姜黄油抑菌作用的研究

供试菌种 表 2 最低抑菌浓度的测定结果 ( %) 姜黄油的浓度 姜黄油的 M I C ( %) 值
0. 313 0. 625 1. 25 2. 5
大肠杆菌
5 -
10 -
+
+ + + +
+ + -
+ -
5% 1. 25 % 2. 5% 1. 25 %
金黄色葡萄球菌 + 枯草芽孢杆菌 黑曲霉
2
+ +
2. 1 测定抑菌圈
;i K ey w ords :cur cum al ongaoi l nhi bi t or yconcent r at i on;ant i bact er i alef f ect
姜黄是一种常用中草药 ,为姜科植物 ,其资源丰富 ,价 格低廉。 姜黄味辛、 苦 ,性温 ,有破血行气、 通经止痛的功能。 近年来 ,关于姜黄的药理作用及生物活性有了新的报道 ,药 理学研究证明 :姜黄具有很好的抗氧化、 抗菌、 抗爱滋病毒、 起作用的主要成分是姜 抗肿瘤等作用 ,是临床常用的中药。 黄素和姜黄油。本试验利用石油醚提取的姜黄油为材料来 研究姜黄油对几种常见腐败菌和致病菌的抑菌作用。 材料和方法 姜黄油 实验室自制 ( Es )、 试验菌种 大肠杆菌 金黄色葡萄球 cher i chi a col i 枯草芽孢杆菌 菌 ( St )、 ( Baci )、 aphyl ococcusaur eas l l uss ubt i l i s ( As ) 。由本院微生物实验室提供。 黑曲霉 per gi l l usni ger 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 ( 培 养 细 菌 用),察 氏 培 ( 培养霉菌用) 养基 试 验 仪 器 :BP221S 电 子 天 平 ZK-82B 鼓 风 干 燥 箱
2006. Vol . 27. NO . 5
食品研究与开发
理论研究
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姜黄油抑菌作用的研究
胡小军 ,李凤侠 ( 淮海工学院海洋学院 ,江苏 连云港 222005 )
摘 要 :就姜黄油对几种常见细菌、 霉菌抑菌效果进行了研究。 结果表明 :姜黄油对几种菌有明显的抑制作用。 其中对 金黄色葡萄球菌最强 ,M I C =1. 25 % ,抑菌圈直径为 17. 5 m m ,对 大 肠 杆 菌 的 抑 制 作 用 较 弱 ,M I C =5 % ,抑 菌 圈 直 径 为
YXQ-SG41. 280 立式压力蒸汽灭菌锅 H H B11 电热恒温培养
箱 H ZQ-X100 振荡培养箱 SPX-150C 恒温恒湿箱 SZ-H 双 目生物显
28 ℃ ,培养 48 h。取出后测出滤纸片抑菌圈直径大小 ,比较
抑菌效果。 ( MI 1. 2. 4 姜黄油最低抑菌浓度 C) 的测定 采用平板划线法。在培养基上划线培养细菌 ,以有无 ( 菌落生长正常) 比较 ,有肉眼 菌生长为判断标准 ,与对照组 可见菌落者为无抑菌作用 ; 无菌落生长者的姜黄油浓度为 ( MI 姜黄油的最低抑菌浓度 C) 。把待测试剂用石油醚溶解
2. 5% 、 1. 25% 、 0. 625% 、 0. 313% 的一系列姜黄油浓度梯度溶液。 1. 2. 2 菌悬液的制备
将试验菌从 4 ℃的冰箱中取出后, 接种到新鲜斜面培养 基上。 细菌接到牛肉膏蛋白胨固体培养基上,37 ℃培养 24h;霉 菌接种到察氏固体培养基上 ,28 ℃培养 48 h。恒温培养活化 后 ,从斜面上挑取两环菌落于 100 m L 无菌水 ,轻轻研磨制成 混悬液 ,稀释 10 倍 ,并通过血细胞计数板计数 ,确定菌液的 稀释度 ,使最后的菌悬液含量为 106 个 / m L,待用。
1. 2 试验方法 1. 2. 1 姜黄油浓度的制备
取一定量的姜黄油 ,加入石油醚分别稀释成 10 % 、 5% 、
( 1977-),男 ,河 北 宣 化 人 ,硕 士 ,从 事 食 品 科 学 方 作者简介 :胡 小 军 面的教学科研工作。
理论研究
食品研究与开发
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[ 4]
