吸取 Vc 对照品溶液 1.5、3.0、4.5、6.0、7.5 mL于50 mL 棕色容量瓶中，用流动相溶液将其稀释至刻度，摇匀，分别配成 60、120、180、240、300 μg/mL的标准系列溶液。
按“1.2.3”中色谱条件，采用HPLC法测定各标准液的峰面积，记录色谱图。
1.2.5 “中白”样品测定取同批“中白”供试品溶液，按“1.2.3”的色谱条件连续进样 6 次，采用HPLC法检测。
1.2.6 方法重复性比对HPLC法重复性测定：取同批“中白”番木瓜样品，按照“1.2.2”的制样方法制备供试品溶液，准确称5份，按“1.2.3”的色谱条件测定，通过计算 RSD来考查其方法的重复性。
2，6-二氯靛酚滴定法重复性测定：具体操作方法参见国家标准[1]。
1.2.7 回收率测定用移液器吸取等量“中白”样品溶液至相应编号的容量瓶中，在已知浓度的样品中分别准确加入50、100、150、200、250 μg的标准品，采用HPLC法依次进行峰面积测定。
1.2.8 提取液的选择取5份“中白”番木瓜并分为2组，分别以2%草酸和2%偏磷酸作为样品提取液，参照“1.2.2”的方法制样；检测方法参照“1.2.3”，分别以0.1%草酸[10]和0.2%MPA[11]作为流动相测定Vc含量。
1.2.9 3个番木瓜品种的Vc含量通过实地调研，选取海南普遍种植的3个番木瓜品种（中白、大青、小青），从海南昌江、东方、三亚基地分别摘取这3个品种的成熟番木瓜，按照“1.2.2”方法，分别制得6份待测样品，按照“1.2.3”的色谱条件，用HPLC法检测。
2 结果与分析2.1 线性关系分析以峰面积对浓度求回归方程和相关系数，结果见图1。
得到线性回归方程y=35.41x-4.16（r=0.999），Vc含量在 60～300 μg/mL 的浓度范围内线性关系良好。
2.2 样品测定及精密度由表1可知，“中白”Vc含量平均值为49.17 mg/hg，标准偏差（RSD）为0.69%，表明HPLC法精密度良好。
2.3 重复性比对结果表明，HPLC法重现性良好，RSD为0.68%；国标方法2，6-二氯靛酚滴定法测得的RSD为5.45%（表2）。
从表2的数据可知，HPLC法测定的Vc数据稳定，重现性明显优于滴定法。
分析原因如下：其一，番木瓜为深颜色果肉，虽通过高岭土褪色，但仍有残留底色，并且通过脱色过滤，延长了Vc溶液的处理时间，容易造成Vc氧化损失；其二，滴定法通过肉眼观察颜色突变终点，势必会存在人为误差。
故HPLC法更能客观准确地测定Vc含量。
2.4 回收率分析将测得的峰面积带入回归方程y=35.41x-4.16（r=0.999），得到各组Vc含量，经计算得到回收率，结果见表3。
方法回收率在98.56%～103.21%，平均回收率为100.75%，RSD为0.68%。
回收率较稳定，说明采用HPLC法测定番木瓜Vc含量数据可靠。
2.5 提取液的选择结果表明，这2种提取液对Vc含量的测定没有明显影响（表4），说明草酸和偏磷酸均可作为较好的抑制剂阻止Vc氧化。
但由于偏磷酸遇热不稳定，本研究选择2%草酸作为样品浸提剂。
液态Vc有较强的还原性，在酸性溶液中较稳定，为保证在整个测试过程中Vc呈现较稳定的状态，故流动相应保持酸性。
本研究选用0.2% MPA水溶液及0.1%草酸水溶液作为流动相进行测试，结果均呈单峰且出峰快。
出于与浸提剂一致性考虑，本研究选择0.1%草酸作为相关实验的流动相。
2.6 不同品种番木瓜果实中Vc含量比较通过对海南常见的3个番木瓜品种Vc含量的测定，发现这3种番木瓜品种Vc含量总体差异不大，含量从高到低依次为中白、小青、大青（表5）。
3 讨论与结论利用全波长扫描Vc标准溶液，发现在254 nm处有最大吸收值，因此选择254 nm作为色谱的检测波长。
本研究结果表明，HPLC法线性范围较宽，线性关系良好，说明在测试过程中，Vc受环境干扰少；通过重复性测试可知，HPLC法的RSD为0.68%，说明该方法重现性好，结果稳定、可靠，明显优于传统滴定法，大大减少了肉眼观察滴定终点的误差，提高了测定的准确度。
HPLC法的回收率为98.56%～103.21%，说明该方法准确、可靠。
综上所述，采用高效液相色谱法测定番木瓜中Vc含量具有选择性好、灵敏度高、操作简单、结果可靠等优点，是测定Vc含量的理想方法。
本研究测定了海南常见的3个番木瓜品种果实的Vc含量，发现这3个番木瓜品种Vc含量总体差异不大，从高到低依次为中白、小青、大青。
本研究结果可为喜好生食番木瓜的民众提供一定的参考价值。
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