唐书谦 ,叶庆佾 ,钟白玉 ,等 . 姜黄挥发油、 水浸出液体外抗真菌 试验 [ 第三军医大学学报 ,1997,12:569~571. J ] . 收稿日期 :2005-09-15
2. 2 测定最低抑菌浓度
采用平板划线法测定大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、 枯
ห้องสมุดไป่ตู้
姜黄油最低抑菌
5
( %) MI C
4 3 2 1 0 1 2 3 4
对照 石油醚 无菌水
10 17. 5 12. 5 15
---------
---------
注 :1- 大肠杆菌 ;2- 金黄色葡萄球菌 ;3- 枯草芽孢杆菌 ;4- 黑曲霉 图 4 姜黄油的 M I C值
从表 2 和图 4 中可以看出 : 姜黄油对于供试菌种有显 著的抑菌作用 ,当姜黄油的浓度在 1. 25 % 时 ,金黄色葡萄球 菌、 黑曲霉的生长即完全受到抑制 ,培养皿中无菌落生长 ;而 以石油醚和无菌水做对照的培养皿中 ,各菌均表现出强的生 金黄色 长势。 当培养基中姜黄油的浓度为 5 % 时 ,大肠杆菌、 葡萄球菌、 枯草芽孢杆菌和黑曲霉生长完全受到抑制。通过 姜黄油对供试菌抑菌效果比较 ,最 低 抑菌 浓 度 ( MI C) 为 :大 ( MI 肠杆菌 ( MI C) 5 % ,金黄色葡萄球菌 C)1. 25 % ,枯草 芽 孢 杆 菌( MI C)2. 5 % ,黑曲霉 ( MI C)1. 25 % 。 结论 抑菌试验结果表明 ,姜黄油常见致病菌和腐败菌具有 明显和广泛的抑制作用。其中对金黄色葡萄球菌抑制效果 最 强 ,M I C=1. 25 % ,抑 菌 圈 直 径 为 17. 5 m m ,对 大 肠 杆 菌 的 抑制作用较弱 ,M I C=5 % ,抑菌圈 直 径 为 10 m m 。有关 姜 黄 油的抑菌机理尚待进一步研究。
由表 1 和图 1、 图 2、 图 3 中可以看出 :姜黄油对金黄色 葡萄球菌、 黑曲霉阳性菌的抑菌效果最好 ,对大肠杆菌阴性 菌效果较差。对食品中常见腐败菌黑曲霉抑制效果较好。
[ 3]
杜青云 ,王国胜 ,张铭穷 . 中药姜黄挥发油体外抗真菌实验研究 ( 4):212. 中国皮肤性病杂志 ,1997,11 [ J ] .
10 m m 。
关键词 :姜黄油 ;抑菌浓度 ;抑菌作用
STUDY ON TH E ANTI BACTERI AL EFFECT OF CURCUM A LONGA OI LS H U Xi ao-j un,LIFeng-xi a haiI ns t i t ut eofTechnol ogy,Li anyungang 222005,J i angs u,Chi na) ( Ocean Col l ege,H uai A bs t ract : The paper m ade an ant i bact er i alact i vi t ys t udy ofcur cum a l onga oi l s on s om e m i cr oor gani s m whi ch pol l ut ef oods t uf fand f ood.Thes t udyr es ul tdem ons t r at ed t hatcur cum al ongaoi l shad obvi ousi nhi bi t i ng t he gr owt h ofs om e m i cr oor gani s m .I nhi bi t or y ef f ecton St aphyl ococcusaur easwasr em ar kabl y,M I C =1. 25 % . The di am et erofi nhi bi t i ng was 17. 5 m m .I nhi bi t or y ef f ecton Es cher i chi a col iwas s m al l ,M I C( Es cher i chi acol i )= 5 % .Thedi am et erofi nhi bi t i ngwas10 m m .
( 平均值) 表 1 抑菌圈直径 供试菌种 抑菌圈直径 ( m m) 一系列姜黄油浓度梯度下 的平均抑菌圈直径 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 黑曲霉 注 :"---" 为无抑菌作用。 抑菌圈直径 抑菌圈直径 ( m m)
18 16 14 12 10 8 6 4 2 0
草芽孢 杆 菌 以及 黑 曲 霉 的最 低 抑 菌 浓度 ,最 低 抑 菌 浓度 的 测定结果见表 2 和图 4。
1
2
3
4
注 :1- 大肠杆菌 ;2- 金黄色葡萄球菌 ;3- 枯草芽孢杆菌 ;4- 黑曲霉 图 1 姜黄油对试验菌的抑制效果
3
图 2 姜黄油对大肠杆菌的抑菌效果
姜黄油作为天然中草药姜黄的主要成分之一 ,其安全 性 能 极 高 ,如 将 其 用 在 食 品 中 进 行 防 腐 ,其 推 广 和 应 用 必 将带来巨大的经济和社会效益。 参考文献 :
1
1. 1 试验材料
1. 2. 3 滤纸片扩散法测定姜黄油的抑菌能力
按无菌操作的方式往无菌培养皿中倒入适量培养基 , 每个培养皿中约 5 m L,即培养基的厚度约为 1. 5 m m 。待培 养基凝固后 , 用无菌移液管吸取 0. 1~0. 2 m L 菌悬液于培养 基表面 ,用无菌涂布棒涂布均匀 ,然后用无菌镊子以无菌操 作方式取出各溶液浸泡后的滤纸片 , 尽量使石油醚挥发完 全。按培养皿的标号 ,对号入座 ,将滤纸片放入培养基表面 相应位置 ,每个培养皿等距放 3 个滤纸片 ,每个浓度做 6 组 平行。并用浸有石油醚的滤纸片做对照 ,无菌水做空白。放 入 培 养 箱 恒 温 倒 置 培 养 ,细 菌 置 37 ℃ ,培 养 24 h;霉 菌 置
[ 1]
赵泽贞 ,温登玫 ,魏丽珍 ,等 . 姜黄油抗突变机理进一步试验研 究[ 癌变 . 畸变 . 突变 ,1999,11 ( 2):75~77. J ] .
[ 2]
图 3 姜黄油对黑曲霉的抑制效果
陈敏娟 . 姜黄素研究进展及 应 用 前 景 [ J ] . 海 峡 药 学 ,2003,15 ( 1):4~6.
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稀释后 ,吸取各种浓度溶液 1 m L,分别加入直径 8 m m 的培 养皿中 ,每皿加入已融化的培养基 9 m L,摇匀 ,静置待凝固 后制成含有待测浓度供试样品的平板。在培养皿上划线接 种 ,按 前 述 条 件 培 养 菌 落 ,观 察 个 培 养 皿 是 否 长 菌 及 菌 落 生长情况。每 一 姜 黄 油浓 度 梯 度 做 三组 平 行 试 验 ,以 完 全 没有菌生长的最低浓度为该样品的 M I C 值。 结果与讨论 采用滤纸片扩散法研究姜黄油对大肠杆菌、 金黄色葡 萄球菌、 枯 草 芽 孢 杆 菌 以 及 黑 曲 霉 的 抑 制 效 果 ,以 抑 菌 圈 直径的大小为指标 ,试验结果见表 1、 图 1、 图 2、 图 3。